Lady Johana Serna Velazque

• “Staphylé”, CGP en racimos • De 0.5 – 1 µm, anaerobios facultativos, algunos

aislamientos requieren de CO2.

• Soportan Tpº de 18-40ºC• Presentes en piel y mucosas de seres humanos.

CAPSULA

BIOPELICULA

PEPTIDOGLUCANO

PROTEINA A

COAGULASA

• CAPSULA: 11 serotipos capsulares de S.aureus (5 y 7). Serotipos 1 y 2 (colonias de aspecto mucoide)

• BIOPELICULA : (capa de polisacáridos extracelular).

• PEPTIDOGLUCANO: actividad endotoxigénica.

• ACIDOS TEICOICOS: polisacárido A (S.aureus) y polisacárido B (S.epidermidis).

• PROTEINA A: En mayoría de cepas de S.aureus

• COAGULASA: Factor de agregación (Fibrinógeno Fibrina insoluble)

• PROTEINAS ADHESINAS: MSCRAMM

TOXINAS ESTAFILOCOCICAS: TOXINA ALFA: altera musculo liso, forma poros

en células huésped. TOXINA BETA: “esfingomielinasa C”; cataliza

hidrólisis de fosfolípidos TOXINA DELTA: actividad citolitica, surfactante

que altera membrana c TOXINA GAMMA: lisan neutrófilos y

macrófagos. LEUCOCIDINA DE PANTON -VALENTINE:

leucotoxica las dos ultimas toxinas están formadas por componente S y

componente, ambas forman poros que provocan inestabilidad osmótica.

TOXINAS ESTAFILOCOCICAS: TOXINAS EXFOLIATIVAS: Síndrome de la piel escaldada

estafilocócica; son dos (ETA y ETB) que se unen a glucolipidos GM4.

ENTEROTOXINAS: (A a E; G a I); y tres subtipos de enterotoxina C. la enterotoxina a se asocia con mayor frecuencia a enfermedad, C y D a productos lácteos contaminados y B produce colitis pseudomenbranosa estafilococica.

TOXINA 1 DEL SINDROME DEL SHOCK TOXICO (TSST-1): es un superantígeno que estimula la liberación de citocinas y provoca extravasación de células endoteliales. A altas concentraciones tiene efectos citotoxicos en células.

COAGULASA: ligada ( a la pared de estafilococo, puede convertir directamente fibrinogeno en fibrina) o libre ( reacciona con un factor del plasma para formar una estafilotrombina.

CATALASA: cataliza la conversión de H2O2 en agua y oxigeno.

HIALURONIDASA: hidroliza los ácidos hialuronicos (matriz acelular del tejido conectivo). Diseminación de S.aureus.

FIBRINOLISINA: “estafilocinasa”; disuelve los coágulos de fibrina

LIPASAS: importante en invasión a tejidos cutáneos y subcutáneos e infecciones cutáneas superficiales ( forúnculos, carbunco).

NUCLEASA: termoestable.

PENICILINASA (β lactamasa): la presencia de plásmidos transmisibles aseguro la distribución de esta enzima.

Escuche bien… catalasa negativa

AGAR MANITOL SALADO

Colonias amarillas Colonias rojas

S.aureus S.epidermidis

COAGULASA

(+) (-) S.aureus S. No aureus

a. Una endocoagulasa o "clumping factor" que está unida a la pared celular (test en placa).

b. Una exocoagulasa o que actúa mediante la activación de un factor (CRF), formándose un complejo coagulasa-CRF, el

cual reacciona con el fibrinógeno produciéndose un coágulo de fibrina

FUNDAMENTO

PRESENCIA DE DNAsa

(+) (-) S.aureus S.epidermidis

S.saprophyticusS.haemolyticus

S.capitis

Enzima termoestable DNAsa es capaz de clivar los enlaces fosfodiester internos de la molécula de ADN. FUNDAMENTO

Se siembra una colonia de estafilococo en forma de moneda en una placa de medio sólido que contiene DNA y verde de metilo.

Se incuba 18 horas a 35º.

PROCEDIMIENTO

POSITIVO

NEGATIVO

SUCEPTIBILIDAD A LA NOVOBIOCINA

RESISTENTE SENSIBLE S.aureus

S.saprophyticus

S.epidermidis

Varias especies del Género Staphylococcus son resistentes a la novobiocina (disco de 5 µg).FUNDAMENTO

PROCEDIMIENTO Se siembra una placa de agar sangre con un hisopo embebido en una suspensión de la cepa a estudiar. Luego se aplica

el disco de novobiocina y se incuba a 35º por 18 horas.

• Producción de una nueva proteína fijadora de penicilina.• PBP2 (no esta en cepas sensibles), codifican un gen llamado

mecA .

CUANDO LA CEPA ES RESISTENTE A METICILINA, SIGNIFICA:

Resistente a todos los antibioticos β-lactamicos (penicilinas, cefalosporinas y carbapenems).

• RESISTENCIA A LOS GLUCOPEPTIDOS• RESISTENCIA A LOS MACROLIDOS• RESISTENCIA A LOS AMINOGLUCOSIDOS• RESISTENCIA A LAS QUINOLONAS (MUTACIONES DEL GEN Gyr)

CEPAS BACTERIANAS (sospechosas de SARM)

SUSCEPTIBILIDAD ANTIMICROBIANA (OXACILINA)

DETERMINACIÓN DE RESISTENCIA A OXACILINA CON FOX (30 µG)

DETERMINACIÓN DE LA RESISTENCIA A OXACILINA MEDIANTE EL MÉTODO DE DESCARTE (SCREENNING TEST)

DETERMINACIÓN DE LA CONCENTRACIÓN INHIBITORIA MÍNIMA (CIM) A OX

DETERMINACIÓN DE LA PRODUCCIÓN DE PBP2A

PROCEDIMIENTO DE EXTRACCIÓN DE LA PBP2A

PROCEDIMIENTO DE LA AGLUTINACIÓN DE PARTÍCULAS DE LÁTEX

DETECCIÓN DEL GEN mecA (DETERMINANTE DE LA RESISTENCIA A OXACILINA)

http://www.scielo.org.ve/scielo.php?pid=S0075-52222008000100004&script=sci_arttext