UNIVERSIDAD AUTNOMA DE CAMPECHEFacultad de Medicina

EXAMEN TIEMPOS DE COAGULACIN.

Nombre de los alumnos: Marn Gutirrez Diana Martnez Chin Wendy Njera Marentes Catherine Velzquez Chable Flory Ye Lpez Jos

Programa acadmico: Competencias

Unidad de aprendizaje:

Laboratorio Clnico

EQUIPO 1

Fecha:30 de Julio de 2013.

INTRODUCCINTiempo de protrombina (TP)Es un examen de sangre que mide el tiempo que tarda la porcin lquida de la sangre (plasma) en coagularse.El mdico puede ordenar este examen si se tiene signos de un trastorno de coagulacin de la sangre. Si se est tomando un anticoagulante llamado warfarina, el mdico le har chequeos regulares del tiempo de protrombina o TP.Cuando uno sangra, el cuerpo inicia una serie de actividades que ayudan a que la sangre se coagule, lo cual se denomina cascada de la coagulacin. La prueba de TP examina protenas especiales, llamadas factores de coagulacin, que estn involucradas en este evento, y mide su capacidad para ayudar a coagular la sangre.Cuando cualquiera de los factores de coagulacin de la sangre falta o no est trabajando apropiadamente, el tiempo de protrombina es prolongado.Un resultado de TP que est demasiado alto o demasiado bajo en alguien que est tomando warfarina (Coumadin) puede deberse a: Dosis errnea del medicamento. Consumir alcohol. Tomar ciertos medicamentos, vitaminas, suplementos, medicamentos para el resfriado, antibiticos u otros frmacos de venta libre. Consumir un alimento que cambie la manera como el anticoagulante trabaja en el cuerpo.El aumento en el tiempo de protrombina (TP) puede deberse a: Obstruccin de las vas biliares. Coagulacin intravascular diseminada. Hepatitis. Enfermedad heptica. Malabsorcin. Deficiencia devitamina K. Deficiencia del factor VII. Deficiencia del factor X. Deficiencia del factor II (protrombina). Deficiencia del factor V. Deficiencia del factor I (fibringeno).

Tiempo parcial de tromboplastina (TPT)Es una prueba de sangre que examina el tiempo que le toma a la sangre coagularse y puede ayudar a establecer si uno tiene problemas de sangrado o de coagulacin. El mdico puede ordenar este examen si se tiene problemas de sangrado o coagulacin de la sangre. Hay tres rutas para para la cascada de coagulacin y el examen de TPT examina protenas especiales, llamadas factores, que se encuentran en dos de estas rutas.El examen igualmente se puede utilizar para vigilar pacientes que estn tomando heparina, un anticoagulante. Este examen generalmente se hace junto con otros exmenes, como un examen de protrombina.El valor normal vara entre laboratorios. En general, la coagulacin debe ocurrir entre 25 a 35 segundos. Si la persona est tomando anticoagulantes, la coagulacin tarda hasta 2 veces ms tiempo. Un resultado de TPT anormal (demasiado prolongado) puede deberse a: Coagulacin intravascular diseminada (CID). Deficiencia delfactor XIIo del factor XI. Hemofilia A. Hemofilia B. Hipofibrinogenemia. Enfermedad heptica. Anticoagulantes lpicos. Malabsorcin. Deficiencia de vitamina K. Enfermedad de von Willebrand.JUSTIFICACIN

CONTENIDO MATERIALCANTIDAD

Guantes1 par

Micropipetas2

Puntillas4

Cubetas3

EQUIPO

Equipo Coatron M11

REACTIVOS

Reactivo TP1

CaCl21

MUESTRA

Plasma con citrato de sodio1

MTODO / PROCEDIMIENTO

a) PROCEDIMIENTO DE TIEMPO DE PROTROMBINA (TP)1. Prender el equipo Coatron M1 que sirve para realizar pruebas de tiempos de coagulacin de manera semiautomatizado como tiempo de protrombina, tiempo de tromboplastina parcial activada, fibringeno entre otras.

