CROMATOGRAFA

Profesora: Delia whu

CROMATOGRAFIALa cromatografa es un grupo de mtodos que permiten separar, aislar, e identificar mezclas moleculares que dependen de las afinidades diferenciales de los solutos entre dos fases inmiscibles.Estan constituidos por dos fases:Fase estacionariaFase mvil

CROMATOGRAFACLASIFICACIN:1.- De acuerdo a la fase estacionaria- Cromatografa en columna: Fase estacionaria compuesto por un slido finamente dividido sostenido en un estrecho tubo de vidrio metal. Fase mvil lquido gas que pasa por percolacin baja presin.- Cromatografa plana: Fase estacionaria puede ser un papel poroso un slido finamente dividido que se aplica sobre una placa de vidrio. Fase mvil es un lquido mezcla que se desplaza a travs del slido por capilaridad.

CROMATOGRAFA2. De acuerdo a la naturaleza de las fases estacionaria y mvil.Si la fase estacionaria es un slido se le denomina cromatografa de adsorcin. Si la fase estacionaria es un lquido se le denomina cromatografa de particin.

CROMATOGRAFACromatografa de adsorcin:La retencin de los componentes y su separacin dependen de la capacidad de los tomos que estn en la superficie para extraer los solutos de la fase mvil y adsorberlos temporalmente a travs de las fuerzas de London y de Van Der Walls, interacciones dipolo y dipolo inducido con grupos polares de la superficie activa.

CROMATOGRAFIAEntre los adsorbentes ms usados son el gel de slice y la almina, poseen superficies que tienen grupos OH y tomos de oxgeno e interaccionan fuertemente con los solutos polares.

CROMATOGRAFA Adsorbentes usados en cromatografa Sacarosa El ms dbil Almidn Inulina Talco Carbonato de calcio Fosfato de calcio Magnesia Gel de slice Silicato de magnesio Almina Carbn El ms fuerte

CROMATOGRAFA

Los solventes usados en la separacin deben ser elegidos de acuerdo a las propiedades de los solutos y a las propiedades de la fase estacionaria.

CROMATOGRAFA SOLVENTES VALOR ELUTROPICO CONSTANTE PARAMETRO DE E DIELECTRICA SOLUBILIDAD____________________________________________________________________________Heptano 0.00 1.92 7.4Hexano 0.01 1.88 7.3Isoctano 0.01 1.94 7.0Ciclohexano 0.04 2.02 8.2Tetracloruro carbono 0.18 2.24 8.6Tolueno 0.29 2.38 8.9Benceno 0.32 2.27 9.2Eter etlico 0.38 4.33 7.4Cloroformo 0.40 4.81 9.1Cloruro de metino 0.42 8.93 9.6Tetrahidrofurano 0.45 7.58 9.1Acetona 0.56 20.70 9.4Dioxano 0.56 2.25 9.8Acetato de etilo 0.58 6.02 8.6Acetonitrilo 0.65 37.50 11.8Piridina 0.71 12.30 10.41-propanolol 0.82 20.33 10.2Etanol 0.88 24.30 11.2Metanol 0.95 32.70 12.9Ac.actico largo 6.15 12.4Agua largo 78.54 21.0______________________________________________________________________________ CARACTERSTICA DE LOS SOLVENTES USADOS EN CROMATOGRAFA

CROMATOGRAFACromatografa de particin: Se produce la retencin y separacin debido a la solubilidad relativa de los componentes en los dos lquidos determinados por su coeficientes de particin que es una constante y depende de la temperatura. En sta cromatografa la fase estacionaria ha sido reemplazada por fases enlazadas unidas como el octadecilsililo (ODS) para formar una fase estable y no polar.

CROMATOGRAFALa ventaja de stas fases enlazadas pueden ser hechas de modo reproducible y la superficie no vara durante la cromatografa. Algunas fases enlazadas contienen grupos aminos, cianos hidroxilos que son de naturaleza polar.La cromatografa de particin puede ser:-Fase normal-Fase inversa reversa

CROMATOGRAFAFase normal:La fase estacionaria es polar(polietilenglicol)y la fase mvil es no polar (hexano). Los compuestos polares se retardan y los no polares eluyen ms rapidamente.

