ACLIMATACIÓN Y SIEMBRA DE POSTLARVA

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L a aclimatación es un proceso de ajuste fisiológico gradual de las postlarvas, desde condiciones del laboratorio a las del estanque en las que serán sembradas. Las va- riables más importantes de aclimatación son salinidad y temperatura, no obstante, algunas veces deben considerarse otros valores de calidad de agua. El evitar el estrés y los rápidos cambios ambientales son claves para una aclimatación exitosa y mejoramiento en la sobrevivencia. Se hace énfasis en procedimientos apropiados de aclimatación dado que el costo de la post- larva representa un porcentaje significativo del costo de producción. El estadio de postlar- va es el estadio de vida mas sensitivo del camarón y requiere de manipulación cuidadosa y manejo para evitar altas mortalidades e inadecuado crecimiento. Entender bien los pro- cedimientos de aclimatación y siembra puede ayudar a mejorar significativamente los ingresos económicos de la operación, y potenciar la conservación de otros insumos y recursos. La postlarva silvestre a menudo es usada para sembrar estanques, y tiene la ventaja de estar disponible localmente en algunos lugares. También representa una fuente de ingresos para algunos residentes locales. Sin embargo, el uso de esta postlarva conlleva muchos proble- mas potenciales, entre estos: la composición multi-especies de las capturas, amplias fluc- tuaciones en abundancia y disminución de las poblaciones debido a la destrucción de habi- tats. La industria del camarón se dirige hacia la casi total dependencia en la postlarva producida en laboratorio pues tiende a un abastecimiento más regular, evita cualquier controversia sobre la pesquería de las poblaciones silvestres, y garantiza la obtención de la especie de interés. Un beneficio extra es el reproducir camarón selectivamente. Las enfermedades son una de las principales amenazas a la industria, por eso para una siembra altamente venta- josa se procura organismos Resistentes a Enfermedades Específicas (SPR), Libres de Patógenos Específicos (SPF), o de Alta Salud Mejorada Genéticamente (HHGI) (ver Capítulo 7). Se recomienda el cultivo de especies nativas de camarón o que ya han sido cultivadas en el área, para evitar la introducción de especies exóticas. En el caso de Latinoamérica, las especies nativas principales cultivadas son Litopenaeus vannamei y Litopenaeus stylirostris, 109 Aclimatación y siembra de postlarva ACLIMATACIÓN Y SIEMBRA DE POSTLARVA Granvil D. Treece Texas A&M University Sea Grant College Program 2700 Earl Rudder Frwy. South College Station, Texas 77845 Fuentes de postlarvas

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La aclimatación es un proceso de ajuste fisiológico gradual de las postlarvas, desdecondiciones del laboratorio a las del estanque en las que serán sembradas. Las va-riables más importantes de aclimatación son salinidad y temperatura, no obstante,

algunas veces deben considerarse otros valores de calidad de agua. El evitar el estrés y losrápidos cambios ambientales son claves para una aclimatación exitosa y mejoramiento enla sobrevivencia.

Se hace énfasis en procedimientos apropiados de aclimatación dado que el costo de la post-larva representa un porcentaje significativo del costo de producción. El estadio de postlar-va es el estadio de vida mas sensitivo del camarón y requiere de manipulación cuidadosa ymanejo para evitar altas mortalidades e inadecuado crecimiento. Entender bien los pro-cedimientos de aclimatación y siembra puede ayudar a mejorar significativamente losingresos económicos de la operación, y potenciar la conservación de otros insumos yrecursos.

La postlarva silvestre a menudo es usada para sembrar estanques, y tiene la ventaja de estardisponible localmente en algunos lugares. También representa una fuente de ingresos paraalgunos residentes locales. Sin embargo, el uso de esta postlarva conlleva muchos proble-mas potenciales, entre estos: la composición multi-especies de las capturas, amplias fluc-tuaciones en abundancia y disminución de las poblaciones debido a la destrucción de habi-tats.