2. Darle click en el botn Test y darle click en las flechas en direccin para abajo y seleccionar la prueba que se desea realizar, en este caso buscar la opcin TP (Tiempo de protrombina). Darle click en enter

3. Graduar una micropipeta con 25 L y otra con 50 L, marcar 4 puntillas una con la letra M (muestra), TP (reactivo TP), TTPa (reactivo 1) y CaCl (CaCl2) por cuestiones de tiempo y para poder agilizar la prctica. Con una micropipeta y la puntilla marcada con la letra M colocar 25 L de la muestra en una cubeta. Asegrese que la cubeta no tenga burbujas, de ser as darle unos pequeos golpecitos a la cubeta para que desaparezcan las burbujas.

4. Con ayuda de una micropipeta y la puntilla marcada con las letras TP, tomar 50 L de reactivo de TP precalentado durante 5 minutos.

5. Transferir la cubeta de la posicin de incubacin al rea de lectura.

6. Oprimir el botn optic y en la pantalla va aparecer wait (espere) y cuando el equipo indique que coloque el reactivo de TP, inmediatamente se deposita en la cubeta.

7. El equipo funciona del mismo modo que un espectrofotmetro de manera que cuando deja de pasar la luz significa que ya se ha formado el coagulo. Esperar los resultados que nos proporcione el equipo y analizar detenidamente.

b) PROCEDIMIENTO TIEMPO DE TROMBOPLASTINA PARCIAL ACTIVADA (TTPA)

1) Cambiar la prueba seleccionada en el equipo Coatron M1. Darle click en Test y darle click en las flechas en direccin para abajo y seleccionar la prueba que se desea realizar, en este caso buscar la opcin TTPa (Tiempo de tromboplastina parcial activada). Darle click en enter

2) Con ayuda de una micropipeta y la puntilla marcada con la letra M, colocar 25L de la muestra en una cubeta

3) Con ayuda de una micropipeta y la puntilla marcada con las letras TTPa colocar 25L de reactivo 1 en la misma cubeta del paso anterior.

4) Incubar durante 1 minuto

5) Con ayuda de la micropipeta y la puntilla marcada con las letras CaCl, tomar 25l de CaCl2 precalentado durante 5 minutos.

6) Transferir la cubeta de la posicin de incubacin al rea de lectura.

7) Oprimir el botn optic y en la pantalla va aparecer wait (espere) y cuando el equipo indique que coloque el CaCl2, inmediatamente deposito en la cubeta.

8) Esperar los resultados que nos proporcione el equipo y analizar detenidamente

RESULTADOSLos tiempos de la prueba de tiempos de coagulacin fueron los siguientes:

RESULTADOVALOR DE REFERENCIA

TPTP

18.1 SEG24-36 SEG

TTPaTTPa

47.4 SEG13-15 SEG

DISCUSIN:Al realizar el anlisis de la muestra proporcionada, se pudo realizar la prueba en el equipo Coatron M1; la prueba no fue del todo exacta, ya que hubo algunos errores en el pipeteo de la muestra y los reactivos, estos errores no fueron por causa humana, sino porque hubo un desajuste en la micropipeta, lo cual hacia variar la cantidad de sustancias en la reaccin; esto nos daba resultados ms altos de los esperados, por lo cual por la falta de tiempo, se tomaron como los resultados correctos. El anlisis se realiz de manera exitosa sin embargo las variaciones en el resultado fue lo nico a destacar.

CONCLUSIN:Se concluye que el paciente obtuvo como resultado de TP 18.9 segundos lo cual nos indica una anormalidad en los factores de coagulacin de la va extrnseca y la va comn; como el tiempo de coagulacin tardo ms de lo normal, se puede deducir la anormalidad en alguno de los factores de coagulacin I (fibringeno), II (protrombina), V, VII y X, ya que cuando no hay presencia de uno de estos factores, se prolonga el tiempo de coagulacin, tal y como sucedi en el paciente. En el caso de TTPa los resultados para este paciente fueron de 47.4 segundos, lo cual nos indica la anormalidad en el tiempo de coagulacin de la sangre; es decir se comprueba alguna anormalidad en los factores de la va intrnseca (XII, XI, IX y VII) y los de la va comn (X, V, II y I).BIBLIOGRAFIA:Carvazos Guzmn Luis. Historia y Evolucin de la Medicina. Ed. Manual Moderno. Mxico, D.F. 2009, 200pp.Elizalde Cremonte Mirta Alejandra. Manual de la Universidad Autnoma del Noreste. Programa de formacin continua en medicina general. Henri J.H., Tood- Sanford- Davdsohn, Diagnstico y tratamiento clnico por el laboratorio, Ed. Salvat, Barcelona, Espaa.

