guía hematología 2

8/12/2019 gua hematologa 2

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UNIVERSDADDE ANTIOQUIAFACULTADDE MEDICINA

DEPARTAMENTODE FSIOLOGAY BIOQUMICA

MANUALDELABORATORIOHEMOSTASIA

NORMASPARAEL INGRESOALLABORATORIO:

LABORATORTODE HEMATOLOGAil (HEMOSTASTA)

El mecanismo hemosttico est diseado para detener la hemorragia en vasosque presentan dao en su integridad.El proceso es rpido y localizad y no afectala fluidezde la sangre en circulacin.La hemostasia comprende una interaccinintegrada complejade: 1) vasos sanguneos,2) plaquetas y 3) factores de lacoagulacin y 4) la fibrinlisis.Para las pruebas de coagulacin,el anticoagulanteutilizadoes el Citratodesodio al3.25o/o,el cual tiene como principiola frecipitacindel calcio.

TIEMPODE SANGRA

OBJETIVO

Evaluar la hemostasia primaria,involucrandoel recuento de plaquetas y sufuncin.Esta prueba es utilizadacomo:' Prueba prequirrgicapara evaluar los trastornos hemorrgicosrelacionadosconlas plaquetas y su valorpredictivopositivoes bueno.' Prueba de tamizaje de las diferentes trombopatas: Enfermedad de vonwillebrand,Trombasteniade Glanzmann ysndrome de Bernard soulier., Controlde los medicamentosantiagregantes.


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FUNDAMENTO

Allesionar pequeos vasos la hemorragiaprovocada es determinada por laliberacinsustancias vasoconstrictorasy por la agregacin plaquetariaque taponala lesin.MATERIALES. Lanceta desechable. Papelfiltro' Cronmetro. Algodn. Alcohol' Portaobjetos

METODOLOGA

' Seleccin del sitiode puncin:Se selecciona la parte anterior,aproximadamente 5 cm por debajo del pliegue antecubital.del brazo, este nodebe estar paralizado ni con edema. Debe evitarse lesionar grandes vasos, ascomo las reas callosas y cicatrizadas. Si es necesario, se debe afeitar el lugar deincisinseleccionado.' Colocar el tensimetrosobre la porcin superior del brazo del paciente., Desinfectar el lugar de la incisin' Subirel tensimetroa 40 mmHgdurante 30 segundos antes de hacer laincisin' Colocar la lanceta en la zona elegida, asegurndose de que est en contactocon la piel.' Si la prueba se realizacon lanceta, se deben hacer tres punciones y losextremos de la lanceta deben quedar marcados en la piel,para garantizai quepenetr completamente.' cada 30 segundos absorba la sangre que fluye,con papel de filtro#1(rasgado), sin tocar el tapn que se est formando.' En caso de que la sangre que fluyasea muyabundante, puede absorber conmayor frecuencia.' Detenga el cronmetrouna vez que el sangrado de haya detenidocompletamente. Si despus de 15 minutoscontina la hemorragiase hace unvendaje con gasa estril y seca, el resultado se reporta mayorde 1S minutos.. Retire el tensimetro ylimpieel rea de incisin.

vALoRDEREFERENCIA:El valornormal es de 3 a 6 minutos.. lnterpretacin:La prueba se encuentra alterada en:


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) Trombocitopenia:Hay una correlacininversa entre el nmero de plaquetas yla prolongacindel tiempo. El tiempode sangra se encuentra alterado cuando elnmero de plaquetas est por debajo de 100.00/ mm3

ITrombopatas: por lo general, el tiempoes de ms de 1s minutos

Enfermedadde von wiilebrand,Trombasienia de Granzmann, sndromeBernard Soulier etc. en:de

Cushing, Amiloidosis,desrdenes

se puede alterar.

vasculares primarios:vasculitis,Sindrornededel tejido conectivo y Ehlers Danlos.

uso de medicamentos antiagregantes (aspirina)

PRUEBADE TORNIQUETE:METoDoDE RUMPEL_ LEEDEOBJETIVODeterminar la fragilidadcapilar del paciente.

FUNDAMENTODeterminala fragilidadcapilar, al aumentar la presin sangunea. La obstruccindel flujovenoso por el aumento de la presibn puede producirla ruptura depequeos vasos y la aparicin de petequiasMATERIALES

. Tensimetro.. Cronmetro.METODOLOGIA

' Antes de iniciarla prueba se debe observar cuidadosamente el antebra zo, paracomprobarsi hay petequias, de haberlas, se deber encerrar en un crculo,ydeterminar si aparecieron nuevas o aumentaron de tamao.' se coloca el rensimetroen er brazo der paciente y se ilevaa gOmmHgmantenindolo as por 5 minutos.

'Transcurridoeste tiempose retira, se

esperan otros 5 minutosy se observa laaparicin de petequias en el antebra zo y en la mano.' El resultado se da por cruces de 1 - 4 dependiendo del nmerode petequias:) + Mas de 10 petequias en el antebrazo.F ++ Mas de 20 petequias en el antebrazo.) +++ Mas de 40 petequias en el antebra zo y el dorso de la mano.F ++++lncontablespetequias.


