Aclimatación de orquídeas phalaenopsis sp mediante la aplicación de sustratos orgánicos y hongo...

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1 ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- Aclimatación de orquídeas Phalaenopsis sp mediante la aplicación de sustratos orgánicos y hongo micorrícico. Chilpe Jeimy (1, 2,3), Delva Johnny (1, 2,3), Gutierrez Christian (1, 2,3), Pomaquiza Luis (1, 2,3), Lucero Gabriela (1, 2,3). (1) Universidad de cuenca (2)Carrera de ingeniería agronómica (3) Estudiantes de la Catedra de Biotecnología. Cuenca-Ecuador. ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------- Abstract: Orchids are a species of great economic and aesthetic importance, the production of these large scale has become a hit with tissue culture, the development of all these leads to determine necessary conditions for its growth after obtaining a seedling as: disinfection, transfer, acclimatization among some; the study determined the substrate suitable for the acclimatization of Phalaenopsis sp and observed characteristics presented with and without a mycorrhizal fungus inoculation, evaluating these peculiarities is defined a DCA with five treatments: Trat 1 = turba, Trat 2 = Bocashi, Trat 3 = bark pine, Bocashi, Earth, crushed coal, Trat 4 = humus, Earth, gravel, Bocashi, Trat 5 = Bocashi, ground, leaf litter. Resulting to peat substrates, Bokashi and bocashi+tierra+hojarasca, allow a survival between 85 and 90% of the plants of Phalaenopsis sp, also identifying that there is a symbiosis between the mycorrhizal fungi and the plant must be a direct contact at the time of inoculation. Resumen: Las orquídeas son una especie de gran importancia económica y estética, la producción de estas a gran escala se ha convertido un éxito con el cultivo de tejidos, el desarrollo de todo estos lleva a determinar condiciones necesarias para su crecimiento después de obtener una plántula como: desinfección, traslado, aclimatación entre algunas; en el estudio realizado se determinó el sustrato adecuado para la aclimatación de Phalaenopsis sp y se observó las características que presenta con y sin la inoculación de un hongo micorrícico, evaluando estas particularidades se define un DCA con cinco tratamientos: Trat 1=turba, Trat 2=bocashi, Trat 3=corteza de pino, bocashi, tierra, carbón picado, Trat 4=humus, tierra, grava, bocashi, Trat 5=bocashi, tierra, hojarasca. Resultando que los sustratos de turba, bocashi y bocashi+tierra+hojarasca, permiten un supervivencia entre el 85 y 90% de las plantas de Phalaenopsis sp, además identificando que para que existan un simbiosis entre el hongo micorrícico y la planta debe haber un contacto directo en el momento de la inoculación.

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Aclimatación de orquídeas Phalaenopsis sp mediante la

aplicación de sustratos orgánicos y hongo micorrícico.

Chilpe Jeimy (1, 2,3), Delva Johnny (1, 2,3), Gutierrez Christian (1, 2,3), Pomaquiza

Luis (1, 2,3), Lucero Gabriela (1, 2,3).

(1) Universidad de cuenca

(2)Carrera de ingeniería agronómica

(3) Estudiantes de la Catedra de Biotecnología.

Cuenca-Ecuador.

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Abstract:

Orchids are a species of great economic and aesthetic importance, the production of these large scale

has become a hit with tissue culture, the development of all these leads to determine necessary

conditions for its growth after obtaining a seedling as: disinfection, transfer, acclimatization among

some; the study determined the substrate suitable for the acclimatization of Phalaenopsis sp and

observed characteristics presented with and without a mycorrhizal fungus inoculation, evaluating

these peculiarities is defined a DCA with five treatments: Trat 1 = turba, Trat 2 = Bocashi, Trat 3 =

bark pine, Bocashi, Earth, crushed coal, Trat 4 = humus, Earth, gravel, Bocashi, Trat 5 = Bocashi,

ground, leaf litter. Resulting to peat substrates, Bokashi and bocashi+tierra+hojarasca, allow a

survival between 85 and 90% of the plants of Phalaenopsis sp, also identifying that there is a

symbiosis between the mycorrhizal fungi and the plant must be a direct contact at the time of

inoculation.

