A 51 PRUEBAS eficacia antimicrobiana Conservantes antimicrobianos son sustancias que se aaden a las formas de dosificacin estril para protegerlos de crecimiento microbiolgico o de microorganismos que se introducen inadvertidamente durante o despus de la fabricacin de process.In el caso de artculos estriles envasados en recipientes de dosis mltiples, se aaden conservantes antimicrobianos para inhibir el crecimiento de microorganismos que pueden ser introducidos en repetidas ocasiones la retirada de las dosis individuales. Conservantes antimicrobianos no deben utilizarse como sustituto de buenas prcticas de fabricacin o solamente para reducir la poblacin microbiana viable de un producto no estril o el control de la carga biolgica preesterilizacin de formulaciones multidosis durante conservantes manufacturing.Antimicrobial en formas de dosificacin compendio cumplir con los requisitos para sustancias que se aaden en los ingredientes y los procesos en los avisos generales. Todos los agentes antimicrobianos tiles son la proteccin mxima substances.For txicos de los pacientes, la concentracin del conservante demostrado ser eficaz en el producto envasado final debe ser inferior a un nivel que puede ser txico para los seres humanos. La concentracin de un conservante aadido antimicrobiano puede mantenerse a un mnimo si los ingredientes activos de la formulacin posee una intrnseca eficacia activity.Antimicrobial antimicrobianos, ya sea inherente a dicho producto o si produce debido a la adicin de un conservante antimicrobiano, debe ser demostrado para todas las inyecciones envasados en recipientes de dosis mltiples o para otros productos que contienen la eficacia preservatives.Antimicrobial antimicrobianos debe ser demostrado para dosis mltiples formas de dosificacin tpica y oral y de otras formas de dosificacin como oftlmica, tica, nasal, de riego, y lquidos de dilisis (ver formas farmacuticas 1151 ). Este captulo proporciona las pruebas para demostrar la eficacia de los antibiticos conservantes antimicrobianos protection.Added debe ser declarado en la etiqueta del anlisis y los criterios de eficacia aplicables a un producto en el envase original, sin abrir, en el que fue distribuido por el fabricante. CATEGORAS DE PRODUCTOS A los efectos de las pruebas, artculos compendio se han dividido en cuatro categoras (ver Tabla 1 ). Los criterios de eficacia antimicrobiana de estos productos estn en funcin de la va de administracin. Categoras tabla Product 1.Compendial Categora Descripcin del producto 1 Inyecciones, incluyendo otros productos parenterales emulsiones, productos tica, nasal estril productos, y productos oftlmicos hecho con bases acuosas o vehculos. Productos utilizados por va tpica hizo con una solucin acuosa

2

Categora Descripcin del producto bases o vehculos, productos no estriles nasal, y emulsiones, incluyendo las que se aplican a las membranas mucosas. 3 4 Otros productos de uso oral que los anticidos, hecho con bases acuosas o vehculos. Los anticidos hecho con una base acuosa.