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No se deben contar las que aparecieron en el sitiodonde se coloc etTensimetro, ni en el pliegue del brazo, ya que estas se presentan porcontinuidad.

VALORDE REFERENCIA:Hasta '10 petequias en el antebrazo.

FRAGILIDADCAPILARAUMENTADA:Se asocia a deficienciade vitaminaC,trombocitopenia,prpura de ScheleinHenoc, prpurasenil, diabetes, sepsis,hiperesplenismo.

TIEMPODE COAGULACINSANGRETOTAL

UTILIDADEvaluarel sistema intrnseco de coagulacin

FUNDAMENTOEl contacto de la sangre venosa con una superficieextraa (vidrio)produce laactivacin del factorXllque a su vez activa el factorXlas sucesivamente hastala formacindel cogulo de fibrina.

MATERIALES. Jeringa. Tubo de sangra sin anticoaugulante. Bao maria a 37oC. Cronmetro. Sangre. Algodn. Alcohol. Torniquete

PROCEDIMIENTOlnmediatamentedespus del sangrado se activa el cronometro,se mantendr enla mano para mantener la temperatura corporal,posteriora ello se gira el tubo a90 grados suavemente cada 30 segundos y se debe observar dtenidamentehasta que se formecompletamenteel cogulo.

El valornormal es de 6 a 15 minutos.Un resultadomenor indica,una tcnicadefectuosa. Un valormayorde 15 minutosindicaun defecto severo en alguno delos factores, exceptuando el factorVIIo Xll.Puede indicartambin presencia deun anticoagulantecirculante.


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RETRAccTr.lorlcoculoUTILIDADEvaluarla funcinplaquetariayla estructura de la fibrinaen la induccinde laretraccin del cogulo.

FUNDAMENTOEl cogulo formadoen un tubo de vidriose retrae por accin de las plaquetas yla fibrina.

PROCEDIMIENTOLa sangre utilizadaen el procedimientoanterior la dejamos en el bao mara yobservamos el tubo cada 15 minutossin agitarla.Transcurridauna hora, robserva la separacin del cogulo de las paredes del tubo, con la presencia desuero alrededor del cogulo. La retraccin o separacin debe ser totalen 12horas, el cogulo formadodebe persistirpor 72 horas. El resultadose reporta.

Normal:Si hay retraccin.Negativa:Si no se observa retraccin.

La retraccin depende del nmero de plaquetas y su funcin.Es negativoen lastrombocitopenias y trombopata.

DESFIBRINACINDELASANGREOBJETIVOPromover la coagulacinde la sangre total,dando como resultado la formacindefibrina

FUNDAMENTOLa sangre total es un conjuntode clulas y plasma. En el plasma encontramos losfactores de la coagulacin,los cuales al ser activados dan como resultado laformacinde fibrinaque ser atrapada en los palillos.

MATERIALES

. Jeringa. Agujas. Alcohol. Algodn. Cpsula de porcelana.. Palillos.


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PROCEDIMIENTO. Tomar 2 cm de sangre venosa en una cpsula de porcelana' Agitarcon los palillosjuntos impidiendoque se coagule la sangre, se obtendrun cogulo adheridoa los palillosel cual debe lavarse y observar cuidadosamentesu forma y contextura.Examinarla sangre que queda en el recipiente.

TTEMPODE PROTROMBTNA(TP)

OBJETIVOMedirel tiempo requeridopara la formacindel cogulo de fibrina,despus deagregar tromboplastinatisulary clorurode calcio aun plasma citratadopobre enplaquetas.Los factores que evala el TP son:. El FVll(que es el que se activa con la tromboplastina tisular). Los factores comunes (FX,FV, Flly Fibringeno)' Es la prueba ideal para el controlde la anticoagulacincon anticoagulantesorales, en este caso se debe reportar con el lNR.FUNDAMENTOUn exceso del extracto tisulary calcio,agregados al plasma reaccionan con losotros factores (V, Vll,Xy fibrinogeno) paraformarun compuesto activo,queconvierte la protrombinaen trombinay el fibringenoen fibrina.

MATERIALES

. Alcohol. Algodn' Agujas. Tubos tapa azul (citratoa\3.25%). Tubos de ensayo. Pipetas pasteur de 0.2 y 0.1 ml. Bao de mara a 37 C. Cronmetro. Tromboplastinatisularque contiene calcioPROCEDTMTENTO(SOLODOCENTES)

' Extraer 4.7 mlde sangre en un tubo de tapa azul o hasta que se agotecompletamente el vacio.Esto permite mantener la relacin9:1 (Sangre:anticoagulante).' Centrifugar10 minutosa 3.000 r.p.m.para obtenerplasma pobre en plaquetasy separar el plasma.' En un tubo se colocar 0.2 mlde tromboplastinatisulare incubar a 37 Cdurante 60 segundos' Adicionar0.1 ml de plasma y poneren marcha el cronmetro.


