UNIVERSIDADSANFRANCISCODEQUITOUSFQ

ColegiodeComunicaciónyArtesContemporáneas

GrabadoconBacteriasCorrosivasdelMetalTrabajoexperimental

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NicoleMarianelaDíazGuerreroArtesContemporáneas

Trabajodetitulaciónpresentadocomorequisitoparalaobtencióndeltítulode

LicenciadaenArtesContemporáneas

Quito,19demayode2017

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UNIVERSIDADSANFRANCISCODEQUITOUSFQ

COLEGIODECOMUNICACIÓNYARTESCONTEMPORÁNEAS

HOJADECALIFICACIÓNDETRABAJODETITULACIÓN

GrabadoconBacteriasCorrosivasdelMetal

NicoleMarianelaDíazGuerrero

Calificación:

Nombredelprofesor,Títuloacadémico DeborahMorillo,MasterofArtsinArtEducation

Firmadelprofesor

Quito,19demayode2017

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DerechosdeAutor

Por medio del presente documento certifico que he leído todas las Políticas y

Manuales de la Universidad San Francisco de Quito USFQ, incluyendo la Política de

PropiedadIntelectualUSFQ,yestoydeacuerdoconsucontenido,porloquelosderechos

de propiedad intelectualdel presente trabajo quedan sujetos a lo dispuesto en esas

Políticas.

Asimismo, autorizo a laUSFQ para que realice la digitalización y publicación de

estetrabajoenelrepositoriovirtual,deconformidadalodispuestoenelArt.144dela

LeyOrgánicadeEducaciónSuperior.

Firmadelestudiante:_______________________________________Nombresyapellidos:NicoleMarianelaDíazGuerreroCódigo:00102505CéduladeIdentidad:1719959411Lugaryfecha: Quito,19demayode2017

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RESUMENEsteproyectodeinvestigacióntienecomofinalidadproponerunmétodoalternativoparalarealizacióndegrabadosobremetal,noparareemplazarlosmétodostradicionalessinoparaexponernuevosmediosdetrabajoenelarte.Para realizar grabado sobremetal, el método tradicional dice que se debe seguir unaseriedepasosusandoquímicoscorrosivos.Elnuevométodoqueseproponedicequesepueden usar medios biológicos para hacer el mismo trabajo que hacen los mediosquímicos.Paraestefin,seha investigadosobreelusodebacteriascorrosivasysulfato-reductoras, que son capaces de corroer elmetal sin la necesidad de usar los químicostradicionales como el ácido sulfúrico o el cloruro férrico, y así conseguir un resultadosimilaraldelgrabadotradicional.Palabrasclave:Grabado.Bacterias.Microbiología.Corrosión.Cobre.Arte.Ciencia.

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ABSTRACTThisresearchprojectproposesanalternativemethodfortherealizationofengravingonmetal, not to replace traditional methods, but to explore new means of work in thismedia.Thetraditionalmethodforengravingstatesthatyoushouldfollowaseriesofstepsusingcorrosivechemicals.Theproposednewmethodsaysthatbiologicalmeanscanbeusedtodothesameworkthatthechemicalmethoddoes.Forthispurpose,wehaveinvestigatedtheuseofcorrosiveandsulfate-reducingbacteria,whichareable tocorrode themetalwithouttheneedtousetraditionalchemicalssuchassulfuricacidorferricchloride,andthusachieveasimilarresulttothetraditionalmethodsofengravingonmetal.KeyWords:Engraving.Bacteria.Microbiology.Corrosion.Copper.Art.Science.

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AGRADECIMIENTOS

EspecialesagradecimientosalInstitutodeMicrobiologíadelaUniversidadSanFranciscode Quito. Sonia Zapata, directora del Instituto, JuanMosquera y LorenaMejía por supacienciaydedicación,sinloscualesestetrabajonolohubiesepodidorealizar.Además, mi reconocimiento especial a Deborah Morillo, coordinadora de ArtesContemporáneasporsuacertadadirecciónysucolaboraciónenellogrodeestetrabajo.

Miagradecimientoatodoslosprofesoresquehansidopartedemiformaciónacadémica.Yfinalmente,unagradecimientoamispadresquieneshansidolosprincipalesmotoresdemivida,creyendoenmissueñosysiendounapoyoincondicional.

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TABLADECONTENIDO

Introducción...................................................................................................................8Capítulo1.Trabajoenellaboratorio:procesodeaislamientodelabacteria.................11Capítulo2.Procesodelgrabado:comparacionesentreelmétodotradicionalyelnuevométodopropuesto........................................................................................................18

2.1.Definicionesyresumenhistóricodelgrabado.............................................182.2TécnicasdegrabadoaprendidasenlaUniversidadSanFranciscodeQuito..202.3Comparacionesentrelosmétodostradicionalesyelnuevométodopropuesto..........................................................................................................24

2.3.1ElTallerdeGrabado.......................................................................242.3.2Ellaboratoriodemicrobiología......................................................262.3.3Untallercomplementarioideal:microbiologíaygrabado..............272.3.4Elnuevométodopropuesto:pasoapaso.......................................28

2.4ProsyContrasdelosdosmétodos...............................................................30

2.4.1Prosycontrasdelgrabadotradicional...........................................302.4.2Prosycontrasdelgrabadoconbacteriascorrosivasdelmetal.......31

Capítulo3.Conclusiones...............................................................................................33ReferenciasBibliográficas.............................................................................................35AnexoA:Procesodeimpresión....................................................................................36AnexoB:Instruccionesparaaislamientodebacteria....................................................41

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INTRODUCCIÓN

Tesis:

Realizar grabado sobre metal usando un método alternativo que no use químicos

corrosivossinobacteriascorrosivasdelmetal,obteniendoresultadossimilaresalosque

se obtienen usando técnicas como el aguatinta, en cuanto a imagen sobre metal e

impresa.

El nuevométodopropuesto representa un beneficio para elmedio ambiente y para la

personaquerealizaelprocesodegrabado,dadoquelasbacteriasusadasnoconstituyen

ningúntipodecontaminaciónparaningunodelosdosagentesantesmencionados.

Objetivo:

Elobjetivodeestetrabajoesproponerunmétodonovedosodeaplicacióndelaciencia

enelcampodelarte.

Esporestarazónquelafinalidadderealizargrabadoconbacteriascorrosivasdelmetal,

enestecaso,nopretendecrearobrasdeartesinodemostrarque la tesispropuestaes

posibleyfactible.

Idea:

Laideadedesarrollarestenuevométodoenelprocesodelgrabadovienedelanecesidad

deencontrarunmétodoinnovadordentrodelartecontemporáneoydelasbellasartes,

puesesunmétodoquenosehausadoantes.

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Larelaciónentrearteyciencianoesnueva,puesexistenvariosartistasquehanrealizado

experimentosysehanbeneficiadode ladisciplinacientíficapararealizarobrasdearte.

Por ejemplo, Eduardo Kac es el creador de "GFP Bunny"que es una “obra de arte

transgénico que consta de la creación de un conejo verde fluorescente ("Alba")”

(ekac.org, 2000). Otro ejemplo es Stelarc (Stelios Arcadiou), quien adhirió

quirúrgicamenteunaorejaasuantebrazoizquierdo.

