04. Diagnostico por citometria de flujo de HPN.pptx

7/23/2019 04. Diagnostico por citometria de flujo de HPN.pptx

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INMUNOFENOTIPO HPNValoracin de protenas que utilizan GPI para su

anclaje a la membrana citoplasmatica

Dr. Elas Prez BecerraCitometria de Flujo


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Definicin

La HPN, tambin conocida como !"# De

$arc%iafa&$ic%eli, es una enfermedad

adquirida ' clonal de la clula tronco%ematopo'tica con la consi(uiente

produccin de clulas san(uneas

defectuosas#


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)pidemiolo(a

La HPN es una enfermedad pocofrecuente, su tasa anual de incidencia no

esta bien establecida# !e estima que sea* a + -eces menor que la anemiaaplasica#

.fecta a pacientes de ambos se"os 'puede aparecer a cualquier edad, pero sedescribe ma'or frecuencia en el se"ofemenino#


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/uadro clnico

)l comienzo de la HPN suele ser

insidioso ' la e-olucin tiende a ser

prolon(ada ' -ariable#Generalmente cursa con episodios de

%emlisis intra-ascular ' %emo(lobinuria#

.sociados a infecciones, menstruacin,medicamentos, trasfusiones, ejercicio,

entre otras#


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/uadro clnico

Hemlisis intra-ascular crnica sin patron

nocturno definido#

Puede cursar con pancitopenia, carenciade %ierro, trombosis -enosa e infecciones

de repeticin#


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Defecto molecular

)l clon anomalo de precursores

%ematopo'eticos, es %ipersensi-o a la

lisis por el complemento, sur(e comoconsecuencia de una mutacion somatica

del Gen PIG&. 01asfatidil Inositos (lic2n

del (rupo .3#


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Defecto molecular

)l Gen PIG&. es el responsable de la

sintesis de una estructura quimicallamada Glucofosfatidilinositol 0GPI3 por

medio del cual se unen un (rupo de

protenas a la membrana celular#


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)"presin de protenas que utilizan el anclaje

por GPI

Antgeno Funcin Distribucin celular

CD14 Receptor LPS Monocitos

CD16 FcRIII Neutrofilos (Polimorfismo GPI)

CD24 Clul!s " # $r!nulocitos%

CD&& (D'F) Re$ul!cin el comp% *o!s l!s cel% +em!topo#etic!s%

CD&2 (C'MP'*+) Linfocitos # monocitos%

CD&, '-esin *o!s l!s cel% +em!topo#etic!s%

CD&. (MIRL) In-i/ior C'M *o!s l!s cel% +em!topo#etic!s%


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por GPI










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por GPI










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CELULAS TRONCO CD34


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1isiopatolo(a

Lisis intra-ascular

)l mecanismo de %emlisis parece ser la

acti-acin incontrolada del complemento

en la superficie de los eritrocitosanormales por la marcada reduccin o

ausencia de protenas de membrana

re(uladoras de la acti-idad delcomplemento 0/D*4 ' /D**3#


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1isiopatolo(a

Infecciones

Las infecciones son frecuentes ' se

atribu'en a defectos cuantitati-os '

cualitati-os en los leucocitos 0p#ejem# Ladisminucion de /D+5 trae como resultado

una acti-idad quimiotactica ' fa(ocitica

pobre3#


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1isiopatolo(a

trombosis

)l tromboembolismo -enoso es una de las complicaciones m2s temidas en la

HPN ' junto a los episodios %emorr2(icos son responsables de un *6 de la

mortalidad por esta enfermedad# !e presenta entre el +7 ' el 86 de los casos#

9epresenta el ma'or factor pronstico ne(ati-o: la ma'ora de las trombosis

intraabdominales principalmente de las -enas %ep2tica ' mesentric# La

localizacin m2s frecuente ' (ra-e es la trombosis de la -ena %ep2tica o sndrome

de ;


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Dia(nostico HPN

/uadro clnico# General de orina#

;iometria %em2tica#DHL

Hapto(lobinas Hemosiderina en

orina#

$edula sea Hb# Libre en plasma

1osfatasa alcalina en los neutrofilos#

.cetilcolinesterasa eritrocitaria#


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Dia!ostico HPN

Para un dia(nostico de certeza de HPN ' la

identificacin del dficit de e"presin de GPI, es

necesaria la demostracin del defecto de

e"presin en al menos dos lneas

%ematopo'ticas distintas de al menos dos

marcadores 0dos protenas asociadas a GPI o

una protena asociada a GPI ' 1L.)93


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CE"U"#$ HPN


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INDIC#CIONE$


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.spectos metodol(icos

.c$o#

1lourocromo#

Preparacin de la muestra#

)-entos analizados#)quipo#


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.n2lisis en neutrofilos


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@amaAo de la clona HPN


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@amaAo de la clona HPN


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Panel recomendado para HPN


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Dia(nostico HPNDemostrar dos tipos celulares con el defecto


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Dia(nostico HPNDemostrar dos tipos celulares con el defecto


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9equerimientos

metodol(icos


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@ratamiento

)l .c$o eculizumab es un anticuerpo %umanizado I(G Bappa# )ste .c$o se

une especficamente ' con (ran afinidad al componente /* del

complemento# )sta union pre-iene la (eneracin del subfra(mento /*a ' del

complejo de ataque a la membrana 0$./3 /*b&4# /uando se administra por

-a intra-enosa, la semi-ida de eliminacin de eculizumab es de 7C7 E7%

0F++ das3, permaneciendo fundamentalmente en el espacio -ascular# )l

estado de equilibrio de las concentraciones plasm2ticas de eculizumab se

lo(ra F+* das despus de la primera administracin# La farmacodinamia de

eculizumab se correlaciona directamente con la concentracin plasm2tica del

medicamento, ' el mantenimiento de concentraciones plasm2ticas superiores

a =* (mL conlle-a en la practica al bloqueo completo de la acti-idad

%emoltica dependiente de la acti-acin de /*


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eculizumab


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$onitoreo

$onitorizacin de la eficacia? )l descenso rapido de la

cifra de la LDH serica %asta un -alor pr"imo al normal

tiene una (ran utilidad para comprobar que eculizumab

esta bloqueando la acti-idad %emoltica del

complemento# Para -er la capacidad de respuesta de lamedula osea es mu' util monitorizar el recuento de

reticulocitos# Los casos tratados con eculizumab que

muestran una escasa ele-acion de la cifra de Hb '

tienen un recuento de reticulocitos bajo pueden traducirun componente medular %ipore(enerati-o#


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$onitoreo terapia con

aculizumab


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%CI#$

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