Resumen:

Las orquídeas son una especie de gran importancia económica y estética, la producción de estas a

gran escala se ha convertido un éxito con el cultivo de tejidos, el desarrollo de todo estos lleva a

determinar condiciones necesarias para su crecimiento después de obtener una plántula como:

desinfección, traslado, aclimatación entre algunas; en el estudio realizado se determinó el sustrato

adecuado para la aclimatación de Phalaenopsis sp y se observó las características que presenta con

y sin la inoculación de un hongo micorrícico, evaluando estas particularidades se define un DCA con

cinco tratamientos: Trat 1=turba, Trat 2=bocashi, Trat 3=corteza de pino, bocashi, tierra, carbón

picado, Trat 4=humus, tierra, grava, bocashi, Trat 5=bocashi, tierra, hojarasca. Resultando que los

sustratos de turba, bocashi y bocashi+tierra+hojarasca, permiten un supervivencia entre el 85 y 90%

de las plantas de Phalaenopsis sp, además identificando que para que existan un simbiosis entre el

hongo micorrícico y la planta debe haber un contacto directo en el momento de la inoculación.

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INTRODUCCIÓN

Las orquídeas han fascinado al mundo durante siglos y han sido consideradas como flores místicas;

aunque algunos pueblos primitivos también la han utilizado con fines medicinales. En la Antigua

Grecia eran vistas como un símbolo de virilidad. Debido a su belleza y al elevado coste que

alcanzan las orquídeas actualmente, son motivo de cultivo por particulares e industriales como flor

cortada y como planta ornamental, por ello tiene una importancia económica a nivel mundial (Giap,

García, & Gonzalo, 2015)

Así (Alvaréz, 1998) comentó que las amplias posibilidades que para la producción de orquídeas

ofrecen nuestras condiciones naturales, hacen de aquéllas un excelente renglón de producción que

sin lugar a dudas, merece una especial atención dentro del marco de la floricultura nacional,

debiendo ser considerada de modo especial, como línea exportable de seguro mercado. (Valerín,

2005) nos da conocer que el éxito de la técnica de cultivo de tejidos vegetales como un instrumento

en la propagación masiva de plantas, depende de la capacidad para manejar en el vivero, plantas

a gran escala durante el periodo de adaptación; de esta manera se logra un alto grado de sobre

vivencia a bajo costo. Señala además que la aclimatación: es el cambio gradual de las condiciones

ambientales; en el caso concreto, es la transferencia de las plántulas de un ambiente aséptico

cerrado a un vivero o campo, con menor humedad relativa y mayor intensidad de luz.

(Castro, 2015) Confirmó que en países subtropicales como en caso del ecuador las orquídeas

tienen un crecimiento litofítico, epifítico y terrestre. Además menciono que al conocerse que el

porcentaje de germinación de sus semillas es muy bajo desconociéndose de esta manera el tipo

adecuado de sustrato. Sobre todo la problemática del laboratorio de biotecnología de la ingeniería

agronómica al no contar datos de la última fase de la micropropagación que es la aclimatación, así

como también para la conservación y el aprovechamiento sostenible de especies exóticas que

tienen en el país, razón por la cual el objetivo de esta investigación fue aclimatación la especie de

orquídea Phalaenopsis sp. cultivadas invitro, mediante el traslado a sustratos orgánicos y

aplicación de hongo micorrícico.

MATERIALES Y MÉTODOS

La investigación se realizó en los predios de la Facultad de Ciencias Agropecuarias 2°55'08.8"S

79°01'26.6"W a una altura de 2550 m.s.n.m. con una temperatura media anual de 12,6°C y con una

precipitación anual de 507 mm, ubicado en el campus Yanuncay de la Universidad de Cuenca. En

esta investigación se aplicó un diseño completamente al azar (DCA) y medidas de tendencia

central, donde se estableció 5 tratamientos: Trat 1=turba, Trat 2=bocashi, Trat 3=corteza de pino,

bocashi, tierra, carbón picado, Trat 4=humus, tierra, grava, bocashi, Trat 5=bocashi, tierra,

hojarasca; con 2 factores de análisis el primero con micorrizas y el segundo sin micorrizas cada

factor con 4 repeticiones de 5 UE respectivamente. Se aclimatizó los frascos invitro del laboratorio

por 15 días abriendo periódicamente la tapa, luego se trasladó a los respectivos sustratos

preparados en una misma proporción de los ingredientes, se desinfectó las plántulas en una

solución al 1% de Benomil y se procedió al respectivo trasplante. Colocando los tratamientos bajo

invernadero a humedad relativa de 70% aproximadamente, donde se incorporó a las determinadas

repeticiones el hongo micorrícico mediante la inoculación directa con una sección del medio de

cultivo en la parte superior del sustrato. Se contabilizó en número de plantas vivas después del

trasplante con el fin de determinar el sustrato más recomendable en la aclimatización de orquídeas

y si el hongo interfiere en el proceso de adaptación.

