PRACTICA N°04DETERMINACION GRAVIMETRICO DE

LA CASEÍNA

I. INTRODUCCIONEn los métodos gravimétricos se determina el peso de un constituyente o sustancia precipitada. Los cálculos se verifican con auxilio de los pesos atómicos o moleculares y se fundamentan en la constancia de la composición de sustancias puras y en las relaciones ponderales (estequiométricas) de las reacciones químicas.

El aislamiento y purificación de las proteínas presenta grandes dificultades, debido al fenómeno de la desnaturalización, alteración que puede sufrir bajo la acción de numerosos agentes, como el calor, los ácidos y álcalis.. el etanol. la cetona, el ácido tricloroacético, la luz ultravioleta etc. , e incluso la agitación. El resultado es que la proteína es menos soluble, hay disminución y pérdida de la actividad fisiológica que pudiera tener, citando los cambios más destacados.

Teniendo en cuenta esta circunstancia, se recurre a métodos en que esta desnaturalización no se produzca. Se utiliza la mínima solubilidad de la proteína en su punto isoeléctrico, ajustando el pH al valor conveniente para determinar su separación de una mezcla; la adición del sulfato de amonio en condiciones apropadas favorece la precipitación, así como el empleo de alcohol etílico.

II. OBJETIVOS Aislar la caseína presente en la leche por precipitación. Purificar la caseína presente en la leche, por diferencia de solubilidad. Calcular el porcentaje (P/V) de la caseína presente en la leche de vaca por el

método gravimétrico.

III. MATERIALES Y MÉTODO

III.1 MATERIALES Le<che de vaca descremada Vaso de precipitación Pipetas Vidrio de Reloj tubos de ensayo

Espátula Embudos Placas Petri Bagueta Balanza PH-metro Densímetro Estufa Ácido acético 6.0 N Etanol Éter etílico Papel filtro

III.2 PROCEDIMIENTO En un vaso de precipitación de 250 mL, colocar 40 mL de leche descremada. para

obtener este tipo de leche se debe dejar leche entera en refrigeración durante la noche anterior; luego tomar la parte inferior de la leche con la ayuda de una pipeta.

A los 40 mL de leche descremada agregar 40 mL de agua y 1 mL de ácido acético 6.0 N ( para lograr un pH aproximado de 4.6)

Filtrar, para separar la caseína coagulada y lavarla dos veces con agua. El filtrado puede servir para obtener lactosa.

Lavar la caseína dos veces con 5 mL de etanol y otras dos con 5 mL de éter etílico (muy inflamable).

Colocar, mediante una espátula, la caseína en un vidrio de reloj o una placa Petri, dejarla secar en estufa a 40 °C durante 10 minutos aproximadamente y luego pesar

Determinar la cantidad de caseína por diferencia de pesos Determinar el error de recuperación ( Error = % caseína experimental – %caseína

real)

IV. RESULTADOSMUESTRA Volumen

de muestra

peso de papel+ caseína

peso de papel

peso de caseína

% de caseína(P/V)

% de caseína real (P/V)

% Error de recuperación

leche descremada

40 mL 3.221 1.091 2.13 5.325 2.80 2.525

leche entera

40mL 2.480 1.052 1.428 3.51 2.80 0.71

V. DISCUSION Los resultados que se obtuvieron se dio que tuvo un alto % de error de recuperación esto

pudo ocurrir debido a que no se hizo un adecuado lavado de la caseína Y

VI. CONCLUSION Se logró aislar la caseína gracias a que se agregó… mL de ácido acético. esto se tuvo que

realizar para poder obtener la caseína y trabajar con ella, saber cuánto de caseína se obtiene de la cantidad de leche determinada.

la purificación de la caseína se realiza con el lavado de esta en el caso de esta práctica se hizo dos con agua destilada y una con alcohol, pero al parecer estas no fueron suficientes en el caso de la leche descremada para poder tener la caseína pura ya que se obtiene un porcentaje de recuperación muy alto.