ESPIROQUETASM.V. Aurico Sousa Fonseca Departamento de Patologa Veterinaria Ctedra de Microbiologa e Inmunologa

REVISIN HISTRICA

Descritas por Leeuwenhoek 1675-1685 Erhenberg les asign el nombre en 1833 Obermeier describi al primer patgeno del grupoBorrelia recurrentis

Grupo diferenciado de microorganismos Caractersticas morfolgicas y estructurales peculiares Propiedades y caractersticas nicas

TAXONOMA Y NOMENCLATURA

Hasta hace relativamente poco tiempo los gneros eran clasificados en base aHbitat Morfologa Metabolismo % G+C del ADN Nmeros de fibrillas axiales o endoflagelos y Poder patgeno

Estudios moleculares basados en la secuencia de los genes que codifican al ARNr 16s los clasific en un grupo filogentico, y permiti establecer las relaciones existentes entre las espiroquetas

TAXONOMA Y NOMENCLATURA Actualmente se describen en la seccin XXV del volumen 5 de la 2da. Edicin del Manual Bergey de Bacteriologa sistemtica Se incluyen en: Clase Spirochaetes Orden Spirochaetales

CARACTERSTICAS MORFOLOGCAS Bacterias mviles Forma de hlice 0,1 a 3,0 m de dimetro longitud de 5 a 250 m Gram negativas Microscopia ptica

Tcnicas para aumentar grosor Difciles de colorear, se observan con microscopa de campo oscuro y/o contraste de fases.

Impregnacin argntica (Tcnica de Levaditi) Tincin negativa con nigrosina o tinta china (Fontana-Tribon-deau) Wright, Romanowsky y Giemsa Inmunoperoxidasa Anticuerpos Fluorescentes

ESTRUCTURA CELULAR Y COMPOSICIN Membrana clular externa pluriestratificada que rodea completamente al cilindro protoplasmtico Estructura similar a membrana externa de Gram negativas

Cilindro protoplsmico constituido porCitoplasma Regin nuclear o nucleoide Complejo membrana citoplsmica peptidoglicano Membrana citoplasmtica Pared celular (similar a bacterias Gram negativas)

ESTRUCTURA CELULAR Y COMPOSICIN El cilindro protoplsmico se encuentra enrollado por los llamados filamentos axiales Fibrillas axiales, flagelos periplsmicos, endoflagelos o fibrillas periplsmicas El nmero de endoflagelos vara entre 2 y 100 por clula dependiendo del gnero y especie Se insertan cerca de uno de los extremos del cilindro, en el disco de insercin. El otro extremo no est insertado Similares en su ultraestructura y caractersticas qumicas a los otros flagelos bacterianos Movimientos de rotacin a lo largo del eje longitudinal, flexin por plegamiento, torsin y traslacin en los medios lquidos o slidos.

CARACTERSTICAS DE CRECIMIENTO

Son quimiohetertrofos Fuentes de carbono y energa: Aminocidos, largas cadenas de cidos grasos y largas cadenas de alcoholes grasos Se pueden comportar como anaerobios, aerobios, anaerobios facultativos o microaerfilos

CARACTERSTICAS DE CRECIMIENTO Algunos gneros se pueden cultivar en medios artificiales de laboratorio, siendo su crecimiento lento Se desarrollan bien en medios enriquecidos con suero de conejo o hemoglobina Entre los medios ms adecuados para espiroquetas se encuentran Stuart, Fletcher, Noguchi, Korthof, Reiter y Ramme, Chang, Li-Yan Po y el medio slido de Cox y Larson Treponema se ha logrado cultivar hasta por dos generaciones en lneas celulares Se multiplican por fisin binaria (divisin transversal)

ECOLOGA

HbitatSon ubicuas y de distribucin cosmopolita Formas bacterianas de vida libre en: aguas dulces y saladas Tierras, lodos y fango Saprofitas en el suelo en descomposicin Simbiontes en: Cavidad bucal y aparato genital del ser humano y de los animales Aparato digestivo de mamferos (rmen bovino) y de moluscos (gnero Cristispira) Patgenos intracelulares Treponema Agentes Zoonticos Borrelia y Leptospira Patgenos animales de trascendencia econmica Brachyspira

ECOLOGA Transmisin La transmisin natural ocurre por va Oral o digestiva Aergena Por contacto Mediante vectores hematfagos Garrapatas e insectos

Microorganismos lbiles que muestran sensibilidad a:Calor Luz Desecacin Acidez Sustancias qumicas como: Arsenicales Mercuriales Bismuto Lisozima Antibiticos como: Penicilina, tetraciclina, estreptomicina y tilosina

Resistenciarifampicina

GNEROS DE INTERS EN MEDICINA VETERINARIA Familias Spirochaetaceae Borrelia Treponema Serpulinaceae Brachyspira Leptospiraceae Leptospira

Gnero Borrelia

GeneralidadesComprende especies patgenas para el ser humano y los animales (aves, vacas, ovejas, caballos y perros) Agentes productores de zoonosis