LOS ORGANISMOS DE ENSAYO Use las culturas de los siguientes microorganismos 1: Candida albicans (ATCC No.10231), Aspergillus niger (ATCC No.16404), Escherichia coli (ATCC No.8739),Pseudomonas aeruginosa (ATCC No.9027), y Staphylococcus aureus (ATCC No 0,6538). Los microorganismos viables en el ensayo no debe ser ms de cinco pasajes retirado de los efectos ATCCculture.For original de la prueba, un pasaje se define como la transferencia de organismos de una cultura establecida para las transferencias medium.All frescos counted.In el caso de los organismos mantenidos por las tcnicas de lote de semillas, cada ciclo de congelacin, descongelacin, y el resurgimiento de un nuevo medio se toma como una transfer.Aseed stock tcnica debe ser utilizado para almacenamiento a largo plazo de cultures.Cultures recibido de la ATCCshould ser resucitado de acuerdo con directions.If crecido en el caldo, las clulas se sedimentaron por centrifugation.Resuspend en 1/20o el volumen de caldo de mantenimiento fresco, y aadir un volumen igual de 20% (v / v en agua) de glicerol estril. Las clulas cultivadas en agar puede ser raspado de la superficie en el 10% de glicerol broth.Dispense pequeas alcuotas de la suspensin en vials.Store estriles los viales en nitrgeno lquido o en un congelador mecnico a no ms de - 50 . Cuando una nueva semilla de valores vial es necesario, puede ser removido y usado para inocular una serie de culturas cultures.These de trabajo de trabajo se pueden utilizar de forma peridica (cada da en el caso de bacterias y levaduras) para iniciar el cultivo de inculo. MEDIA Todos los medios utilizados en el ensayo debe ser probado para promotion.Use el crecimiento de los microorganismos se ha indicado anteriormente en los organismos de prueba. PREPARACIN DEL INCULO Preparatorio para la prueba, inocular la superficie de un volumen adecuado de medio de agar slido a partir de un cultivo madre recientemente renovado de cada una de las condiciones de cultivo especificado microorganisms.The para el cultivo de inculo se describen en la Tabla 2 en la que los medios de comunicacin adecuados son la soja-casena digerir o Sabouraud dextrosa medio de agar (ver lmites microbianos Prueba A 61 N ). Para cosechar los cultivos bacterianos y C. albicans, usar el TS solucin salina estril, el lavado de la superficie de crecimiento, la recogida en un recipiente

adecuado, y la adicin de TSto suficiente solucin salina estril obtener un recuento microbiano de alrededor de 1 10 8 unidades formadoras de colonias (ufc) por cosecha mL.To las clulas de A.niger, el uso de solucin salina estril TScontaining 0,05% de polisorbato 80, y aadir suficiente solucin salina estril TSto obtener un recuento de alrededor de 1 10 8 UFC por ml. Por otra parte, los organismos de cultura de valores pueden ser cultivadas en un medio lquido adecuado (es decir, la soja-casena caldo de resumen o de caldo glucosado de Sabouraud) y las clulas recogidas por centrifugacin, se lava y se resuspendi en solucin salina estril TSto obtener un recuento microbiano de alrededor de 1 10 8UFC por ml. [NOTA: La estimacin de la concentracin de inculo puede ser realizado por las mediciones turbidimtrico para el desafo microorganisms.Refrigerate la suspensin si no se utiliza dentro de dos horas.] Determinar el nmero de ufc por mlin cada suspensin, con las condiciones de los medios de comunicacin y los tiempos de incubacin microbiana a la valorizacin enumerados en la Tabla 2 para confirmar la ufc inicial por valor de mLestimate.This sirve para calibrar el tamao del inculo utilizado en la bacteria y la levadura test.The Las suspensiones deben ser utilizados dentro de 24 horas de la cosecha, pero la preparacin de hongos se pueden almacenar en el refrigerador hasta por 7 das. PROCEDIMIENTO La prueba se puede realizar ya sea en cinco envases originales si el volumen suficiente de producto est disponible en cada recipiente y el envase del producto se puede introducir asptica (es decir, de agujas y jeringas a travs de un tapn de elastmero de goma), o en cinco recipientes estriles, cubiertas bacteriolgica de tamao adecuado en el que un volumen suficiente de producto ha sido transferred.Inoculate cada contenedor con una de las inculo preparado y estandarizado, y el volumen del inculo mix.The suspensin utilizada es de entre 0,5% y 1,0% del volumen de la producto.El concentracin de microorganismos de prueba que se aade al producto (categoras 1,2,y 3) son tales que la concentracin final de la preparacin de la prueba despus de la inoculacin es de 1 10 5 y 1 x 10 6 ufc por Cada ml de la categora producto.Para 4productos (anticidos), la concentracin final de la preparacin de la prueba despus de la inoculacin es de 1 x 10 3 y 1 10 4 ufc por Cada ml del producto. La concentracin inicial de microorganismos viables en cada preparacin de la prueba se calcula sobre la base de la concentracin de microorganismos en cada uno de los inculo estandarizado segn lo determinado por el mtodo del plato de conteo. Incubar los recipientes inoculados a 22,5 2,5 . Muestra cada contenedor en los intervalos apropiados especificados en el Cuadro 3. Registro de los cambios observados en la apariencia en estos intervals.Determine por el procedimiento de la placa-contar el nmero de UFC presentes en cada preparacin para el examen de los intervalos de aplicacin (ver procedimiento en los ensayos lmite microbiano A 61 N ). Incorporar un inactivador (neutralizador) del antimicrobiano especfico en el recuento en placa