Yaqueelmétodoquesepropone,notieneantecedentesclarosenelcampodelartese

puedeasumirqueesinnovadoryportantoseharealizadodesdecero.Esdecirqueseha

realizado desde la investigación de qué tipos de bacterias corrosivas son capaces de

corroerelmetalparacrearlatexturanecesaria,hastahacerlaspruebaspertinentespara

comprobarqueesunmétodofuncionalyaplicable.

Aclaración:

Esimportantemencionarqueesteesuntrabajodeinvestigaciónenelcampodelarteen

conjunto con el campo de la microbiología, pues se intenta encontrar un método

científicoqueseaaplicableeneláreadelgrabado.Ysehalogradoencontrarelmétodo,

peroalmismo tiemposehadejadode lado la importanciade la imagen resultantedel

grabadotradicionalparaelpropósitodeestainvestigación.Esimportantemencionarque

paraposteriorestrabajosconelnuevométodo,elartistapodrátenertotalcontrolsobre

elmaterial(lasbacterias)parapodercrearunaimagen.

La imagen es un elemento importante de la rama del arte ya que es la manera de

expresiónqueusa el artistapara contar unahistoria, parahacerpensar al observador,

paracrearunaincógnitaoparahacernosreflexionar.

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En el trabajo científico tradicional, se usan los métodos científicos para comprobar

hipótesisyencontrarresultados.

Enestecaso,uniendoambasdisciplinas, loquesequiere lograresresumirosimplificar

unapartedeltrabajocientíficoparaquepuedaseraplicadaconfacilidadenelámbitodel

arte. Por esta razón, este trabajo de investigaciónnobusca crear unaobra de arte, es

decir, el resultado no mostrará una imagen clara o con significado como lo hace el

grabadotradicional,sinoquemostrarálosresultadosdeunainvestigacióninicialqueha

logrado aislar una bacteria corrosiva del metal y que puede crear una textura lo

suficientemente profunda para lograr que la imagen sea visible en la impresión. Este

trabajo demostraría que un nuevo método que se beneficia de la ciencia, puede ser

usadoenelartedelgrabado.

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CAPÍTULO1.TRABAJOENELLABORATORIO:PROCESODE

AISLAMIENTODELABACTERIA

Elprimerpasopararealizarestainvestigaciónfueencontrarunabacteriaqueseacapaz

de oxidar el metal y corroerlo a tal punto que creará una textura, lo suficientemente

prominente,parapoderrealizarlaimpresióncontintasobrepapel.

LabacteriaqueseempleóenelestudiofueThiobacillusferrooxidans.Lascaracterísticas

delasbacteriasdelafamiliaThiobacillus(T.ferrooxidans,T.thioxidans)sonlacapacidad

dedesarrollarseenambientesaerobiosyoxidarvarioscompuestosquecontienenazufre

para formar ácido sulfúrico, es decir, oxidan sulfuros a sulfatos; mientras que las

sulforreductoras convierten sulfatos a sulfuros. Estasbacteriaspueden ser encontradas

enlapartesuperiordealgunostubérculos.(DocenciaU.deAntioquia,s.f)

Las bacterias del hierro como T. ferrooxidans, son capaces de oxidar el hierro ferroso

presenteenunhábitatacuosoyprecipitarloenformadeóxidoférricohidratadooensus

secreciones mucilaginosas, similar a las bacterias que usan manganeso. (...) El hierro

ferroso lo obtienen de la tubería o del agua en su interior. [Fe(OH)3]. (DocenciaU. de

Antioquia,s.f).Ademásdelhierro,T.ferrooxidansescapazdeoxidarelcobreII,proceso

utilizadoparalarecuperacióndemetalesenlahidrometalurgia.(Torma,A.E.,&Habashi,

F.,1972)

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Idealmente, se necesita de una corrosión activa para lograr la textura y profundidad

deseados.Lacorrosiónactivalacausanlosmicroorganismosydebenestarpresenteslos

siguientesfactores:

1. Lapresenciademicroorganismosodesussubproductos.

2. Morfologíasdecorrosiónmicrobiológicamenteúnicas.

3. Productosydepósitosdecorrosiónespecíficos.

4. Condicionesambientalescompatibles.(DocenciaU.deAntioquia,s.f)

Enotraspalabras,paraprocederconlaexperimentaciónsedebetener:

1. Labacteria:Thiobacillusferrooxidans

2. Capacidaddecorroerdelmicroorganismoqueformapatronesúnicos.

3. Placasdecobresobrelascualesaplicarlabacteria.

4. Condiciones compatibles: laboratorio demicrobiología con elmaterial y equipo

necesarioscomounaincubadorayambienteestérilparaevitarcontaminación.

En un inicio, se contó con la ayuda del centro especializado en uso y cultivo de cepas

INIAP (Instituto Nacional de Investigaciones Agropecuarias), quienes facilitaron la

obtencióndelabacteriaestudiada.ElINIAPentrególacepaT.ferrooxidansyaaislada.

Unavezobtenidosloselementosnecesarios,seprocedióacultivarlabacteriaenmedios

decultivoYDCqueestáncompuestosdeextractodelevadura.Debidoaqueesteesun

mediodecarácternutritivonoselectivo,variosorganismossoncapacesdedesarrollarse

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enél.Estoresultóserunproblemayaqueelcultivosecontaminóconhongosynopudo

volverseaaislar.

Serealizóunnuevointentodeaislamientodelabacteriatomandodosmuestrasdeagua,

provenientesdeunatuberíacongrancantidaddecorrosión.Elaguapresentabauncolor

amarilloyrestosdeoxidaciónqueseacumulabanenelfondodelrecipientecontenedor.

Losresultadosobtenidosdelaguanofueronexitososyaquelabacteriaobtenidadeesa

pruebanologrócorroerelmetal.

Finalmenteseconsiguióunlíquidoferrosoprovenientederesiduosdeprocesosdemina

en el pueblo La López, ubicado en Machala. Este líquido que contenía la bacteria T.

ferrooxidans inactiva, lo facilitó el INIGEMM (Instituto Nacional de Investigación

GeológicoMineroMetalúrgico)

Pararealizarlaactivacióndelabacteriaserealizóunfiltradodellíquidoyseprosiguióde

lasiguientemanera:

Primero,sepreparóelmedio9Ken250mLdeaguadestilada,conlossiguientesreactivos:

- 0.025g(NH4)2SO4

- 0.01gK2HPO4

- 9gFeSO4.7H2O

- 0.0122gMgSO4

SeregulóelpHa1.5conH2SO4yterminadalapreparaciónseesterilizóenautoclavepor

15minutos.

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Como siguiente paso se hizo la filtración del líquido ferroso con medio 9K para el

posterioraislamientodelabacteria:

1. Semezcló120mLdemedio9kcon130mLdemuestradelíquidoferroso.

2. Sehomogenizóenagitadorpor30minutos.

3. Sehizoelprimerfiltradoconbombadesucciónypapelwhatman.

4. Ellíquidofiltradosevolvióafiltrarunasegundavezconunamembrana(seusaron

2membranas,yaquelaprimerasetapóalamitaddelfiltrado)

5. Lasdosmembranasquequedandelfiltrado,selavaroncon5mLdeaguaácidaen

unplatoPetri.