La industria del camarón se dirige hacia la casi total dependencia en la postlarva producidaen laboratorio pues tiende a un abastecimiento más regular, evita cualquier controversiasobre la pesquería de las poblaciones silvestres, y garantiza la obtención de la especie deinterés. Un beneficio extra es el reproducir camarón selectivamente. Las enfermedades sonuna de las principales amenazas a la industria, por eso para una siembra altamente venta-josa se procura organismos Resistentes a Enfermedades Específicas (SPR), Libres dePatógenos Específicos (SPF), o de Alta Salud Mejorada Genéticamente (HHGI) (ver Capítulo7).

Se recomienda el cultivo de especies nativas de camarón o que ya han sido cultivadas en elárea, para evitar la introducción de especies exóticas. En el caso de Latinoamérica, lasespecies nativas principales cultivadas son Litopenaeus vannamei y Litopenaeus stylirostris,

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Aclimatación y siembra de postlarva

ACLIMATACIÓN Y SIEMBRA DE POSTLARVA

Granvil D. TreeceTexas A&M University

Sea Grant College Program2700 Earl Rudder Frwy. SouthCollege Station, Texas 77845

Fuentes de postlarvas

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a pesar que se encuentran otras especies de peneidos de menor importancia en cultivocuando se usa postlarva silvestre.

Cuando se compra postlarva, la regla general es la del "comprador cauteloso". Dos aspec-tos, la salud general y la calidad, son claves para el éxito, y el comprador se debe respon-sabilizar de asegurar que la condición sea satisfactoria. Es generalmente buena idea que elcomprador o su representante inspeccione la postlarva antes del envío, acompañe el envíoy supervise su sobrevivencia después de la siembra. La persona a cargo también deberíamedir y reportar a la estación de aclimatación los parámetros de calidad de agua en el la-boratorio de tal manera que los reservorios de agua sean preparados.

Existen varias formas de evaluar la condición de la postlarva y monitorear su sobrevivenciadespués de la siembra. Estas son detalladas en Villalón (1994).

El estado de salud de la postlarva es importante. Si es vendida como SPR, SPF o HHGI, debeestar certificada por la autoridad apropiada. La evidencia de la certificación debe guardarse.Los compradores también pueden por su lado verificar que la postlarva no presente signosde enfermedad aunque no tengan el estatus de SPF, SPR o HHGI. Detalles relacionados amétodos de diagnóstico son descritos en el capítulo 7. El personal que realiza los diagnós-ticos debe ser experimentado y contar con equipos adecuados para que sus resultados seanútiles.

En una granja grande, la aclimatación debería realizarse en una ubicación central, y no allado del estanque. Las instalaciones deben proveer sombra, aire, agua filtrada y fácil acce-so. La postlarva puede ser aclimatada en una variedad de estructuras siempre que agua yaire sean proveídos y se mantengan condiciones higiénicas. Pistas rectangulares de fibra devidrio han funcionado bien en la granja Nova de Belice para este propósito. Cuando las pis-tas no se usan para aclimatar postlarvas, son usadas para cultivar algas benéficas ydiatomeas las que servirán para inocular reservorios y estanques.

La cantidad y capacidad de tanques para la aclimatación debe basarse en las rutinas desiembra. La densidad recomendada para aclimatación es 500 postlarvas/litro (Villalón 1991).La capacidad máxima es de 100 toneladas, sin embargo es preferible 50 a 75 toneladas. Si lainstalación va a ser usada solo para aclimatación, la densidad de siembra puede ser 500 a1,000 camarones/litro, pero si se necesita un mantenimiento mayor a 24 horas, la densidaddebe caer por debajo de los 500 por litro. Algunas granjas mantienen larvas a 75 postlar-vas/litro, sin embargo, pruebas de investigación y comerciales han mostrado puede sem-brarse a densidades más altas (se discutirán posteriormente). Las densidades de siembrasugeridas dependen del tamaño y edad de la postlarva, y deben ser ajustadas en periodosde mantenimiento largos.

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Instalaciones de aclimatación

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Abra cada bolsa que contenga postlarva, e inmediatamente mida y anote la temperatura yconcentración de oxígeno. Evalúe visualmente cada bolsa. Huela el agua, observe la activi-dad, porcentaje de mortalidad. Si observa mortalidad en las bolsas, anote el porcentajeaproximado tomando nota, si hay, de mortalidades masivas.