o en la dilucin adecuada preparado para condiciones plating.These se determinan en el estudio de validacin de la muestra basada en las condiciones de los medios de comunicacin y los tiempos de incubacin microbiana recuperacin En el Cuadro 2. Uso de las concentraciones calculadas de ufc por mLpresent en el inicio de la prueba, calcular el cambio en el registro de 10 valores de la concentracin de ufc por mLfor cada microorganismo en los intervalos de prueba aplicables, y expresar los cambios en materia de registro reducciones. Condiciones mesa 2.Culture para la preparacin del inculo Organismo Medio adecuado Incubacin Inculo Temperatura Tiempo de incubacin 32,5 2,5 18to 24 horas Recuperacin microbiana Tiempo de incubacin 3 para 5 das

Escherichia coli (ATCC No.8739)

Pseudomonas aeruginosa (ATCC No.9027)

Staphylococcus aureus (ATCC No.6538)

Candida albicans (ATCC No.10231)

Aspergillus niger (ATCC No.16404)

Soja-casena Digesto caldo; Soja-casena Digesto Agar Soja-casena Digesto caldo; Soja-casena Digesto Agar Soja-casena Digesto caldo; Soja-casena Digesto Agar Agar Sabouraud dextrosa; Caldo glucosado de Sabouraud Agar Sabouraud dextrosa; Caldo glucosado de Sabouraud

32,5 2,5

18to 24 horas

3 para 5 das

32,5 2,5

18to 24 horas

3 para 5 das

22,5 2,5

44to 52 horas

3 para 5 das

22,5 2,5

6to 10 das

3 para 7 das

CRITERIOS PARA LA EFICACIA DE LOS ANTIMICROBIANOS Los requisitos para la eficacia de los antibiticos si se cumplen los criterios especificados en el Cuadro 3 se cumplen (ver Cifras significativas y tolerancias enAvisos Generales). No hay un aumento se define como no ms de 10 0.5log unidad mayor que el valor anterior medida.

Tabla 3.Criteria de microorganismos ensayados Para 1Products Categora Bacterias: No menos de 1.0log la reduccin de la cuenta inicial calculada en siete das, no menos de 3.0log reduccin del recuento inicial de 14 das, y sin aumento de la 14days'count en 28 das. Levaduras y No hay un aumento de la cuenta inicial calculada en 7,14, y 28 mohos: das. Para 2Products Categora Bacterias: No menos de 2.0log reduccin del recuento inicial de 14 das, y sin aumento de la 14days'count en 28 das. Levaduras y No hay un aumento de la cuenta inicial calculada en 28 das mohos: 14y. Para 3Products Categora Bacterias: No menos de 1.0log reduccin del recuento inicial de 14 das, y sin aumento de la 14days'count en 28 das. Levaduras y No hay un aumento de la cuenta inicial calculada en 28 das mohos: 14y. Para 4Products Categora Bacterias, No hay un aumento de la cuenta inicial calculada en 28 das levaduras, 14y. y moldes:1

Disponible a partir de American Type Culture Collection, 10801University Boulevard, Manassas, VA20110-2209 (http://www.atcc.org).