6. Elaguadelavadosesembróen75mLdemediolíquido9K

7. Sedejaenincubacióndurante7días.

Se continuó con la preparación del medio sólido 9K, para lo cual se necesitaron dos

soluciones:

SoluciónA:

- 1,75g(NH4)2SO4

- 0,029gK2HPO4

- 0,58gKCI

- 0,0252MgSO4

- 0,0084Ca(NO3)2

Estosreactivosfuerondisueltosen210mLdeaguadestiladayseregulóelpHa1.9con

H2SO4.Estasoluciónseesterilizóenautoclavepor15min.

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SoluciónB:

- 37,3gFeSO4.7H2O

- 12gAgar

Estosreactivosfuerondisueltosen290mLdeaguadestiladayseregulóelpHa1.9con

H2SO4.Estasoluciónnoseesteriliza.

Posteriormente, semezclaron las dos soluciones y se llevó a ebullición enmicroondas

hastadisolverbienelagar.Serepartióelmedioen20platosPetri.

Despuésdeundíadereposo,elmedio9knosesolidificó.Estefueelsegundoproblema

encontradoenelproceso.Seprocedióadevolverelmedioaunsolofrasco,dondesele

agregó 12g de agar extra y se disolvió nuevamente en microondas. Se almacenó en

refrigeradora.Finalmentesevolvióarepartirelmedioen15platosPetri.

Undíadespués,losmediosaúnnosehabíansolidificadoysedeterminóqueelproblema

fueproductodequeelagarnodebeserexpuestoaunpHmenora6;elmedio9Ktiene

unpHreguladode1.9,portantoelagarnosepodíasolidificar.

ComopasoadicionalserealizóelmedioYDCen300mLdeaguadestiladaysediluyeron

lossiguientesreactivos:

- 6gdeCaCo3

- 6gdeDextrosa

- 3gdeExtractodeLevadura

- 4,5gdeAgar

Estasoluciónseesterilizóenautoclavepor15minutosyserepartióen10platosPetri.

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Finalmentesedecidiórealizarotrasolucióndemedio9K,usandolosmismosreactivosy

enlasmismascantidades,peroestavezsinmodificarelpH,locualpermitióqueelagar

sesolidifiquesinningúnproblema.

Se procedió entonces a sembrar la bacteria desde el medio líquido realizado

anteriormente,alosmedios9kyYDC.Serealizólasiembraen2medios9Kyen4YDCy

selesincubóenanaerobiosisenjarraGasPackdurante5días.

Los medios 9K resultaron óptimos para el cultivo de la bacteria y se observaron las

primerascoloniasdebacterias.EnelmedioYDCnosevioningúncrecimientodebacterias

perosidehongos,porloquesedecidióqueelmedioYDCnoeseladecuado,yseeliminó

estemedioprosiguiendoconloscultivossolamenteenelmedio9K.

Elsiguientepasofuehacerlapruebadelabacteriasobreelmetalyselarealizósobredos

tiposdemetal.Primeroseaplicólabacteriasobrecobreyseincubó,despuésseaplicóla

bacteriasobreTolyseincubó.Ambosensayosseincubaronenunmedioanaerobio.Se

dejóenincubaciónpor7días.Elresultadodeestapruebafueambiguoyaque,sobreel

cobre,labacteriatieneunacorrosiónactivayesnotablemuyclaramente.Perosobreel

Tollabacteriatieneunacorrosiónmuyleveyescasiimperceptible.

Acontinuación,seprocedióarealizarunaúltimapruebayseaplicólabacteriamezclada

conazufresobreelcobreyelTol.SerealizóestamezclayaquelabacteriaT.ferrooxidans

esunabacteriadelhierroydelazufreysepotenciaconlapresenciadeesteelemento.

Efectivamente,losresultadosobservadosdespuésdeestapruebafueroncompletamente

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exitosos ya que el azufre en conjunto con la bacteria produjeron una corrosión más

profundayconmástextura.

Aclaración:

Esimportanteaclararqueexisteunatécnicaenelgrabadoenlacualseaplicaazufrecon

aceitedeolivayseproduceunacorrosiónactiva,peroestaduraaproximadamente7días

ensurtirefecto.Enestecaso,labacteriaenconjuntoconelazufredioresultadosclaros

en2díasdeincubación.

A partir de este punto, se puede iniciar con las pruebas de impresión en el taller de

grabado.

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CAPÍTULO2.PROCESODELGRABADO:COMPARACIONES

ENTREELMÉTODOTRADICIONALYELNUEVOMÉTODO

PROPUESTO

2.1.Definicionesyresumenhistóricodelgrabado

El grabado es una técnica artísticamuy antigua usada de distintasmaneras, el libro El

Grabadolodefinedelasiguientemanera:

Elgrabado,enciertomodo,seencuentraentrelasmanifestacionesartísticasmásantiguasde lahumanidad.Enefecto,siporgrabadoentendemoselresultadodepresionarunobjetodurosobreotromásblando,con la finalidaddeobtenerunamarcaomuesca,yporarteentendemostodoaquellorealizadoporelhombreconun añadido estético a la función práctica. Sin embargo, es una manifestaciónartística peculiar, por un lado muy vinculada al mundo de la industria y de latécnicay,portanto,almundodelareproducciónenserie;yporotro,almundodelacreatividadydelarte.(Catafal,Olivia;2007)

Una segunda definición nos dice que el grabado es la reproducción de una creación

original ypropiao interpretacióndeunaobraajena resueltasunayotravaliéndosede

diferentes procedimientos sobre madera, metal, piedra, linóleo, etc. para obtener de

ellas,porestampación,unacantidadampliadeejemplares, segúnsea la resistenciadel

materialgrabado.(Work,1985)

Finalmente,unadefiniciónmás sencillaexplicaqueelgrabadoes todo trabajoartístico

que requiere comomedio una planchamatriz incidida por el artista para obtener una

estampa. (Cruz, 1992) Y como complemento; la palabra grabado, etimológicamente,

significa“hacerunaincisión”.(Cruz,1992)

Portanto,entendemosquepararealizargrabadossepuedenusarvariosmaterialesque

servirándematrizyparacadaunodeellosserealizandistintastécnicas.

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Esimportantecrearunprecedentedelatécnicadelgrabado,yaquesequiereincursionar

proponiendounanuevatécnicayparaestosedebesabercómoesqueempiezaestetipo

dearte,conquématerialesyconquéfines.

En laantigüedad,quepodríamoshablarde laseraspaleolíticoyneolítico, losprimeros

“grabados” se realizaban en materiales como huesos y cerámica, usando para grabar

moluscos, piedras y huellas de los dedos. Pero el primer precedente del grabado

moderno son los “cilindros-sellos”, originarios de Mesopotamia, que eran cilindros de

aproximadamente10cmdealto(normalmentehechasdepiedra)queestabangrabadas

ennegativo y estabapensadapara ser reproducidaenpositivo ymásdeuna vez. Este

instrumento era usado sobre arcilla, rodándolo con un movimiento circular. (Catafal,

Olivia; 2007) En este punto, los cilindros-sellos se asemejan casi completamente al

grabado moderno, excepto por el uso de la tinta y el papel para imprimir.