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RESULTADOS.

Con el fin de determinar el mejor sustrato para el trasplante de orquídeas invitro para su

aclimatización en invernadero se analizaron los datos encontrados en el ensayo donde tenemos:

Sustratos con hongo micorrícico.

En la figura 1 podemos identificar que el análisis entre los Tratamiento evaluados son significativos

al 0,05 y 0,01%, con un CV (coeficiente de variación) de 17%.

ADEVA SUSTRATOS CON HONGO

F tab

F de V gl SC CM FC 0,05 0,01

SC total 19,00 21,80

SC trat 4,00 17,30 4,33 14,42 3,86 6,99

SC error 15,00 4,50 0,30

Figura 1

Por lo cual se procede a realizar la prueba de Tukey con la finalidad de determinar la diferencia

significativa entre los tratamientos lo que se observa en la figura 2, donde se muestra que el

Tratamiento 1 presenta una mayor cantidad de plantas vivas luego del trasplante en relación a los

demás tratamientos.

Figura 2

Sustratos sin hongo micorrícico.

De similar forma se procede al análisis para determinar que sustrato sin micorrizas es más

significativo para la aclimatización de orquídeas Phalaenopsis sp para el trasplante, en la figura 3

se identifica que existe una alta significancia entre los resultados mostrando que son diferentes con

un CV de 13%.

1,00

2,00

2,75

1,251,00

1,75

1,25

0,75

1,50

0,75

0,00

0,50

1,00

1,50

2,00

2,50

3,00

Valor de Tukey= =0,05

DIFERENCIA SIGNIFICATIVA TRATAMIENTOS SUSTRATO CON HONGO

4

ADEVA SUSTRATOS SIN HONGO

F tab

F de V gl SC CM FC 0,05 0,01

SC total 19,00 17,75

SC trat 4,00 11,50 2,88 6,90 3,06 4,89

SC error 15,00 6,25 0,42

Figura 3

Con el fin de determinar que tratamiento es más significativo se procede a realizar la prueba de

Tukey indicando en la figura 4 que el tratamiento que presenta una mayor cantidad de plantas vivas

después del trasplante se muestra en el tratamiento 1 .

Figura 4

Siendo así los resultados que se presenta en los análisis de los ADEVAS de los experimentos se

procede a comparar mediante medidas de tendencia central la relación de plantas vivas por cada

tratamiento evaluado (sustratos) en la figura 5 y 6 se identifica que en las dos evaluaciones el Trat

1 (turba) presenta una mayor cantidad de plantas vivas 4 de cada 5 plantas sobreviven luego del

trasplante, sin mostrar una diferencia significativa con el hongo inoculado.

Figura 5

0,25

2,00

1,25

0,25

1,75

1,00

1,75

1,000,75

0,00

0,50

1,00

1,50

2,00

2,50

Valor de Tukey= 0,07

DIFERENCIA SIGNIFICATIVA TRATAMIENTOS SUSTRATO SIN HONGO

4,50

3,50

2,50

1,75

3,25

4,50 4,25

2,50

3,25

4,25

0,00

1,00

2,00

3,00

4,00

5,00

TRAT 1 TRAT2 TRAT 3 TRAT 4 TRAT 5

PLANTA VIVAS SUSTRATOS EVALUADOS (5 PLANTAS)

SUSTRATO CON HONGO

SUSTRATO SIN HONGO

5

Figura 6

DISCUSIONES.

Una alta humedad, un medio rápido para el enraizamiento y material libre de organismos malignos

presentó el sustrato-turba al mostrar un 90% de plantas vivas de Phalaenopsis sp luego del

trasplante a comparación de los sustratos con diversas combinación presentaron una menor

cantidad de plantas vivas, a lo que (Nguyen , Garcia, & Hernandez, 2010) cerciora que en su

investigación al evaluar turba como sustrato obtuvo un entre un 80 y 100% de supervivencia a los

20 días del trasplante de Spathoglottis plicata.

En tanto al sustrato combinado con sustrato de pino presento una menor supervivencia, pero

estudios realizado por (Rodríguez Morero, 2012) menciona que la corteza de pino con otros

sustratos comparados es el mejor para la aclimatación por condiciones y costos en Epidendrum

elipticum graham.

