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Capitulo 12: Serología

Serología- Estudio de los Fluidos del cuerpo. Sangre, Orina,

Sudor, Bilis, Saliva y Semen.

Sangre- Compuesta de 55% Plasma-Parte liquida de la sangre sin

coagular y Suero- 45% Sólidos suspendidos {Eritrocitos,

Leucocitos, Plaquetas etc.}

Antígeno (Ag)- Proteína que estimula al cuerpo a producir

anticuerpos, pueden estar localizados en las células rojas.

Anticuerpo-(Ab)- proteína que destruye o inactiva un Ag

especifico, se encuentra en el suero.

Tipos de Sangre:

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Tipo A- Células con Antígeno A y Anticuerpo B. Tipo B- Células con Antígeno B y Anticuerpo A Tipo AB- Células con Antígeno AB y ningún Anticuerpo Tipo O- No posee ni Antígenos ni Anticuerpos. Factor Rh (+)-Personas con Antígeno D. Factor Rh (-)-Personas sin Antígeno D.

Inmunoensayos:

Complejo de droga y proteína, se inyecta a un animal produciendo

Ab policlonales.

Ab policlonal- Se producen respondiendo a la variedad de sitios

diferentes en el Ag. Produce Ab que varían en composición por lo

tanto varían en especificidad.

Ab monoclonal- Son Ab idénticos que interactúan con un solo lugar

del Ag.

Inyectar el complejo del Ag. Remover el bazo y las células que producen Ac. Combinar las células del bazo con células cancerosas produciendo células hibridomas.

Las células hibridomas se cultivan y se separa aquella que produce el Ab de interés.

Cultivar las células hibridomas seleccionada para la producción de Ab monoclonal.

Ej. EMIT- Enzyme multiplied Immunoassay Technique.

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Características de manchas de Sangre:

Bencidina-(Cancerogénica) Fenolftaleína- Peroxidasa de la Hemoglobina (Hg) hace que se torne color rosa intenso. Materiales vegetales dan positivo.

Ej. Papas, Horseradish. Poco probable que estos materiales se

encuentren en la mancha de la escena.

Tirilla de Hemastix- Se humedece con agua y se pone en contacto con la sangre. Cambia a verde cuando es positiva.

Luminol- Se rosea sobre el área y se oscurece el lugar usando una lámpara UV, Se determina la luminiscencia. Áreas grandes

pueden presentar patrones de sangre. Detecta sangre diluida

300,000 veces y no interfiere con la prueba de DNA.

Microcristales- Mezclar sangre con reactivo de Takayama o reactivo de Teichmann y produce cristales. Poco sensitiva y

susceptible de interferencias.

Precipitin- Determina si es sangre humana. Se produce al inyectar sangre humana a un animal este produce Ab. Se conoce

como antisuero humano, Una mezcla de sangre humana con suero

antihumano produce un anillo o banda opaca en la interface.

Se puede utilizar una gelatina de difusión donde emigran el

Ag y el Ab produciendo una región opaca donde se unen.

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Marcadores Genéticos:

Enzimas polimórficas- proteínas que catalizan reacciones

especificas. Estas existen en diferentes formas.

Izo-enzimas- Componente proteico de la enzima.

La Izo-enzima PGM- Fosfoglucomutasa. Tiene tres variantes en la

población

Variantes Tipos de sangre Factor Rh

PGM-1 58% Tipo O 43% Rh (D) 85%

PGM-2-1 36% Tipo A 42% Rh (C) 10.5%

PGM-2 6% Tipo B 12% Rh (E) 4.5%

Tipo AB 3%

Los marcadores genéticos ocurren independientemente uno del otro,

Se utiliza el producto de su distribución en la población para

determinar la probabilidad que estén en una mancha de sangre.

Ej. Una mancha con PGM-2, Tipo B y Rh (C) la probabilidad de estar

en un solo individuo es de 0.06 x 0.12= 0.105= 0.000756= 0.0756%

0.0756% de la población o sea = 1 en 1323.

Patrones Sanguíneos:

La localización, distribución y apariencia de las manchas de

sangre y las salpicaduras me ayudan a interpretar y reconstruir

los eventos que pudieron ocurrir y produjeron sangrado. Puntos en

la determinación de dirección, distancia, de la caída de la gota

de sangre y el ángulo de impacto.

Textura de la superficie- Mientras más dura y menos porosa es la superficie menor es la salpicadura.

Forma de la mancha- Determina la dirección que viaja la sangre que impacta un objeto. La punta final de la mancha

siempre señala la dirección en que viaja.