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' Se inclinael tubo hasta la mitad para poder observar los hilos de fibrinay laformacindel cogulo, cuando se iniciaformacinde los hilos,se detiene elcronmetro y se lee el tiempo.INTERPRETACNLa tromboplastina tisularque se utilizapara las pruebas de laboratorioes unextractode pulmno cerebro ms calcio.La prueba se debe realizar porduplicado,el valornormales de 10 a 15 segundos aproximadamente,pero cadalaboratoriotendr sus propios valores de refeiencia.El tiempo de protrombinamide principalmentela actividaddel complejoprotrombinico.La va extrnseca recibe ste nombre porque requiere la presenciadel factor tisularpresente en los tejidos extravasculares. El factor tisularenpresencia del calcioactivaal factorVll,pero tambin puede ser estimulada, porclulas endoteliales ylos leucocitos.

TEMPoTROMBOPLASTTNApARcrALAcflvADA(TTpa)OBJETIVOMedirel tiempo requerido para la formacindel cogulo de fibrina,despus deagregar un activadorde contacto (slicacoloidal)a un plasma citratadopobre enplaquetas.Los factores que evala el TTpson:Factores Xll,Xl,lXy VlllLos factores comunes (FX,FV, Flly Fibringeno)Es la prueba para la monitorizacinde pacientes bajo terapia anticoagulanteconheparina

FUNDAMENTOMedirel tiempo de coagulacin del plasma en presencia de una tromboplastinaparcial activada, la cual sustituye la accin del factor3 plaquetario,necesario parala formacindel coagulo de fibrina.

MATERIALES, Alcohol. Algodn. Agujas. Tubos tapaazul (citratoal3.2S%), Tubos de ensayo. Pipetas pasteur de 0.2 y 0.1 ml. Bao de mara a 37'C. Cronmetro' Reactivo para medirtiempo parcial de tromboplastina(cefalina). Calcio0.025 M


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PROCEDIMIENTO' Extraer4.7 mlde sangre en un tubo de tapa azul o hasta que se agotecompletamente el vacio.Esto permite mantener la relacing:1 (Sangre:anticoagulante).' Centrifugar10 minutosa 3.000 r.p.m.para obtenerplasma pobre en plaquetasy separar el plasma.' Tomar 0.1 mlde plasma y adicionar0.1 ml de tromboplastinaparcial e incubarpor 5 minutos exactos a 37'C' Agregar0.1 ml de clorurode calcio0.025 Mpreviamente incubado y ponerenmarcha el cronmetro.' lnclinarel tubo hasta que aparezcan los hilos de fibrinay se formeel cogulo.Se detiene el cronmetroen el momentoque aparezcan los hilos de fibrina yseanota el tiempo.

INTERPRETACINLa prueba se debe realizarpor duplicado,

el valornormales de 28-32 segundosaproximadamente,pero cada laboratoriotendr sus propiosvalores dereferencia.El TTPa evala la va intrnseca, esta va es ms lenta que la extrnseca, se iniciacon la activacindel factor Xllen el momentoen que la sangre entra en contactocon el endoteliolesionado y esta activacinparticipanla precalicrena, eciningenode alto peso molecular, el colgeno y el F3p.

TTEMPODE TROMBTNA(TT)

OBJETIVO

Medirel tiemporequerido parala formacindel cogulode fibrina,despus deagregar trombinaa un plasma citratadopobre en plaquetas.Eltiempode trombinamide la calidad y cantidad del fibringeno

FUNDAMENTOEl fibringeno,se convierteen fibrina, graciasa a la trombinamediante dospasos, en el primerpaso Ia trombinafijael fibringenopara formarmonmeros defibrina,luego estos se agregan para formarpolmerosinsolublesde fibrina.

MATERIALES

. Alcohol. Algodn' Agujas. Tubos tapaazul (citratoal3.ZS%), Tubos de ensayo. Pipetas pasteur de 0.2 y 0.1 ml. Bao de mara a 37 C, Cronmetro. Trombina. SolucinSalina


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PROCEDTMTENTO(SOLODOCENTES)' Extraer4.7 mr de sangre en un tubo de rapa azur o hasta que se agotecompletamente er vacio.Esto permitemantener ra reracin :r (sangre:anticoagulante).y separar el plasma.. Tomar 0.2 mt de plasmasalina hasta que el tiemposegundos).

. Centrifugari0 minutosa 3.000 r.p.m. para obtener plasma pobre en plaquetascontroly adicionar0.2 ml de trombinacon solucinse encuentre en el intervalode referencia (16_22

AfibrinogenemiaHipofibrinogenemiaDisfibrinogenemiaAnticoagulacincon heparinaEn presencia de productos de degradacin de fibringenoy/o fibrinaHipergammaglobulinemias

' Tomar 0'2 mlde plasma problemay adiciona r 0.2 mlde trombinaajustada.' lnclinary agitar el tubo hasta que aparezcan ros-hilosde tuiin,/'se formeelcogulo' se detiene el cronmetioen el momentoque aparezcan los hilosdefibrinay se anota el tiempo.INTERPRETACINLa prueba se debe realizar por duplicado, el valor normales de 16-22 segundosaproximadamente, pero cada laboratoriotendr sus propios valores dereferencia.Elvalordel TTpueden ser alterados por:

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