Ciudad Victoria, Tamaulipas. 2013
Fisiología Celular
Manual de Prácticas
Autor: María Lorena Torres Rdz, MC-MVZ.
D-RS-05-18-03
Manual de Prácticas de Fisiología Veterinaria
María Lorena Torres Rodríguez Página 2 de 144
DIRECTORIO INSTITUCIONAL
Rector
M.E.S. JOSE MA. LEAL GUTIERREZ
Secretaria General
DRA. OLGA HERNANDEZ LIMON
Subsecretario Académico
ING. JOSE ANDRES SUAREZ FERNANDEZ
Subsecretario Administrativo
ING. MARCO ANTONIO DELGADO BARRIO
DIRECTORIO FMVZ
Director
DR. RIGOBERTO LOPEZ ZAVALA
Secretario Académico
MVZ SAID HERNANDEZ CONTRERAS
Secretario Administrativo
MVZ MIGUEL A. GUEVARA GUERRERO
D-RS-05-18-03
Manual de Prácticas de Fisiología Veterinaria
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INDICE
I. Introducción 10
I.i. Competencias profesionales a las que contribuye y su ubicación
dentro del mapa curricular 11
I.ii. Niveles de Desempeño. 12
II. Programa del sistema de prácticas 14
III. Prácticas Generales de Seguridad. Reglamentos 16
IV. Práctica No. 1.- Uso, cuidado y manejo del microscópio
1) Hoja de Identificación. 17
2) Número de alumnos por unidad de práctica 18
3) Introducción. 18
4) Propósito especifico de cada Práctica.- 19
5) Criterios de desempeño 19
6) Resultados esperados de acuerdo a los criterios de desempeño 20
7) Normas de seguridad específicas de la práctica. 20
a) Cuadro de disposición de desechos 20
8) Desarrollo de la Práctica 21
9) Sistema de evaluación.
a) Evidencia de desempeño 23
b) Evaluaciones intermedias 23
c) Método de asignación de calificaciones. 23
d) Cuestionario de evaluación 23
V. Práctica No. 2.- La célula y sus componentes
1) Hoja de Identificación. 24
2) Número de alumnos por unidad de práctica 25
3) Introducción. 25
4) Propósito especifico de cada Práctica.- 25
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5) Criterios de desempeño 26
6) Resultados esperados de acuerdo a los criterios de desempeño 26
7) Normas de seguridad específicas de la práctica. 26
a) Cuadro de disposición de desechos 26
8) Desarrollo de la Práctica 27
9) Sistema de evaluación.
a) Evidencia de desempeño 27
b) Evaluaciones intermedias 28
c) Método de asignación de calificaciones. 28
d) Cuestionario de evaluación 28
VI. Práctica No. 3.- Sistema internacional de unidades
1) Hoja de Identificación. 29
2) Número de alumnos por unidad de práctica 30
3) Introducción. 30
4) Propósito especifico de cada Práctica.- 36
5) Criterios de desempeño 36
6) Resultados esperados de acuerdo a los criterios de desempeño 36
7) Desarrollo de la Práctica 38
8) Sistema de evaluación.
a) Evidencia de desempeño 38
b) Evaluaciones intermedias 38
c) Método de asignación de calificaciones. 39
VII. Práctica No. 4.- Unidades de concentración de las soluciones
1) Hoja de Identificación. 40
2) Número de alumnos por unidad de práctica 41
3) Introducción. 41
4) Propósito especifico de cada Práctica.- 48
5) Criterios de desempeño 48
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6) Resultados esperados de acuerdo a los criterios de desempeño 49
7) Desarrollo de la Práctica 49
8) Sistema de evaluación.
a) Evidencia de desempeño 52
b) Evaluaciones intermedias 53
c) Método de asignación de calificaciones. 53
VIII. Práctica No. 5.- Propiedades coligativas de las soluciones
1) Hoja de Identificación. 54
2) Número de alumnos por unidad de práctica 55
3) Introducción. 55
4) Propósito especifico de cada Práctica.- 55
5) Criterios de desempeño 55
6) Resultados esperados de acuerdo a los criterios de desempeño 56
7) Normas de seguridad específicas de la práctica. 56
a) Cuadro de disposición de desechos 57
8) Desarrollo de la Práctica 57
9) Sistema de evaluación.
a) Evidencia de desempeño 58
b) Evaluaciones intermedias 58
c) Método de asignación de calificaciones. 58
d) Cuestionario de evaluación 59
IX. Práctica No. 6.- Osmosis
1) Hoja de Identificación. 60
2) Número de alumnos por unidad de práctica 61
3) Introducción. 61
4) Propósito especifico de cada Práctica.- 65
5) Criterios de desempeño 66
6) Resultados esperados de acuerdo a los criterios de desempeño 66
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7) Normas de seguridad específicas de la práctica. 67
a) Cuadro de disposición de desechos 67
8) Desarrollo de la Práctica 67
9) Sistema de evaluación.
a) Evidencia de desempeño 68
b) Evaluaciones intermedias 68
c) Método de asignación de calificaciones. 68
d) Cuestionario de evaluación 68
X. Práctica No. 7.- Difusión simple y los factores que afectan su velocidad
1) Hoja de Identificación. 76
2) Número de alumnos por unidad de práctica 77
3) Introducción. 77
4) Propósito especifico de cada Práctica.- 78
5) Criterios de desempeño 78
6) Resultados esperados de acuerdo a los criterios de desempeño 79
7) Normas de seguridad específicas de la práctica. 79
a) Cuadro de disposición de desechos 79
8) Desarrollo de la Práctica 79
9) Sistema de evaluación.
a) Evidencia de desempeño 80
b) Evaluaciones intermedias 80
c) Método de asignación de calificaciones. 80
d) Cuestionario de evaluación 81
XI. Práctica No. 8.- Potencial de membrana en reposo
1) Hoja de Identificación. 84
2) Número de alumnos por unidad de práctica 85
3) Introducción. 85
4) Propósito especifico de cada Práctica.- 88
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5) Criterios de desempeño 88
6) Resultados esperados de acuerdo a los criterios de desempeño 89
7) Normas de seguridad específicas de la práctica. 89
8) Desarrollo de la Práctica 89
9) Sistema de evaluación.
a) Evidencia de desempeño 94
b) Evaluaciones intermedias 94
c) Método de asignación de calificaciones. 94
d) Cuestionario de evaluación 94
XII. Práctica No. 9.- Potencial de acción
1) Hoja de Identificación. 95
2) Número de alumnos por unidad de práctica 96
3) Introducción. 96
4) Propósito especifico de cada Práctica.- 98
5) Criterios de desempeño 98
6) Resultados esperados de acuerdo a los criterios de desempeño 99
7) Normas de seguridad específicas de la práctica. 99
8) Desarrollo de la Práctica 99
9) Sistema de evaluación.
a) Evidencia de desempeño 106
b) Evaluaciones intermedias 106
c) Método de asignación de calificaciones. 106
d) Cuestionario de evaluación 106
XIII. Práctica No. 10.- Sinápsis química
1) Hoja de Identificación. 107
2) Número de alumnos por unidad de práctica 108
3) Introducción. 108
4) Propósito especifico de cada Práctica.- 111
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5) Criterios de desempeño 111
6) Resultados esperados de acuerdo a los criterios de desempeño 111
7) Normas de seguridad específicas de la práctica. 112
8) Desarrollo de la Práctica 112
9) Sistema de evaluación.
a) Evidencia de desempeño 122
b) Evaluaciones intermedias 122
c) Método de asignación de calificaciones. 122
d) Cuestionario de evaluación 122
XIV. Práctica No. 11.- Contracción muscular
1) Hoja de Identificación. 123
2) Número de alumnos por unidad de práctica 124
3) Introducción. 124
4) Propósito especifico de cada Práctica.- 126
5) Criterios de desempeño 127
6) Resultados esperados de acuerdo a los criterios de desempeño 127
7) Normas de seguridad específicas de la práctica. 128
a) Cuadro de disposición de desechos 128
8) Desarrollo de la Práctica 128
9) Sistema de evaluación.
a) Evidencia de desempeño 131
b) Evaluaciones intermedias 131
c) Método de asignación de calificaciones. 132
d) Cuestionario de evaluación 132
XV. Práctica No. 12.- Mitosis y Meiosis
1) Hoja de Identificación. 135
2) Número de alumnos por unidad de práctica 136
3) Introducción. 136
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4) Propósito especifico de cada Práctica.- 136
5) Criterios de desempeño 138
6) Resultados esperados de acuerdo a los criterios de desempeño 138
7) Normas de seguridad específicas de la práctica. 138
a) Cuadro de disposición de desechos 138
8) Desarrollo de la Práctica 138
9) Sistema de evaluación.
a) Evidencia de desempeño 139
b) Evaluaciones intermedias 140
c) Método de asignación de calificaciones. 140
d) Cuestionario de evaluación 140
XVI. Bibliografía. 142
XVII. Anexo. Formatos para portafolios de evidencias
1) Lista de cotejo . 143
2) Formato de indicaciones para reporte escrito 144
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Introducción
Los organismos vivos que hay en nuestro planeta forman un conjunto muy amplio y
variado, que va desde los virus, bacterias y protozoos a las plantas con flores, los
animales invertebrados y vertebrados. Son millones de especies adaptados a todos los
nichos posibles existentes en la superficie de la Tierra y los océanos. A pesar de esta
inmensa diversidad, todas las formas de vida que conocemos comparten principios de
funcionamiento similares. La fisiología celular tiene como objetivo estudiar los procesos
físicos y químicos que tienen lugar en las células, para comprender los procesos en
tejidos y órganos de los animales con el propósito de entender su función integral.
El objetivo de este manual de prácticas es que los alumnos valoren la importancia del
estudio de la Fisiología Celular en la comprensión de los cambios funcionales que se
realizan en las células animales, con la finalidad de conservar las funciones vitales de los
organismos.
Algunas de las prácticas aquí descritas son originales y otras son clásicas de fisiología,
que se adecuaron para realizarse con el equipo disponible, mismas que pueden
modificarse para realizarse con otro equipo de laboratorio. En este manual también se
introducen algunas prácticas basadas en programas computacionales, que gracias a los
avances tecnológicos, permiten demostrar fenómenos fisiológicos en una forma sencilla y
didáctica. Todo esto fundamentado en facilitar el aprendizaje de los fenómenos
fisiológicos a nivel celular.
Deseo que este manual siga siendo algo vivo, de manera que podamos, en el futuro
añadir algunos capítulos, o mejorar los ya existentes. Todo ello sería sinónimo de
dinamismo y espero que a ello me ayuden los propios alumnos de Fisiología, con sus
dudas y sugerencias lo que redundaría en una obra de mayor calidad docente.
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Competencias Profesionales a las que contribuye, y su ubicación
dentro del mapa curricular vigente.
La materia la encontrarás dentro del programa académica de la Facultad en el primer
semestre. (tabla1)
Tabla 1. Secuencia curricular del programa académico de la Licenciatura: Médico
Veterinario Zootecnista.