Si el oxígeno está bajo el nivel de saturación (<15 mg/l), inyecte inmediatamente oxígenoal agua dentro de las bolsas de transporte hasta que se sature o alcance una lectura mínimade 12 mg\L. La saturación de oxígeno depende directamente de la temperatura y salinidad.

Toda la instalación de aclimatación debe ser limpiada varios días antes del arribo de la post-larva. Esto es para poder tratar los tanques, superficies y tuberías usando una solución dehypoclorito1 por al menos una hora. Estos también deben ser refregados con esta solución.Luego se debe limpiar con abundante agua y dejar secar. Se debe eliminar cuidadosamentetodo residuo de hipoclorito antes que la postlarva sea llevada a la instalación. También esimportante evitar usarlo en cualquier agua que contenga amonio pues puede liberar gastóxico de cloro.

El tanque reservorio debe llenarse con el agua del estanque a ser sembrado. La mayoría deinstalaciones filtra el agua de aclimatación del reservorio a 0.5 mm o 500 micrómetros,algunos hasta a 125 micrómetros. Se debe agregar EDTA2 a cada tanque hasta alcanzar unaconcentración de 2 ppm2.

El agua del estanque debe enfriarse antes de colocar la postlarva. No agregue agua tibia delestanque directamente a los tanques de aclimatación. Coloque cerca de 200 litros de aguadel estanque en un tanque auxiliar y use hielo en bolsas plásticas para enfriarla a 26-27 °C.Esta agua ajustará la temperatura de los tanques de aclimatación a 25 °C.

Mida la temperatura, pH, oxígeno, salinidad y nivel de amonio del agua del estanque yanótelas en la hoja de control de aclimatación (Apéndice 1).

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Aclimatación y siembra de postlarva

Procedimientos de aclimatación de Postlarvas

Apertura de las bolsas de transporte del laboratorio

Preparación de estanques de aclimatación

1 Mezclas secas de cloro son el hipoclorito de sodio o calcio. Para propósitos desinfectantes, se recomienda unaconcentración de 12-25 ppm. Para hacer una concentración como ésta, añada 115-168 g. de mezcla seca de cloro(la cantidad libre de cloro varía) a 500 galones de agua limpia. Use esta solución de inmediato. Si se usa cloro delimpieza o para piscinas, se recomienda una concentración de 2.5 ppm, la cual se obtiene mezclando 1/2 ml porlitro de agua limpia. Las formulaciones líquidas contienen más cloro libre disponible y son más estables en el tiem-po.

2 EDTA = ácido tetra acético diamino etileno. Este compuesto quela rastros de metales. Dos gramos en 1,000 litrosde agua rinde una solución de 2 ppm.

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Mida la temperatura, pH, oxígeno, salinidad y nivel de amonio del agua del tanque de acli-matación y anótelas en la hoja de control de aclimatación (Apéndice 1).

Mida la temperatura promedio y niveles de oxígeno en todas las bolsas plásticas y anótelasen la hoja de control de aclimatación.

El agua de los tanques de aclimatación debería ajustarse a la salinidad promedio en las bol-sas de transporte, así también la temperatura.

Densidades máximas de siembra en los tanques de aclimatación son: (número de postlar-va/pie2 de área del fondo del tanque)

Un ejemplo es el de la Granja Nova (Belice) que encontró que la densidad ideal para acli-matar postlarvas mayores de 12 días es 179,404 postlarvas/m3; esto se basó en sus necesi-dades de siembra. Esta densidad dio sobrevivencias mejores, mientras estos volúmenestomaron el menor tiempo para completar procedimientos y colocar al camarón en losestanques.

Típicamente, una densidad de siembra entre 140,000-150,000 postlarvas/m3 debería ser posi-ble, pero esto dependera del sitio de la granja.

La estación de aclimatación puede requerir algo más que solo filtración si la postlarva esmantenida por más tiempo que el periodo de aclimatación. Por ejemplo, si se planea reten-er la postlarva de 4 a 10 días extra para propósitos de cuarentena, se deben tomar medidasadicionales para mantener una adecuada calidad de agua. En este caso, puede ser necesarioun sistema de recirculación con filtro biológico y desinfección UV para conservar la super-vivencia alta.

