INSTRUCTIVO PARA EL LAVADO DE CRISTALERÍA

EN EL LABORATORIO DE LA PLANTA DE TRATAMIENTO

DE AGUA POTABLE

CÓDIGO IN – DT – 02

VERSIÓN 03

FECHA 07-07-2008

SISTEMA INTEGRADO DE GESTIÓN

INSTRUCTIVO PARA EL LAVADO DEL MATERIAL EN LOS LABORATORIOS PARA EL CONTROL DE LA CALIDAD DEL AGUA POTABLE Y MONITOREO DE

LAS FUENTES DE EMPRESAS PUBLICAS DE LA CEJA E.S.P.

Elaboró Revisó Aprobó

Fáber Eduardo Martínez Fáber Eduardo Martínez Orlando Ríos Duque

TABLA DE CONTENIDO

1. OBJETIVO Y ALCANCE

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2. DESCRIPCIÓN DE LOS PROCESOS

3. NORMATIVIDAD

4. DEFINICIONES

5. CONTROL DE REGISTROS

6. ANEXOS

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1. OBJETIVOS Y ALCANCE

1.1 Definir las actividades que se deben desarrollar, para garantizar la adecuada limpieza de los instrumentos y de la cristalería utilizada en los laboratorios para el Control de La Calidad del Agua Potable y el monitoreo de las fuentes, con el fin de eliminar errores en los resultados por el uso de material contaminado con microorganismos, iones inorgánicos y/o metales, provenientes de un inadecuado proceso de Lavado.

1.2 Evitar la contaminación de las aguas, evitando la descarga del material contaminado por el desagüe al alcantarillado.

Este instructivo aplica a la dirección técnica, específicamente al los laboratorios para El Control de La Calidad del Agua potable y monitoreo de las fuentes, perteneciente a la sección de Plantas y Redes de Empresas Publicas de La Ceja E.S.P

2. DESCRIPCIÓN DEL POCESO

La limpieza y/o descontaminación de los instrumentos y cristalería del laboratorio, se realiza para remover los Contaminantes orgánicos e inorgánicos, específicamente, metales e iones. Esta suciedad puede afectar los resultados e interferir en las determinaciones.

Un adecuado proceso de limpieza contribuye en la garantía de la calidad Analítica, ya que se parte de la ausencia de agentes contaminantes que alteren los resultados de los análisis.

La vidriería u otro material no descartable a utilizar en los análisis Fisicoquímicos y Microbiológicos, que entren en contacto con las muestras, en lo posible debe ser de uso exclusivo para el desarrollo de cada clase de determinación.

El lavado del material se debe llevar a cabo después de realizar cada ensayo

2.1 Usos de Extran (Jabón de laboratorio libre de Fosfatos)

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Use jabón para laboratorio libre de Fosfatos (Extran Alcalino o neutro) según las indicaciones detalladas en los ítems 3.1.1. y 3.1.2, en concentraciones de 5%, 10% o 20%, Según el tipo de suciedad y el tipo de análisis que va a realizar.

2.1.1 Preparación de la Solución de Extran

Para preparar una solución de Extran (Por ejemplo al 10%) a partir de una solución de Extran al 100% se efectúa el siguiente procedimiento

Preparación de una solución jabonosa al 10% de Extran a partir de una solución de Extran al 100%Para preparar 1 litro = 1000 cc de Extran al 10%.

FORMULA: Cf x Vf Vi = Ci

Vf: Volumen final.Cf: Concentración final.Ci: Concentración final.Vi: Volumen inicial

10% x 1000 c.c. V = = 100c.c. 100% De esta forma para Obtener 1000 ml de Extran al 10% de concentración, a partir de Extran al 100%se debe tomar 100 ml de Extran al 100% de concentración y se lleva hasta un volumen de 1000ml con Agua desionizada.

2.1.1.2 Usos del Extran Neutro

2.1.1.2 Para el Lavado del material volumétrico

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2.1.1.2 Para el lavado del material usado para análisis microbiológico, de Alcalinidad, pH, Cloruros, turbiedad y sulfatos.