Posteriormente, en China se empieza a desarrollar una variante de los sellos

mesopotámicos,graciasaldesarrollodelpapelylatintaparaescribir.Aestoselesuma

que la cultura tenía la necesidad de la difusión de los textos budistas y de los clásicos

chinos y por tanto se considera que las primeras Xilografías son las impresiones de

imágenesdeBuda(RollosdelosMilBudas).AfinalesdelXId.C.sedesarrollaunatécnica

mássofisticadaqueconsistíadecincelarenmaderaunaimagenennegativoypasarleuna

capadetintaparaluegopresionarlasobreunpapelyobtenerunaimagenenpositivo.

Posteriormente,enJapón,sepopularizaysedifundelaimpresióndeestampasinspiradas

enlapinturapopularllamadaukiyo-e.(Catafal,Olivia;2007)

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Conestosantecedentes,brevementeresumidos,podemosvercómoelartedelgrabado

hasidounodelastécnicasmásusadasymásantiguas.

2.2 Técnicas de grabado aprendidas en la Universidad San Francisco de

Quito

El tallerdegrabadoofrecía a susestudiantesdiferentes técnicaspara realizar grabado,

entreestasestán:lapuntaseca,elaguafuerte,elaguatinta,lamezzotintayelgrabadoal

azufre.Paracomenzar,sepresentaránlasdefinicionesdeloselementosnecesariospara

realizarelgrabado,tomadosdellibroElGrabado:

- Biselado de la plancha: se recomienda biselar antes de pulir la plancha ya que no se

deberíatocarconlosdedoslasuperficiedelaplanchapulidayaquequedanlasmarcas

de las huellas. El biselado consiste en limar los filos de la plancha en un ángulo de

aproximadamente45ºpara lograrque los filosseanunbisel redondoyposteriormente

nosecorrael riesgodedañarel fieltrode laprensaoromperelpapel. (Catafal,Olivia;

2007)

- Preparación de la plancha cobre: se debe pulir la plancha con lija, primero con una

gruesaparaquitartodaslasimpurezasydespuésconunamásfinaparalograrunpulido

limpio. El pulido se realiza con agua. A continuación se pule con crema pulimento de

metales; esta crema leponeuna capanegra sobre laplanchaynosdamos cuentaque

estálistacuandoesacapasedisipa.(Catafal,Olivia;2007)

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-Desengrasarlaplanchademetal:desengrasarlaplanchaesimportanteyaquedeesta

manera se asegura que el barniz, colofonia, etc., se van a adherir correctamente a la

plancha. Paradesengrasar sedebe limpiar lamisma conunalgodón librede grasa con

bicarbonato (o blanco de España) y vinagre. Se limpia con agua y no se debe tocar la

superficieconlosdedosyaquepuedenquedarlashuellas.(Catafal,Olivia;2007)

-Aplicacióndelbarnizblando:normalmenteestebarnizvieneenunabolayduro.Para

aplicarlosobreunaplanchapulidaydesengrasadasedebecalentarunpocolaplanchay

aplicarelbarnizhastaquesederrita.Sedebeaplicarenvariospuntosenlaplanchapara

despuésesparcirloconunrodillo.Dejarsecar.

Acontinuaciónsehaceunadescripcióndelastécnicasantesmencionadas,tomadasdeEl

GrabadoyLéxicodelGrabadoenMetal:

1. Punta Seca: la punta seca consiste en tallar una plancha de cobre o zinc

(preferentemente de cobre ya que es elmaterialmás suave) con una punta de

metal. La amplitud y profundidad de los entallados (rebabas) dependen de la

presiónqueseejerzaconlaherramienta,delángulodecontactoconlasuperficie

y lacorrectaaplicaciónde losdiversos tiposdepunta.Lacaracterísticaprincipal

delatécnicaeselefectoaterciopeladodelassuperficiesydelostrazos,debidoa

lalínealabrada,conrebordesirregularesllamadosrebabasyqueretienenlatinta

alrededor de la línea. (Cruz, 1992). Después de haber tallado elmetal, se debe

aplicar la tinta conunmuñecoomuñecónqueesuna “semiesferadealgodón”

envuelta en tela sin textura o con la menor textura posible y con mucha

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delicadeza ya que las rebabas de la plancha son muy frágiles y pueden

desaparecer. Finalmente, se procede a limpiar la plancha con suavidad para no

retirar ni la tinta ni las rebabas y se continua con la estampación sobre papel

previamentehumedecido.

2. Aguafuerte:estatécnicapermiterealizarlíneasmáslimpiasyaqueelprocesose

realizausandocloruro férricoybarnizblando.Elprocesoconsisteenbarnizar la

plancha,esdecir,ponerleunacapadebarnizqueesresistentealcloruroférrico.

Sobre esta capa de barniz, con una punta de metal delgada se puede dibujar,

retirando el barniz de manera que esas líneas dibujadas se corroerán con el

químico.La línearesultantees limpiaysepuedenhacermásdetallesqueconla

puntasecayaquenosedebeejercerpresiónmientrassedibuja,esmás fluido.

Despuésdehaberhechoeldibujo,seprocedea introducir laplacaenelcloruro

férrico.Laintensidaddelalínea,quesereflejaenlaoscuridaddelamismaenla

impresión,dependedeltiempoquesedejelaplanchaenelquímico.Paralograr

diferentes intensidades, diferentes valores tonales, se debe hacer el dibujo

paulatinamente.(Cruz,1992)

Finalmente, se procede a entintar con paleta, ya que en este caso no existen

rebabas sino solamente hendiduras donde se conserva la tinta. Se limpia y se

procedealaimpresión.

Parasaber lasdiferentes intensidadesde la líneasedeberealizarunapruebade

tiempos.Estapruebadetiempossedebehacermarcandounaplanchadecobre

máspequeña,introduciéndolaenelquímicoytomandoeltiempo,variasvecesen

diferentestiempos.Despuésseimprimeysevelaintensidaddecadatiempo.

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3. Aguatinta:conestatécnicasepuedenlograrmásvalorestonalesymástexturas.

Enestatécnicasedebedesengrasarlaplanchadecobreparacolocarunacapade

colofoniaylograrunatexturarugosasobrelacualseretienelatinta.Lacolofonia

esunaresinasólidaqueseaplicaenpolvosobrelaplanchaydespuéssecalienta

paraqueseadhiera sobre laplanchadecobre.Unavezaplicada la colofonia se

tapaconbarnizlíquidoelnegativodelaimagenolosespaciosvacíos.Seintroduce

enelquímicoyserepitepaulatinamenteparalograrvariostonos.Finalmente,se

limpialaplanchaconalcohol,queeselúnicoquímicoqueretiralacolofoniayse

procedeaentintareimprimirigualqueenelprocesodeaguafuerte.(Cruz,1992)

4. Mezzotinta: esta técnica es idónea para grabar imágenes en claroscuro. Éste se

resuelveapartirdelucesysemitonossobreunabasenegra.(Catafal,Olivia;2007)

Consiste en texturizar unaplanchade cobre sin preparar, conun graneador. Se

debenrealizarlosmovimientosconelgraneadorentodaslasdireccionesyvarias

veces (aproximadamente 3 capas) para lograr un color completamente oscuro.