PRIMER PERIODO
SEGUNDO PERIODO
TERCER PERIODO
CUARTO PERIODO
QUINTO PERIODO
BIOQUÍMICA I M.CA12.020.06-06
FISIOLOGÍA CELULAR M.CA12.037.05-05
EMBRIOLOGÍA E HISTOLOGÍA VETERINARIA I M.CA12.018.07-07
ANATOMÍA DESCRIPTIVA I M.CA12.016.07-07
MATEMÁTICAS BÁSICAS M.EN07-080.04-04
INGLÉS INICIAL MEDIO M.EH47.033.04-04
INTRODUCCIÓN A LAS TECNOLOGÍAS DE LA INFORMACIÓN M.IT18.259.02-02
MEDIO AMBIENTE Y DESARROLLO SUSTENTABLE M.EN02.083.03-03
BIOQUÍMICA II M.CA12.021.06-06
FISIOLOGÍA VETERINARIA M.CA12.011.06-06
EMBRIOLOGÍA E HISTOLOGÍA VETERINARIA II M.CA12.019.06-06
ANATOMÍA DESCRIPTIVA II M.CA12.017.06-06
DESARROLLO DE HABILIDADES PARA APRENDER M.EH43.008.04-04
INGLÉS INICIAL AVANZADO M.EH47.034.04-04
INFORMÁTICA M.SA41.254.04-04
REDACCIÓN AVANZADA M.EH43.044.04-04
PATOLOGÍA I M.CS32.153.09-09
BACTERIOLOGÍA I
M.CS32.191.09-09
PARASITOLOGÍA I
M.EN02.101.09-09
INMUNOLOGÍA M.CA12.027.07-07
INTRODUCCION AL PENSAMIENTO CIENTÍFICO M.EH44.014.03-03
TAMAULIPAS Y LOS RETOS DEL DESARROLLO M.SA50.051.03-03
CULTURA Y GLOBALIZACIÓN M.EH43.106.02-02
PATOLOGÍA II M.CS32.080.08-08
BACTERIOLOGÍA II
M.CS32.136.08-08
PARASITOLOGÍA II
M.EN02.102.08-08
VIROLOGÍA M.CS32.110.06-06
DIAGNÓSTICO CLÍNICO EN MEDICINA VETERINARIA I M.CA12.008.09-09
MEDICINA PREVENTIVA I M.CS32.063.06-06
BIOESTADÍSTICA M.EN07.008.04-04
NORMATIVIDAD Y REGULACIÓN SANITARIA M.CS30.026.05-05
MEDICINA PREVENTIVA II M.CS32.064.06-06
PATOLOGÍA CLÍNICA M.CA12.035.09-09
FARMACOLOGÍA M.CS31.010.09-09
DIAGNÓSTICO CLÍNICO EN MEDICINA VETERINARIA II M.CA12.009.07-07
NUTRICIÓN I M.CA14.048.08-08
OPTATIVA I OP1.5190.05-05
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Niveles de Desempeño. La Materia te hará competente a desarrollar el Nivel 2
(tabla 2), debido a que deberás realizar una serie de actividades, las cuales no son
rutinarias pero te ayudarán a identificar problemas y resolverlos cuando se apliquen
SEXTO PERIODO SEPTIMO PERIODO
OCTAVO PERIODO
NOVENO PERIODO
DECIMO PERIODO
INOCUIDAD Y CALIDAD DE LOS ALIMENTOS M.CA11.123.05-05
GENÉTICA M.EN02.059.04-04
FARMACOLOGÍA Y TOXICOLOGÍA M.CS31.012.09-09
CLÍNICA DE BOVINOS M.CA12.004.07-07
OPTATIVA II OP2.5190.04-04
TÉCNICA QUIRÚRGICA I M.CA12.032.08-08
NUTRICIÓN II M.CA14.049.08-08
MANEJO DE RECURSOS NATURALES M.CA14.050.05-05
METODOLOGIA DE LA INVESTIGACION M.EH51.026.04-04
REPRODUCCIÓN I
M.CA14.039.09-09
CLÍNICA Y ZOOTECNIA DE PEQUEÑAS ESPECIES M.CA12.007.07-07
ZOOTECNIA DE AVES M.CA14.044.07-07
ZOOTECNIA DE CERDOS M.CA14.045.07-07
OPTATIVA III OP3.5190.04-04
PRODUCCIÓN DE FORRAJES M.CA14.036.06-06
TÉCNICA QUIRÚRGICA II M.CA12.033.08-08
REPRODUCCIÓN II
M.CA14.040.09-09
TERAPÉUTICA QUIRÚRGICA M.CA12.034.07-07
CLINICA DE AVES M.CA12.003.08-08
CLINICA DE CERDOS M.CA12.005.08-08
MUESTREO Y DISEÑO EXPERIMENTAL M.EN07.103.04-04
SERVICIO SOCIAL M.SS.004.482-10
OPTATIVA IV OP4.5190.08-08
FUNDAMENTOS Y APLICACIÓN DE LA ADMINISTRACION AGROPECUARIA M.SA35.364.06-06
BOVINOS PRODUCTORES DE CARNE M.CA14.020.09-09
BOVINOS PRODUCTORES DE LECHE M.CA14.021.09-09
CLÍNICA Y ZOOTECNIA DE EQUINOS M.CA14.022.07-07
CLÍNICA Y ZOOTECNIA DE OVINOS Y CAPRINOS M.CA12.006.07-07
ACUACULTURA DE PECES Y CRUSTACEOS M.CA14.016.06-06
SEMINARIO DE TESIS M.EH51.098.04-04
OPTATIVA V OP5.5190.04-04
PROFESIÓN Y VALORES M.EH44.023.02-02
ADMINISTRACION Y ECONOMIA AGROPECUARIA M.SA35.367.06-06
INDUSTRIALIZACIÓN DE LA CARNE Y LECHE M.SA35.570.07-07
OPTATIVA VI OP6.5190.06-06
INTERNADO (PRÁCTICAS PREPROFESIONALES) M.CA12.013.15-15
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para identificar procesos celulares, que afectan los procesos fisiológicos que suceden
en los animales domésticos.
Tabla 2. Niveles de desempeño
Nivel 1.- Se realizan funciones rutinarias de baja complejidad. Se reciben instrucciones. Se requiere baja
autonomía.
Nivel 2.- Se realizan un conjunto significativo de actividades de trabajo, variadas y aplicadas en diversos
contextos. Algunas actividades son complejas y no rutinarias. Presenta un bajo grado de
responsabilidad y autonomía en las decisiones. A menudo requiere colaboración con otros y trabajo
en equipo.
Nivel 3.- Se requiere un importante nivel de toma de decisiones. Tiene bajo su responsabilidad recurso
materiales con los que opera su área. Así como control de recursos financieros para adquisición de
insumos, ó responsabilidades comparables.
Nivel 4.- Se desarrollan un conjunto de actividades de naturaleza diversa, en las que se tiene que mostrar
creatividad y recursos para conciliar intereses. Se debe tener habilidad para motivar y dirigir grupos
de trabajo.
Nivel 5.- Se desarrollan un conjunto de actividades de naturaleza diversa, en las que se tiene que mostrar un
alto nivel de creatividad, así como buscar y lograr la cooperación entre grupos e individuos que
participan en la implantación de la solución a un problema de magnitud institucional.
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Programa de prácticas de fisiología celular
Unidad Sesión Nombre de la
práctica
Objetivo de la
práctica
Ámbito de
desarrollo
Programación Nivel de
desempeño Sem Durac
1
1
Uso, cuidado y
manejo del
microscopio
Familiarizarse con el
uso, cuidado y
manejo del
microscopio
Laboratorio
1
1 h 1
La célula y sus
componentes
Observar la célula
procariota y
eucariota así como
reconocer algunos
organelos celulares.
Laboratorio 1h 2
2
Sistema
internacional de
unidades
Aplicar de manera
correcta las
unidades aplicables
en medicina.
Laboratorio 1h 2
2
3
Unidades de
concentración
de las
soluciones
Determinar la
concentración de las
soluciones utilizadas
más frecuentemente
en fisiología.
Laboratorio 1h 2
4
Propiedades
coligativas de
las soluciones
Comprender las
propiedades de las
soluciones
aplicables al
citoplasma.
Laboratorio 2 h 2
3 5
Osmosis
Comprender el
movimiento de agua
a través de las
membranas.
Laboratorio 2 h
2
Difusión simple
y los factores
que afectan su
velocidad
Comprender el movimiento de soluto a través de las membranas y los factores que intervienen en este proceso.
2
9 6
Potencial de
membrana en
reposo
Conocer el mecanismo de comunicación celular de células excitables.
Centro de computo
2 h
2
Potencial de
acción 2
Sinapsis
químicas
Comprender el fenómeno de comunicación celular
2
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(neurotransmisores)
7 Contracción
muscular
Comprender el fenómeno de comunicación y movimiento celular (músculos).
Laboratorio 2 h
2
2
10 8 Mitosis y
meiosis celular
Comprender los procesos de división como parte del ciclo celular de las células eucariotas.
Laboratorio 2 h 2
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Prácticas Generales de Seguridad. Reglamentos y
procedimientos generales
1. El representante del equipo, recibirá al inicio de la práctica el material con el que
trabajarán, y este a su vez entregará su credencial y un vale respaldando el material al
encargado del laboratorio.
2. Todo material que se destruya por negligencia de un alumno deberá cubrirse el
importe por el equipo en un lapso no mayor de 10 días hábiles, a partir de la fecha del
incidente.
3. Al término de la sesión el representante del equipo deberá entregar el material que se
utilizó, el cual deberá estar lavado, así como su área de trabajo limpia. En este
momento se le devolverá la credencial.
4. El ayudante de laboratorio dará constancia de la realización de la práctica, por medio
de su firma.
5. Queda ESTRICTAMENTE PROHIBIDO entrar a realizar la práctica SIN BATA.
6. En las prácticas que se requiera el uso de sangre, si la muestra proporcionada es de
sangre humana, deben utilizarse guantes desechables y tomarse todas las
precauciones para el manejo adecuado de muestras de sangre.
7. Es recomendable lavarse siempre las manos al término de un procedimiento y antes
de abandonar el laboratorio.
8. Prohibido ingerir bebidas y alimentos en el laboratorio.
9. No jugar durante la realización de la práctica para evitar accidentes.
TODO ALUMNO QUE NO GUARDE LA DISCIPLINA REQUERIDA EN EL LABORATORIO, SE
LE SUSPENDERÁ POR EL RESTO DEL SEMESTRE, QUEDANDO SIN VALIDEZ EL PUNTAJE
CORRESPONDIENTE A LAS PRÁCTICAS DE LABORATORIO.
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Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia
“Dr. Norberto Treviño Zapata”
María Lorena Torres Rdz, MC-MVZ.
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Número de alumnos por unidad de práctica. La unidad de práctica esta
representada por el equipo de laboratorio, que deberá ser de 5 integrantes; determinando
un responsable para solicitar y entregar el material requerido para la práctica así como el
área de trabajo limpia al finalizar la práctica.
Introducción:
El microscopio es un instrumento especialmente diseñado para el estudio de objetos tan
pequeños que no pueden ser examinados a simple vista. En el trabajo con los seres vivos
encontraremos diferentes tipos de microscopios con diversos aumentos, desde el
microscopio estereoscópico de disección que aumenta de 4 a 40 veces, hasta el
microscopio electrónico que puede aumentar las imágenes más de 100 000 veces. En el
laboratorio generalmente trabajamos con los microscopios compuestos de tipo estudiantil
que aumentan de 100 a 1 500 veces. El microscopio compuesto a diferencia del simple,
tiene dos sistemas de lentes, uno conocido como sistema ocular que visualmente va
montado en un tubo o cuerpo del microscopio y otros llamados objetivos (10X, 40X, 100X)
colocados en el revólver móvil, la imagen que se observa tiene un aumento igual al
producto de la multiplicación del aumento de los sistemas de lentes. Un microscopio se
divide en:
Sistema óptico
Sistema mecánico
Sistema de iluminación
Sistema óptico: Puede ser de un solo ocular o binocular, compuesto por lentes que
multiplican el aumento. Los objetivos que se encuentran montados en el revólver (por lo
general son de 3 a 4) están compuestos por lentes de diferentes aumentos: 10X, seco
débil; 40X, seco fuerte y 100X, lente de inmersión.
Sistema mecánico: Formado por: la base o pie, que da soporte al microscopio; la
columna, une a la platina con la base y sostiene al condensador y diafragma; la platina,
sostiene las preparaciones con el espécimen colocado sobre una perforación que tiene al
centro y que deja pasar la luz que viene del condensador.
pinzas, sostienen la preparación con firmeza sobre la platina;
el brazo, une al tubo con la platina;
el tubo, proporciona sostén a los oculares y a los objetivos y mantiene a unos y
otros separados por la distancia de trabajo correcta.
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el tornillo de cremallera o de avance rápido, mueve el tubo hacia arriba o hacia
abajo, acercando rápidamente el objetivo a la distancia de trabajo aproximada con
respecto al espécimen; el tornillo micrométrico o de ajuste fino, permite enfocar con
precisión moviendo muy lentamente el tubo o la platina hacia arriba o hacia abajo.
Sistema de iluminación: Está compuesto por un espejo o una fuente luminosa,
proporcionan la luz que habrá de atravesar el diafragma, la preparación y el sistema
óptico;
un condensador, que concentra el haz luminoso en la preparación
diafragma, regula la cantidad de luz que va a pasar a través de la preparación.
El microscopio es una herramienta fundamental en el laboratorio por lo que es importante
que conozcan sus partes, para un correcto uso y manejo del mismo.
Propósito específico de la práctica:
Identificarás las partes componentes del microscopio compuesto para su manejo y
correcta manipulación, sin causar daño a las partes integrales del mismo, durante su
manipulación o transporte en el laboratorio.
Utilizarás el microscopio compuesto para familiarizarte con la función de cada una de
sus partes y de esta manera manipularlo de manera adecuada.
Realizarás preparaciones frescas para observar bajo el microscopio y familiarizarte
con el uso del microscopio, en la observación de estructuras microscópicas en el
laboratorio.
Criterios de desempeño:
Serás competente para manipular el microscopio y utilizarlo como herramienta diagnóstica
cuando, leas la práctica, obtengas información acerca de las partes integrantes del
microscopio y la función de cada una de ellas y practiques el correcto uso y manipulación
del microscopio.
Serás competente para elaborar preparaciones frescas para observar al microscopio
cuando, revises la información y practiques la realización de las preparaciones frescas
para observar al microscopio.
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Resultados esperados en relación a los Criterios de desempeño
específicos de la práctica.
Expondras la información consultada acerca del tema con tus compañeros de equipo y les
demostrarás la utilización del microscopio, mediante la observación de preparaciones
frescas.
Contestarás el cuestionario de la práctica antes de abandonar la sesión de laboratorio.
Entregarás un reporte de la práctica con revisión de información acerca del microscopio y
su utilización, así como de la realización de preparaciones frescas.
Medidas de seguridad:
o Cuidado del microscopio
1. El microscopio es un instrumento caro que debe cuidarse esmeradamente.
2. Siempre lo debes sujetar por el brazo y colocar en su base la otra mano.
3. Nunca debe ponerse en la orilla de la mesa.
4. No debe inclinarse, ya que el equilibrio del instrumento no es el adecuado en esta
posición y puede caerse fácilmente.
5. Para limpiar las lentes solo usa el papel adecuado, así evitarás ralladuras.
6. Al terminar el trabajo coloca nuevamente el objetivo de menor aumento en línea recta
con el tubo y sube éste a 1 cm. de la platina.
