UNIVERSIDAD SIMÓN BOLÍVAR

DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA CELULAR

SEPARACION DE PROTEINAS POR

CROMATOGRAFIA

José Bubis

Las proteinas son muy diversas…

A = Eluyente

B = Fracciones eluidas

Reservorio con la

solucion tampon

Colector de fracciones

Columna

Montaje tipico

Ejemplo de un perfil cromatografico tipico

TIPOS DE CROMATOGRAFIA

• INTERCAMBIO IONICO (CATIONICO O ANIONICO)

• EXCLUSION MOLECULAR (FILTRACION DE GEL)

• AFINIDAD

• HIDROFOBICA

Cromatografia de intercambio iónicoSeparación por carga

Por ejemplo…

Las proteinas eluyen cambiando la fuerza ionica

o el pH de la solucion

Cromatografia de exclusión molecular Separación por tamaño

Las proteinas mas grandes eluyen primero

y luego las mas pequeñas

Por ejemplo…

Cromatografía de afinidadSeparación de acuerdo a

especificidad de enlazamiento

Las proteinas eluyen empleando concentraciones altas de

su ligando natural o cambiando la fuerza ionica o el pH

Cromatografia Hidrofobica

Las proteinas se enlazan a concentraciones altas de sal y

eluyen a concentraciones bajas de sal o aumentando la

hidrofobicidad del eluyente

TIPOS DE CROMATOGRAFIA

• INTERCAMBIO IONICO (CATIONICO O ANIONICO)

• EXCLUSION MOLECULAR (FILTRACION DE GEL)

• AFINIDAD

• HIDROFOBICA

En conclusion…