Uno se da cuenta que la plancha está lista cuando la superficie está

completamentemate, sin brillo. Posteriormente, con un bruñidor y un poco de

aceiteseempiezanasacarlostonosblancos,raspandosobrelatexturaqueseha

realizado.Unavezterminadoeldibujo,sedebeentintardelamismamaneraque

conpuntaseca,conunmuñecoyconmuchadelicadezayaque las rebabasson

frágiles. Se debe limpiar de la misma manera, con suavidad y sólo las partes

blancas.Finalmenteseprocedealaimpresión.

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5. Grabadoalazufre:esteprocesoesbastantesimple,perobastantelargo.Sedebe

prepararlaplanchanormalmenteydesengrasar.Almismotiemposepreparauna

solucióndeazufreconunpocodeaceitedeoliva.Estasoluciónquedacomouna

tintayseprocedeaaplicarsobre laplacadecobre.Unavezhechoeldiseño,se

debedejarreposar laplanchaenunlugar limpioporaproximadamente5-8días.

Después de los 5-8 días se limpia la plancha con aguarrás para quitar bien el

aceite, seaplica la tinta conunmuñecoy se limpia. Finalmente seprocedea la

impresión. La textura obtenida esmuy parecida al aguatinta, pero no se puede

logrartantosdetallesovalorestonalesconestatécnica,amenosquesemezclen

otrastécnicascomoaguafuerteopuntaseca.

2.3 Comparaciones entre los métodos tradicionales y el nuevo método

propuesto

2.3.1ElTallerdeGrabado.

Paraempezar,debemosvercómofuncionancadaunode losmétodosantesseñalados.

Lapuntaseca,esprobablementeelmétodoquemenossedemorayaquenodebepasar

por unmétodo químico para realizar el grabado. Después de la punta seca, entre los

métodosquenousanquímicoestálamezzotinta,aunquenoesdifícilesunmétodoque

tomatiempoypacienciayaquepara lograr la textura idealsedebepasarelgraneador

másdeunavez.

Losprocesosquímicos (aguatinta, aguafuerte) no sondifícilesni tomanmucho tiempo.

Paralograrunnegrobastantemarcado,eltiempopromedioquesedejalaplanchaenel

químicoesde20-30minutos.Tambiéndependedelacapacidaddelquímico,avecesestá

desgastadoysedemoraunpocomás.

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Loúnicoenloquenosedistingueningúnproceso,conosinquímico,esenelprocesode

entintadoeimpresión.

Unestudiodegrabadoconequipobásico,segúnGuíaCompletadeGrabadoeImpresión:

TécnicasyMateriales,debecontener;primero,unamesaosuperficieplanacubiertacon

plásticoocualquiermaterialfácildelimpiar.Sedebeteneralamano,traposparalimpiar

o tarlatanas, traposde tela,algodónogasas. Sedebecontar con recipientes con tapas

paraguardarmezclasdetintasyotroslíquidos(quenoseanácidos)comoalcohol,aceite,

aguarrás, etc. Otros elementos importantes son las paletas para mezclar tintas; que

puedenserdecartón,linóleo,metalesnoferrososovidriogruesoconlosbordeslijadosy

protegidos. Adicionar a esto, se debe tener espátulas para mezclar tintas sobre las

paletas.Sedebedisponerdeunparderodillosdegomaquesirvenparalaaplicaciónde

barnizblandoyrodillosdetelaodepielparalaaplicacióndetinta.Ademássenecesita

teneradisposiciónunaseriedebruñidorespararealizarvarios tiposdetrabajocon los

mismos. Entre otros materiales se encuentran las cuchillas para cortar papel u otros

materialesdeltaller,pinzasparacolgarelpapelmojadasolasimpresiones.

Encuantoalaprensadegrabado,estacuentaconunrodilloqueesloquehacepresióny

estampalaimagen.Tieneunfieltro,quefuncionacomounamortiguadorentrelaplancha

yelrodilloparanodañarelpapel.Debajodetodoesto, laprensatieneunaplanchade

acrílico, inmediatamenteencimadelabasedelaprensa.Esteacrílicosepuedelevantar

ligeramenteparaponerunpapelguíadebajoyacomodarexactamentelaplacadecobre

yelpapel.Mientrasseusenmaterialesmáspesadosparalaelaboracióndelaprensa,el

costoseríamayor.

26

2.3.2Ellaboratoriodemicrobiología.

Los laboratoriosdel InstitutodeMicrobiologíade laUniversidadSanFranciscodeQuito

sonbastantecompletosyacontinuaciónseencuentraunadescripcióncompletade las

instalaciones,tomadodelManualdeBioseguridad;LaboratoriodeMicrobiologíaUSFQ.

El laboratoriocuentaconmesonesdetrabajo lisos, instalacionesdegasencadamesón

con llavede gas en cadamesón. Existeuna salidadeemergencia amplia enel áreade

laboratoriosdemicrobiología.

ExisteunaSorbonaparatrabajoconcompuestosvolátilesconunsistemadeextracción

deaire.Lasáreasdetrabajoestándelimitadasparacadatipodeactividad.

Sedisponededosáreasparaautoclaves,haydosequiposespecializadosconestefinen

el área de preparación de medios y otros dos en el área de limpieza de materia

contaminado.Enestaáreaseposeeunsistemadeextraccióndeaireyvaporgenerado

porlosequipos.

Las puertas externas del laboratorio se cierran automáticamente. El material de

construcción(puertas,mesones,pisos,techos)noesabsorbenteniporoso,esresistente

aquímicos,calorypermitesufácillimpieza.Losmesonesresistenelpesodelosequipos.

Secuentaconlavamanosencadalaboratorio,alextremodelosmesonescentrales,

27

cercanosa lapuertadesalida.Secuentaconestacionesdeemergenciapara lavadode

ojos y una ducha de seguridad, en todos los laboratorios de microbiología y biología

molecular.

Los laboratorios también cuentan con incubadoras y refrigeradoras para el cultivo de

microorganismosyalmacenamientodemediosdecultivoymuestras,respectivamente.

Lostanquesdegascomprimidoestánubicadosfueradeloslaboratorios.Elcircuitodegas

cuentaconmúltiplesválvulasdeseguridadubicadasencadamechero.Ysecuentacon

válvulasdepasoparacadamesóndetrabajo.

Se cuenta también con un botiquín de primeros auxilios ubicado en el área de

microbiología.

2.3.3Untallercomplementarioideal:microbiologíaygrabado.

Tomandomateriales y equipos de ambas disciplinas para lograr un taller ideal y poder

desarrollar efectivamente el nuevo método propuesto se necesitarían los siguientes

materiales:

- Incubadora.Necesariaparamantenervivaycultivarlabacteriausadaengrandes

cantidades.Tambiénnecesarioparaincubarlasplacasdemetalimpregnadasdela

bacteriacorrosiva.

- Refrigeradora.Necesariaparamanteneralmacenadoslosmediosdecultivoenlos

cualessedebereproducirlabacteria.