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Densidades recomendadas para los tanques de aclimatación de acuerdo a la edad de postlarvas

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En días muy calientes, antes de pasar las postlarvas a los tanques, coloque una bolsa plásti-ca con hielo en el fondo de cada tanque por unos pocos minutos hasta que la temperaturabaje a 25 ºC.

Tan pronto se haya transferido la postlarva, bombee suavemente oxígeno a la columna deagua para reducir los niveles de amonio.

Riegue aproximadamente 50 g de pelets de carbón activado en cada tanque. Ajuste esta can-tidad dependiendo del tamaño del tanque.

Después de colocar todas las bolsas de transporte en los tanques de aclimatación, haga unaevaluación "clínica" de las postlarvas. Use un beaker plástico o de vidrio de 500-1000 mlpara tomar muestras de cada tanque de aclimatación.

Observe y anote en la hoja de registro (Apéndice 1) la llenura del intestino, señales de muda,señales de canibalismo, presencia de camarones muertos y opacidad de la cola. Detallescompletos de la evaluación de la condición fisiológica son brindados por Villalón (1994).

Mida la temperatura, el oxígeno y la salinidad cada 30 minutos, y el pH y amonio cada hora.Anote los resultados en la hoja de aclimatación.

Una vez que las postlarvas han sido colocadas en los tanques de aclimatación, tome mues-tras de 20-30 animales al azar y envíelas al laboratorio de la granja para su evaluaciónmicroscópica. El personal de laboratorio debería realizar conteos volumétricos y estimadosde mortalidad.

Si se observa mortalidad significativa en uno de los envíos, el gerente de control de calidadestimará el número total de las postlarvas vivas en la aclimatación basado en el estimadode mortalidad. Este conteo debe ser hecho antes que se agregue agua del estanque a lostanque de aclimatación. Una vez hecho el conteo, se debe proceder al llenado de los tan-ques de aclimatacion.

El oxígeno debería ser administrado durante la aclimatación de la forma siguiente:

Durante las primeras horas de aclimatación los niveles de amonio son altos, por lo que losniveles de oxígeno deben mantenerse arriba del nivel de saturación (12 mg\L - 15 mg\L). Lasaturación de oxígeno depende de la temperatura del agua.

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Aclimatación y siembra de postlarva

Transferencia de Postlarvas a los tanques de aclimatación

Conteos volumétricos

Niveles de oxígeno

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Niveles óptimos de oxígeno de 8-12 mg\L deben de mantenerse durante la aclimatación.Durante toda la aclimatación, los niveles de oxígeno no deben bajar nunca de 6 mg\L.

El nivel de oxígeno debe elevarse a 10 mg\L en los tanques de aclimatación justo antes dela siembra para compensar la pérdida en el viaje.

El objetivo de la aclimatación es ajustar lentamente la temperatura y salinidad de los tan-ques de aclimatación de tal forma que la postlarva pueda ajustarse fisiológicamente a lasnuevas condiciones.

La aclimatación debe empezar justo después de haber vaciado la última bolsa de transporteen los tanques. Luego, se debe agregar lentamente agua de los tanques reservorios a travésde un sistema de flujo continuo de tal forma que el volumen del tanque no varíe. El cam-bio en la salinidad debe ser cuidadosamente monitoreado y la tasa de cambio no deberíaexceder la proveída en la siguiente tabla.

Tasas recomendadas en el incremento de salinidad para aclimatación

Para aclimatar la temperatura se recomienda una tasa de cambio de 1 °C/hora, para laspostlarvas saludables la tasa de cambio puede ser 1 °C por 10 minutos. Una buena estrate-gia es mantener la temperatura constante a 25 ºC por el primer 75% del tiempo de aclimat-ación (mientras se ajusta la salinidad) y luego ajustar lentamente la temperatura hacia elfinal del periodo de aclimatación. El mantener la temperatura constante reduce la agresivi-dad y conserva la tasa metabólica relativamente baja.

Los programas de aclimatación propuestos aquí son solo guías, y la velocidad de aclima-tación debería disminuir si las postlarvas muestran síntomas de muda creciente o estrés. Serequiere un monitoreo cuidadoso. La coloración opaca o blancuzca, comportamiento denado errático, intestinos vacíos, o canibalismo creciente son todos indicadores de estrés.Generalmente la larva emergerá a la superficie si está estresada.