7. Ve que las pinzas no queden hacia afuera de la platina.
8. Colócalo nuevamente en su lugar.
9. Lava los porta y cubreobjetos.
o Es recomendable que te laves siempre las manos al término de un procedimiento y
antes de abandonar el laboratorio.
o No juegues durante la realización de la práctica para evitar accidentes.
a) Cuadro de disposición de desechos
Tipo de desechos Como descartarlos Tipo de contenedor
Material biológico Depositar en contenedor rojo
Soluciones y reactivos Al desagüe abriendo la llave para diluir
Material punzocortante Depositar en contenedor amarillo
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Desarrollo de la práctica:
A. Colocación del microscopio
1. El microscopio deberás tomarlo utilizando las dos manos: tómalo del brazo con una
mano y coloca la otra bajo la base, deposita el microscopio sobre la mesa con cuidado,
con el brazo hacia el observador y la platina al lado opuesto.
2. Localiza e identifica en su microscopio las partes que lo conforman.
3. Aprende los nombres de todas las partes del microscopio para que te sea fácil
identificarlas al referirnos a ellas más adelante.
4. Gira el revolver para que el objetivo de menor aumento (el más corto) quede en línea
recta con el tubo. Tiene un tope que deberás sentir al llegar al lugar debido.
5. Mirando a través del ocular, ajusta la intensidad de la luz, si es necesario abre o cierra
el diafragma.
6. Si el ocular o el objetivo están borrosos o con polvo, debes limpiarlos con el papel
adecuado. No uses ningún otro medio porque se rayan los lentes.
B. Cómo preparar el material
El material que va a ser estudiado al microscopio se coloca en un portaobjetos ordinario,
se cubre con un cubreobjetos de plástico o vidrio, ambos deben estar escrupulosamente
limpios, Los portaobjetos se lavan en agua y si se desea, con alcohol de 96º, se secan
evitando dejar las huellas de los dedos, los cubreobjetos son muy frágiles; se deben
limpiar ambas caras al mismo tiempo con un lienzo muy suave y tomarlos solo por los
bordes.
Corta un fragmento de periódico de 1 cm. de lado en donde se encuentre la letra “e”.
Coloca el papel en el portaobjetos y con el gotero adiciona sobre él una gota de agua.
Cuando esté húmedo coloca sobre él un cubreobjetos, evitando que se formen burbujas.
Para lograrlo lo mejor es tomar el cubreobjetos con los dedos haciendo un ángulo de 45º
con respecto al portaobjetos y con unas pinzas curvas dejarlo caer lentamente. Las
burbujas pequeñas pueden extraerse presionando ligeramente el cubreobjetos con las
pinzas o mejor con la goma del lápiz.Esta es la forma de hacer una preparación en fresco.
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C. Cómo enfocar el microscopio
1. Coloca la preparación que has hecho en la platina del microscopio, de manera que el
papel quede en la abertura de la propia platina.
2. Mirando el microscopio lateralmente (no por el ocular), usa el tornillo de cremallera para
bajar el tubo hasta que el objetivo de menor aumento casi toque la preparación, o hasta
que el tubo llegue al tope. Nunca bajes el tubo sin mirar lateralmente el objetivo, porque
éste puede llegar hasta la preparación y chocar con ella, con lo que se puede rayar la
lente frontal del objetivo.
3. Ve a través de los oculares (con ambos ojos abiertos), mueve el tornillo de cremallera
de tal manera que el tubo sólo se mueva hacia arriba, hasta que veas con claridad la letra
“e”. Con el tornillo micrométrico afina el enfoque (1) ¿Cuál es la posición de la letra “e”?,
mueve la preparación hacia la izquierda (2) ¿Hacia dónde se mueve la letra?, mueve la
preparación hacia enfrente (3) ¿Hacia dónde se mueve la letra?
4. Haz otra preparación con un pedacito de tela de nylon o de otro material, en la misma
forma antes indicada, y enfócala siguiendo las mismas reglas.
5. Obsérvala con mayor aumento como sigue: mueve la preparación de modo que el
objeto quede en el centro del campo, es necesario levantar el tubo y hacer girar el
revólver para hacer entrar el objetivo de mayor aumento, que es más largo.
6. Repite los pasos 2 y 3 del enfoque, asegurándote de que el objetivo no toca la
preparación. Nunca bajes el tubo con el tornillo de cremallera sin verlo lateralmente ya
que puede chocar con la preparación y estropearla tanto a ella como al objetivo.
7. El cambio de un aumento a otro, (4) ¿cambia la posición de la letra o de la imagen de
que se trate?; (5) ¿muestra el campo un área mayor o menor del objeto?; (6) la
luminosidad del campo, ¿es mayor o menor que con el aumento bajo? Ajusta el diafragma
para restablecer una buena iluminación.
8. La tela que estas observando es más gruesa que el papel, por lo tanto, tendrás que
mover el tornillo micrométrico para ver las fibras que están a diferentes niveles. En esta
forma tendrás una imagen tridimensional de la tela. Si el tiempo lo permite puedes ver la
lana, el algodón y el pelo humano.
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Evidencias de desempeño:
La correcta ejecución de los procedimientos de laboratorio, y la participación del
alumno durante el desarrollo de la misma, se dará constancia con el sello y la firma
del asistente del laboratorio en la práctica.
Revisión del cuestionario de la práctica al finalizar la sesión de laboratorio.
Comprobar la adquisición de habilidades básicas, según formato de documento
(anexo 1).
Entrega del reporte de práctica según formato de documento (anexo 2), el día
posterior a la sesión de laboratorio.
Evaluaciones intermedias con recomendaciones:
2 días posteriores a la realización de la práctica se revisará tu reporte y se harán los
señalamientos necesarios, para su evaluación final en los días asignados en la carta
descriptiva de la materia.
Método de asignación de calificaciones:
Asistencia a práctica 5 %
Realización de la práctica 50 %
Reporte y cuestionario 45 %
Nota: Sin asistencia a la sesión de laboratorio el reporte carece de validez
Cuestionario de evaluación:
Las preguntas las puedes localizar dispersas en el texto.
Realiza un esquema del microscopio y señala todas sus partes.
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Número de alumnos por unidad de práctica. La unidad de práctica esta
representada por el equipo de laboratorio, que deberá ser de 5 integrantes; determinando
un responsable para solicitar y entregar el material requerido para la práctica así como el
área de trabajo limpia al finalizar la práctica.
Introducción:
La célula, unidad básica de la vida, se caracteriza por una compleja estructura en la que
tienen lugar las reacciones bioquímicas fundamentales para los procesos vitales y la
sustentación de su propia existencia. Las investigaciones realizadas por los científicos a
través de los siglos permitieron desarrollar una "teoría celular" que ha resultado
corroborada por las evidencias experimentales.
Todo ser vivo está construido de la misma manera y por las mismas unidades
fundamentales, las células, existen seres vivos formados por una única célula (bacteria y
protozoarios) y otros por múltiples células (animales y plantas). Las células se clasifican
en procariotas y eucariotas. Las células procariotas son más pequeñas (como regla
general), carecen de las divisiones y la complejidad interna de las células de eucariotas.
No importa que tipo de célula consideramos, todas tienen ciertas características en
común: membrana celular, el ADN, el citoplasma y los ribosomas.
Las formas de las células varían bastante de acuerdo al tipo, tal como las neuronas, son
largas en relación a su ancho y existen otras, tal como los eritrocitos (las células rojas de
la sangre) que son equidimensionales. Algunas células están metidas en una pared rígida,
que forza su forma, mientras que otras tienen una membrana celular flexible y ninguna
pared rígida. El tamaño de las células esta relacionado también a sus funciones, los
huevos son células muy grandes, es la célula más grande producida por un organismo.
Para observar las células es necesario seguir una serie de pasos encaminados
concretamente a salvar dos dificultades: obtener la muestra de células y teñirlas para
poder observar sus distintas estructuras. Las tinciones más frecuentes se hacen con azul
de metileno o con tintura de yodo.
Propósitos específicos de la práctica:
Realizarás preparaciones frescas de diferente origen para identificar algunos
orgánulos que pueden ser observados con el microscopio óptico, tanto en células
animales como en vegetales.
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Identificarás las células procariotas y eucariotas para diferenciarlas al observarlas
en el microscopio óptico a partir de preparaciones hechas en el laboratorio.
Identificarás las células animales y vegetales para diferenciarlas al observar las
preparaciones en el microscopio óptico.
Criterios de desempeño:
Serás competente para identificar y diferenciar las células procariotas y eucariotas, así
como las animales y vegetales cuando, leas la práctica, obtengas información acerca de
las características de los diferentes tipos celulares y utilices el microscopio como
herramienta para identificación.
Serás competente para elaborar preparaciones frescas para observar al microscopio
cuando, revises la información y practiques la realización de las preparaciones frescas
para observar al microscopio.
Resultados esperados en relación a los Criterios de desempeño específicos de la
práctica.
Exponer la información con sus compañeros y demostrar la utilización del microscopio,
mediante la observación de preparaciones frescas.
Realizar diferentes preparaciones para observar los diferentes tipos celulares.
Contestar el cuestionario de la práctica antes de abandonar la sesión de laboratorio.
Entregar reporte de práctica con revisión de información acerca del microscopio y su
utilización, así como de las preparaciones frescas.
Medidas de seguridad:
o Cuidado del microscopio
1. El microscopio es un instrumento caro que debe cuidarse esmeradamente.
2. Siempre se debe tomar por el brazo y colocar en su base la otra mano.
3. Nunca debe ponerse en la orilla de la mesa.
4. No debe inclinarse, ya que el equilibrio del instrumento no es el adecuado en esta
posición y puede caerse fácilmente.
5. Para limpiar las lentes solo use el papel adecuado, así evitará ralladuras.
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6. Al terminar el trabajo coloque nuevamente el objetivo de menor aumento en línea
recta con el tubo y suba éste a 1 cm. de la platina.
7. Vea que las pinzas no queden hacia afuera de la platina.
8. Colóquelo nuevamente en su lugar.
9. Lave los porta y cubreobjetos.
o Es recomendable lavarse siempre las manos al término de un procedimiento y antes
de abandonar el laboratorio.
o No jugar durante la realización de la práctica para evitar accidentes.
a) Cuadro de disposición de desechos
Tipo de desechos Como descartarlos Tipo de contenedor
Material biológico Depositar en contenedor rojo
Soluciones y reactivos Al desagüe abriendo la llave para diluir
Material punzocortante Depositar en contenedor amarillo
Desarrollo de la práctica:
Células de la mucosa bucal
1. Con el hisopo raspar la mucosa oral (interior de la mejilla).
2. Colocar la muestra en un portaobjetos.
3. Añadir una gota de agua y una de azul de metileno.
4. Colocar el cubre y observar al microscopio primero con seco débil y en seguida con
seco fuerte.
Células de epidermis de cebolla
1. Extraer la epidermis (capa fina) de una hoja de la cebolla con ayuda de la aguja.
2. Extender en el portaobjetos
3. Añadir el colorante (lugol) y dejar reposar durante 5 minutos añadiendo más colorante
si se evapora.
4. Lavar la preparación procurando no arrastrar la epidermis.
5. Colocar el cubre y observar.
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Evidencias de desempeño:
La correcta ejecución de los procedimientos de laboratorio, y la participación del
alumno durante el desarrollo de la misma, se dará constancia con el sello y la firma
del asistente del laboratorio en la práctica.
Revisión del cuestionario de la práctica al finalizar la sesión de laboratorio.
Comprobar la adquisición de habilidades básicas, según formato de documento
(anexo 1).
Entrega del reporte de práctica según formato de documento (anexo 2), al día
posterior a la sesión de laboratorio.
Evaluaciones intermedias con recomendaciones:
2 días posteriores a la realización de la práctica se revisará su reporte y se harán los
señalamientos necesarios, para su evaluación final en los días asignados en la carta
descriptiva de la materia.
Método de asignación de calificaciones:
Asistencia a práctica 5 %
Realización de la práctica 50 %
Reporte y cuestionario 45 %
Nota: Sin asistencia a la sesión de laboratorio el reporte carece de validez
Cuestionario de evaluación:
1. Mencione los orgánulos celulares y su función .
2. ¿Cuales son las estructuras más fáciles de observar en las preparaciones que se
observaron en la sesión?
3. ¿Cómo esta constituida la membrana celular y cuales son sus componentes?
4. ¿Cómo esta constituida la pared celular y cuales son sus componentes?
5. ¿Cuál es la diferencia estructural y funcional entre la membrana y la pared celular?
6. Realice un dibujo de la célula eucariota animal y de la célula procariota y mencione
todos sus componentes.
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Número de alumnos por unidad de práctica. La unidad de práctica esta
representada por el equipo de laboratorio, que deberá ser de 5 integrantes; determinando
un responsable para solicitar y entregar el material requerido para la práctica así como el
área de trabajo limpia al finalizar la práctica.
Introducción
La fisiología es una ciencia cuantitativa. Los fisiólogos miden constantemente los cambios
que ocurren en los organismos vivos bajo determinadas situaciones con la finalidad de
comprender la base de su funcionamiento. Por lo tanto, en fisiología, al igual que en otras
ciencias cuantitativas, se requiere un sistema de medición estandarizado.