- Mesón de trabajo con mechero y una conexión externa de circuito de gas. Se

necesitaparaevitarcontaminaciónenlosmediosdecultivoyelesparcimientode

28

la bacteria aotros espacios. Enestemesón también seharía la aplicaciónde la

bacteriasobreelmetal.

- Guantesdelátexodenitrilo.

- Lavamanosconjabónantibacterialypapeltoalla.

- Mesónlimpioparapreparacióndetintayaplicacióndetintasobrelasplacas

- Prensa.

2.3.4Elnuevométodopropuesto:pasoapaso.

Yaquesehadefinidoyexplicadocómofuncionacadaunodelosmétodostradicionales

aprndidos dentro del taller de grabado en laUniversidad San Francisco deQuito en el

área de Artes Contemporáneas, se procede a explicar paso a paso cómo funciona el

nuevométodopropuestoquecombinalasdosáreas:grabadoymicrobiología.

Habiendo aislado la bacteria y teniendo una buena cantidad de lamisma en stock, se

debe trabajarenel áreademicrobiologíaenunmesónconmechero. Sedebe trabajar

con las barreras primarias de protección de bioseguridad: bata y guantes de látex o

nitrilo.

Primero, se debe limpiar el mesón con alcohol, antes de prender el mechero, para

asegurar que se está trabajando en un espacio limpio y estéril. Ya limpio elmesón, se

prendeelmechero.

Segundo,sesacaelplatoPetriconlabacteriadelaincubadorayseempiezalaaplicación

de lamisma sobre la placa de cobre cerca delmechero para evitar contaminación de

29

cualquier tipo. Para la aplicación seusanhisopos y palillos estériles. Con cualquierade

estas dos herramientas se coge la bacteria como si fuera una tinta y se aplica

directamentesobrelaplaca.

Tercero,seponelaplacaenunplatoPetrideplásticoconlamedidanecesaria,esdecir,

quealcance laplacadecobrequeseestéusando.Yse insertaelplatoquecontiene la

placaenlaincubadora.

Elvalortonaldelalíneadependedelabacteriaydesumezclaconotrosreactivos.Enel

caso de esta investigación semezcló la bacteria directamente con azufre, se creó una

especie depasta y se la usó como tinta sobre la placa demetal. La corrosión empieza

inmediatamenteseguidoalaaplicacióndelabacteria.

Es ideal dejar de 1 a 2 días la placa con la bacteria en incubación, así se obtienen los

mejoresresultados.

Cuarto, una vez corroídoelmetal seprocedea limpiar la placaprimero conaguapara

quitar lacostradeazufrequequedaen lasuperficiede laplaca.Despuésse limpiacon

vinagreysalporquedeestamanerasevequelacorrosiónresultantequedaimpregnada,

nosequitaysecompruebaquenoessuciedad.Selimpiaconalcoholparaasegurarque

noquedenresiduosdelabacteria.

Quinto,seprocedeaentintandoconunmuñeco,limpiandocondelicadezayhaciendola

impresión.

30

2.4ProsyContrasdelosdosmétodos

2.4.1Prosycontrasdelgrabadotradicional

Elgrabadotradicionaltienebeneficiosencuantoaltiempoyaquelosquímicoscorrosivos

trabajan inmediatamente creando líneas limpias y claras. Es más fácil crear detalles

pequeños y líneas delgadas. Esto se aplica en el grabado con químicos, es decir,

aguafuerte y aguatinta. Los beneficios de este tipo de grabado se basanmucho en el

productoestéticodelaestampa.

Loscontrasdeestosprocesossebasanenelusodelmismoquímicocorrosivoyaquese

necesitademuchocuidadoparatrabajarlos,yaquesondañinosparalasaludyelmedio

ambiente. Los químicos corrosivos no deben ser desechados por los desagües ya que

corroen las tuberías y causan daños a largo plazo. Además, los químicos corrosivos se

debenmanejar concuidadoyaque si tocan lapielpuedencausar severosdaños como

quemaduras.

Encuantoalgrabadotradicionalsinquímicos,comolapuntaseca,losbeneficiossebasan

primordialmente en que no se usa ningún químico corrosivo y se pueden lograr líneas

marcadasydelgadas,texturasyeneltamañoquesedesee.Conlamezzotintasepueden

lograr variacionesde tonosdesdeel negrohacia el blanco y sepueden logrardetalles,

segúnsetrabajenlosinstrumentosyselogrenlosvalorestonales.

Loscontrasdeestasdostécnicassebasanpuramenteeneltiempo,yaqueestastoman

muchomástiempodetrabajoenelprocesodeldiseñosobrelaplaca.

31

Encuantoalgrabadoalazufre,losbeneficiosestánbasadosprácticamenteenquenose

usanquímicoscorrosivosytampocoseusaningunaherramientapunzante,solamenteun

pincel.

Una desventaja de este proceso es igualmente, el tiempo. Para lograr la corrosión del

material usando azufre mezclado con aceite, se debe dejar reposar la placa de metal

aproximadamentede5a8días.

Dentro de la Universidad San Francisco de Quito, se cuenta con un taller totalmente

equipado, por tanto, trabajar con todas las técnicas tradicionales resulta muy

convenientesisesabeusarelmaterial.Esteesunbeneficioporsobretodos.

2.4.2Prosycontrasdelgrabadoconbacteriascorrosivasdelmetal

Elgrabadoconbacteriascorrosivasnoesunprocesomuydifícilunavezquelabacteriase

tieneaisladayeseeraunodelosprincipalespropósitosdeestetrabajodeinvestigación:

proporcionarlabacteriaaisladaparafuturosproyectosquesedeseenrealizarenelárea

de Artes Contemporáneas de la USFQ. Este es el mayor beneficio que se ha logrado

duranteelproceso.

Otrode losbeneficiosmás importantesesqueelgrabadoconbacteriascorrosivas,usa

precisamenteestasbacteriasquesoncapacesdecorroerelmetalsincausarunimpacto

ambientalcomolohacenlosquímicoscorrosivos.Tampocoespatógena,esdecir,queno

representaunpeligrobiológicoparaelserhumano.Sedesechanrápidamente,esdecir,

desaparecenomuereninmediatamenteconlaaplicacióndealcohol.Lasbacteriasnoson

capacesdeingresardeningunamaneraenelcuerpoatravésdelosguantesdelátex,a

diferencia de los químicos corrosivos que quemarían dichos guantes, por eso en el

32

grabadoconquímicoscorrosivossedebenusarguantesdenitrilo.Otrobeneficioesque

siseaplicalabacteriaconazufre,lacorrosiónsedainmediatamente,estoesalgoquese

pudoapreciardurantelaspruebasenellaboratorio.Aúnasíesrecomendableincubarla

bacteriapor1a2díasparamejoresresultados.(AnexoA)

Lasdesventajasdeesta técnica sebasanenque las líneasno sonclarasy limpias,mas

biensonmásgruesasyentrecortadasdebidoalasherramientasusadasquesonhisoposy

palillos.Otradesventajaesqueeltiempodecorrosiónesde1a2díasencomparaciónal

grabadoconquímicos,quetomaminutos.

