UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADORFACULTAD DE CIENCIAS QUIMICASCARERA DE BIOQUMICA CLNICALABORATORIO DE BIOQUMICA CLNICA IPrctica # 7NOMBRE: ALEX SANTIAGO CHICAIZA ALOMOTOFECHA DE ENTREGA: 2015-01-121. TEMA: HDL y LDL1. OBJETIVOS: Investigar el fundamento del mtodo que se utiliza para la determinacin de HDL y LDL en suero.

1. INTRODUCCIONLDL (low-density lipoprotein)

Es la lipoprotena ms rica en colesterol y la genera el metabolismo de las VLDL en circulacin, con menor contenido de triglicridos y mayor de colesterol y protenas que las VLDL. La principal apoliprotena que contiene es la apo B100. (Gonzles H., 2010)LDL CHOLESTEROL liquicolor que es un a prueba enzimtica homognea para la determinacin cuantitativa de LDL. El LDL es considerado como un componente lipdico que incrementa el riesgo enfermedades cardiovasculares (ECV). Junto con HDL es de importancia diagnstica para estimar el riesgo individual.MtodoLa prueba combina dos pasos especficos: en el primer paso se eliminan y destruyen los quilomicrones, y los colesteroles VLDL y HDL por reaccin enzimtica. En el segundo paso, se determina el colesterol restante de la fraccin LDL, a travs de reacciones enzimticas bien establecidas en presencia de surfactantes especficos para LDL.Reacciones 1er paso:

2do paso:

Procedimiento1. Atemperar los reactivos y las cubetas a 3 C y mantener constante 2. Pipetar directamente en la cubeta :10 l de gua + 750 l de enzima Blanco de reactivo10l CAL + 750 l de enzimaCalibrador10l muestra + 750 l de enzimaSuero problema3. Mezclar con cuidado e incubar por 5 min exactos a 37 C4. Pipetear en cada cubeta (blanco de reactivo, calibrador y muestra) 250 l del reactivo SUB5. Mezclar con cuidado e incubar nuevamente a 37 C y a los 5 minutos leer la absorbancia a 593 nm.

Valores de referencia

HombreMujer

bajo riesgo de ECV< 50 mg/dl< 63 mg/dl

alto riesgo de ECV> 172 mg/dl> 167 mg/dl

HDL (high density lipoprotein)Es un lipoproteina que se sintetiza en el hgado e intestino e intestino. Es la ms pequea y de mayor densidad de la lipoprotenas por su contenido alto en protenas y fosfolpidos. Las principales apoliproteinas que contien son la apo AI y apo AII. (Gonzles H., 2010)Para la determinacin utilizamos el kid comercial: HDL CHOLESTEROL liquicolor que es un a prueba enzimtica homognea para la determinacin cuantitativa de HDL. MtodoLa prueba combina dos pasos especficos: en el primer paso se eliminan y destruyen los quilomicrones, y los colesteroles VLDL y LDL por reaccin enzimtica. En el segundo paso, se determina el colesterol restante de la fraccin HDL, a travs de reacciones enzimticas bien establecidas en presencia de surfactantes especficos para HDL.

Reacciones 1er paso:

2do paso:

Procedimiento1. Atemperar los reactivos y las cubetas a 3 C y mantener constante 2. Pipetar directamente en la cubeta :10 l de gua + 750 l de enzima Blanco de reactivo10l CAL + 750 l de enzimaCalibrador10l muestra + 750 l de enzimaSuero problema3. Mezclar con cuidado e incubar por 5 min exactos a 37 C4. Pipetear en cada cubeta (blanco de reactivo, calibrador y muestra) 250 l del reactivo SUB5. Mezclar con cuidado e incubar nuevamente a 37 C y a los 5 minutos leer la absorbancia a 593 nm.

Valores de referencia< 35 mg/dl factor de riesgo para ECV> 60 mg/dl bajo riesgo para ECV

Bibliografa:

HDL Cholesterol liquicolor. Human Gesellschft fr Biochemica mbH Max Planck Ring 21 D 65205 Wiesbaden. Germany

HDL Cholesterol liquicolor. Human Gesellschft fr Biochemica mbH Max Planck Ring 21 D 65205 Wiesbaden. Germany

GONZLES H., . (2010). Principios de Bioqumica Clica y Patologia Molecular. Barcelona (Espaa): Elsevier.