2.1.1.3 Para Mantener sumergidas las celdas del fotómetro y turbidimetro, (Extran Alcalino al 5%), con el fin de evitar incrustaciones. (Esta solución debe cambiarse cada dos días con el fin de evitar incrustaciones de Extran en las celdas

2.1.2 Usos del Extran Alcalino

2.1.2.1 Para el lavado del material usado en determinaciones de, metales y dureza

2.1.2.2 Para el lavado de la cristalería no volumétrica, y determinaciones como metales, turbiedad, dureza, Sulfatos (Extran Alcalino al10%)

2.2 Lavado del material para análisis de metales, de Dureza, de Sulfatos y microbiologico (Lavado con Acido Clorhidrico 17%

Lave con detergente, enjuague con agua corriente y sumérjalo en una disolución de ácido nítrico al 20 % (V/V) por 4 h o en ácido nítrico diluido al 8 % (V/V)/ácido clorhídrico al 17 % (V/V), y enjuague con agua corriente y finalmente enjuagar con agua reactivo

2.2.1. Enjuague con abundante agua Clorada

2.2.2 Enjuague con Extran alcalino al 5% (Para analisis de dureza y metales) o neutro al 5% (para analisis de sulfatos y microbiológico), si es el caso remoje por un periodo de tiempo apropiado según la suciedad y de acuerdo a las especificaciones detalladas en los ítems 2.1.1 y 2.1.2

2.2.3 Utilice escobillones apropiados de acuerdo al material que se está lavando

3.2.4 Lave el material tres veces con agua de la red

2.2.5 Para el caso de lavado de pipetas, se utiliza La potasa alcohólica debido a que combina la acción solvente del alcohol con la acción hinchante y saponificante del álcalis fuerte. Se usa potasa cáustica, es decir KOH comercial, porque es más soluble en alcohol que la soda cáustica.

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Sin embargo se puede reemplazar por una solución hidroalcohólica al 70 - 80% de Hidroxido de sodio. La concentración es variable pero siempre diluida, 1 - 5%, y se puede aumentar si es necesario. Una variante práctica es guardar los enjuagues de alcohol en un frasco, mientras no sean muy diluidos, y luego agregarles el álcalis en la cantidad conveniente. Se debe guardar en frascos bien cerrados. Tiene utilidad en el lavado de pipetas y buretas. Para el caso de pipetas asegúrese durante el lavado que el agua pase a través de la luz de la pipeta. No use jabón y remoje después de su uso en un recipiente adecuado.(Ojo conseguir el recipiente para pipetas

2.2.6 Enjuague tres veces con una solución de Ácido Clorhídrico (HCl) (1+1)

2.2.7 Deje escurrir

2.2.8 Enjuague una vez con acetona (para la remoción de compuestos orgánicos) si es necesario.

2.2.9 Deje secar

2.2.10 Deseche los residuos de este proceso en un recipiente de Residuos Químicos Peligrosos (RQP)

2.2.11 Enjuague tres veces con agua desionizada.

2.2.12 Observe, mientras lava el material, que el agua moje las paredes completamente.

2.2.13 Coloque las pipetas sobre el soporte porta pipetas y deje que se escurran. (Puede secar las puntas con un paño que no suelte pelusa, para que se absorba el líquido.)

2.2.14 Colocar sobre papel absorbente y boca abajo los Beacker, las probetas, los balones, etc.

2.2.15 Cuelgue verticalmente los escobillones utilizados para lavar hasta que se escurran completamente

2.2.16 Una vez secado el material, Se verifica la efectividad del lavado (Item 2.5).y se registra lo observado en el Formato para el Control de la Calidad del lavado.

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2.2.17 Acomode el material en sus respectivos puestos; los tubos de ensayo que se colocan en las gradillas deben ser puestos boca abajo, cuidando que estos no tengan polvo o sarro en su base.