Finalmente, lo que se podría contar como desventaja es que no se tienen todos los

equiposnecesarioscomo la incubadora, la refrigeradoraoelmesónconmecheroenel

tallerdegrabadoyportantosedeberíatrabajarendosdistintosambientes:eneltaller

degrabadoyenellaboratoriodemicrobiología.Además,enlaUSFQ,losencargadosdel

laboratoriodemicrobiologíadebendarunaaprobaciónparaqueunapersona“externa”,

eneste casounestudiantedeArtesContemporáneas, ingreseenel laboratorio yhaga

uso de las instalaciones. A pesar de que este no es un proceso difícil, se debe dar un

examenqueapruebeelingreso.

33

CAPÍTULO3.CONCLUSIONES

Habiendo hecho una comparación de las técnicas tradicionales y el nuevo método

propuesto,sepuedeconcluirquehayciertosbeneficiosenamboslados.Conelgrabado

tradicionalresultaclaramentemásfácilyaqueesunatécnicaexploradadurantedécadas

ycadavezsehaidosimplificandoyesmásasequibleencuantoaencontrarmaterialesy

equipos.

Obviamente, la técnicapropuestaesunpocomás complicada y resultaríamás costoso

adecuar un espacio dentro de las instalaciones deun taller de grabadopara encontrar

todas lasnecesidadesdeun laboratoriodemicrobiología.Dentrode laUniversidadSan

Francisco de Quito, se tiene una clara ventaja, que es que se cuenta con ambos

ambientes y a poca distancia, incluso la relación entre ambas disciplinas ya se ha

empezadoconesteproyectodeinvestigación.

Encuantoatiempoyaproducción,lastécnicastradicionalessiresultanmásrápidasque

lanuevatécnicaperoelimpactoambientalesalgoquenosepuedepasarporalto.Elmás

grandebeneficioque sehaencontrado conel grabado conbacterias corrosivasesque

reduce el impacto ambiental considerablemente ya que estas bacterias corroen

solamente los lugares donde son aplicadas, se limpian con alcohol y desaparecen;

además,nocausandañoalserhumanodeningunamanera.Unacosasiesimportante,el

procesoesmuchomásdelicado,yaquesedebetrabajarenunambienteestérilyconun

mecheroqueproporcionalaesterilidadnecesariaparanocausarningunacontaminación

34

de hongos o esporas en los medios de cultivo donde se encuentran las bacterias

corrosivas.

Esimportanteaclararqueestenoesunprocesoquereemplacealastécnicasdelgrabado

con químicos corrosivos como el agua fuerte y el aguatinta porque visiblemente no se

puedenconseguirlosmismosresultadosconlaaplicacióndelasbacteriassobreelmetal.

Apesardequesepuedeapreciarunaimagen,nuncavaaestarcargadadelosdetallesy

tonalidadesquelogranlastécnicastradicionales.

Finalmente,seconcluyequeambastécnicas, latradicionaly lapropuesta,sonbuenasy

tienensusbeneficios.Peroclaramente,seríaextremadamentecostosotratardecrearel

taller ideal:grabadoymicrobiología,porel costode losequipos.Peroestonosignifica

quelatécnicapropuestanodebaseguirsiendoaplicadao investigadaafuturo,pueses

unamuybuenaalternativaaltrabajoconlosquímicoscorrosivos.Posiblementeconmás

investigaciónyafuturo,sepuedaconseguirqueelgrabadoconbacteriassesimplifiquea

talpuntoquesealaopciónmásconvenienteeneltrabajoconmetal.

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REFERENCIASBIBLIOGRÁFICAS

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CruzM,Jaime(1992).LéxicodelGrabadoenMetal.EditorialUniversitariaS.A.Chile.

Dawson, John. (1996) Guía Completa de Grabado e Impresión; Técnicas y Materiales.

Tursen,S.A.H.BlumeEdiciones.Madrid,España.

DocenciaUniversidaddeAntioquia.(s.f.).Microorganismosensistemasdeenfriamiento.

Obtenido de docencia udea:

http://docencia.udea.edu.co/bacteriologia/MicrobiologiaAmbiental/microbiologia

_8.pdf

Pla,Jaume.(1986)TécnicasdelgrabadoCalcográficoysuEstampación.EdicionesOmega

S.A.Barcelona,España.

Torma, A. E., & Habashi, F. (1972). Oxidation of copper (II) selenide by Thiobacillus

ferrooxidans.Canadianjournalofmicrobiology,18(11),1780-1781.

Trueba, Gabriel; et al.(2014). Manual de Bioseguridad. Laboratorio de Microbiología.

UniversidadSanFranciscodeQuito.Quito,Ecuador.

Work, Thomas. (1992) Crear y Realizar Grabados. Las Ediciones de Arte. Barcelona,

España.

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ANEXOA:PROCESODEIMPRESIÓN

Proceso de Impresión de estampas - Primera prueba de aplicación de bacteriay primera impresión.

Esta impresión corresponde a la primera placa trabajada en el laboratorio con la aplicación debacteria. La aplicación se hizo sobre una placa reciclada, por tanto, en la impresión se ven lineas delgadas y muy marcadas. Esto nos permite observar la diferencia entre el trabajo de una puntaseca y la bacteria.

Detalle de placa

En la primera parte se realizan líneas esparcidas sobre la placa para dejar espacio para que la bacteria trabaje.

En esta tercera parte de la placa, se aplicó la bacteria primero como base y se espolvoreó azufre encima.

En la segunda parte de la placa se aplicó la bacteria conmovimientos circulares. Se puede ver que hubo menos trabajo de la bacteria.

Figura 1. Placa trabajada junto a la impresión de la misma.

Figura 2. Detallede placa.

Figura 3. Perspectiva de la placa junto a su impresión. Se puede observar claramente el detalle de punta seca en comparación con la mordedura de la bacteria.

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Proceso de las dos primeras placas - Primera parte

Para realizar este proceso, se realizó una imágen con varias formas, líneas curvas y se intentaron texturas gruezas y fuertes. Para dibujar se mezcló una parte de bacteria en su medio azufre y se creó una pasta, que se aplicó sobre el metal. La imagen representa un paisaje de montañas.

El resultado de esta placa de metal, después de una limpieza simple con alcohol fue una capa gruesade corrosión encima del metal y estas son las impresiones que se consiguieron:

Después de la primera impresión nos dimos cuenta de que el papel se quedaba adherido en la placa de metal y se procedió con una limpieza profunda con limón y sal. Este es el resultado de la impresión después de la limpieza:

Figura 4. Placas trabajadas con la mezcla de azufre y bacteria (pasta).

Figura 5. Primera impresión de las placas.Grabado falso.

Figura 6. Segunda impresión de las placaslimpiadas con limón y sal. Se puede observar que la imagen desaparece al retirar la capa de corrosión encima de la placa.Desaparece el grabado falso.

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Proceso de las dos primeras placas - Segunda parte

Ya que la corrosión era solamente superficial, es decir, un grabado falso, se procedió a pulir nuevamente las dos placas de metal y se aplicó más bacteria como base y se espolvoreó con un poco de azufreencima. Se hizo esto ya que se comprobó que mezclar previamente la bacteria con azufre y crear una pasta, no es efectivo en el proceso de corrosión; mientras que la bacteria aplicada directamente sobre la placa si logra una mordida visible.