Medir es comparar con un patrón, el problema se presenta cuando se utilizan diferentes
patrones de comparación. A principios del siglo XIII, la confusión con los diferentes
sistemas de medición existentes era enorme. Como ejemplo se puede mencionar que
mientras en algunos países para medir peso se utilizaba el kilogramo, en otros se utilizaba
la libra: pero no solo eso, sino que existían diferentes definiciones para la libra en el reino
unido, París y Berlín, y se carecía de un patrón único. Esto generaba problemas no solo
en el mundo científico, sino también en el comercio, por lo que en 1790 se formo una
comisión de la academia de ciencias de Francia conformada por Lavoisier, Coulomb,
Laplace y Tayllerand, lo mejor de la comunidad científica francesa en ese momento. Esta
comisión logro la aprobación de un decreto que la autorizo a crear medidas con sus
múltiplos y submúltiplos. Sus resultados iníciales se modificaron con el paso de los años,
pero su importancia radica en que dio inicio al sistema métrico que culmino en el actual
Sistema Internacional de Unidades (Systeme International d” Unités), conocido en su
forma abreviada como SI. La firma por parte de 17 países en 1875 en Paris, Francia, del
tratado de Metro y constitución de la conferencia General de Pesos y Medidas fue
consecuencia de los trabajos de esta comisión. A este tratado, que firman en la actualidad
51 países, se adhirió a México en 1890. los avances científicos y tecnológicos hacen
necesaria la revisión periódica del SI, por lo que los integrantes de la Conferencia General
de Pesos y Medidas se reúnen cada cuatro años: México esta representado en estas
reuniones por el Centro Nacional de Metrología, que es el laboratorio nacional de
referencia en mediciones en este país; la ley federal sobre Metrología y Normalización
establece que el sistema internacional de unidades es el sistema de medición oficial en
México.
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Como resultado de las diferentes resoluciones emitidas por la Conferencia General de
Pesos y Medidas, actualmente el sistema internacional de unidades se constituye por
siete unidades básicas y 22 unidades derivadas.
Unidades básicas: estas son siete unidades independientes una de la otra, la última que
se agrego fue el mol, en 1971 (cuadro 3.1)
Como se menciono antes, la medición no es otra cosa que la comparación con un patrón;
la definición de los patrones de las unidades básicas se describen a continuación. Es
importante señalar que algunos de estos patrones han sido reemplazados por patrones
más precisos, como es el caso del metro, cuyo patrón original creado en 1889 era una
barra de platino-iridio que se conservaba en Serves, Francia, y al cual reemplazo un
patrón basado en la longitud de onda de una radiación de Cripton 86, en 1960. Estas
modificaciones han sido necesarias y posibles gracias al avance tecnológico y esto
representa una de las razones por las que la Conferencia General de Pesas y Medidas
debe reunirse periódicamente.
Cuadro 3.1 Unidades Básicas
Magnitud Nombre Símbolo
Longitud Metro m
Masa kilogramo kg
Tiempo segundo s
Intensidad de corriente
eléctrica
Amperio A
Temperatura termodinámica kelvin K
Cantidad de sustancia Mol mol
Intensidad luminosa candela cd
El número entre paréntesis en cada una de las definiciones representa el año de la última
modificación.
Metro (m). Longitud que recorre la luz en el vacío durante el intervalo de tiempo
correspondiente a 1/299 792 458 de segundo (1983).
Kilogramo (Kg). Es la masa del prototipo internacional, que es un cilindro hecho de una
aleación de platino-iridio (1901)
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Segundo (s). Es la duración de 9 192 631 770 periodos de la radiación correspondiente a
la transición entre los dos niveles hiperfinos del estado base del átomo de Cesio
133(1967).
Amperio (A). Es la intensidad de una corriente constante que, mantenida en dos
conductores paralelos, rectilíneos, de la longitud infinita, de sección circular despreciable,
colocados a un metro de distancia entre si en el vacío, produce entre estos conductores
una fuerza igual a 2 x 10-7 Newton por metro de longitud (1948).
Kelvin (K). Es la fracción 1/273.16 de la temperatura termodinámica del punto triple del
agua (1967).
Mol (mol). Es la cantidad de sustancia de un sistema que contiene tantas partículas
elementales como átomos existen en 0.012 kilogramos de carbono 12 (1971). Cuando se
utiliza el mol, la naturaleza de las partículas elementales debe especificarse, y estas
pueden ser átomos, moléculas, iones, electrones, otras partículas o grupos específicos de
tales partículas.
Candela (cd). Es la intensidad luminosa en una dirección determinada de una fuente que
emite radiación monocromática a una frecuencia de 540 x 1012 Hz y que tiene una
intensidad radiante en esa dirección de 1/683 vatios por esteraidán (1979).
Unidades derivadas: estas unidades resultan de la combinación algebraica de las
unidades básicas. Los nombres y símbolos de algunas de estas unidades pueden ser
reemplazados por nombres y símbolos especiales, que a su vez pueden utilizarse para
formar expresiones y símbolos de otras unidades derivadas. En los cuadros 3.2 y 3.3 se
muestran las unidades derivadas que se utilizan con mayor frecuencia en medicina.
Cuadro 3.2 Unidades derivadas
Magnitud Nombre Expresión
Área metro cuadrado m2
Volumen metro cúbico m3
Velocidad Metro por segundo m/s
Aceleración metro por segundo cuadrado m/s2
Grados Celsius. La unidad derivada con el nombre de grado Celsius y el símbolo oC
merecen un comentario aparte. La conferencia general de pesos y medidas estableció el
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uso de la temperatura Celsius, expresada con el símbolo t y definida por la expresión: t =
T – T0, en donde T0 =273.15 K corresponde al punto de congelación. Es importante
señalar que una unidad Kelvin es de la misma magnitud que un grado Celsius, y hacer
notar que la unidad Kelvin se representa como K; es incorrecto utilizar oK , mientras que el
símbolo para representar el grado Celsius es oC. en la practica, los instrumentos de uso
común en medicina para registrar la temperatura miden en oC.
Unidades no incluidas en el SI, existen otras unidades que, a pesar de no estar incluidas
en el SI, se utilizan con frecuencia en medicina y por la ciencia en general (cuadro 3.4).
Cuadro 3.3 Unidades derivadas con nombres y símbolos especiales
Magnitud Nombre Símbolo Expresió
nFrecuencia hertzio Hz s-1
Fuerza newton N m kg s-2
Precision Pascal Pa m-1kg s-2
Trabajo Julio J m-2kg s-2
Potencia vatio W m-2 kg s-3
Cantidad de carga eléctrica coulombio C As
Fuerza electromotriz voltio V m2 kg s-
3A-1Capacitancia faradio F m-2 kg-1 s-
4A-2Resistencia ohmio m-2 kg s-
3A-2Conductancia eléctrica siemens S m-2 kg-1 s-
3A-2Temperatura Celsius grado
Celsius
ºC T – T0
Litro. Es una unidad de volumen y su uso es muy frecuente; aunque es valido escribirlo
con minúscula (1), se recomienda escribirlo con mayúscula (L) para evitar la confusión
con el numero 1.
Angstrom. Unidad de medición de longitud equivalente a la diezmillonésima parte de un
milímetro, su uso es cada vez menos frecuente, pero aun se puede encontrar en algunos
textos. 1Ă = 0.1 nm = 1x10-10 m la Conferencia General de Pesos y Medidas incluye esta
unidad en la categoría de temporal y considera aceptable su uso en algunas situaciones
hasta que se puede prescindir de ella.
Múltiplos y submúltiplos. La Conferencia General de Pesos y Medidas también estableció
los prefijos que deben utilizarse para los múltiplos y submúltiplos de las unidades. La
última revisión de estos prefijos se realizo en 1991; el avance de los sistemas de medición
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que permite medir cada vez cantidades más pequeñas y mas grandes ha obligado a estas
adecuaciones. En medicina son particularmente importantes los submúltiplos, ya que las
cantidades de ciertas sustancias presentes en el organismo son muy pequeñas.
Es importante hacer notar que el kilogramo es la única unidad del SI con un prefijo (kilo)
como parte de su nombre. Debido a que no pueden utilizarse múltiples prefijos, en el caso
del kilogramo, los prefijos del cuadro 3.5 se usan con la unidad gramo, como en
miligramo, y los símbolos con el símbolo g, como en mg.
Cuadro 3.4 Otras unidades utilizadas frecuentemente y no incluidas en el sistema
internacional de unidades
Nombre Símbolo Magnitud en El SI
Minuto min 1min = 60s
Hora h 1h = 60min = 3 600s
Dia d 1d = 24h = 86 400s
Grado o 1o = (/180) rad
Minuto ' 1'= (1/60)o = (/10 800) rad
Segundo " 1" = (1/60)'= (/648 000) rad
Litro L 1L = 1dm3 = 10-3 m3
Tonelada t 1t = 103kg
Reglas para escribir los símbolos del SI. Los símbolos del Sistema Internacional de
Unidades forman parte del idioma de la ciencia, y como todo idioma tiene reglas para su
escritura, las más importantes se mencionan a continuación.
Los símbolos se escriben con minúscula. Ejemplo para metro:
Correcto: m
Incorrecto: M
Una excepción de lo anterior es cuando el símbolo deriva de un nombre propio, en ese
caso se escribe con mayúscula y sin punto, ejemplo K, V, F por Kelvin, Volta y Faraday.
Los símbolos no llevan punto al final, ya que se trata de un símbolo y no de una
abreviatura, solo preceden a un punto cuando van al final de una oración. Por ejemplo
para segundo:
Correcto: s
Incorrecto: s.
Los símbolos se escriben igual en singular y plural por ejemplo para kilogramos:
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Correcto: kg
Incorrecto: kgs
La multiplicación de unidades se indica por un espacio entre ellas o un punto a media
altura, mientras que la división se indica por una diagonal o un exponente negativo.
Por ejemplo metro por segundo se puede expresar como: m/s, m s-1 y m s-1
Para expresar una unidad derivada, formada por una división entre unidades, puedeutilizarse una línea oblicua, una línea horizontal o exponentes negativos. Por ejemplometro sobre segundo puede ser: m/s, ms-1 o m
s
El símbolo % es utilizado para representar 0.01.
Los términos ppm para partes por millón, cps para ciclos por segundo, cc para
centímetro cúbico y otros parecidos son incorrectos.
Cuadro 3.5 Múltiplos y submúltiplos
Prefijo Símbolo Factor Múltiplo Submúltiplo
yotta Y 1X1024
1000 000 000 000 000 000 000 000
zetta A 1x1021
1 000 000 000 000 000 000 000
exa E 1x1018
1 000 000 000 000 000 000
peta P 1x1015
1 000 000 000 000 000
tera T 1X1012
1 000 000 000 000
giga G 1x109
1 000 000 000
mega M 1x106
1 000 000
kilo K 1x103
1 000
hecto H 1x102
1 00
deca Da 1x101
1 0
deci D 1x10-1
0.1
centi C 1x10-2
0.01
mili M 1x10-3
0.001
micro Μ 1x 10-6
0.000 001
nano N 1x10-9
0.000 000 001
pico P 1x10-12
0.000 000 000 001
femto F 1x10-15
0.000 000 000 000 001
atto A 1x10-18
0.000 000 000 000 000 001
zepto Z 1x10-21
0.000 000 000 000 000 000 001
yocto Y 1x10-24
0.000 000 000 000 000 000 000 001
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Propósitos específicos de la práctica:
Identificar las unidades de medida para familiarizarse con las unidades
frecuentemente utilizadas en medicina, incluidas o no en el sistema internacional de
unidades (SI), para la correcta expresión y comprensión de los textos médicos.
Aplicar los símbolos, prefijos y factores de potencia para escribir correctamente una
magnitud, las cuales son aplicables frecuentemente en la medicina.
Aplicar las reglas para escribir correctamente las unidades del SI.
Criterios de desempeño:
Serás competente para manejar adecuadamente las unidades de medición de utilización
más frecuente en medicina cuando, leas la práctica, obtengas información acerca del SI
resuelvas algunos problemas.
Serás competente para aplicar los símbolos, prefijos y factores de potencia en la
determinación de unidades utilizadas en medicina.
Serás capaz de resolver problemas, recuperar y analizar información de diferentes
fuentes
Resultados esperados en relación a los Criterios de desempeño específicos de la
práctica.
Expondrás la información consultada acerca del tema con tus compañeros de equipo y les
demostrarás la aplicación de estas unidades en medicina.
Realizarás diferentes ejercicios de conversion de unidades utilizadas con mayor
frecuencia en medicina.
Contestarás el cuestionario de la práctica antes de abandonar la sesión de laboratorio.
Entregarás el reporte de práctica con sus observaciones y discutirás acerca de la
importancia de la aplicación de estas unidades.
Desarrollo de la práctica
1. Utiliza una báscula con estatímetro para obtener el peso y estatura de por lo menos
tres de tus compañeros.
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2. Utiliza la unidad básica para escribir los pesos obtenidos, un equivalente empleando un
múltiplo o submúltiplo y el equivalente utilizando el factor de potencia. Por ejemplo, si el
peso es de 68 kg (unidad básica), también lo puedes expresar como 68000 g
(submúltiplo) o 68x10-3 g (factor de potencia).