2.2.18 Forma de preparación de la solución de Acido Clorhidrico (1+1)

Preparación de la solución Ácido Clorhidrico para el lavado de la cristaleríaPara preparar 1 litro de ácido Clorhidrico 17% o 6 M

Se toman 500 ml de HCL concentrado y se lleva a un beaker aproiado con aproximadamente 250 ml de agua desionizada; se deja enfriar y se lleva a un balón volumétrico de 1000 ml

2.3 Lavado de material y frascos de muestreo para análisis de Turbiedad, Alcalinidad, Color, pH, Nitritos, Cloruros

2.3.1 Lave con detergente líquido alcalino especial para laboratorio Libre de Fosfatos, (Extran al 10%), La concentración depende del tipo de suciedad.

2.3.2 Enjuague con abundante agua de la red

2.3.3 Enjuague tres veces con agua desionizada

2.3.6 Observe, mientras esta lavando el material, que el agua moje las paredes completamente.

2.3.7 Coloque las pipetas sobre el soporte porta pipetas y deje que se escurran. (Puede secar las puntas con un paño que no suelte pelusa, para que se absorba el líquido de las puntas)

2.3.8 Colocar sobre papel absorbente y boca abajo los Beacker, las probetas, los balones, etc.

2.3.9 Cuelgue verticalmente los escobillones utilizados para lavar hasta que se escurran completamente

2.3.10 Haga la prueba de Verificación del Material lavado que se detalla en el ítem 2.5., registre lo observado en el Formato para el Control de La Calidad del Lavado del Material.

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2.3.10 Almacene en el lugar correspondiente

2.4 Lavado y esterilización del material para análisis microbiológico

2.4.1 Procedimiento para el lavado y la esterilización del material utilizado

2.4.1.1 El material utilizado: bolsas, tubos, frasco, cajas petri, filtros etc., con su contenido, se deben esterilizar en la autoclave colocando una ampolla de Sterikon para verificar su funcionamiento. Esta ampolla contiene nutrientes, indicador de pH y esporas de Bacillus stearothermofhilus que son resistentes a alta temperaturas, pero no resisten una temperatura de 121ºC por 15 minutos después de este tiempo se inactivan. Dicha ampolla se coloca dentro de la autoclave sobre una caja de petri, esta tiene inicialmente un color violeta, después de la esterilización debe conservar su color, se lleva a incubar a 60ºC por 48 horas, aún debe conservar su color

2.4.1.2 Verificación de la Esterilización, si la esterilización es completa, no se observa cambio de color de la Ampolleta, de lo contrario vira a un color amarillo y se observa producción de gas lo que indica que la esterilización no es aceptable, registre esta observación en el Formato para el control de la calidad del Lavado del Material

2.4.1.3 Transcurrido este tiempo apague la autoclave, espere a que la aguja del manómetro llegue a cero, deje que el material se encuentre frio y llévelo al área de lavado donde le debe retirar los residuos.

2.4.1.4 El material sólido para desechar se recoge en bolsa plástica de color rojo (Residuos peligrosos Biológicos Infecciosos), se sella muy bien y se lleva al lugar de los desechos biológicos (RPBI).

2.4.1.5 Cuando el material es líquido, se deja con un poco de desinfectante (hipoclorito al 2%) por unas horas, y se desecha por el desagüe del alcantarillado.

2.4.1.6 Lavar con solución jabonosa de Extran neutro al 5% y un poco de hipoclorito, se frota con una esponja suave o escobillón

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2.4.1.7 Enjuagar con abundante agua para quitar el jabón

2.4.1.8 Pasar a un recipiente que contenga solución jabonosa caliente e hipoclorito

2.4.1.9 Dejar de 1 a 2 horas y luego enjuagarlo con abundante agua de grifo para luego enjuagar con agua Desionizada hervida.

2.4.1.10 Secar en el horno a 60 ºC por 2 horas.

2.4.1.11 Verifique el material lavado, como se especifica en el ítem 2.5. Registre lo observado en el formato para el Control de la La Calidad del Lavado del Material.

2.4.1.12 Si se usan bolsas, escúrralas muy bien colóquelas en la bolsa plástica roja directamente y llévelas al lugar de almacenamiento de residuos Biológicos (RBPI).