Figura 7. Placa pulida con aplicación directa de bacteria y espolvoreado con azufre.

Figura 8. Placa con bacteria, espolvoreadacon azufre. Resultado después de 2 días en incubación.

Figura 9. Resultado después de lavado con agua, limpiado con alcohol y limpiado con vinagre.

Finalmente se puede ver el resultado de la impresión de la verdadera mordida de la bacteria sobre el metal.

Figura 11. Impresión final, sketch de la imagen y placas de metal.

Figura 10. Detalle de placas después de impresión y limpiado con aguarrás, vinagre y sal y lavado con agua.

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Proceso de las dos segundas placas - Primera parte

En las dos segundas placas se trabajó de la misma manera, con la pasta hecha con bacteria y azufre mezclado. El motivo de estaimagen es uno más natural y suave, con líneas delgadas.

El resultado de la primera impresión falsa es el siguiente:

Y este es el resultado de la segunda impresión, una vez limpiado con limón y sal:

Figura 12. Placas trabajadas con lamezcla de azufre y bacteria (pasta)

Figura 13. Primera impresión de las placas.Grabado falso.

Figura 14. Segunda impresión de la placalimpiada con limón y sal. Se puede observar que la imagen desaparece al retirar la capa de corrosión encima de la placa. Desaparece el grabado falso.

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Proceso de las dos segundas placas - Segunda parte

Ya que el previo intento fue fallido, se procedió a pulir las placas y aplicar una cantidad generosa de bacteria directamente sobre las mismas y se espolvoreó con azufre. Se dibujó nuevamente, líneas más gruesas asemejando un árbol con gruesas ramas. Se usó la bacteria como tinta y en la figura 1 se presenta el resultado de la verdadera mordedura de la bacteria después de una incubación de 2 días.

Figura 15. Placa después de limpieza con vinagre y sal y posteriormentecon agua.Figura 16. Detalle de la placa

trabajada, después de las impresiones, limpiada aguarrás,vinagre y sal y lavada con agua.

Figura 17. Impresión final, sketch de la imagen y placas

Ya que en estas placas el trabajo de la bacteria funcionó de mejor manera y la mordedura es más profundala, se decidió hacer una serie de 10 impresiones de estas placas. Como se puede observar, la imagen impresa es bastante fiel al sketch.

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ANEXOB:INSTRUCCIONESPARAAISLAMIENTODEBACTERIA

Son bacterias que se desarrollan en un pH ácido, el género más representativo esThiobacillusque tiene la formadebaciloyesGramnegativo.Estasbacteriasutilizanelhierrocomofuentedeenergía.Objetivo:

• Prepararmediosdecultivo• AislarlabacteriaThiobacillussp.

Metodología:• Tomademuestras

Latomademuestrasserealizódedosgrifosdeaguaconconexionesdetubosdehierrooxidados.

Procedimientoenellaboratorio

• MediosdecultivoysolucionesEl medio utilizado fue el 9K propuesto por Silverman y Lundgren para elaislamientodeestetipodebacterias.

Medio9Klíquido

Medio9Ksólido

0.025g(NH4)2SO40.01gK2HPO49gFeSO4.7H2O0.025gMgSO4.7H2OEstos reactivos fueron disueltosen 250mL de agua destilada,ajustando con H2SO4 10N parallegar a un pH final de 1.5. Seautoclavó a 121 lb de presióndurante15minutos.

SoluciónA:1.75g(NH4)2SO40.029gK2HPO40.058gKCl0.029gMgSO4.H2O0.0084gCa(NO3)2Los reactivos fueron disueltos en210 mL de agua destilada,ajustando el pH a 1.9 con H2SO410N. Se autoclavó a 121 lb depresióndurante15minutos.SoluciónB:37.3g FeSO47.H2Oen290mLdeaguadestiladaapH1.9conH2SO4

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10N,más 12g de agarosa. No seesterilizó en autoclave para evitarla precipitación de compuestos ydesnaturalizacióndeagarosa.Unavez autoclavada la solución A semezclóconlasoluciónBsellevóaebulliciónysedistribuyóelmedio

en

platosdePetri.

Reactivosutilizadosenlapreparacióndemediosdecultivo

• PreparacióndelasmuestrasSetomaron130mLdelasmuestrasdeaguacon120mLdelmedio9Klíquidoyseprocedieronahomogenizarenunagitadorpor30minutos.

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• FiltradoLasmuestrashomogenizadassefiltraronconpapelWhatmanN°42yaunSegundofiltradoconfiltrosdemembrane,luegodelocualselavaronlasmembranascon5mLdeaguaácidayestaaguadellavadosesembróen75mLdemedio9Klíquidoenfiolasde100mLyfueroncolocadasenincubacióna37°Cdurante7días.

• Aislamientodebacteriasenmediosólido

Luegodelos7díasdelaincubacióndeloscultivosenlostubos,sesembraronconunestriadosencilloenplacasdemedio9Ksólido,paralocualseutilizólacámaradeflujolaminar.

• IncubaciónLosplatosdePetrifueronincubadosa37°CporsietedíasenatmósferadeCO2

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• Almomentonosehanobtenidoresultadospositivos,solamentesehaobservadocambio en la coloración delmedio de cultivo. Probablemente lasmuestras noseanlasadecuadasdebidoaqueThiobacillusesungénerodebacteriasquesontermófilasyquesoportantemperaturasdehasta75°C.Lasmuestrasqueindicanen algunos artículos provienende agua y rocas deminasque aquí nopodemosencontrar.

• Otroinconvenienteesquelostiemposdeincubacióndeunpasoaotrosonmuylargos(7días).

RESULTADOS.Lamuestradelmatraz(fiolaaforada)tambiénsesembróenplatosdePetriconteniendomedioYDC(medioparaaislamientodebacterias)eincubandoa28°C,luegodetresdíasseobservólapresenciadecoloniasdecoloramarillo.

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ColoniasamarillasenYDCParadeterminarsilabacteriaaisladaesgramnegativasehizolapruebadesolubilidadconKOHal3%,paralocualsetomóunacoloniaconunaasaysecolocóenunaplacaportaobjetosdondepreviamentesehabíacolocadounagotadeKOH,semezclóconelasayseprocedióalevantarlaobservándoselaformacióndeunhilo;deacuerdoaestosepuedededucirqueesunabacteriaGramnegativa.

PruebadesolubilidadconKOH

Tambiénsetomópartedeunacoloniaysedepositóenunaplacaportaobjetosconaceitedeinmersiónparaserobservadaconaumentode100X.Lasestructurasobservadasenelmicroscopiofuerondeformabacilar.Porelmomentoseconcluyequelabacteriacumplecon3características:

• PuedevivirenmediosdepHácido(1.5)• PositivaparagramnegativaconKOH• Sumorfologíacorrespondeabacilos

SesugierehacerpruebascomplementariasparaconfirmarsisetratadeThiobacillussp.

Bacteriaobservadaconaumento100X(Presenciadebacilos)

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Almomentosehacolocadopartedelacoloniabacterianaenalfileresentomológicostantoalambientecomoencámarahúmedaa37°Cparaversiseproducelaoxidación.

Alfileresconlabacteria Cámarahúmedaconalfileresmásbacteria