Bioquímica de Carbohidratos

1. Que significado tiene el siguiente resultado en TSI:

A. La bacteria fermenta glucosa

B. La bacteria fermenta los 3 carbohidratos

C. Produce H2S a partir de la peptona

D. A y C

E. A, B y C

2. El resultado para la prueba de Rojo de metilo mostrado en la figura significa que:

A. Fermenta la glucosa

B. Produce ácidos y gas

C. Produce metilcarbinol

D. No fermenta la glucosa

E. N.A.

3. El resultado para la prueba de Voges Proskauer mostrado en la figura significa que:

A. Fermenta la glucosa

B. Produce ácidos y gas

C. Produce metilcarbinol

D. No fermenta la glucosa

E. N.A.

4. El resultado para la prueba de Citrato mostrado en la figura significa que:

A. No utiliza el citrato

B. Utiliza el citrato como fuente de energía

C. Fermenta glucosa

D. Utiliza la peptona del medio

E. N.A.

5. El resultado para la prueba fermentación de hidratos de carbono de la figura significa que:

A. No utiliza el carbohidrato

B. Lo utiliza oxidándolo

C. Fermenta el carbohidrato

D. Es medio de cultivo sin inocular

E. N.A.

6. En una prueba de OF un resultado de fermentador sería:

A. Tubo abierto amarillo, tubo cerrado verde

B. Ambos tubos de color amarillo

C. Ambos tubos de color verde

D. Tubo abierto verde, tubo cerrado azul

E. N.A.

7. En una prueba en LIA un resultado de K/A significa que la bacteria:

A. Descarboxila la lisina

B. Fermenta la glucosa

C. No utiliza la lactosa

D. Es oxidadora

E. N.A.

8. El resultado mostrado en la figura para una prueba de ureasa significa que hay:

A. Fermentación de glucosa

B. Producción de ureasa

C. Utilización de la peptona del medio

D. No hay degradación de la urea

E. N.A.

9. El resultado mostrado en la figura para una prueba de DNAsa significa que:

A. La bacteria es un Staphylococcus

B. La bacteria degrada el DNA

C. La bacteria no degrada el DNA

D. Tanto A como B

E. N.A.

10. En una prueba de desaminación del triptófano, lo mostrado en la figura es:

A. Un resultado negativo

B. Se ha producido Indol

C. Se ha producido cadaverina

D. Se dio cambio de pH

E. N.A.

Pruebas Bioquímicas

•Metabolismo respiratorio•Metabolismo de carbohidratos•Metabolismo de Proteínas•Metabolismo de lípidos•Metabolismo de Bases nitrogenadas

Metabolismo Respiratorio

Oxidasa

Catalasa

OF

Medio de Hugh y Leiffson

CEPA

37°c X 24 h

Oxidación

(Aerobio)

Fermentación

(A.F.)

Fermentador anaerobio

Ni fermentador ni oxidador

Metabolismo de Hidratos de Carbono

• Fermentación de azúcares• Caldo Base de fermentación• TSi o KIA

• Utilización de fuentes de Carbono• Citrato• Malonato

• Determinación de rutas catabólicas• VP-RM

• Catabolismo de Macromoléculas• Hidrólisis del almidón

Fermentación de hidratos de Carbono

TSI

• TSI es un medio de pruebas múltiples• Medio sólido preparado en tubos que se dejan

inclinar luego de la esterilización: pico de flauta

Área Aerobia

Área Anaerobia

Compuesto por:• Carbohidratos:

• Glucosa 0.1%• Lactosa 1%• Sucrosa 1%

• Indicador de pH• Rojo fenol

• Indicadores de H2S

• Citrato de amonio férrico• Tiosulfato de sodio

bacteria (acidez) + tiosulfato de sodio = H2S gas

H2S + iones férricos = Sulfuro ferroso (ppdo. negro)

Resultados:

Reaction (slant / butt) Recorded Colors Description

Alkaline / Acid K / A Red / Yellow Only glucose utilized.**

Acid / Acid A / A Yellow / YellowGlucose and lactose and/or sucrose

utilized.***

Acid/Acid A/A Yellow/BlackGlucose and lactose and/or sucrose utilized

along with H2S production.

Alkaline/Acid K/A Red/BlackOnly glucose is utilized along with H2S

production.

Alkaline/No Change K/NC Red/Orange

No carobohydrates utilized; peptones utilized.*

Alkaline/No Change K/NC

Black or Dark Blue-Green/Orange

No carobohydrates utilized; peptones utilized with pigment production

Voges - Praskauer (VP) Producción de acetil-metilcarbinol o acetoína

Complejo rojo con α-naftol y creatina.

Rojo de metilo (RM) Producción de ácidos a partir de

glucosa.

Utilización del Citrato

Hidrólisis del Almidón

Metabolismo de Proteínas

• Descarboxilación de AAS• LIA• LOA

• Desaminación de AAS• Desaminación de la fenilalanina• Producción de Indol

• Proteólisis• Licuefacción de la gelatina• Hidrólisis de la caseína

37°C 8 h 24h

Descarboxilación

(-) (+)

Desaminación

K/K

K/K+

K/A

K/A+

Medio LIA:

Glucosa 0.1%

L-Lisina

Peptona

R/A

R/A+

L O A

Caldo Descarboxilación:

•Purpura de Bromocresol

•Glucosa

•AAS:

Lisina

Ornitina

Arginina

Desaminación de la Fenilalanina

Medio de cultivo:

Caldo o Agar Fenilalanina

Reactivo de lectura:

FeCl2 10%

Ácido Fenilpirúvico

Producción de Indol

Licuefacción de la gelatina

Gelatina Nutritiva

37°C x 24 h

22°C x 3-5 díasRefrigeración x 10 min

Gelatinasa (-)

Gelatinasa (+)

Hidrólisis de la Caseína

(-) (+)

Halo de proteólisis

Metabolismo de Lípidos, Ácidos nucleicos y otras fuentes nitrogenadas

• Lípidos• Lipólisis del agar yema de huevo

• Ácidos Nucleicos• DNAsas

• Otras fuentes nitrogenadas• Ureasa

• Reducción del NO3

Lipólisis del Agar Yema de Huevo

(-) (+)

Halo de lipólisis

Producción de DNAsas

(-) (+)

Halo de degradación

Bañar con HCl 0,1N

UREASA

Caldo o Agar urea• Urea

• NH3

• CO2

• Rojo Fenol• Amarillo

Ácido• Naranja

Neutro• Rojo grosella

Básico

Reducción del NO3

Caldo Nitrato

37°C x 24h

Reactivos de lectura:

Α-naftilamina

Ácido sulfanílico

(-*)

(+)

3 2NitratoreductasaNO NO

Polvo de Zn

(-)

(+)

3 2 2NO NO N