Sujeto Unidad básica Múltiplo o submúltiplo Factor de potencia
1
2
3
Ahora haz lo mismo con los valores obtenidos para la estatura.
3. Escribe por lo menos cinco unidades derivadas con base en el metro y cinco unidades
que deriven del kilogramo.
DERIVADAS DEL METRO
Nombre Expresión Símbolo
1
2
3
4
5
DERIVADAS DEL KILOGRAMO
Nombre Expresión Símbolo
1
2
3
4
5
Sujeto Unidad básica Múltiplo o submúltiplo Factor de potencia
1
2
3
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4. Selecciona cinco unidades derivadas con nombres específicos y discute con sus
compañeros en que áreas de la fisiología se utilizan.
1. ____________________________ 4. ____________________________
2. ____________________________ 5. ____________________________
3. ____________________________
5. Menciona el nombre de cinco unidades de medición cuyo símbolo se escriba con
mayúscula y explica por qué.
1. ____________________________ 4. ____________________________
2. ____________________________ 5. ____________________________
3. ____________________________
Evidencias de desempeño:
La correcta resolución de los ejercicios de la práctica, y tu participación con tus
compañeros en la resolución de los ejercicios, se dará constancia con el sello y la
firma del asistente del laboratorio en la práctica.
La revisión de los ejercicios realizados durante la práctica al finalizar la sesión de
laboratorio.
Comprobar la adquisición de habilidades básicas, según corresponda en el formato
de documento (anexo 1).
Entregarás el cuestionario y el reporte de práctica según el formato de documento
(anexo 2), el día posterior a la sesión de laboratorio.
Evaluaciones intermedias con recomendaciones:
El reporte lo entregarás dos días posteriores a la realización de la práctica, se revisará y
se harán los señalamientos necesarios, para su evaluación final en los días asignados en
la carta descriptiva de la materia.
Método de asignación de calificaciones:
Asistencia a práctica 5 %
Realización de la práctica 50 %
Reporte y cuestionario 45 %
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Nota: Sin asistencia a la sesión de laboratorio el reporte carecerá de validez
Cuestionario de evaluación:
Las siguientes preguntas hacen referencia a unidades utilizadas ampliamente en
medicina.
1. La concentración de algunas sustancias en sangre, como la glucosa, se expresa con
frecuencia en mg/dl. ¿Cuántos mililitros hay en decilitro?
2. ¿Cuántos decilitros hay en un litro?
3. La concertación de hormonas en sangre se encentra en el intervalo de 1x10-9 a 1x10-
12 mol/L de moléculas. ¿Cuál es el nombre correspondiente al submúltiplo de estas
cantidades?
4. La concentración de células sanguíneas se expresa en células/l. ¿Cuántos l hay en
un litro?
5. La cantidad de hemoglobina contenida en un eritrocito (hemoglobina corpuscular
media) es de 29 pg. ¿Cómo se expresa esta cantidad en gramos utilizando el factor de
potencia?
6. Cuantos picogramos hacen un nanogramo?
7. Cuantos microgramos hay en un miligramo?
Si la temperatura corporal normal es de 37oC. ¿A cuanto equivale una unidad kelvin?
8. Si en una biometría hematica se reportan 4.6x10-6 eritrocitos por ml. ¿Cuántos
eritrocitos hay por ml?
9. ¿Cuál es la diferencia entre 1kg de glucosa y un mol de glucosa?
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Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia
“Dr. Norberto Treviño Zapata”
María Lorena Torres Rdz, MC-MVZ.
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Número de alumnos por unidad de práctica. La unidad de práctica esta
representada por el equipo de laboratorio, que deberá ser de 5 integrantes; determinando
un responsable para solicitar y entregar el material requerido para la práctica así como el
área de trabajo limpia al finalizar la práctica.
Introducción
Concentración es la proporción relativa de soluto y solvente, por lo tanto:
Concentración = Cantidad de soluto
Volumen del solvente
La unidad que se utiliza con mayor frecuencia para determinar el volumen del solvente es
el litro, mientras que la cantidad de soluto puede expresarse en diversas formas; una de
ellas es con respecto ala masa o peso del soluto, entonces se utiliza como unidad el kg y
se habla de concentraciones kg/L, g/L, mg/dl, etc. Sin embargo, al considerar los efectos
de diversas sustancias importantes desde el punto de vista fisiológico y sus interacciones
en el medio interno del organismo, a menudo tiene mayor importancia conocer el numero
de moléculas que hay en una solución, el numero de partículas libres disueltas o el
numero de cargas eléctricas en la solución. De acuerdo con el sistema internacional de
unidades, el mol es la unidad básica para determinar la cantidad de una sustancia. Su
definición es: la cantidad de sustancia de un sistema que contiene tantas partículas
elementales como átomos existen en 0.012 kg de carbono 12; y agrega que, cuando se
utiliza el mol, la naturaleza de las partículas elementales debe especificarse. Estas
pueden ser átomos, moléculas, iones, electrones, o bien otras partículas o grupos
específicos de tales partículas, se pude hablar de i mol de moléculas de NaCl, 1 mol de
iones de sodio o 1 mol de partículas libres de sodio; sin embargo, aunque cada vez mas
frecuente el uso del mol en la forma antes mencionada, en medicina aun persiste el uso
del equivalente cuando se trata de cargas eléctricas y del osmol cuando lo que se mide es
la cantidad de partículas libres. El mol se reserva para referirse ala cantidad de moléculas.
Es importante saber como se relacionan el mol, el equivalente y el osmol entre si, ya que
para todas las soluciones pueden calcularse los tres, y al conocer el valor de uno de ellos
y las características químicas del soluto se pueden calcular los otros dos.
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A partir de la definición del mol, se establece que 1 mol de carbono equivale al numero de
partículas contenidas en 12g de carbono, y al saber que el peso atómico del carbono es
12, entonces 1 mol de carbono es igual a un peso atómico expresado en gramos, y esto
es valido para todos los elementos. Así, el peso atómico del sodio es de 23, entonces 1
mol de sodio es igual a 23 gramos; para el potasio, con un peso molecular de 39, 1 mol es
igual a 39 gramos; al referirse a la concentración de las soluciones, una polución 1 molar
de sodio tiene 23 gramos de sodio disueltos en un litro de solvente y una solución 1 molar
de potasio tiene 39 gramos disueltos e 1 litro de solvente.
Ahora bien, si lo que se quiere saber es a cuanto corresponde 1 mol de una sustancia
conformada por varios elementos, como por ejemplo el cloruro de sodio (NaCl), entonces
se debe sumar el peso molecular del sodio, que es 23, al peso molecular del cloro, que es
35.5, por lo que 1 mol de NaCl es igual a 58.5 g; por lo tanto, una solución 1 molar tiene
58.5 g de NaCl en un litro de solvente.
Los pesos moleculares de los iones mas importantes en los líquidos corporales se
muestran en el cuadro 4.1, a partir de este se puede calcular que 1 mol de moléculas de
KCl es igual a 74.5 g y 1 mol de moléculas de CaCl2 es igual a 111 g, cantidades que
disueltas en 1 litro de solvente constituyen soluciones 1 molar. En el ejemplo de CaCl2 hay
que tomar en cuanta que esta molécula esta formada por 2 átomos de cloro y 1 de calcio.
Cuadro 4.1 Pesos moleculares
Nombre Símbolo Ion Peso molecular (PM)
Sodio Na Na+ 23
Cloro Cl Cl- 35.5
Potasio K K+ 39
Calcio Ca Ca++ 40
Otro concepto que debe recordarse es que de acuerdo con la Ley de Abogadro, el
numero de partículas contenidas en 1 mol, independientemente de la partícula que se
trate, es de 6.022 x 1023, numero conocido como numero de Abogadro; por tanto, e un
mol de moléculas de NaCl hay 6.022 x 1023 moléculas de NaCl.
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El NaCl, por ser una sustancia electrolítica, al estar en solución se disocia en los iones
Na+ y Cl-, y en esta forma se encuentra en los líquidos corporales, debido a que la
cantidad de cargas eléctricas influye en el funcionamiento celular, es importante conocer
la cantidad de cargas eléctricas que hay en una solución; en este caso la unidad utilizada
para medir cantidad de cargas eléctricas es el equivalente (eq). Si se ejemplifica
gráficamente lo que ocurre con una solución 1 molar de NaCl se vera lo siguiente:
Fig. 4.1 Solución 1 molar de NaCl
Este esquema corresponde a una solución 1 molar de NaCl, lo que significa que, de
acuerdo con la ley de Abogadro, hay 6.022 x 1023 moléculas de NaCl disueltas en un litro
de solvente. Sin embargo, el número de cargas eléctricas presentes (positivas y
negativas) es del doble; es decir, hay 2 mol de cargas eléctricas en solución por cada
mol de moléculas de NaCl, y como ya se menciono, la unidad utilizada de forma habitual
para referirse ala cantidad de cargas eléctricas es el eq. Por lo tanto, en este ejemplo:
1 mol/L de moléculas de NaCl= 2mol/L de cargas eléctricas =2 eq/L
Vale la pena recalcar que al utilizar el mol, como se ve en el ejemplo anterior, hay que
especificar la partícula de la que se trata.
Si ahora se analiza el ejemplo de una solución 1 molar de CaCl2, se vera lo siguiente:
Fig. 4.2. Solución 1 molar de CaCl2.
111 g de
Cl-
Ca++
Cl-
58.5 g de
Na+Cl-
1 litro de solvente
1 litro de solvente
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En este caso, en 1 mol de moléculas de CaCl2, hay cuatro cargas eléctricas por cada
molécula, por lo tanto:
1 mol/L de moléculas de CaCl2 = 4 mol/L de cargas eléctricas = 4 eq/L
Ello significa que a partir de una solución molar se puede calcular el número de cargas
eléctricas en la solución (equivalentes), si se sabe en cuantas partículas se disocia el
soluto y cuantas cargas tiene cada partícula (valencia).
En ocasiones al estudiante le resulta algo difícil saber si una molécula se disocia y en que
se disocia; sin embargo, esto puede deducirse a partir del nombre de la sustancia. El
bicarbonato de sodio se disocia en bicarbonato y sodio, el lactato de calcio en lactato y
calcio, el sulfato de sodio en sulfato y sodio, mientras que la glucosa y la urea no se
disocian. Una vez que se sabe en cuales y cuantas partículas se disocia el soluto, el otro
dato necesario es conocer la valencia de cada partícula. Por ejemplo, el sulfato de sodio
(Na2SO4), se disocia en 2 iones sodio (Na+) y 1de sulfato (SO4=), dando un total de 4
cargas eléctricas por mol de moléculas de Na2SO4, por lo que:
1 mol/L de moléculas de Na2SO4= 4 mol /L de cargas eléctricas = 4eq/L
En el cuadro 4.2 se suministra una lista de las sustancias electrolíticas mas utilizadas en
solución en medicina, incluyendo su peso molecular y las partículas en las que se disocia.
Cuadro 4.2 Sustancias electrolíticas utilizadas en medicina
Nombre Fórmula Catión Anión Num. Part. PM
Sales de Sodio
Cloruro de sodio NaCl Na+
Cl-
2 58.5
Bicarbonato de sodio NaHCO3 Na+
HCO3-
2 84
Acetato de sodio Na(C2H3O2) Na+
C2H3O2-
2 82
Lactato de sodio Na(C3H5O3) Na+
C3H5O3-
2 112
Sulfato de sodio Na2SO4 2Na+
SO4 3 142
Fosfato dibásico de sodio Na2HPO4 2 Na+
HPO4=
3 142
Fosfato monobásico de sodio NaH2PO4 Na+
H2PO4=
2 120
Gluconato de sodio Na(C6H11O7) Na+
C6H11O7-
2 218
Sales de Potasio
Cloruro de potasio KCl K+
Cl-
2 74.5
Fosfato dibásico de potasio K2HPO4 2 K+
HPO4=
3 174
Fosfato monobásico de potasio KHPO4 K+
HPO4=
2 136
Sales de Calcio
Cloruro de calcio CaCl2 Ca++
2 Cl-
3 111
Gluconato de calcio Ca(C6H11O7)2 Ca++
C6H11O7-
3 430
Sales de Magnesio
Cloruro de magnesio MgCl2 Mg++
2 Cl-
3 95
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La tercera unidad que se usa en medicina para medir la cantidad de soluto es el osmol
(osm); en este caso lo que importa es la cantidad de partículas libres en solución,
independientemente de su masa y de su valencia. La importancia del numero de
partículas libres en una solución es, entre otras cosas, que determina la magnitud de la
presión osmótica que genera la solución y por lo tanto el movimiento osmótico del agua
entre los compartimientos líquidos corporales.
La osmolaridad normal de los líquidos corporales es de 290+ 10 mosm/L, y este valor se
utiliza como referencia para catalogar a las soluciones utilizadas en la práctica medica en:
isoosmolares, cuando su osmolaridad es igual ala osmolaridad plasmática normal;
hipoosmolares, cuando es menor, e hiperosmolares cuando es mayor a la del plasma.
