Separacion de proteinas por cromatografia
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UNIVERSIDAD SIMÓN BOLÍVAR
DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA CELULAR
SEPARACION DE PROTEINAS POR
CROMATOGRAFIA
José Bubis
Las proteinas son muy diversas…
A = Eluyente
B = Fracciones eluidas
Reservorio con la
solucion tampon
Colector de fracciones
Columna
Montaje tipico
Ejemplo de un perfil cromatografico tipico
TIPOS DE CROMATOGRAFIA
• INTERCAMBIO IONICO (CATIONICO O ANIONICO)
• EXCLUSION MOLECULAR (FILTRACION DE GEL)
• AFINIDAD
• HIDROFOBICA
Cromatografia de intercambio iónicoSeparación por carga
Por ejemplo…
Las proteinas eluyen cambiando la fuerza ionica
o el pH de la solucion
Cromatografia de exclusión molecular Separación por tamaño
Las proteinas mas grandes eluyen primero
y luego las mas pequeñas
Por ejemplo…
Cromatografía de afinidadSeparación de acuerdo a
especificidad de enlazamiento
Las proteinas eluyen empleando concentraciones altas de
su ligando natural o cambiando la fuerza ionica o el pH
Cromatografia Hidrofobica
Las proteinas se enlazan a concentraciones altas de sal y
eluyen a concentraciones bajas de sal o aumentando la
hidrofobicidad del eluyente
TIPOS DE CROMATOGRAFIA
• INTERCAMBIO IONICO (CATIONICO O ANIONICO)
• EXCLUSION MOLECULAR (FILTRACION DE GEL)
• AFINIDAD
• HIDROFOBICA
En conclusion…