Por otra parte, (Francisco Nava, y otros, 2011) observaron que las plantas pequeñas mueren a

diferencia de las grandes, probablemente por no presentar un pseudobulbo desarrollado y por lo

tanto, no tener la posibilidad de acumular agua en cantidades suficientes como para lograr su

sobrevivencia, siendo esta una de las razones porque los sustratos exitosos en otros estudios no

hay sido relevante en esta investigación, a lo que (Vido , Flachland, Rey , & Mroginnski, 2001)

afirma que el porcentaje de supervivencia varia del 0 al 100%.

Las orquídeas de hábito terrestre se adaptan relativamente bien a un buen número de sustratos,

siempre y cuando tengan buen drenaje (Jiménez y Caballero, 1990).

En tanto al inoculo de la micorriza no mostró un efecto significativo ya que el inoculo no se realizó

directamente a la orquídea, sino al suelo con la una parte de medio de cultivo que se mantenía éste

y no hubo un contacto directo entre la relación hongo-planta (micorriza), ya que (Mondino, 2012)

para que exista un efecto en el desarrollo del hongo este debe entrar en contacto directo con el

huésped o tener las condiciones necesarias para sobrevivir.

90,00

70,00

50,00

35,00

65,00

90,0085,00

50,00

65,00

85,00

0,00

10,00

20,00

30,00

40,00

50,00

60,00

70,00

80,00

90,00

100,00

TRAT 1 TRAT2 TRAT 3 TRAT 4 TRAT 5

PLANTA VIVAS SUSTRATOS EVALUADOS %

SUSTRATO CON HONGO

SUSTRATO SIN HONGO

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CONCLUSIONES

Los tratamientos evaluados en los diferentes sustratos y combinaciones (humus, turba, grava,

bocashi, hojarasca, tierra, en diversos estudios y especies muestran importancia, como la

simbiosis con un hongo beneficio; en el estudio realizado no se identificó la clara relación entre el

hongo inoculado y la especie Phalaenopsis sp. Se determinó que los sustratos en el cual se adapta

permitiéndose aclimatizar la especie Phalaenopsis sp se da en turba con un 90% de supervivencia,

bocashi y la mezcla de bocashi, tierra y hojarasca con un 85% de supervivencia.

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BIBLIOGRAFÍA

Alvaréz, P. M. (1998). www.cablenet.com. Obtenido de www.cablenet.com:

http://www.buscagro.com/www.buscagro.com/biblioteca/Giap-Nguyen-Van/vitroplantas-de-orquideas.pdf

Castro, J. P. (09 de Enero de 2015). biblioteca.emi.edu. Obtenido de biblioteca.emi.edu:

http://biblioteca.emi.edu.bo/administracion/presentpdf/present%5B3768%5D.pdf

Francisco Nava, J. J., Jiménez-Aparicio, A. R., De Jesús-Sánchez, A., Arenas-Ocampo, M. L., Ventura-Zapata, E., &

Evangelista-Lozano, S. (2011). ESTUDIO DE LA MORFOLOGÍA Y ACLIMATACIÓN DE PLANTAS DE LAELIA

EYERMANIANA RCHB. f. GENERADAS IN VITRO. POLIBOTANICA, P. 114-115.

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www.buscagro.com: http://www.buscagro.com/www.buscagro.com/biblioteca/Giap-Nguyen-

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sustratos en la Biofábrica del Rio.

RODRÍGUEZ MORERO, P. F. (2012). ACLIMATACIÓN DE VITRO PLÁNTULAS DE ORQUÍDEA (Epidendrum elipticum

graham) EN INVERNADERO. MACHALA: UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA.

Valerín, A. (2005). Características de las plantulas in vitro y su alimatación. Mexico: Ti Orquideas.

Vido , M., Flachland, E., Rey , H., & Mroginnski, L. (2001). Comportamiento ex vitro de Plantas de Brassavola perrinii

(Orchidaceae) y de Tres Híbridos Intergenéricos1. Obtenido de UNNE.

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ANEXOS

DISEÑO DE LOS TRATAMIENTO CON Y SIN MICORRIZA.

Tratamiento 1 Tratamiento 2

Tratamiento 3 Tratamiento 4

Tratamiento 5

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SUSTRATO EVALUADO SUPERVIVENCIA PLANTAS

SUSTRATO 1 SUSTRATO 2

SUSTRATO 3 SUSTRATO 4

SUSTRATO 5