En continuación con los mismos ejemplos anteriores, si se regresa a la figura del NaCl en
solución, se observa que se disocia en 2 partículas, por lo que 1 mol de NaCl/L es igual a
2 osm/L de NaCl, o si se utiliza el SI: 1 mol/L de moléculas de NaCl = 1 mol/L de iones
sodio + 1 mol/L de iones CI = 2 osm/L de NaCl
En el ejemplo de la solución de CaCl2, esta molécula se disocia en tres partículas: 2 de
cloro y 1 de calcio, por lo que: 1 mol/ L de moléculas de CaCl2 = 1 mol/L de iones calcio +
2 mol/L de iones cloro de = 3 osm/L de CaCl2
Por tanto, la osmolaridad de una solución se obtiene multiplicando la concentración molar
del soluto en solución por el número de partículas en las que se disocia. Sin embargo,
aquí debe tomarse en cuenta que los solutos no siempre se disocian por completo; por
ejemplo, NaCl en solución forma los iones Na+, Cl- que se separan pero, debido a las
cargas eléctricas de estos dos iones, algunos de ellos permanecen unidos. Además, la
cantidad de moléculas que no se disocian no es constante, sino que varía con la
concentración del soluto; como era de esperarse, a una mayor concentración hay un
mayor número de moléculas no disociadas.
Esta desviación del comportamiento ideal de un soluto, al no disociarse por completo, se
corrige utilizando el coeficiente osmótico, que representa con la letra g. El valor del
coeficiente osmótico varía de 0, para una sustancia que no se disocia, a 1, para las
sustancias que se disocian por completo. Los líquidos corporales son soluciones muy
diluidas, por lo que las moléculas se disocian casi en el 100%; por ejemplo, para NaCl a la
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concentración de 140 mmol/L de iones, que es la concentración a la que se encuentra en
el líquido extracelular, corresponde un coeficiente osmótico de 0.9295.
Por tanto, la formula para calcular con mayor exactitud la osmolaridad de una solución es:
Osmolaridad= C x n x g
En donde C es igual a la concentración molar de la solución, n es el número de partículas
en las que se disocia y g es el coeficiente osmótico.
Si se desea saber la osmolaridad de una solución de NaCl con 140 mmol/L de iones, de
acuerdo con lo mencionado antes:
Osmolaridad=140 x 2 x 0.9295 = 260 mosm/L
Como ya se mencionó, el valor del coeficiente osmótico adquiere relevancia en soluciones
concentradas; sin embargo, tanto los líquidos corporales como las soluciones de mas uso
en medicina son soluciones diluidas, razón por la que el coeficiente osmótico con
frecuencia no se toma en cuenta. Sin embrago, vale la pena recordarlo, principalmente en
situaciones de trabajo en laboratorio, cuando se requiere mayor precisión. Por otro lado,
el coeficiente osmótico explica en parte las diferencias que se observan entre los cálculos
teóricos de la osmolaridad y la medición de la misma con el osmometro.
Vale la pena señalar que en medicina en lugar de mol, el equivalente y el osmol se utilizan
los submúltiplos milimol (mmol), miliequivalente (meq) y miliosmol (mosm).
Otra manera de expresar la concentración de una solución es en forma porcentual. La
solución mas utilizada en la practica clínica es la solución de NaCl al 0.9%, lo que significa
que hay 0.9 g de NaCl en cada 100 ml de solución; otra de las soluciones de mayor uso
en medicina es la de glucosa al 5%, en este caso hay 5g de glucosa en cada 100 ml de
solvente.
A continuación se ejemplificara como a partir de una solución porcentual se puede
calcular la concentración molar, osmolar y de equivalentes, tomando como ejemplo la
solución de NaCl al 0.9%. Los pasos a seguir para hacer estos cálculos son:
1. Una solución porcentual indica la cantidad de gramos que hay en 100 ml de solución.
Una solución 0.9% de NaCl tiene 0.9 g en 100ml de solución.
2. Para calcular la molaridad se necesita saber cuantos gramos hay en un litro.
Un litro de NaCl al 0.9% tiene 9g de NaCl
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3. El siguiente paso es saber cuantos gramos hay en una solución 1 molar de esta
sustancia.
Una solución 1 molar de NaCl tiene 58.5g/L, que corresponde al peso molecular del
NaCl expresado en gramos
4. Con los datos anteriores podemos decir que una solución con 9g/L de NaCl tiene una
molaridad menor a 1 mol/L, específicamente la molaridad es 9/58.5= 0.153 mol/L o
153 mmol/L. en medicina se prefiere utilizar mmol en lugar de mol, ya que en las
soluciones corporales los valores se encuentran en este rango, lo mismo es valido
para meq y mosm.
5. A partir del valor anterior se puede calcular cuantos meq hay en la solución. Para esto
es necesario saber en cuantas partículas se disocia el NaCl y cual es la valencia de
cada una de ellas.
El NaCl se disocia en Na+ y Cl-, y cada ion tiene una valencia de 1, por lo que una
solución con 153 mmol/L tiene el doble de cargas eléctricas que corresponde a 306
meq/L
6. Para pasar de la molaridad a la osmolaridad es necesario saber en cuantas partículas
se disocia el NaCl sin importar su valencia. En el punto anterior se menciono que se
disocia en dos partículas: sodio y cloro.
La osmolaridad de una solución de NaCl al 0.9%es igual a 153 mmol/L x 2= 306
mosm/L
7. La solución de NaCl al 0.9% también se conoce como solución fisiológica; sin
embargo, de acuerdo con el valor obtenido, su osmolaridad es superior a la de los
líquidos corporales, que es de 290+ 10 mosm/L. pero si tomamos en cuenta que el
coeficiente osmótico de esta solución es de 0.9295, entonces la osmolaridad es de
284 mosm/L (306 x 0.9295), que cae dentro del rango del valor normal.
La formula utilizada diariamente en la practica clínica para determinar la osmolaridad
plasmática toma en cuenta las concentraciones plasmáticas de Na+, K+, glucosa y
nitrógeno de la urea, en ocasiones reportado como BUN (blood urea nitrogen, nitrógeno
ureico en sangre o simplemente en uremia). El Na+ y el K+ se reportan por el laboratorio
clínico en mmol/L y, como no se disocian, el valor dado en estas unidades es igual al valor
enmosm/L. En el caso de la glucosa y el nitrógeno en la urea, el laboratorio los reporta en
mg/dl o en mmpl/L; como estas dos sustancias tampoco se disocian, su valor expresado
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en mmol/L es igual es igual al valor en mosm/L; por lo tanto, cuando todos los valores se
reportan en mmol/L la formula que se utiliza es:
Osmolaridad plasmática = [Na+ + K-] x + [glucosa] + [nitrógeno de la urea]
Sin embargo, cuando la glucosa y el nitrógeno de la urea se reportan en mg/dl es
necesario hacer la conversión a mmol/L que por no disociarse corresponden también al
valor en mosm/L, en este caso se utiliza la siguiente formula:
Osmolaridad plasmática = [Na+ + K+] X 2 + [glucosa] / 18 + [nitrógeno de la urea] / 2.8
De acuerdo con esta formula, el valor de la glucosa dado en mg/dl se divide entre 18, ya
que el peso molecular de la glucosa es 180 por lo que una solución 1 molar tiene 180g/L,
que corresponden a 18 g/dl, lo mismo aplica para el nitrógeno de la urea que se divide
entre 2.8.
En ambas formulas la suma de sodio y potasio se multiplica por 2 debido a que por cada
un o de estos cationes hay presente un anión para mantener la electroneutralidad de los
líquidos corporales.
Propósitos específicos de la práctica:
Identificarás las unidades que se usan en medicina para determinar la concentración
de una solución.
Aplicarás las formulas fisicoquímicas para calcular la concentración de una solución en
mol, equivalente y osmol.
Aplicarás las fórmulas fisicoquímicas para preparar soluciones con la concentración de
mmol, meq o mosm solicitadas.
Identificarás las soluciones mas utilizadas en medicina y determinarás su
concentración en las diferentes unidades.
Criterios de desempeño:
Serás competente para manejar adecuadamente las unidades de medición utilizadas con
mayor frecuencia en medicina al leer la práctica, obtengas información acerca de las
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formulas fisicoquímicas empleadas para determinar la concentración de las soluciones y
resuelvas algunos problemas.
Serás competente para aplicar los símbolos, prefijos y factores de potencia en la
determinación de la concentración de las soluciones.
Serás competente para preparar soluciones de utilidad en medicina, como terapia o para
mantener los organismos.
Serás capaz de resolver problemas, recuperar y analizar información de diferentes
fuentes
Resultados esperados en relación a los Criterios de desempeño específicos de la
práctica.
Expondrás la información consultada acerca del tema con tus compañeros y les
demostrarás la aplicación de las formulas fisicoquímicas para determinar la concentración
de las soluciones.
Realizarás diferentes ejercicios para determinar la concentración de diferentes soluciones
utilizadas en medicina.
Contestarás el cuestionario de la práctica antes de abandonar la sesión de laboratorio.
Entregarás el reporte de práctica con tus observaciones y discusión acerca de la
importancia de determinar la concentración de las soluciones.
Desarrollo de la práctica:
1. Determina la cantidad de soluto en gramos y la cantidad de solvente que necesitas
para preparar las siguientes soluciones:
Solución Cantidad de soluto Cantidad de solvente
100 ml de NaCl al 1.8%
500 ml de NaCl al 0.9%
1L de NaCl al 0.4%
1L de sol. glucosada al 5%
500 ml de sol. glucosada al 10%
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2. Calcula la osmolaridad de una solución glucosada al 5 % que es, junto con la solución
de NaCl al 0.9% de las mas utilizadas en la práctica clínica.
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
3. Calcula la osmolaridad de la solución de NaCl al 0.4%.
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
4. En esta misma solución de NaCl al 0.4%, ¿Cuál es la concentración en meq/L?
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
5. Calcula la osmolaridad de la solución glucosada al 5%.
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
6. Calcula la osmolaridad de una solución que contiene 110 mg/dl de glucosa.
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
7. Calcula la osmolaridad de una solución que contiene 142meq/L de Na y 142 meq/L de
Cl.
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
8. Calcula la molaridad, osmolaridad y la cantidad de equivalentes de una solución de
cloruro de sodio al 5%.
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
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9. La concentración normal de sodio en plasma es de 140mmol/L. ¿Cómo expresarías
esta concentración en forma porcentual?
______________________________________________________________________
10. La concentración normal de potasio en plasma es de 4 meq/L. ¿Cómo expresarías
esta concentración en forma porcentual?
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
11. Que cantidad de CaCl2 necesita disolver en litro de solvente para tener una solución
con osmolaridad de 290 mom/L.
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
12. Calcule la osmolaridad plasmática de un paciente con los siguientes datos de
laboratorio: sodio =140 meq/L, glucosa = 90mg/dl y nitrógeno de la urea (BUN)= 40
mg/dl.
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
13. Calcula la osmolaridad plasmática de un paciente con los siguientes resultados de
laboratorio: sodio = 125meq/L, glucosa =90mg/dl y nitrógeno de la urea (BUN)
=40mg/dl.
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
14. Te encuentras colaborando en un proyecto de investigación sobre el efecto de ciertas
sustancias en la función cardiaca, para lo que el investigador principal te pide que
prepares 10ml de cada una de las siguientes soluciones utilizando como solvente la
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solución de Krebs, y te proporciona el peso molecular y la presentación farmacéutica
de las sustancias que vas a utilizar.
Sustancia Peso
molecular
Concentración en cada
ampolleta en mg/ml
Preparar solución con
una concentración
Aceticolina 181.7 10 10-2 mol/L
Adrenalina 219.7 1.22 10-3mol/L
Atropina 676.8 0.5 10-4mol/L
Fentolamina 377.5 10 10-3mol/L
Propranolol 295.8 1 10-3mol/L
Verapamilo 491.1 2.5 10-3mol/L
Ouabaìna 584.7 2.5 10-3mol/L
Escribe a continuación la cantidad que deberás tomar de la ampolleta correspondiente a
cada una de las sustancias, y la cantidad de solvente que requerirás para preparar estas
soluciones:
Evidencias de desempeño:
De la correcta resolución de los ejercicios de la práctica, y tu participación con tus
compañeros en la resolución de los ejercicios, se dará constancia con el sello y la
firma del asistente del laboratorio en la práctica.
Se revisarán el cuestionario y los ejercicios realizados durante la práctica al
finalizar la sesión de laboratorio.
Solución Cantidad tomada de
la ampolleta
Cantidad de solvente para
completar los 10ml
Atropina 10-2 Molar
Adrenalina 10-3 Molar
Atropina 10-4 Molar
Fentolamina 10-3 Molar
Propanolol 10-3 Molar
Verapamilo 10-3 Molar
Ouabaína 10-3 Molar
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Comprobar la adquisición de habilidades básicas, según corresponda en el formato
de documento (anexo 1).
Se entregará el reporte de práctica según formato de documento (anexo 2), el día
posterior a la sesión de laboratorio.
Evaluaciones intermedias con recomendaciones:
Al cabo de dos días posteriores a la realización de la práctica se revisará tu reporte y se
harán los señalamientos necesarios, para su evaluación final en los días asignados en la
carta descriptiva de la materia.
Método de asignación de calificaciones:
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Realización de la práctica 50 %
Reporte y cuestionario 45 %
Nota: Sin asistencia a la sesión de laboratorio el reporte carecerá de validez
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Número de alumnos por unidad de práctica. La unidad de práctica esta representada
por el equipo de laboratorio, que deberá ser de 5 integrantes; determinando un
responsable para solicitar y entregar el material requerido para la práctica así como el
área de trabajo limpia al finalizar la práctica.