INTRODUCCIN CITOMETRA HEMTICAEs un examen de laboratorio que examina las clulas que componen la sangre, ofrece una informacin general de la sangre y sus componentes, puede mostrar alteraciones o enfermedades hematolgicas (propias de la sangre) o bien una alteracin indirecta o reflejo de una enfermedad de algn otro rgano (no hematolgicas).Hay valores de referencia especficos para los distintos componentes de la sangre (eritrocitos o glbulos rojos, leucocitos o glbulos blancos, plaquetas, etc.) existen varios factores independientes de la enfermedad por los que estos valores pueden variar como el sexo, la edad, la altura sobre el nivel del mar, el laboratorio. Ahora bien para una correcta interpretacin de la biometra hemtica se pueden dividir sus componentes en serie roja, serie blanca y plaquetas. Serie RojaLa serie roja determina los valores relacionados con los eritrocitos como la Hemoglobina (Hb), hematocrito y los eritrocitos mismos.Los eritrocitos o glbulos rojos son las clulas sanguneas que transporta la hemoglobina, la hemoglobina es una protena que a sus vez se encarga de transportar el oxigeno hacia los tejidos. El hematocrito (Hto) es el porcentaje de la sangre que est ocupado por los eritrocitos, usualmente es un valor cercano al valor de la hemoglobina multiplicado por 3 (Hb 10 g/dl, Hto 30.3%)La anemia es la alteracin que se observa con mayor frecuencia en la serie roja y esta se refiere a una cifra de Hb por debajo de sus valores normales para la edad. Existen varias causas de anemia, en Pediatra la ms comn es la deficiencia de hierro Serie blancaLa serie blanca est compuesta por los Leucocitos o Glbulos blancos. Los leucocitos forman parte importante del sistema inmune, se dividen en 2 grandes grupos: 1) Neutrfilos segmentados y 2) Linfocitos. Los leucocitos pueden verse alterados en mltiples padecimientos, principalmente en aquellos donde existen procesos inflamatorios (infecciones, enfermedades autoinmunes como Lupus y Artritis, enfermedades oncolgicas como cncer)Sus valores pueden estar incrementados (Leucocitosis) o disminuidos (leucopenia) aunque la mayora de las veces estos valores pueden estar alterados por infecciones, no son la nica causa.JUSTIFICACINLa biometra hemtica, como se conoce comnmente pero que en realidad su nombre adecuado es Citometra hemtica es un examen de laboratorio que examina aquellas clulas que componen la sangre, esta prctica se efectu con el fin de obtener una informacin general de la sangre y sus componentes, ya que la principal utilidad de esta es para encontrar algunas alteraciones tanto cualitativas como cuantitativas o enfermedades hematolgicas y tambin algunas afecciones de otros aparatos del cuerpo.Dentro de las ventajas que tiene la realizacin de esta prueba podemos mencionar que nos brinda informacin acerca de la determinacin de hemoglobina, determinacin del hematocrito, recuento de leucocitos, entre otros datos de suma importancia para saber o medir las clulas sanguneas. Sin embargo tambin cuenta con desventajas, algunas de ellas son que la extraccin de la sangre venosa no debe tener mucho tiempo para evitar la coagulacin, la contabilizacin de los leucocitos es un proceso algo tequioso y el frotis debe realizarse con cuidado para evitar despedazar los eritrocitos.Esta es una de las pruebas ms solicitadas y realizada en la mayora de las instituciones de salud, ya que da informacin que nos proporciona una idea muy confiable del estado general de salud del paciente

CONTENIDO MATERIAL Cantidad

Guantes1 par

Tubo de vacutainer tapa morada (con EDTA) 1

Camisa de vacutainer1

Aguja para vacutainer1

Torundas con alcohol2

Torniquete1

Portaobjetos2

EQUIPO

Placa de agitacin1

Equipo Sysmex kx-21N.1

Microscopio1

REACTIVOS

Colorante de Wright1

Buffer de Wright1

Aceite de inmersin1

MUESTRA

Sangre1

MTODOAntes de realizar cualquier procedimiento es necesario respetar la normatividad de seguridad e higiene as como de portar la indumentaria correcta, bata clnica de mangas largas, guates, lentes de seguridad, cubreboca, etc. Esto es necesario para evitar algn tipo de contaminacin cruzada, pudiendo ser de tipo operador-muestra, o viceversa (revisar previamente la NOM-007-SSA3-2011). Adems con todo lo anterior evitamos alguna alteracin en los resultados.a) ESTUDIO REALIZADO EN EL COMPAERO

1. Se realiza la extraccin de sangre, con las medidas de seguridad ya previamente establecidas. Se utiliza el mtodo de vacutainer para realizar dicha extraccin y el tubo con tapa de colorlilaomorado que contiene EDTA(un anticoagulante que acta mediante un efecto quelante sobre el calcio, impidiendoelprocesodela coagulacinalfijarlo).

