PATOGÉNESIS MOLECULAR DE LOS LINFOMAS B

MEJORANDO EL DIAGNÓSTICO Y APORTANDO NUEVAS DIANAS TERAPÉUTICAS

Margarita Sánchez-Beato Gómez Grupo de Investigación en Linfomas

Oncología Médica Instituto Investigación Sanitaria Puerta de Hierro

NEOPLASIAS HEMATOLÓGICAS Tumores que afectan médula ósea, sangre y/o órganos linfoides Suponen un gran reto debido a su heterogeneidad Clasificación compleja • Leucemias (sangre)

Mieloide aguda Linfoblástica aguda Mieloide crónica Linfática crónica

• Linfomas (células órganos linfoides) Linfoma de Hodgkin Linfoma no Hodgkin

• Mieloma (células plasmáticas) • Otras

• Linfomas/leucemias B

• Linfomas/leucemias T

• Neoplasias mieloides

Leucemias

Síndromes mielodisplásicos

Otras neoplasias mieloides • …

LINFOMAS B Origen y Clasificación Patogénesis: NFkB, BCR, remodelación cromatina… Microambiente

LINFOMAS

Cedido por L Odqvist

CLASIFICACIÓN DE LOS LINFOMAS DE ACUERDO A LA WHO

Más de 35 subtipos diferentes categorizados en base a sus características morfológicas, inmunofenotípicas,

genéticas y clínicas

Jaffe et al. Blood 2008

BIOLOGÍA DE LAS NEOPLASIAS HEMATOLÓGICAS El conocimiento de la biología de los linfomas/leucemias se basa en la información conocida de la biología de las células linfoides normales

Sin embargo, lo inverso también es cierto: el conocimiento más amplio de la patogénesis de los linfomas/leucemias está cubriendo lagunas hasta ahora desconocidas de la biología y el desarrollo de los linfocitos

Este mejor conocimiento está incrementado el armamentario y el desarrollo de nuevas terapias dirigidas en el tratamiento de la estas neoplasias de forma mucho más racional

ESTADÍOS DE MADURACIÓN DE LA CÉLULA B

ESTADÍOS DE MADURACIÓN DE LA CÉLULA B

RAG AID

Muchas de las alteraciones responsables de la aparición de los linfomas se deben al malfuncionamiento de las enzimas responsables de los reordenamientos e hipermutación somática de las Ig: RAG y AID

INICIO PROLIFERACIÓN & SHM SELECCIÓN & CSR DIFERENCIACIÓN

Molecular Medicine©, Daniele Focosi 2001-2014.

Las distintas neoplasias linfoides B corresponden a los distintos estadios de diferenciación del linfocito B La “célula de origen” correspondiente no está claramente establecido en algunos subtipos

“CÉLULA DE ORIGEN” DE LOS LINFOMAS B

Molecular Medicine©, Daniele Focosi 2001-2014.

CLASIFICACIÓN DE LINFOMAS B

Shaffer et al. Ann Rev Immunol 2012

RUTAS IMPLICADAS EN LINFOMAS B

Lenz et al. NEJM 2010

• AID induce hipermutación somática y “class swith recombination” •Factores de transcripción requeridos para establecer la identidad y función del linfocito B:

BCL6 Blimp1 IRF4

• Linfomas que derivan de los distintos estadios de diferenciación • Alteraciones en el control de rutas como NFkB, BCR,…

Basso & Dalla-Favera, 2015

NUEVAS TECNOLOGÍAS Y MEJORA DEL DIAGNÓSTICO • Los avances en el conocimiento de la biología de los linfomas, en gran parte debida

al uso de tecnologías de alto rendimiento (arrays de expresión), han mejorado la clasificación de los linfomas identificando nuevos subtipos (LBDCG como ejemplo)

• Esta mejora en la clasificación contribuye a un mejor manejo de los pacientes

• Identificación de nuevas rutas susceptibles de ser usadas en el tratamiento (BCR, NfkB, modificadores heterocromatina)

• La secuenciación masiva ha identificado nuevas alteraciones genéticas: mejora en el pronóstico y terapia

CNV analysis

GEP EN LA CLASIFICACIÓN DEL LBDCG

Alizadeh et al. Nature 2000

• Diseñaron y construyeron un microarray “Lymphochip” que incluía cerca de 18.000 genes relacionados con linfomas y centro germinal, cáncer, diferenciación linfoide….

• Hibridaron muestras de células B normales, líneas celulares, y linfomas foliculares, difusos y linfática crónica

• Agruparon las muestras por similitud en los patrones de expresión

GEP EN LA CLASIFICACIÓN DEL LBDCG

Alizadeh et al. Nature 2000

• Diseñaron y construyeron un microarray “Lymphochip” que incluía cerca de 18.000 genes relacionados con linfomas y centro germinal, cáncer, diferenciación linfoide….