Introducción
Cuando una sustancia se disuelve en otra que actúa como disolvente se forma una
solución o disolución; si el soluto es una sustancia no iónica ni volátil, se origina un
cambio en las propiedades físicas del disolvente, tales como alteraciones en su punto de
congelación (que desciende), en su punto de ebullición (que aumenta), y se modifican la
presión de vapor, la presión osmótica, el índice de refracción, etcétera.
Las propiedades que dependen de la cantidad de soluto presente en el disolvente reciben
el nombre de propiedades coligativas, y están subordinadas a la concentración del soluto,
pero no a su naturaleza, ya que todos los solutos incrementan el punto de ebullición y
hacen descender el punto de congelación. Por ejemplo, para 1000 g de agua, 1 mol de
soluto desciende 1.86oC su punto de congelación y aumenta su punto de ebullición en
0.52oC.
Propósito específico de la práctica:
Comprobarás experimentalmente las propiedades coligativas de las soluciones al
realizar modificaciones en el punto de ebullición de una serie de soluciones.
Criterios de desempeño:
Serás competente para manejar adecuadamente las propiedades coligativas de las
soluciones al leer la práctica y obtengas información relevante y su aplicación en los
organismos.
Serás capaz de distinguir las propiedades coligativas de las soluciones y su aplicación
médica.
Serás capaz de resolver problemas, recuperar y analizar información de diferentes
fuentes.
Serás capaz de completar una técnica de laboratorio.
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Serás capaz de que aplicar los conceptos de ensayo, variable dependiente, variable
independiente, modelo y contraste.
Serás capaz de generar gráficos, diagramas de flujo y modelos a partir de la
experimentación.
Resultados esperados en relación a los Criterios de desempeño específicos de la
práctica.
Exponrás la información consultada acerca del tema con tus compañeros de equipo y
demostrarás las propiedades coligativas de las soluciones de forma experimental en el
laboratorio.
Realizarás diferentes experimentos para observar y comprender las propiedades
coligativas de las soluciones.
Contestarás el cuestionario de la práctica antes de abandonar la sesión de laboratorio.
Entregarás el reporte de práctica con tus observaciones y discusión acerca de la
importancia de las propiedades coligativas de las soluciones y su aplicación médica.
Medidas de seguridad:
o Es recomendable que te laves siempre las manos al término de un procedimiento y
antes de abandonar el laboratorio.
o No juegues durante la realización de la práctica para evitar accidentes.
o Ten precaución al trasvasar, podrías ocasionar salpicaduras y derrames. Al tratarse de
sustancias inflames, el trasvase deberás realizarlo alejado de toda fuente de calor.
o Efectúa en cada proceso el montaje adecuado con especial cuidado, fijando todas las
piezas de acuerdo a su función a realizar.
o No calientes directamente el vidrio en la flama, utiliza difuminadores de calor.
o Asegura ventilación suficiente en el laboratorio.
o Evita la fuga de vapores de sustancias peligrosas.
o Vigila la temperatura durante todo el proceso.
o Al terminar el procedimiento deja enfriar el recipiente antes de tomarlo con la mano.
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María Lorena Torres Rodríguez Página 57 de 144
a) Cuadro de disposición de desechos
Tipo de desechos Como descartarlos Tipo de contenedor
Material biológico Depositar en contenedor rojo
Soluciones y reactivos Al desagüe abriendo la llave para diluir
Material punzocortante Depositar en contenedor amarillo
Desarrollo de la práctica:
Se emplearan cinco soluciones de diferente concentración de soluto (etilenglicol) y agua
destilada, determinando los puntos de ebullición de cada una de ellas para comprobar la
variación que produce en el agua un soluto.
El análisis del agua pura permitirá comprobar su punto de ebullición y, posteriormente, en
solución con el soluto, se comprobara experimentalmente una de las propiedades
coligativas de las soluciones, graficándose los resultados obtenidos en la relación
cantidad de soluto-temperatura.
1. Prepara en seis vasos de precipitados, utilizando la probeta graduada, las siguientes
disoluciones:
a) 100 ml de agua destilada
b) 100 ml de agua destilada + 10 ml de etilenglicol
c) 100 ml de agua destilada + 40 ml de etilenglicol
d) 100 ml de agua destilada + 100 ml de etilenglicol
e) 100 ml de agua destilada + 150 ml de etilenglicol
f) 100 ml de agua destilada + 200 ml de etilenglicol
2. Calienta suavemente, en el arreglo de calentamiento que utiliza el soporte universal, el
vaso de precipitados con 100 ml de agua destilada (primer vaso); coloca el termómetro
y toma el valor de la temperatura (Fig. 7.1) cuando llegue a su punto de ebullición (la
columna de mercurio se detiene en ese punto).
3. Emplea el mismo procedimiento para determinar el punto de ebullición de las otras
cinco soluciones y registra los resultados en la tabla correspondiente.
4. Grafica los resultados obtenidos de cantidad de soluto contra temperatura.
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Fig.7.1 Esquema de colocación de la solución para realizar el experimento.
Evidencias de desempeño:
El asistente del laboratorio en la práctica dará constancia con el sello y la firma de
la correcta resolución de los ejercicios durante la práctica, y tu participación con tus
compañeros en la resolución de los ejercicios.
Revisión del cuestionario y los ejercicios realizados durante la práctica al finalizar la
sesión de laboratorio.
Comprobar la adquisición de habilidades básicas, según corresponda en el formato
de documento (anexo 1).
Entregarás el reporte de práctica según formato de documento (anexo 2), el día
posterior a la sesión de laboratorio.
Evaluaciones intermedias con recomendaciones:
A los dos días posteriores a la realización de la práctica se revisará su reporte y se harán
los señalamientos necesarios, para su evaluación final en los días asignados en la carta
descriptiva de la materia.
Método de asignación de calificaciones:
Asistencia a práctica 5 %
Realización de la práctica 50 %
Reporte y cuestionario 45 %
Nota: Sin asistencia a la sesión de laboratorio el reporte carecerá de validez
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Cuestionario de evaluación:
1. Definir soluto, solvente y solución.
2. Definir molar solución molar.
3. Definir mol.
4. ¿de que depende el aumento del punto de ebullición de las soluciones en la práctica?
1. Describir lo observado durante la práctica.
2. Anotar las conclusiones
TABLA DE RESULTADOS
Solución Disolvente Soluto Temperatura
1 100 0
2 100 10
3 100 40
4 100 100
5 100 150
6 100 200
Cantidad de soluto-temperatura (gráfica)
GLOSARIO
Sustancia iónica. Sustancia que en solución se descompone en sus iones.
Sustancia volátil. Sustancia que presenta un punto de ebullición bajo.
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“Dr. Norberto Treviño Zapata”
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Número de alumnos por unidad de práctica. La unidad de práctica esta
representada por el equipo de laboratorio, que deberá ser de 5 integrantes; determinando
un responsable para solicitar y entregar el material requerido para la práctica así como el
área de trabajo limpia al finalizar la práctica.
Introducción
El termino osmosis se refiere al movimiento de agua a través de una membrana
semipermeable, que se ocasiona por una diferencia en la osmolaridad o concentración de
solutos a ambos lados de la membrana, lo que genera una diferencia de presión
osmótica, fuerza necesaria para el movimiento del agua.
El siguiente esquema sirve para ejemplificar como la osmolaridad produce movimiento de
agua a través de una membrana. En este esquema se observan en A dos
compartimientos, en el 1 hay un soluto en solución y en el 2 hay solamente agua; los dos
compartimientos están separados por una membrana permeable al agua pero
impermeable al soluto. Después de algún tiempo la situación cambia a lo que se observa
en B: la cantidad de agua en el compartimiento 1 aumenta y en el compartimiento 2
disminuye hasta alcanzar un nuevo nivel de equilibrio. El movimiento de agua del
compartimiento 2 al 1 ocurrió debido a que se genero una presión osmótica en el
compartimiento 1 y el movimiento del agua se detuvo cuando la cantidad de agua en el
compartimiento 1 aumentó la presión hidrostática de este compartimiento hasta un valor
suficiente para contrarrestar la presión osmótica. En otras palabras, el movimiento
osmótico del agua se detiene debido a que la presión osmótica que atrae agua al
compartimiento 1 es de igual magnitud que la presión hidrostática en este mismo
compartimiento que tiende a sacar agua de el.
Fig. 5.1 Generación de presión osmótica y movimiento osmótico del agua a través
de una membrana semipermeable
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La forma en la que la presión osmótica se genera no esta completamente explicada.
Algunos físicos mencionan que es debido a que la presencia de soluto disminuye la
presión hidrostática del solvente en el que se encuentra; mientras que otros argumentan
que las partículas del soluto al chocar contra la membrana impermeable y rebotar
producen un vacío momentáneo que atrae las moléculas de agua hacia el.
En este momento es importante señalar que el movimiento osmótico del agua a través de
una membrana es diferente a la difusión de agua a través de ella. El movimiento osmótico
es mas rápido que la difusión y la fuerza impulsora es una diferencia de presión. La razón
de que el movimiento osmótico sea mas rápido es que este se basa en la ley de
Poiseuille, que establece que el flujo a través de un tubo es proporcional al radio del tubo
elevado a la cuarta potencia (r4), en este caso el tubo esta representado por los canales
en la membrana celular a través de los cuales se mueve al agua.
Por otro lado, la difusión se debe a una diferente concentración de las moléculas de agua
a ambos lados de la membrana. Esta diferencia de concentración es la fuerza impulsora,
por lo que, al igual que en todo proceso de difusión, el movimiento del agua a través de la
membrana es proporcional al área de la superficie que se atraviesa, lo que corresponde al
área de los canales; y si área = r2, en esta caso el flujo de agua es proporcional al radio
de los canales a la segunda potencia.
El movimiento osmótico del agua depende, por tanto, de la magnitud de la presión
osmótica que se genera, y esta a su vez, esta dada por dos factores: osmolaridad de la
solución, es decir, numero de partículas en solución y permeabilidad de la membrana al
soluto.
En relación con el primer punto, existe una relación directa entre el número de partículas y
la magnitud de la presión osmótica que se genera. Para ver como influye el segundo
factor, que es la permeabilidad de la membrana al soluto, se presentan tres ejemplos:
1. Membrana impermeable al soluto: el soluto es incapaz de atravesar la membrana.
2. Membrana poco permeable al soluto: el soluto atraviesa difícilmente la membrana.
3. Membrana permeable al soluto: el soluto atraviesa libremente la membrana.
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Fig. 5.2 membrana impermeable al soluto
En estos tres ejemplos se ve claramente que cuando el soluto no atraviesa la membrana
se genera la mayor presión osmótico, y por tanto, la osmosis o movimiento de agua es
mayor (fig.5.2); mientras que el otro extremo, cuando el soluto atraviesa libremente la
membrana no se genera presión osmótica y por tanto no hay ósmosis (fig.5.4), aunque
en un sentido estricto se genera algo de presión osmótica transitoria al inicio, la que
desaparece cuando la concentración del soluto se iguala a los dos lados de la membrana;
es decir, cuando la osmolaridad es igual. Entre estos dos extremos están todos los
valores intermedios, como se ve en la (fig.5.3), en la que el soluto si atraviesa la
membrana pero no alcanza a igualar la osmolaridad; en este caso se genera un presión
osmótica de menor magnitud que en la figura 5.2 y por tanto la ósmosis es menor.
Fig. 5.3 membrana poco permeable al soluto
Fig. 5.4 membrana permeable al soluto
Si se toma en cuenta lo mencionado hasta aquí se puede calcular la presión osmótica de
una solución utilizando la ecuación de Van’ t Hoff: = C n g o R T
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En donde: representa la presión osmótica, C es la concentración de moléculas del
soluto en mmol/L, n es el numero de partículas en las que se disocia la molécula del
soluto, g es el coeficiente osmótico, σ es el coeficiente de reflexión, su valor varia entre 0
y 1, R es la constante de los gases, T es la temperatura absoluta en unidades Kelvin.
Y ya que: Osmolaridad= C n g
La formula también se puede expresar como: = Osm σ R T
De las variables utilizadas para calcular la presión osmótica, la única que hasta ahora no
se ha mencionado es el coeficiente de reflexión σ. Este se refiere a la capacidad del
soluto para atravesar una membrana; su valor varía desde 0, para las sustancias que
atraviesan libremente la membrana, hasta 1 para aquellas que no la atraviesan en
absoluto.
En este momento es necesario introducir el término de tonicidad, que se refiere a la
presión osmótica generada por una solución. Cuando dos soluciones separadas por una
membrana semipermeable tienen la misma presión osmótica se dice que son isotónicas y
no hay ósmosis. Sin embargo, cuando dos soluciones separadas por una membrana
semipermeable tienen diferente presión osmótica, entonces hay ósmosis por la deferencia
de presión. A la solución con la presión osmótica mayor se le llama hipertónica y ala que
tiene la presión menor, hipotónica.
Es frecuente la confusión del significado de los términos hipo, hiper e isoosmótico con los
de hipo, hiper e isotónica. Para diferenciarlos hay que recordar que la osmolaridad
depende del número de partículas libres en una solución y la tonicidad depende de la
capacidad para generar presión osmótica.
