Microbiologa de Agua:Coliformes, coliformes
fecales y Escherichia coli
Laboratorio Microbiologa Aplicada
Spring 2007
Microbiologa de AguaQu es un coliforme?
Escherichia coli
Citrobacter freundaii
Klebsiella pneumoniae
Enterobacter aerogenes
Grupo de especies de varios gneros
Microbiologa de AguaQu es un coliforme?
Caractersticas en comnGram-negativosBacilos no formadores de esporasAlgunos son mtilesAnaerbos fermentativosFermentadores de lactosa produciendo gas y cido luego de 48 hrs a 32 o 35oC
Coliformes
Pueden estar presentes en:heces fecales de animales de sangre calientepjarostierra
Coliformes fecales
Incluye E. coli y algunos Klebsiella y Enterobacter spp.
Temperaturas de incubacin: 44.5 o 45oC por 24 hrs.
Tipos de E. coli
Cuatro tipos de E. colienterovirulentos(EEC)
E. colienterotoxignico(ETEC)E. colienteropatognico(EPEC)E. colienterohemorrgico(EHEC)E. coli enteroinvasivo(EIEC)
E. coli enterotoxignico (ETEC)
Causante de la diarrea del viajero
Dosis infecciosas altas
Vehculo: agua o alimento contaminado con aguas usadas
E. coli enteropatognico (EPEC)
Mecanismo de virulencia probablemente por la produccin de una verotoxina (Shiga-liketoxin)
Alimentos implicados son carne molida y pollo
E. coli enterohemorrgico(EHEC)
E. coli O157:H7 es habitante normal de los intestinos de todos animales incluyendo los humanosProduccin de una verotoxinaDosis tan bajas como 10 organismosNo fermenta sorbitol, MUG negative
E. coli enterohemorrgico(EHEC)- Alimentos implicados
E. coli enteroinvasivo (EIEC)
Parte de la flora intestinal normal de los humanos y otros primatesDosis infecciosa ~ 10 organismosProduce bacillary dysenterySe confunde con shigellosisVehculos: hamberguer, leche no pausterizada
Infecciones E. coli O157:H7
Taco Bell Dic 200671 personas afectadas
Septiembre-Octubre 2006199 personas afectadas;3 muertos
Mtodos para DetectarColiformes
MPNBasado en probabilidad estadisticaNO es contaje directoTcnica lquida
SlidoContaje directo en medio
Coliformes
MPN - Continuacin
El objetivo es diluir el organismoSeleccione la muestra msdiluda con todos los tubospositivos y los prximos dos
3,2,1 Nuestra combinacin
Determine el MPN utilizando la tabla de MPN
Coliformes
Se asume en MPN
Distribucin al azar de la bacteriaLos organismos no se aglutinanSi hay un microorganismopresente, crecerExisten las condicionesapropiadas para crecer
Ventajas sobre el uso de placasEl tamao de la muestra puedeser mayorMejor para nmeros bajos de organismosEl medio lquido es ms suave para el organismo porque no se expone al calorRequiere preparacin de mediocon antelacin
Medios - LSTLauryl Sulfate Tryptose BrothPrueba PRESUMPTIVA para coliformes
Se informa como presumptive coliforms/gIngredientes
Lauryl Sulfate Algunas bacterias no pueden crecer - SelectivoLactosa Produccin de gas Diferencialw/durham tuboNaCl Aumenta razn de reproduccinTryptona Fuente de Nitrgeno
Incube a 35oC por 48 horas
Medio - BGLBBrilliant Green Lactose BileIncube a 35oC por 48 horasProduccin de gas PositivoIngredientes
Oxgall forma de bilisBrilliant Green Dye Inhibe Gram +
Resultados son coliformesconfirmadosNo utilize BGLB directamente Altamente inhibitorio
Medio EMB AgarEosine Methylene Blue AgarPlacas ya servidasEstriado para aislar del MPNIngredientes - Diferencial
Peptona ProtenaLactosa Produccin de cidoTinte Eosine InhibitorioAzul de metileno Indicador de pH
E. coli and EnterobacerNucleated, dark centered, with or without a metallic green sheen CONFIRMED COLIFORMS
Coliformes
Coliformes
Mtodo Slido
VRBAViolet Red Bile Agar
Peptona Fuente de nitrgenoLactosa Produccin de cidoRojo neutral Indicador (6.8 rojo, 8.0 amarillo)Cristal Violeta Inhibe Gram +NaCl Aumenta razn de crecimientoSales biliares
VRBATpica Rojo-prpura, ColoniasElpticas, puede ser una zona de precipitacinSe recomiendan placas con 10-100 colonias Colonias msgrandesPonga una capa de agar luegoque la primera solidifiqueResultados PresumptivaColiformes
Coliformes
Microbiologa de Agua:Coliformes, coliformes fecales y Escherichia coliMicrobiologa de AguaQu es un coliforme?Microbiologa de AguaQu es un coliforme?ColiformesColiformes fecalesTipos de E. coliE. coli enterotoxignico (ETEC)E. coli enteropatognico (EPEC)E. coli enterohemorrgico (EHEC)E. coli enterohemorrgico (EHEC)- Alimentos implicadosE. coli enteroinvasivo (EIEC)Infecciones E. coli O157:H7Mtodos para Detectar ColiformesColiformesMPN - ContinuacinColiformesSe asume en MPNVentajas sobre el uso de placasMedios - LSTMedio - BGLBMedio EMB AgarColiformesColiformesMtodo SlidoVRBAColiformes
Top Related