2. Se coloca el tubo que contiene la muestra de sangre en una placa de agitacin, de este modo conseguiremos que la muestra este mezclada uniformemente.

3. Prendemos nuestro equipo Sysmex kx-21N, que es un analizador hematolgico que trabaja mediante el mtodo de impedancia y es capaz de medir 17 parmetros en la citometra hemtica.

4. Una vez mezclada la muestra, se abre el tubo que la contiene, y se coloca en el equipo Sysmex kx-21N.

5. Activamos el interruptor de arranque y el equipo comenzara a trabajar con el mtodo de impedancia. El tiempo que tarda el equipo Sysmex kx-21N en realizar el anlisis es de aproximadamente 30 segundos.

6. Esperar a que termine el equipo Sysmex kx-21N de analizar la muestra y cuando termine, proporcionara un papel con los datos obtenidos. 7. Analizar detenidamente estos resultados.

b) Como los resultados del compaero Julio estaban dentro de los parmetros de referencia, para poder observar y entender cmo se realiza un diferencial en citometra hemtica se utiliz la muestra de otro paciente y se realiz el diferencial.

1. Colocar una gota de la muestra de sangre en un portaobjetos

2. Con la ayuda de un cubreobjetos u otro portaobjetos se toca el extremo del portaobjetos y se hace un barrido.

3. Se tie con colorante de Wright. Esperar 10 minutos.4. Se le coloca buffer de Wright. Esperar 10 minutos.

5. Se abre la llave, se limpia con agua potable y se espera a que se seque.

6. Colocar una gota de aceite de inmersin que mejora la resolucin y la nitidez de la imagen ya que reduce significativamente la dispersin de la luz y observar a objeto de 100x.

RESULTADOS

DISCUSIN:Al realizar el anlisis de CHC, se realiz con una muestra de sangre, que se obtuvo en el laboratorio de anlisis clnicos de la Universidad Autnoma de Campeche, por medio de una extraccin a un alumno de la clase. El anlisis se realiz un equipo automatizado que utiliza el sistema de impedancia para realizar el conteo de los eritrocitos, leucocitos y plaquetas principalmente; despus de haber realizado el anlisis a la muestra de sangre del alumno de clase, se nos proporcion otra muestra, la cual presentaba mltiples anormalidades en su anlisis. Se realiz un frotis de la muestra anormal, y posteriormente se realiz la tincin y visualizamos varias estructuras en el microscopio exitosamente.

CONCLUSIN:Al realizar el anlisis se pudo llegar a la conclusin de que el paciente presenta 8.4 g/dl de hemoglobina en sangre, lo cual representa niveles disminuidos; posee un VCM de 104.9 fl lo cual nos indica niveles elevados de volumen de cada eritrocito, posee de hematocrito 25.7% lo cual nos indica niveles muy bajos de glbulos rojos en sangre, por lo cual el paciente debe de tener hipoxia tisular debido al bajo porcentaje de glbulos rojos; posee HCM de 34.3 pg lo cual nos representa una elevacin en la concentracin de hemoglobina por cada eritrocito. Por lo que se deduce que el paciente esta cursando una anemia macrocitica normocromica; es importante recomendar la vigilancia en los niveles del paciente, ya que influyen directamente en los niveles de oxigeno en el organismo, y es importante su tratamiento para evitar serias complicaciones; adems de la vigilancia en el volumen y tamao eritriocitario..BIBLIOGRAFIA:Carvazos Guzmn Luis. Historia y Evolucin de la Medicina. Ed. Manual Moderno. Mxico, D.F. 2009, 200pp.Elizalde Cremonte Mirta Alejandra. Manual de la Universidad Autnoma del Noreste. Programa de formacin continua en medicina general. Henri J.H., Tood- Sanford- Davdsohn, Diagnstico y tratamiento clnico por el laboratorio, Ed. Salvat, Barcelona, Espaa.