Determinación de vitamina c
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DETERMINACIÓN DE VITAMINA C
POR ESPECTROFOTOMETRIAUNHEVAL-2014
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a) Preparación del ácido oxálico
b) Preparación del estándar de trabajo
Solución estándar (madre)
Solución estándares de trabajo
2H
Acido oxálico 8 gr.
Agua destilada
100 ml
Sol. de ácido oxálico 0,4%
0,1 gr. de ácido ascórbico
1 ml
1
1 mgr100 ml
2 ml
2
2 mgr100 ml
3 ml
3
3 mgr100 ml
4 ml
4
4 mgr100 ml
5 ml
5
5 mgr100 ml
2 L
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c) Preparación de solución coloreada 2,6 DFIF
d) Preparación de la curva estándar
NOTA: Repetir el procedimiento con cada estándar de trabajo y construir concentraciónde ácido ascórbico (mgr/100 ml) para todas L1-L2
1H
Agua destilada
1 mgr. 2,6 DFIF
AlmacenarºT = +8ºC
Enfriar
Agua destilada
Hervir
I10 ml de agua destilada
II
1ml de ác.oxálico
III
1 ml ET(1) 9ml H2O
IV
1 ml ET(1)
Ajustar absorbancia
II
9 ml2,6 DFIF Ajustar
absorbancia II
9 ml 2,6 DFIF
Leer absorbancia
Leer absorbancia
12
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L1-L2
[ ] de ác.ascórbico (mgr/100ml)
. .
..
520nm
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e) Preparación de la muestra
350 ml
Hervir
50 gr. muestra
Sol. Ác.oxálico 0,4%
Reposo de 3 min.
Filtrar
Centrifugar
Muestra
EVALUACION
III1 ml filtrado muestra
+ 9 ml agua
Ajustar a cero
III
Registrar la absorbancia
1 ml de filtrado muestra + 9 ml
de 2,6 DFIF
Calcular (L1-L2)Concentración de la muestra
curva estándar