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Procedimiento de aclimatación y programa para postlarva 5 a 11 (Pl5 - Pl11)

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Se recomienda al concluir la aclimatación, liberar las postlarvas en los estanques tan pron-to sea posible, a menos que el objetivo sea ponerlas en cuarentena. Mantener larvas a altasdensidades después de la aclimatación puede acarrear problemas de pobre calidad de agua,estrés, mortalidad y enfermedades.

Si se requiere retener las postlarvas después de la aclimatación, será necesario filtrar ydesinfectar el agua ya sea con luz UV y/u ozono. La calidad de agua local también debe con-siderarse. Es más fácil mantener postlarvas en agua oceánica que en agua estuarina debidoa que generalmente es de mejor calidad.

Posteriores revisiones de la literatura por Clifford (1994) indican que las densidadesideales para aclimatación y transporte de postlarvas son:

Se debe acompañar la aclimatación con un buen régimen de alimentación, para que lapostlarva tenga suficiente energía y combata el estrés causado por las condiciones ambien-tales cambiantes. La alimentación puede empezar a la par con la aclimatación siempre ycuando los conteos volumétricos hayan concluido.

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Aclimatación y siembra de postlarva

Técnicas de alimentación en instalaciones de aclimatación o mantenimiento de postlarvas

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Villalón (1991) sugiere para esto: nauplios de Artemia, yema de huevo (cocida), una dieta dehojuela comercial, y Artemia congelada.

Samocha et. al (1993) usó densidades de siembra de 500 a 1000 postlarvas/L (500,000 a1,000,000 por tonelada de agua) durante la aclimatación. Luego, usó una densidad de 3,200postlarvas/m2 para el mantenimiento en pistas, con hasta un 90% de supervivencia despuésde mantenerlas por 5 semanas. Ellos probaron densidades sobre las 7,800 postlarvas/m2 con90% de supervivencia por un periodo similar en pistas, con 1.9 Kg/m2 de biomasa cosecha-da, sin dañar su crecimiento. La postlarva fue después arralada a 220-300/m2 y cultivada porotros 49 días, resultando un 81% de supervivencia, crecimiento promedio de 1.07 g/semanay peso promedio final de 7.3 g. La población de 3,200 postlarvas/m2 se alimentó con nau-plios de Artemia por 8 días, iniciando con 160 nauplios por postlarva por día durante los 2primeros días, y reduciendo la cantidad a la mitad hasta llegar a 20 nauplios de Artemia porpostlarva por día en el día 8.

Desde el primer día de mantenimiento se dio comida seca 6 veces al día con un tamaño deración crumble 0 (rango de tamaño de partícula <0.59 mm) para postlarva de 1-15 mgpromedio. También recomendaron dar a partir del segundo día alimento suplementario(Artemia adulta congelada); otros suplementarios semanales podrían ser usados depen-diendo del nivel de suciedad por epibiontes y salud. Si se detecta suciedad o contaminaciónbacteriana, se debe considerar alimentación frecuente con Artemia para mejorar la muda.Con baja suciedad y buena salud, el suplemento debería darse solo 2 veces por semana. Lacantidad total de Artemia dada durante un ciclo no debería exceder el 10% de la biomasacosechada total esperada.

Un régimen de alimentación similar con postlarvas de P. monodon es descrita en Treece yFox (1993), donde se alimentó Pl-4 con nauplios de Artemia a 6/ml. Una ración seca adi-cional se administró a razón del 100% del peso corporal dividiéndola en cuatro subracionesiguales por día; hasta el día 18 se mantuvo estas condiciones con 59% de supervivenciaaproximadamente. La Artemia fue gradualmente retirada y su aplicación suspendida com-pletamente para el día 11 y se dio alimento seco al 200% del peso corporal a partir de Pl-6.Se encontró que el recambio diario de agua del 100% era adecuado en un ambiente oceáni-co. El agua se filtró con arena y se desinfectó con photozone (UV y ozono).

La calidad del agua debe ser monitoreada con cuidado mientras se tenga postlarva en tan-ques.

