Exposicón Grupo 2 Generación de Moléculas de ADN Recombinante/ SEGUNDO PARCIAL

7/25/2019 Exposicn Grupo 2 Generacin de Molculas de ADN Recombinante/ SEGUNDO PARCIAL

1/21

Facultad Ciencias De La SaludEscuela de Laboratorio Clnico

UNIVERSIDAD TECNICA DE MAN

EX!SICI!N BI!L!"IA M!LECULAR TEMA: GENERACION DE UNA MOLECULA DE ADN RECOMBINANTE

Integrantes: STEFANY PICO NAPA VANESSA MEZA ANDRADE MARIA GARCIA VILLAFUERTE GISEL BRAVO POLANCO ALDRITH MOLINA CHAVEZ ROCIO IZA CEDEO ARLA ALCIVAR CEDEO


2/21

PALABRAS CLAVES

DIDEO!INUCLE"TIDOS RECOMBINANTE CLONACI"N ESCALONADA

BACTERIOFAGO PLASMIDOS


3/21

GLOSARIODideoxinucletidos.- Nucletido modificado que en posicin 3' ha perdido

simboliza como ddNTP. Se incorpora en sntesis de !N" # $N" pero se in

sntesis posterior.

Escalonada: Seme%ante en la superficie a una serie de escalones.

Bacteriofago.- &s un irus que infecta e(clusiamente bacterias. Tal # como s

otros irus que infectan a c)lulas

l#s$idos%&Son molculas de ADN extracromosmico ci

replican y transmiten independientes del ADN cromosmicoRecominante.- *)lula u organismo que resulta de la recombinacin de genes

"!N+ independientemente de si se ha producido de forma natural o por medios


4/21

"eneraci'n deuna $ol(cula de

ADNReco$binante%La estrategia bsica en la

clonacin molecular esinsertar un fragmento de

ADN de inters en unamolcula que es capas de

replicarse de formaindependiente en una clula

husped


5/21


6/21

Los fragmentos de AD! utili"ados

#ara crear mol$culas de AD!

recominante son generados #or

digestin con endonucleasas de

restriccin.

Estas en"imas cortan sus secuenci

reconocimiento de forma escalo

generando extremos com#lement

o co&esi'os de una sola &era

#uede asociarse entre si

a#areamiento de ases


7/21


8/21

EL AD! #roducido se liga al

'ector de AD! de modo antes

descrito% los genes eucariticos

est)n interrum#idos #or

secuencias no codificantes ointrones

*ue se eliminan de AR!m

em#lamado o s#licing% la #clonar AD!c adem)s del A

#ara el entendimiento de l

funcin de los genes


9/21

Vectores )ara adn reco$binaD!"!ND#!ND$ D!L %A&A'$ D!L ADN ()!

#NS!*%A + D!L "*$",S#%$ D!L !-"!*#&!N!S "$S#.L! )%#L#/A* D#S%#N%$S 0!1%$*!1L$NA1#,N "A*A 2!N!*A* &$L31)LAS*!1$&.#NADAS

$%*$S %#"$S D! 0!1%$*!S D!SA**$LLAD"A*A !-"*!SA* ADN 1L$NAD$ ! #N%*$D)&$L31)LAS *!1$&.#NADAS !N 13L)LAS!)1A*#$%AS S! D#S1)%!N !N S!11#$N!S"$S%!*#$*!S

L$S "L4SD$S 2!N!*AL&!N%! S! )SAN 1L$NA* #NS!*%$S D! ADN 2!N,$ $ A


10/21

L!S VELASM"ENERC!NSI

A , -BINCLU/!RI"ERELICUN "RFRA"M

ADNC LI"ADL1SMADNREVIADI"ER

MEDIA


11/21

,as bacterias que contengan elpl-smido de inter)s pueden crecerseen grandes cantidades # e(traerse su"!N. ,as pequeas mol)culascirculares del "!N plasmdico a

menudo e(isten cientos de copia porc)lula+ pueden separarse del "!Ncromosmico bacteriano.

,os ectores del bacterifago

tambi)n son empleados por elaislamiento tanto del "!N gencomo clones de "!Nc a partir dc)lulas eucariotas # puedenacomodar fragmentos ma#ores a"!N inserto que los pl-smidos.


12/21

&n los ectores de clonacin+ lassecuencias del genoma delbacterifago que son dispensablespara la replicacin iral han sido

eliminadas # sustituidas por sitios/nicos de restriccin para la insercidel "!N clonado.

&l "!N de estos fagos puedeentonces aislarse+ dando lugagrandes mol)culasrecombinantes que contiene usolo fragmento de "!N clona


13/21


14/21

En #eter$%na#&s est'#%&s #ean()%s%s #e ADN gen*$%+& es

,re+%s& +)&nar -rag$ent&s #e ADN$a.&res #e )& /'e 'n -ag& !,'e#e ,&rtar0

En #eter$%na#&s est'#%&s #ean()%s%s #e ADN gen*$%+& es,re+%s& +)&nar -rag$ent&s #e ADN$a.&res #e )& /'e 'n -ag& !,'e#e ,&rtar0

1$SD$S

.A1%!*#$6A2$S "

1*$&$S$&AA*%#6#1#AL "#

1 A*%#6#1#AL.A1%!*#AN$

1 A*%#6#1#AL D!L!0AD)*A


15/21

'


16/21

cuenciaci'n de ADNLA 1L$NA1#$N &$L!1)LA* D!)N 6*A2&!N%$ #ND#0#D)AL D!

ADN "!*%! !L A#SLA!N%$D! LAS 2*AND!S 1AN%#DAD!SD! &A%!*#AL 2!N!%#1$7

#N1L)+!ND$ LAD!%!*NA1#$N D! S)

S!1)!N1#A D! N)1L!$%#D$S

LAS S!11$D#6#1A

2!N!S*!LA16*!1)!N1$N LAS

"*!0#A!S%)

!L &!%$D$ .AS#1$!&"L!AD$ "A*A S!1)!N1#A*!L ADN89:;; D! LA

D!S$-#**#.$SA

LA S#N%!S#S D! ADN S!#N#1#A !N )N ")N%$

)N#1$ D!L ADN1L$NAD$

A "A*%#* D! )N1!.AD$* S#N%3%#1$


17/21

LA *!1*!A11#$N D!S#N%!S#S D! ADN

#N1L)+! ?D#D!$-#N)1L!,%#D$S

8 A7172 y %

Exposicón Grupo 2 Generación de Moléculas de ADN Recombinante/ SEGUNDO PARCIAL

Documents

Transcript of Exposicón Grupo 2 Generación de Moléculas de ADN Recombinante/ SEGUNDO PARCIAL