2.4.2 Procedimiento para Esterilizar el Material Limpio

2.4.2.1 Coloque el material en la autoclave de la forma que se especifica en los ítems 2.4.2.2, 2.4.2.3, 3.4.2.4 y esterilícelo a 121ºC por 15 minutos a 15 psi.

2.4.2.2 Cajas de Petri Envuelva en papel kraft por grupo de 4 cajas de petri y séllelas con cinta de enmascarar y coloque un trozo de cinta indicadora de esterilidad sobre el papel kraft. Repita el procedimiento con las demás cajas.

2.4.2.3Tubos Tome unos 6 tubos colóquele la tapa pero sin dejarla muy sellada y envuélvalos en papel Kraft séllelos con cinta de enmascarar y coloque un trozo de cinta indicadora de esterilidad, haga esto con todos los demás tubos.

2.4.2.4 Frascos para el MuestreoAntes de Autoclavar debe realizarce el procedimiento concerniente al lavado con acido Clorhidrico.Después de lavados, adicionar 0.3 ml de Tiosulfato de Sodio al 10%, este procedimiento elimina el Cloro Residual, colóqueles la tapa sin dejarla muy sellada, envuelva cada frasco en papel kraft, séllelos con cinta de enmascarar y coloque un trozo de cinta indicadora de esterilidad

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2.4.2.5 FiltrosEnvulelvalos en papel Kraft y selle con cinta de enmascarar

2.4.2.6 Deje enfriar

2.4.2.7 Cúbralos del polvo

2.4.2.8 Colóquelo el material en el estante designado.

NOTA: La cinta indicadora contiene esporas de Bacillus stearothermophilus en sus canales diagonales las cuales tienen un indicador de color que al momento de la esterilización satisfactoria vira a negro.

2.5 Verificación del lavado del material

2.5.1Verificacion por medio de un indicador de pH

Para verificar si el material seco está en condiciones de uso, debe prepararse un indicador de pH de la siguiente forma:

2.5.1.1 En una probeta de 500 ml preparar una solución con la siguiente composición

Indicador de pH (0.1g)

2.5.1.3 Etanol (300 ml)

2.5.1.4 Agua Desionizada (200 ml)

2.5.1.5 Procedimiento

2.5.1.6 Después del lavado del lote de materiales, seleccione al azar una muestra y coloque 2 gotas del indicador en el material de Vidrio en estudio.

2.5.1.7 Haga un testigo positivo con una gota de detergente; (añada dos gotas del indicador preparado en el ítem 3.5.5, el indicador cambiara de color, el color depende del indicador de pH utilizado).

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Puede usarse las tirillas indicadoras de pH

2 5.1.8 Observe la reacción en el material de vidrio estudiado. El indicador no debe cambiar de color, en este caso el material puede ser usado.

2.5.2 Otra forma de Verificación

2.5.2.1 Tome una Alícuota del Agua del último baño utilizada para enjuagar el lote del material en un tubo de ensayo y verifique que el pH sea neutro, en este caso puede ser utilizado el material.

El resultado de esta prueba debe ser consignado en el Formato para el Control de la Calidad del Lavado del material

2.5.2.2 VERIFICACION ANTES DEL USO DEL MATERIAL

Observe el material lavado y seco a contraluz, si observa manchas de detergente, este material no puede ser utilizado, hasta que se le practique un nuevo procedimiento de lavado

2.6 Lavado Especial

Se aplica en el caso de tener pipetas, probetas o cualquier material en el que se ha depositado algún residuo y no es posible eliminarlo por simple lavado

2.6.1 Remoje por 24 horas la con mezcla Sulfocrómica (Maneje con cuidado esta mezcla ya que es corrosiva, ver forma de preparación en el Anexo 4)

2.6.2 Elimine la mezcla Sulfocrómica en un recipiente rotulado como RPBI (Residuos peligrosos Biológicos Infecciosos)

2.6.3 Lave el material como se menciono anteriormente, verifique que los residuos incrustados ahora sean removidos)

2.6.4 Enjuague perfectamente para evitar que los residuos de la mezcla ahora queden en el material

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2.6.5 Enjuague tres veces con agua desionizada

2.6.6 Preparación de la Mezcla Sulfocrómica

Manéjese con cuidado, mezcla corrosiva

La mezcla sulfocrómica es uno de los agentes de limpieza más violentos de uso común, pues posee un altísimo poder oxidante. Su utilización está muy difundida pero se deben tomar Esta Mezcla consiste en una solución diluida de dicromato de sodio o potasio,(Cr207Na2 o Cr207K2), en ácido sulfúrico concentrado.