Caractersticas morfolgicas y estructuralesMorfologa helicoidal Espiras amplias, irregulares y escasas Extremos del cilindro protoplasmtico son afilados El interior del citoplasma no presenta tbulos Cubierta externa presenta un lipopolisacrido txico diferente a la endotoxina de las Gram negativas Tamao entre 0,2 y 0,5 m de dimetro y 3-20 m de longitud Posee entre 7 y 30 filamentos axiales

Gnero Borrelia

GeneralidadesComprende especies patgenas para el ser humano y los animales (aves, vacas, ovejas, caballos y perros) Agentes productores de zoonosis

Caractersticas morfolgicas y estructuralesMorfologa helicoidal Espiras amplias, irregulares y escasas Extremos del cilindro protoplasmtico son afilados El interior del citoplasma no presenta tbulos Cubierta externa presenta un lipopolisacrido txico diferente a la endotoxina de las Gram negativas Tamao entre 0,2 y 0,5 m de dimetro y 3-20 m de longitud Posee entre 7 y 30 filamentos axiales

Gnero Borrelia Se visualizan mejor al microscopio tras coloraciones con anilina que las otras espiroquetas Son Gram negativas, pero se colorean mejor con Giemsa, Wright y Naranja de acridina Resisten varias semanas en los cogulos sanguneos a temperatura ambiente, algunos meses a 4 oC y por tiempo indefinido a -20 oC Atraviesan la placenta Se eliminan por la leche y la orina

Gnero Borrelia Aislamiento e identificacin El cultivo es difcil y lento (7-8 das) Tasa promedio de generacin: 18 a 20 horas Especies que han podido ser aisladas en vitro son microaerfilas Antes se cultivaban y aislaban en Huevos embrionados de gallina Animales de experimentacin (ratn recin nacido) Pases sucesivos en vectores artrpodos

Gnero Borrelia Aislamiento e identificacin Ahora se emplean medios artificiales como: Noguchi y Li-Yan-Po Medio BSK II (Barbour-Stoenner y Kelly) Suero de conejo, 5 fluorouracilo y kanamicina Medio CM RL 1066 Glutamina Temperatura de incubacin 33 a 35 C

Gnero Borrelia

Hbitat Parsitos obligados que se encuentran distribuidos por el torrente circulatorio Presentan la misma distribucin geogrfica que sus vectores

Gnero Borrelia

TransmisinArtrpodos hematfagos Garrapatas de los gneros Argas, Ixodes, Rhipicephalus, Margaropus, Boophilus y Ornithodoros Adquieren las Borrelia al alimentarse de los animales enfermos Hombres, aves, vacas, ovejas, caballos y perros o los reservorios Aves migratorias, roedores, ciervos, vacas, ovejas y caballos Se ha demostrado transmisin transovrica

Gnero Borrelia

Especies de intersBorrelia anserina Borreliosis o espiroquetosis aviar Borrelia theileri Fiebre recurrente en vacas. Tambin en ovejas y equidos Borrelia coriaceae Aborto epizotico en bovinos Borrelia burgdorferi Enfermedad de Lyme Borrelia afzelii Enfermedad de Lyme Borrelia garinii Enfermedad de Lyme

Gnero Borrelia

Diagnstico serolgicoElisa Posibles falsos positivos con cepas OX-2 y OX-K de Proteus Inmunofluorescencia indirecta (IFI) Western blot

Diagnstico molecularPCR (Reaccin en cadena de la Polimerasa)

Gnero Borrelia Tratamiento Tetraciclina, penicilina, eritromicina, amoxicilina, kanamicina y ceftriaxona Medidas profilcticas Evitar el contacto con los vectores que sirven de vehiculo a Borrelia Uso de productos frente a las garrapatas Eliminar roedores Existen bacterinas y vacunas de subunidades para perros

Gnero Treponema

Gnero Brachyspira

GeneralidadesCatarsis taxonmica Inicialmente Treponema (T. hyodysenteriae) En 1991 Stanton et al., la reclasifican como Serpula En 1992 Stanton et al., la reclasifican como Serpulina En 1997 Ochiai et al., reporta una homologa mayor de 96% con Brachyspira

Gnero Brachyspira

Especies de intersBrachyspira aalborgi Especie tipo del gnero Brachyspira hyodysenteriae Disenteria porcina intensa Brachyspira innocens No patgena Brachyspira pilosicoli Espiroquetosis intestinal porcina dbil Brachyspira alvinipulli Enteropatgena para el pollo. Produce diarrea

Gnero Brachyspira Hbitat Reservorio: intestino del cerdo Perros y roedores son sensibles al microorganismo

Transmisin Fecal-oral

Gnero Brachyspira Diagnstico Toma de muestra

Gnero Brachyspira

Caractersticas morfolgicas y estructuralesBacteria mvil, helicoidal B. hyodysenteriae Mide 8-10 m de longitud y 0,3-0,4 m de dimetro Presenta de 14 a 18 endoflagelos La mitad se inserta en cada uno de los extremos B. pilosicoli Mide 4-8 m de longitud y 0,20,3 m de dimetro Presenta de 10 a 12 endoflagelos

Gnero Brachyspira

Aislamiento e identificacinCrecen en condiciones de anaerobiosis en agar sangre soja tripticasa a 38 C Se pueden usar el medio de agar sangre modificado complementado con espectinomicina y rifampicina