extracción de ADN - sankris.es · extracción de ADN.ppt Author: Ana Created Date: 11/27/2013...

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CÓMO  EXTRAER  ADN  DE  CUALQUIER  COSA  VIVIENTE  

iADN!  ¿Quieres  decir  que  puedo  verlo?  ¿Cómo?  

Primero  necesitas  encontrar  algo  que  contenga  ADN.  Ya  que  el  ADN  es  el  plano  de  instrucciones  para  la  vida,  cualquier  cosa  viviente  con@ene  ADN.  

Para  este  experimento  preferimos  usar  tomates.  

 1.  Pon  en  una  licuadora:  1.1.  Tu  fuente  de  ADN  (más  o  menos  100  ml  o  ½    taza  de  tomates  )  1.2.  Un  pellizco  grande  de  sal  de  mesa  (menos  de  un  ml  o  1/8  de  cucharadita)    1.3.  Agua  fría.  El  doble  de  la  can@dad  de  tu  fuente  de  ADN  (más  o  menos  200  ml  o  1  de  taza).  

2.  Licua  todo  a  alta  velocidad  por  15  segundos.  

El  licuado  separa  las  células  de  los  unas  de  otras,  por  lo  que  ahora  @enes  una  muy  diluida  sopa  de  células  de  tomates.    

3.  Vierte  tu  sopa  de  células  de  tomate  a  través  de  un  colador  dentro  de  otro  contenedor  (como  una  taza  medidora  por  ejemplo).  

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4.  ¿Cuánta  sopa  de  tomates  @enes?  Añade  como  1/6  de  esa  can@dad  de  detergente  líquido  (más  o  menos  30  ml  o  dos  cucharadas  soperas)  y  mézclalo.  Deja  reposar  la  mezcla  entre  5  y  10  minutos.  

5.  Vierte  la  mezcla  en  tubos  de  ensayo  de  vidrio,  cada  uno  como  1/3  lleno.    Agítalo  suavemente.  iSé  cuidadoso!  Si  lo  agitas  demasiado  fuerte  romperás  en  ADN  haciéndolo  más  diRcil  de  ver.  

6.  Añade  un  chorrito  de  zumo  de  piña.  

7.  Ladea  tu  tubo  de  ensayo  y  lentamente  vierte  el  alcohol  isopropílico  sobre  la  pared  del  tubo  de  manera  que  forme  una  capa  sobre  la  mezcla  de  tomates.  Sigue  ver@endo  hasta  que  tengas  en  el  tubo  aproximadamente  la  misma  canTdad  de  alcohol  que  de  mezcla  de  tomates.  

El  ADN  se  elevará  desde  la  mezcla  de  tomates  hasta  la  capa  de  alcohol.  Puedes  usar  un  palito  de  madera  u  otro  @po  de  gancho  para  arrastrar  el  ADN  que  está  en  el  alcohol.    iFelicitaciones!  iAcabas  de  completar  una  extracción  de  ADN!  

El  alcohol  es  menos  denso  que  el  agua,  por  lo  que  flota  en  la  parte  superior.  Debido  a  que  se  formaron  dos  capas  separadas,  toda  la  grasa  y  proteína  que  rompimos  en  los  dos  primeros  pasos  van  a  la  fase  acuosa  y  el  ADN  a  la  fase  alcohólica.  

¿Qué  es  esa  cosa  pegajosa?  El  ADN  es  una  larga  y  pegajosa  molécula  a  la  que  le  gusta  formar  grumos.  

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Ahora  que  has  extraído  exitosamente  ADN  de  una  fuente,  estás  listo  para  experimentar  un  poco  más  allá.  Intenta  trabajar  con  estas  o  con  algunas  de  tus  propias  ideas:  

       Experimenta  con  otras  fuentes  de  ADN.  ¿Qué  fuentes  producen  más  ADN?,  ¿Cómo  puedes  compararlas  entre  si?          Experimenta  con  dis@ntos  @pos  de  jabones  y  detergentes.  ¿El  jabón  en  polvo  funciona  tan  bien  como  el  detergente  líquido?  ¿y  que  hay  del  shampoo  y  el  jabón  líquido  para  el  cuerpo?          Trata  de  saltarte  alguno  de  los  pasos  o  simplemente  cámbialos.  Te  hemos  dicho  que  necesitas  realizar  cada  paso,  pero  ¿es  cierto?  Averígualo  por  @  mismo.  Intenta  cambiar  la  can@dad  de  alguno  de  los  ingredientes  u@lizados.          ¿Solamente  las  cosas  vivas  con@enen  ADN?  Intenta  extraer  ADN  de  cosas  que  pienses  que  no  deberían  de  tener  ADN.  

Se  introduce  en  la  solución  la  varilla  de  vidrio  y  se  espera  a  que  las  fibras  blanquecinas  se  adhieran  a  ésta,  se  depositan  en  un  portaobjetos  y  se  les  agrega  una  gota  de  cristal  violeta  sobre  las  fibras,  finalmente  se  le  coloca  un  cubreobjetos,  dejándose  reposar  por  cinco  minutos.  Por  ul@mo  se  pasa  a  observar  al  microscopio  biológico,  donde  deberá  de  realizar  el  dibujo  de  lo  observado  en  el  obje@vo  de  40  X.