Salvo para casos excepcionales no debe prepararse con drogas puras o pro análisis, porque ello es un gasto absolutamente innecesario.

La elección de la base se hace teniendo en cuenta que el de potasio es menos higroscópico y puede almacenarse indefinidamente en recipientes de cierre común, pero es bastante más caro que el de sodio.

En condiciones normales es aconsejable utilizar este último de grado comercial, que además es más fácil de conseguir.

Para el caso del Acido sulfúrico basta el concentrado comercial que puede obtenerse en droguerías o como insumo, sirve igual aunque tenga color oscuro, como suele suceder habitualmente por carbonizaciones de sustancias orgánicas que caen en su seno, tapones, restos de los envases mal lavados, etc. Pero es importante que sea concentrado, puesto que la mezcla sulfocrómica tiene efecto limpiante solamente si el sulfúrico tiene un título mayor del 95%.

Hay que recordar que el ácido sulfúrico concentrado es una sustancia peligrosa y de difícil manipulación.

Condiciones de seguridad para el uso y manejo del Acido Sulfúrico

El ácido sulfúrico concentrado del 98% Quema la piel y las mucosas instantáneamente.Destruye los tejidos de las prendas de vestir también instantáneamente.

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Al caer al agua genera tal cantidad de calor que con frecuencia la hace hervir. Y si por el contrario, el agua cae sobre él, el vapor generado proyecta el ácido hacia afuera del recipiente.Es muy pesado, casi el doble del agua, y por lo tanto difícil de manejar en recipientes de considerable volumen.Moja el vidrio y es viscoso, lo que hace que las chorreaduras sean casi inevitables.

Por lo tanto es recomendable:a) Tenerlo en recipientes de poco volumen, como máximo bidoncitos de 3 - 5 litros de plástico resistente, con un pico de fácil escurrido y tapa a rosca.b) Guardarlo en estantes alejados del uso permanente y a baja altura.c) Rotularlo de forma muy visible, con letras bien grandes cubiertas con lámina de plástico transparente tipo "contact" (hay algunos líquidos de apariencia semejante como el ácido fosfórico o la glicerina).d) Una vez extraída la fracción de ácido a utilizar tapar bien el recipiente y lavarlo en la pileta por afuera con cuidado bajo chorro de agua laminar, para eliminar el ácido que con seguridad chorreó del pico.e) Utilizar antiparras o anteojos de seguridad para su manipuleo. Los guantes son opcionales pues a veces son peligrosos por la incomodidad que representan.f) Trasvasarlo a recipientes de vidrio borosilicato en porciones no mayores de un litro.

PREPARACIÓN

Preparar la mezcla sulfocrómica requiere precaución. Es conveniente hacerla en un sitio tranquilo o fuera de los momentos pico de trabajo. Transvasar con cuidado medio a un litro de ácido sulfúrico concentrado a un vaso de vidrio borosilicato seco y agregar evitando salpicaduras, cinco siete gramos de dicromato por cada litro de ácido, y agitar con varilla de vidrio hasta disolución total. Si se disuelve todo se puede agregar un poco más. Si queda soluto sin disolver, éste no deberá pasarse al frasco donde se la va a guardar para su uso, porque el sólido puede obturar las puntas de pipetas y buretas.Esperar que se enfríe la mezcla y luego transvasarla a los frascos que deben ser de vidrio resistente y estar rotulados de forma visible.