El nivel máximo aceptable de amonio (NH3-N) (que también reduce el crecimiento en 1-2%)es 0.1 ppm (corresponde a 1.8 mg/L de amonio no ionizado NH4-N a 28 °C, pH de 8, salin-idad de 27 ppt). Dado que la mayoría de algas utiliza amonio, ponerlas en tanques de acli-

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Alimentación durante la aclimatación

Alimentación durante el mantenimiento

Calidad de agua en las instalaciones de aclimatación y mantenimiento

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matación o mantenimiento no debería ser un problema. El agregar oxígeno puro para con-servarlo a saturación también ayudará a reducir los problemas de amonio.

El nitrato debería medirse ocasionalmente para asegurar que su nivel esté bajo 1 mg/L; elnivel puede ser determinado por electrodo, estuches de prueba comerciales, o por métodoanalítico.

Cualquier concentración detectable de sulfuro de hidrógeno es considerada indeseable,dado que concentraciones de 0.01-0.05 mg/L de H2S pueden ser letales, y su olor a huevospodridos es reconocido fácilmente aún a concentraciones bajas. La mayoría de proce-dimientos de instalaciones de aclimatación y mantenimiento involucran el uso de EDTAcomo agente quelante a 2 ppm o más. Ésta ayuda a controlar desechos adhiriéndose a laextremidades del camarón, e incrementa la disponibilidad de metales trazas en agua demar.

Los estanques deben prepararse para la siembra cuidadosamente (drenado, encalado delfondo, secado completo y llenado). Esto se detalla en el capítulo 10. Se debe iniciar el llena-do y el régimen de fertilización a la par. Para esto se describen dos métodos en el capítulo5.

También deben ser muy bien inspeccionados antes de sembrarlos para asegurar un bloomadecuado de algas y la ausencia de predadores.

Es ideal el liberar las postlarvas en la parte más fresca del día, cuando los trabajadoresestán descansados y menos prontos a cometer errores.

La cosecha de animales aclimatados es un paso crítico dado que han sido sometidos a estrésy se debe tener cuidado de no infligir estrés adicional durante este procedimiento.

Los tanques de transporte deben limpiarse y secarse como se describe arriba, y luegollenarse con agua de los tanques reservorios o del estanque donde la postlarva será sem-brada. A este punto, los parámetros de calidad de agua deben ser similares en las dosfuentes de agua.

Una evaluación microscópica final de la postlarva debe de realizarse antes de continuar conel drenaje de los tanques de aclimatación.

Mientras la postlarva se drena desde el fondo del tanque, se debe colocar una línea aireado-ra en el recipiente contenedor. Esto ayuda a conservar el filtro de la ranura de drenaje librede suciedad previniendo derrames. Mientras el tanque se drena, moje las paredes del con-tenedor para evitar la adherencia de la postlarva en sus paredes.

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Liberación de postlarva a los estanques

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Sólo drene el 20 % del volumen del tanque de aclimatación en el contenedor antes de trans-ferir la postlarva al tanque de transporte. Repita el procedimiento hasta drenar el tanque.Esto no tomará más de media hora. Cada tanque de transporte debería tener una densidadfinal máxima de 800 postlarvas por litro, y deben ser oxigenados continuamente.

La postlarva debe ser drenada de los tanques de transporte hacia el estanque a intervalos de50 metros, con la ayuda de una manguera parcialmente sumergida en el estanque. Se debeevitar disturbios cerca del punto de descarga para prevenir el entierro de la postlarva en elfondo del estanque. La postlarva debe ser monitoreada mientras entra al estanque. La larvaes siempre liberada en el lado del estanque a favor del viento pues así el viento y las olasayudan a dispersarlas después de la siembra.

Para monitorear la sobrevivencia post-siembra se pueden usar jaulas forradas con tela defiltro. Se usan dos por estanque y se las coloca cerca del borde a una profundidad mínimade 50 cm. Se siembran 100 postlarvas en cada jaula, y 48 horas después se las retira y se cal-cula cada porcentaje de sobrevivencia. El promedio de éstos se toma como la tasa de sobre-vivencia de siembra del estanque (debe ser mayor al 85%). La orilla de los estanques debeser también monitoreada por la presencia de postlarvas muertas.

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APÉNDICE 1HOJA DE CONTROL DE ACLIMATACION

Fuente: Villalon 1994

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