CROMATOGRAFIA FASE NORMAL

CROMATOGRAFA-Fase reversa: La fase estacionaria es no polar (ODS) y la fase mvil es polar (agua, metanol, acetonitrilo).Los compuestos no polares se retienen ms fuertemente que los polares, stos eluyen primero.Las fases enlazadas son las ms usadas en la cromatografa de fase invertida.

CROMATOGRAFIA EN FASE RESERVA

CROMATOGRAFA3.-Cromatografa de intercambio inico:Es un mtodo muy selectivo, los compuestos inicos se suelen separar y analizar por ste mtodo, en la que utilizan resinas cambiadoras de iones como fase estacionaria.Son tiles para cationes inorgnicos, aminocidos.

CROMATOGRAFAFase estacionaria: -Intercambiadores aninicos-Intercambiadores catinicosLos rellenos usados estn constituidos por polmeros de alto peso molecular que contienen grupos inicos covalentemente enlazados.

CROMATOGRAFALos intercambiadores catinicos contienen grupos de c. Sulfnicos (cambiadores de cationes fuertes) ac. Carboxlicos (cambiadores catinicos dbiles).Los intercambiadores aninicos contienen grupos amonio cuaternario unidos al tomo de silicio a travs de grupos intermedios.

CROMATOGRAFAFase mvil:Tres variables afectan en la retencin de un soluto inico en una columna de intercambio inico que son:-La fuerza inica-El pH-Presencia de modificadores orgnicos

CROMATOGRAFAMecanismo de interaccin en CII: Ejm.Purificacin del aguaRes SO3H + Na Res SO3Na + HRes N(CH3)3OH + Cl Res-N(CH3)3Cl + OHLa cromatografa de II pueden desarrollarse mediante el desplazamiento por mtodos de elucin.

CROMATOGRAFIA DE INTERCAMBIO IONICO

CROMATOGRAFA4.-Cromatografa por exclusin de tamao:Los componentes de la muestra se separande acuerdo al tamao de sus molculas.La fase estacionaria usada son polmeros que han sido entrecruzados para dar una red abierta con numerosos poros de tamao uniforme.

CROMATOGRAFATipos:-Geles blandos: Son de hidrato de carbono entrecruzados como el dextrano (sephadex), agarosa poliacrilamida.-Geles rgidos: Son poliestirenos entrecruzados, dextrano alquilado.Usos: Separacin de polmeros orgnicos.

CROMATOGRAFA DE FILTRACION EN GEL

CROMATOGRAFA5.-Cromatografa plana-Cromatografa en capa fina: La fase estacionaria es gel de slice (ccf) gel de slice modificada (ODS), alumina, poliamida, celulosa.Fase mvil: Depende de la naturaleza de los solutos y de la fase estacionaria.

CROMATOGRAFA-Cromatografa en papel:Fase estacionaria es un papel de filtro de celulosa altamente hidroxilado.Fase mvil se usan mezclas de alcoholes (butilico,isopropilico) y agua con amoniaco ac. actico para controlar la carga de los solutos y reducir la aparicin de colas.

CROMATOGRAFADefiniciones:Tiempo de retencin : trTiempo muerto : tmTiempo de retencin ajustado: tr = tr tmAnchura de la base de las seales = WbNmero de platos tericos = N N = 16 (tr / Wb)2

CROMATOGRAFAAltura equivalente a un plato terico: AEPT AEPT = L / NCoeficiente de distribucin reparto: K K = cant.muestra x ml fase / cant.muestra x ml de fase mvil.Relacin de capacidad: k k = tr / tm

CROMATOGRAFA Resolucin = R R = 2(tr2 tr1) / Wa + Wb

Selectividad = alfa alfa = tr2 / tr1

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