• Hibridaron muestras de células B normales, líneas celulares, y linfomas foliculares, difusos y linfática crónica

• Agruparon las muestras por similitud en los patrones de expresión

SUBTIPOS DE LBDCG

Alizadeh et al. Nature 2000 Rosenwald et al. NEJM 2002 & JEM 2003

RUTAS DE SEÑALIZACIÓN RELEVANTES EN LINFOMAS B NFkB & BCR Remodelación cromatina

NFκB PATHWAY

• Desarrollo y supervivencia de los linfocitos

• Regulación respuesta inmune

•Cáncer

Cedido por L Odqvist

NFκB PATHWAY NFkB está implicado en multitud de funciones relevantes en tumorigénesis

Cedido por L Odqvist

BCR (B-cell receptor) PATHWAY Imprescindible para la supervivencia de las células B Activación dependiente de Ag (propios o externos como H. Pylori en MALT) o independiente de Ag La traducción de señales BCR • es dependiente de Ca2+

• interconectada con múltiples rutas de señalización

• activación de 2º mensajeros y proteínas transductoras de señales: PI3K, PLC,

• NFkB… Activación tónica y crónica Frecuentemente alterado en linfomas B Ausencia de activación en LHc y PMBCL

NFκB, BCR & JAK/STAT EN LINFOMAS B

Modificado Shaffer et al. Ann Rev Immunol 2012

MUTACIONES EN LBDCG (NFκB, BCR, JAK/STAT, TLR…)

Pasqualucci L et al. Nature Genetics 2011

La secuenciación masiva ha permitido el descubrimiento de nuevas mutaciones en genes involucrados en la regulación de estas rutas de

señalización en LBDCG, LF y otros

MUTACIONES EN LBDCG (NFκB, BCR, JAK/STAT, TLR…)

La secuenciación masiva ha permitido el descubrimiento de nuevas mutaciones en genes involucrados en la regulación de estas rutas de

señalización en LBDCG, LF y otros

Okosun J et al. Nature Genetics 2014

NFκB, BCR & JAK/STAT EN LINFOMAS B

Shaffer et al. Ann Rev Immunol 2012

NFκB & BCR COMO DIANA TERAPÉUTICA

Vaque et al. Haematologica 2014

LENALIDOMIDA

En la actualidad hay un gran número de terapias para los linfomas B dirigidos contra esta rutas de señalización

ALTERACIÓN EN GENES REGULADORES DE LA CROMATINA

Okosun J et al. Nature Genetics 2014 Pasqualucci L et al. Nature Genetics 2011

NFκB, BCR, JAK/STAT & REMODELACIÓN DE CROMATINA EN LINFOMAS B

Basso & Dalla-Favera, Nat Rev Immunol 2015

HETEROGENEIDAD Y EVOLUCIÓN CLONAL • La progresión tumoral es fundamentalmente un proceso de diversificación

mutacional/genética y selección (evolución “Darwiniana”) • El background genético de las neoplasias hematológicas se modifica durante la

evolución de la enfermedad y nuevas variaciones genéticas y epigenéticas aparecen continuamente en las células por medio de eventos mutacionales estocásticos y se seleccionan aquellos clones con ventaja proliferativa

• Esta inestabilidad genética da lugar a la coexistencia en la masa tumoral de subpoblaciones celulares genéticamente diferentes

• Estas poblaciones/mutaciones sub-clonales suponen un gran reto en la terapia del cáncer y los tumores “recaídos” desarrollan nuevas alteraciones genéticas

Quimioterapia/transformación/progresión

La heterogeneidad genética no es sólo una característica de los

tumores; es la fuerza que los dirige

EL MICROAMBIENTE EN LOS LINFOMAS B

Scott & Gascoyne. Nat Rev Cancer 2014

Los elementos del microambiente (MA) no son meros transeúntes o componentes de la respuesta inflamatoria antitumoral, sino que “permiten” y “participan” en la patogénesis tumoral

Compuesto por • Cls. del sistema inmune • Cls. estromales • Vasos sanguíneos • Matriz extracelular

Las características del MA vienen determinadas por • Alteraciones en las cls. malignas • Dependencia de las células de los

estímulos externos • Proliferación e invasión inmune • Respuesta antiinflamatoria

Crítico en LH (99%) y MALT, LF…

EL MICROAMBIENTE EN LOS LINFOMAS B Señales de supervivencia y proliferación del MA tumoral

Interacciones entre células del microambiente y las células tumorales que incrementan la supervivencia y crecimiento celular

Scott & Gascoyne, Nat Rev Cancer 2014

EL MICROAMBIENTE EN LOS LINFOMAS B

• Pérdida de moléculas de superficie que median la interacción con el sistema inmune

• Aumento en moléculas de superficie que reducen la capacidad antitumoral de sistema inmune

• Inducción de diferenciación de los linfos T CD4+ hacia Treg inmunosupresoras y recrutamiento de otras células inmunosupresoras TH2, macrófagos y reducción de CTLs

Interacciones entre células del MA tumoral y las células tumorales que permiten la “evasión inmune”

Scott & Gascoyne, Nat Rev Cancer 2014

TERAPIAS DIRIGIDAS CONTRA EL MICROAMBIENTE

La interacción entre las células tumorales y el microambiente afecta a la respuesta al tratamiento

Pero también abre nuevas puertas a nuevas terapias

• Tratamiento del H. Pylori en linfomas MALT

Los esfuerzos se dirigen a

• respuesta inmune antitumoral

• reducir el “soporte” del MA mediante bloqueo de moléculas de superficie

Scott & Gascoyne, Nat Rev Cancer 2014

En resumen… • Las neoplasias hematológicas tienen una clasificación compleja • Dicha clasificación (basada también en alteraciones genéticas) refleja la

“célula de origen” • Rutas de señalización críticas en linfomas B

BCR NFkB JAK/STAT TLR Genes implicados en remodelación de cromatina y metilación del ADN …

• Importancia del microambiente • La mejora del conocimiento y del diagnóstico mejora las opciones de

terapia • Heterogeneidad y evolución clonal y terapia

Gracias por vuestra atención!!