Determinación de vitamina c

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DETERMINACIÓN DE VITAMINA C POR ESPECTROFOTOMETRIA UNHEVAL-2014

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Page 1: Determinación de vitamina c

DETERMINACIÓN DE VITAMINA C

POR ESPECTROFOTOMETRIAUNHEVAL-2014

Page 2: Determinación de vitamina c

a) Preparación del ácido oxálico

b) Preparación del estándar de trabajo

Solución estándar (madre)

Solución estándares de trabajo

2H

Acido oxálico 8 gr.

Agua destilada

100 ml

Sol. de ácido oxálico 0,4%

0,1 gr. de ácido ascórbico

1 ml

1

1 mgr100 ml

2 ml

2

2 mgr100 ml

3 ml

3

3 mgr100 ml

4 ml

4

4 mgr100 ml

5 ml

5

5 mgr100 ml

2 L

Page 3: Determinación de vitamina c

c) Preparación de solución coloreada 2,6 DFIF

d) Preparación de la curva estándar

NOTA: Repetir el procedimiento con cada estándar de trabajo y construir concentraciónde ácido ascórbico (mgr/100 ml) para todas L1-L2

1H

Agua destilada

1 mgr. 2,6 DFIF

AlmacenarºT = +8ºC

Enfriar

Agua destilada

Hervir

I10 ml de agua destilada

II

1ml de ác.oxálico

III

1 ml ET(1) 9ml H2O

IV

1 ml ET(1)

Ajustar absorbancia

II

9 ml2,6 DFIF Ajustar

absorbancia II

9 ml 2,6 DFIF

Leer absorbancia

Leer absorbancia

12

Page 4: Determinación de vitamina c

L1-L2

[ ] de ác.ascórbico (mgr/100ml)

. .

..

520nm

Page 5: Determinación de vitamina c

e) Preparación de la muestra

350 ml

Hervir

50 gr. muestra

Sol. Ác.oxálico 0,4%

Reposo de 3 min.

Filtrar

Centrifugar

Muestra

EVALUACION

III1 ml filtrado muestra

+ 9 ml agua

Ajustar a cero

III

Registrar la absorbancia

1 ml de filtrado muestra + 9 ml

de 2,6 DFIF

Calcular (L1-L2)Concentración de la muestra

curva estándar