2.7. Aspectos de Salud y Seguridad Laboral

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2.7.1 para el lavado del material, se debe tener en cuenta que los profesionales y auxiliares, están en contacto permanente con microorganismos y contaminantes químicos orgánicos e inorgánicos potencialmente peligrosos capaces de producir enfermedad, por lo tanto, debe haber una manipulación con la debida responsabilidad y cuidado.

2.7.2 El riesgo está asociado directamente con la inhalación, ingestión, el contacto directo con la piel, a través de cortes de piel y a través de la conjuntiva.

2.7.3 La manipulación de cajas de petri, de tubos de ensayo y la ruptura del material de vidrio presenta un alto riesgo de accidentes en el área de lavado.

2.7.4 El personal del laboratorio debe estar entrenado contra los peligros potenciales relacionados con el lavado como son

2.7.5 Manipulación de desechos y material de vidrio contaminado.

2.7.6 Evitar movimientos bruscos o innecesarios ya que puede ocasionar un derrame infeccioso

2.7.8 Evitar tener contacto con superficies no estériles 2.7.9 Mantener cerradas las puertas del área de lavado durante el desarrollo del

procedimiento. 2.7.10 Evitar el paso de personal ajeno por el área de lavado.

2.8 Elementos de Protección Los siguientes son los elementos de protección que debe cumplir el personal que labora en el área de lavado

2.8.1 Bata de laboratorio manga larga 2.8.2 Tapabocas 2.8.3 Monogafas 2.8.4 Guantes de látex 2.8.5 Zapatos antideslizantes

Nota: La mayoría de medios de cultivo están clasificados como SUSTANCIAS NOCIVAS. La incorporación de estas sustancias en el organismo, puede producir efectos nocivos de menor trascendencia, que deben ser evitados.

2.9 Limitaciones e Interferencias

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2.9.1 Las interferencias en el proceso de lavado se refieren a posibles procesos inadecuados de esterilización, lavado y secado del material que puede interferir en los resultados de los análisis microbiológicos y fisicoquímicos que se le realizan al agua cruda y tratada.

2.9.1.1 Se puede presentar por las siguientes causas2.9.1.2 Lavado de material en forma deficiente. 2.9.1.3 Fallas en el proceso de esterilización de material. 2.9.1.4 Ambientes contaminados que afecten el procedimiento.

2.9.2 Estas interferencias se eliminan con procedimientos de calidad como son: 2.9.2.1 Estandarizando las operaciones, y dando el entrenamiento necesario al personal que realizar el lavado del material en forma eficiente. 2.9.2.2 Garantizando el ambiente de trabajo con equipos y técnicas adecuadas. 2.9.2.3 Llevando un estricto programa de control de calidad del lavado que incluye el uso de las ampollas y las tirillas en el lavado del material para análisis Microbiológico y el uso de indicador de pH en el lavado de material para análisis Fisicoquímico y registrando la información en el formato para el control de la calidad del material lavado.

3 NORMATIVIDAD.

OHSAS 18001:2007

4 CONTROL DE REGISTROSFormato para el Control de La Calidad del Material LavadoIdentificación Almacenamiento

y protecciónRecuperación Tiempo de

retenciónDisposición

Formato para el control de la calidad del material lavado

Archivo del laboratorio

Por código y Fecha de Archivo

1 ano en el laboratorio2 anos en archivoMuerto por el SIG

Destrucción

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5 ANEXOS

BIBLIOGRAFIA

Coliformes totales y e. coli por el método de filtración por membrana en agar chromocult Código: TP0314, Instituto de Hidrología, Meteorología y Estudios Ambientales IDEAM, 2007, pág. 3-5,10-11

Instructivo para el Lavado del Material, Facultad de Medicina, Universidad Autónoma de Baja California

Sobrino Alma, Lavado de Material para ensayos Toxicológicos

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HOJA CONTROL DE CAMBIOS

VERSIÓN FECHA REVISÓ ELABORÓ APROBÓMODIFICACIONES

01 01-06-2006

Faber Martínez Faber Martínez

Andrés R. Se realizaron cambios por el Sistema Integrado de Gestión y fondo de copia no controlada para control de procesos en la red interna.

7t

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