Angulo de impacto en una superficie plana se determina midiendo el ángulo de distorsión circular de la mancha.

El origen de la salpicadura se determina en dos dimensiones dibujando líneas rectas a través del eje de varias manchas.

La intersección o punto de convergencia de las líneas

representa un punto de donde la sangre emana. [Ver ejemplos

próxima pagina].

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Principios de Herencia:

Cromosomas- Estructura en el núcleo de la célula donde están

localizados los genes. Estos están compuestos de DNA.

Gen- segmento de DNA localizado en el cromosoma que es la unidad

básica de herencia.

Locus- localización física de un gen en el cromosoma.

Alelo- Una de las posibles alternativas de la forma de un gen

localizados en el mismo locus de un par particular de cromosomas.

Homocigótico- Tiene dos genes alélicos idénticos.

Heterocigótico- Tiene dos genes alélicos diferentes.

La célula humana tiene 23 pares de cromosomas o sea 23 del padre y

23 de la madre.

Cromosoma X- sexo femenino Cromosoma Y- sexo masculino

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Las células reproductivas (ovulo y espermatozoide) tienen 223 =8.4

millones de diferentes posibles combinaciones. 223 x 2

23= 2

46=7x10

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posibilidades. Ej. Tipos de sangre A, B, O =Cromosoma 9

A (Pa)+ A (Ma) AA homocigoto

A (Pa)+ B (Ma) AB heterocigoto

A (Pa)+ O (Ma) AO heterocigoto

Genotipo- un par de genes alelos. Ej. AO, AA

Fenotipo-Manifestación física de un genotipo.

Gen dominante- Manifiesta sus características sobre otro. Ej. A y

B.

Gen recesivo- Oculta sus características. Ej. Un individuo

heterocigótico AO va a tener un tipo de sangre A y uno AB

manifiesta tanto A como B.

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Caracterización de Semen:

Eyaculación entre 2.5 a 6.0 ml de fluido seminal. 100 millones de

espermatozoides por mililitro.

Identificación con textiles- Apariencia dura, tostada y costrosa.

Prueba de fosfatasa acida- (Enzima secretada por la próstata). (1)

α naftilfosfato de sodio y fast Blue B Dye cambia a violeta (2) 4-metil umbelifenil fosfato (MUP) con UV produce fluorescencia.

Falsos positivos: vegetales, frutas, hongos cremas contraceptivas,

secreciones vaginales. La reacción es mucho más lenta. Ej.

Reacción en menos de 30 segundos indica fuertemente que es semen.

Espermatozoide- presente en la mancha, es semen. Se extraen con

agua de la mancha y se le añade tinte y se mira la laminilla en el

microscopio.

Razones para no encontrar un espermatozoide:

Se unen bien fuerte a la tela.

Son extremadamente vidriosos cuando se secan.

Se desintegran si se lava la tela.

Se desintegran si se estregan con otro objeto.

Hombres con bajo contaje (oligoespermia)

Hombres con vasectomía, no contaje (aspermia)

Ag específicos de la próstata- PSA o P30. Enzimas que son

especifica de la próstata y asociada al plasma seminal. Prueba

fácil y certera en laboratorio. Anti P30 + semen + electroforesis

aglutinación (+). Ab monoclonal es 100 veces más sensitivo.

Colección de evidencia: (violación)

Ropa-bolsas diferentes de papel

Recoger evidencia suelta, Parar la victima sobre un papel sin zapatos. Ej. Desvestirse sobre el papel.

Tela con manchas evitar que se mezclen con otras

Pelos peinados y control

Hisopos vaginales, anales y orales

Muestras para DNA

Raspado de uñas

Muestra de orina para detectar drogas de club

Evidencia del sospechoso:

Ropa

Pelo púbico peinado control

Hisopo del pene antes de 24 horas de los hechos.

Prueba para DNA

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Ropa interior buscar por la parte de adentro. DNA de la victima que deja el pene al estar en contacto con la tela.

Establecer tiempo de la violación:

Espermatozoides vivos- 4 a 6 horas en la vagina

Espermatozoides sin movimiento- de 3 a 6 días en vagina después del contacto sexual.

Espermatozoides completos- de 16 a 72 horas después del contacto sexual.

Fosfatasa acida- antes de 48 horas del contacto sexual.

PSA- antes de 24 horas del contacto sexual

Muestra para DNA de la pareja si tuvo relaciones entre las 72 horas de la agresión

Espermatozoide sin movimiento- 3 a 6 horas en boca, 9 a 20 horas en ano y 17 días en cérvix.