Como ejemplo, véase lo que ocurre si hipotéticamente se le inyecta a una persona una
solución hiperosmolar de cloruro de sodio con 320 mosm/L, hay que recordar que esta
solución, para ser llamada hiperosmolar, debe tener una osmolaridad superior a la del
plasma, que es de 290 mosm/L. Una vez inyectada la solución, esta se localiza en el
líquido intravascular, y como el cloruro de sodio atraviesa libremente la membrana de los
capilares, la osmolaridad del liquido intravascular se iguala con la del liquido intersticial y
no hay movimiento de agua; ocurre lo mismo en la figura 5.4. En este momento, tanto el
liquido intravascular como el intersticial quedan con una osmolaridad igual, aunque mayor
a lo normal, por lo tanto son isoosmolares uno del otro, y como la presión osmótica que
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genera es igual, también son isotónicos. Ahora el liquido extracelular es hiperosmolar en
relación con el liquido intracelular, y debido a que la membrana celular es muy poco
permeable al sodio, este casi no la atraviesa, por lo que se genera una diferencia de
presión osmótica; el liquido extracelular es hipertónico en relación con el liquido
intracelular, lo que produce movimiento de agua desde el interior de la célula hacia el
liquido extracelular.
Ahora comparece lo que ocurre si en lugar de una solución de NaCl se inyecta una
solución de urea con la misma osmolaridad de 320 mosm/L. la urea tiene característica de
atravesar libremente la membrana capilar y la membrana celular, por tanto, una vez que
se encuentra en sangre atraviesa la membrana capilar y la osmolaridad entre el plasma y
el liquido intersticial se iguala: no hay generación de presión osmótica y por lo tanto
tampoco hay ósmosis, los dos compartimientos son isoosmolares isotónicos. Como se
mencionó, la urea también atraviesa la membrana celular, se iguala la osmolaridad entre
el líquido intracelular y el extracelular y no se produce presión osmótica ni movimiento de
agua debido a que el compartimiento intracelular y el extracelular son isotónicos. Estos
ejemplos demuestran como dos soluciones con la misma osmolaridad producen efectos
diferentes en el organismo dependiendo de su coeficiente de reflexión.
La unidad utilizada con mayor frecuencia para medir la presión osmótica es el mmHg, y a
la temperatura corporal una solución con una concentración de 1 osm/L produce una
presión de 19 300 mmHg, lo que corresponde a 19.3 mmHg de presión por cada mosm/L.
Por tanto, la presión osmótica calculada para los líquidos corporales con una osmolaridad
de 290 mosm/L es de 5 597 mmHg; el valor real es algo menor debido a que los líquidos
corporales no son soluciones ideales, por lo que los iones en solución no se encuentran
disociados por completo.
Por otro lado, la unidad de presión de acuerdo al Sistema Internacional de Unidades es el
pascal, cada mmHg de presión equivale a 0.133 kPa, por lo que la presión osmótica de
los líquidos corporales de 5 597 mmHg equivale a 744 kPa.
Propósitos específicos de la práctica:
Comprenderás el concepto de osmosis para aplicarlo a los movimientos de agua
en las células.
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Comprenderás como se genera la presión osmótica que ayuda a los procesos de
filtración.
Comprenderás la diferencia entre osmol efectivo y osmol no efectivo para
entendender los movimientos de agua generados por la presencia de estos.
Comprenderás la diferencia entre movimiento osmótico de agua y difusión de agua
para interpretar los fenómenos de filtración.
Criterios de desempeño:
Serás competente para calcular la presión osmótica a partir de la osmolaridad.
Serás capaz de predecir la dirección del movimiento osmótico a través de una membrana.
Serás capaz de resolver problemas, recuperar y analizar información de diferentes
fuentes.
Serás capaz de completar una técnica de laboratorio.
Serás capaz de que aplicar los conceptos de ensayo, variable dependiente, variable
independiente, modelo y contraste.
Serás capaz de generar gráficos, diagramas de flujo y modelos a partir de la
experimentación.
Resultados esperados en relación a los Criterios de desempeño específicos de la
práctica.
Expondrás la información con tus compañeros de equipo y demostrarás los movimientos
de agua dependientes de la presión osmótica.
Realizarás diferentes experimentos para la observación de las propiedades coligativas de
las soluciones.
Contestarás el cuestionario de la práctica antes de abandonar la sesión de laboratorio.
Entregarás el reporte de práctica con tus observaciones y discusión acerca de la
importancia de la osmolaridad y la presión osmótica en los movimientos de agua a través
de las membranas (filtración) y su aplicación médica.
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Medidas de seguridad:
o En este experimento requerirás el uso de sangre, si la muestra proporcionada es de
sangre humana, debes utilizar guantes desechables y tomar todas las precauciones
para el manejo adecuado de muestras de sangre.
o Es recomendable lavarse siempre las manos al término de un procedimiento y antes
de abandonar el laboratorio.
o No juegues durante la realización de la práctica para evitar accidentes.
a) Cuadro de disposición de desechos
Tipo de desechos Como descartarlos Tipo de contenedor
Material biológico Depositar en contenedor rojo
Soluciones y reactivos Al desagüe abriendo la llave para diluir
Material punzocortante Depositar en contenedor amarillo
Desarrollo de la práctica:
Ósmosis a través de la membrana celular
En situaciones normales, la osmolaridad del líquido intracelular y extracelular es la misma,
con un valor de 290± 10 mosm/L, por lo que estos líquidos también son isotónicos. Sin
embrago, si la osmolaridad del plasma disminuye y los solutos del liquido intracelular no
pueden atravesar libremente la membrana, el liquido intracelular se vuelve hiperosmolar e
hipertónico con respecto al plasma con generación de presión osmótica que mete agua a
la célula, lo que provoca un aumento de volumen que puede llegar a la rotura celular. Por
el contrario, cuando la osmolaridad del plasma aumenta, a expensas de un soluto que no
atraviesa libremente la membrana celular, el plasma se vuelve hiperosmolar e hipertónico
con respecto al líquido intracelular, lo que provoca la salida del agua de la célula con
disminución de su tamaño.
El efecto de soluciones con diferente tonicidad puede ser fácilmente demostrado en los
glóbulos rojos, que en una solución hipotónica se hinchan, pierden la concavidad central y
pueden llegar a lisarse con salida de hemoglobina, esto se observa fácil a simple vista,
mientras que si se exponen a una solución hipertónica disminuyen su volumen y pierden
su apariencia redondeada y forman crenocitos.
1. Prepara 100 ml de las siguientes cuatro Soluciones:
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Solución A: NaCl al 1.8 %
Solución B: NaCl al 0.9%
Solución C: NaCl al 0.4%
Solución D: solución glucosada al 5%
2. Agita suavemente el frasco que contiene la sangre anticoagulada a fin de mezclar por
completo.
3. Marca un tubo capilar para microhematocrito como control normal, llenalo a las ¾
partes y colocalo aparte, este será un control normal que utilizarás posteriormente.
4. Marca cuatro tubos de ensayo con la letras A,B,C y D y adiciona 5 ml de sangre en
cada tubo.
5. Marca un portaobjetos como control normal.
6. Obten una gota de sangre del tubo A, colocalo en el portaobjetos marcado como
control normal y realiza la tinción de Wright conforme a los siguientes pasos:
a) Extiende las células (frotis), deja secar el frotis.
b) Coloca el portaojetos sobre las dos varillas puestas en la tarja del laboratorio.
c) Cubre el frotis con el colorante Wright durante 5 min.
d) Sin mover el portaojetos y evitando tirar el colorante, agrega agua y espera 5 min.
e) Lleva el portaojetos al chorro de agua y deja secar.
f) Una vez seco el frotis colócalo junto con el microhematocrito de control normal para
observarlo al microscopio posteriormente.
g) Centrifuga los cuatro tubos de ensayo A, B, C y D a 3 000 Hz durante 4 min, para
separa las células del plasma.
h) Mide el volumen de plasma en cada tubo de ensayo, anótalo en el cuadro
correspondiente del reporte de laboratorio y sustituyelo por un volumen igual de las
soluciones A, B, C, y D; mezcla, espere 5 min, observa las diferencias entre los
tubos y descríbelas en el cuadro correspondiente al reporte de laboratorio.
i) Marca cuatro portaobjetos con las letras A, B, C , y D.
j) Obten de cada tubo de ensayo una gota de sangre, colocala en el portaobjetos
correspondiente y realiza la tinción de Wright en la forma ya descrita.
k) Identifica cuatro tubos capilares para microhematocrito con las letras A, B, C y D.
l) Llena por capilaridad los tubos capilares para microhematocrito, tomando la
muestra del tubo de ensayo correspondiente A, B, C o D.
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m) Coloca en la microcentrifuga para microhematocrito los cuatro tubos capilares A, B,
C y D, junto con el tubo capilar control normal y centrifuga por 5 min.
n) Lee los cinco tubos capilares para microhematocrito y escribe los resultados en el
cuadro correspondiente del reporte de laboratorio.
o) Observa en el microscopio los cinco frotis a 100 x utilizando una gota de aceite de
inmersión, dibuja y describe la forma de los eritrocitos en cada uno de ellos en el
reporte de laboratorio.
Osmosis a través de la membrana de células vegetales
La membrana de las células vegetales también puede usarse para demostrar el
movimiento osmótico de agua.
1. Prepara las siguientes soluciones:
Solución A: agua destilada
Solución B: NaCl a 0.4%
Solución C: NaCl a 0.9%
Solución D: NaCl a 5%
Solución E: NaCl a 10%
2. Obten de la parte interna de una papa (sin cáscara) cinco piezas de aproximadamente
5 cm de longitud y 1 cm de diámetro.
3. Determina el volumen de cada pieza: sumérjelo en un volumen conocido de agua
contenido en una probeta graduada de 10 ml, y mide el aumento en el volumen de
agua en la probeta.
4. Anota los valores obtenidos en el cuadro del reporte de laboratorio en la columna
“ANTES”.
5. Espera dos horas, saca la pieza de papa de la solución y mide nuevamente el volumen
en la forma antes descrita, anota los resultados en el cuadro del reporte de laboratorio
en la columna “DESPUÉS”
6. Calcula el porcentaje de variación en cada una de las piezas de papa y anota el valor
en el cuadro del reporte de laboratorio en la columna “VARIACIÓN”, especifica si hubo
un aumento (+) o disminución (-).
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Evidencias de desempeño:
De la correcta resolución de los ejercicios de la práctica, y tu participación con tus
compañeros en la resolución de los ejercicios, se dará constancia con el sello y la
firma del asistente del laboratorio en la práctica.
Revisión del cuestionario y los ejercicios realizados durante la práctica al finalizar la
sesión de laboratorio.
Comprobar la adquisición de habilidades básicas, según corresponda en el formato
de documento (anexo 1).
Entregarás el reporte de práctica según formato de documento (anexo 2), el día
posterior a la sesión de laboratorio.
Evaluaciones intermedias con recomendaciones:
Dos días posteriores a la realización de la práctica se revisará tu reporte y se harán los
señalamientos necesarios, para la evaluación final en los días asignados en la carta
descriptiva de la materia.
Método de asignación de calificaciones:
Asistencia a práctica 5 %
Realización de la práctica 50 %
Reporte y cuestionario 45 %
Nota: Sin asistencia a la sesión de laboratorio el reporte carecerá de validez
Cuestionario de evaluación:
Osmosis a través de la membrana celular
1. Calcula la osmolaridad y la presión osmótica que se genera a 37oC para cada una de
las siguientes soluciones empleadas, asumiendo un valor de σ de 1:
Solución Osmolaridad Presión osmótica
mmHg
Presión osmótica
kPa
NaCl 1.8%
NaCl 0.9%
NaCl 0.4 %
Sol. glucosada al 5%
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2. Anota el volumen plasmático sustituido y las observaciones de cada uno de los tubos
de ensayo.
Tubo Volumen sustituido Observaciones
A
B
C
D
3. Lecturas obtenidas en los tubos capilares para microhematócrito:
Tubo de microhematócrito Lectura
Control Normal
A
B
C
D
4. Dibujos de los frotis vistos al microscopio. Descripción y Observaciones
Tubo Control
Tubo C Tubo D
Tubo A Tubo B
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5. Explica por que el volumen plasmático sustituido en cada tubo es diferente.
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
____________________________________________________________________
6. Explica por que la lectura de los tubos de microhematocrito es diferente.
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
____________________________________________________________________
7. Explica la variación en la forma de los eritrocitos en los frotis.
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
____________________________________________________________________
Osmosis a través de la membrana de células vegetales
1. Calcula la osmolaridad y la presión osmótica que se genera a 37oC para cada una de
las soluciones empleadas, asumiendo un valor de σ de 1.
Solución Osmolaridad Presión osmótica en
mmHg
Presión osmótica
en kPa
A. Agua destilada
B. NaCl 0.4%
C. NaCl a 0.9%
D. NaCl a 5%
E. NaCl a 10%
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2. Escribe los volúmenes de las piezas de papa
3. Explica las variaciones en el volumen de las cinco piezas de papa.
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________
Calculo de la presión osmótica y predicción de la dirección del movimiento osmótico
1. En los siguientes esquemas, las dos ramas del tubo están separadas por una
membrana semipermeable que permite únicamente el paso de agua; toma en cuenta
la osmolaridad de las soluciones contenidas en cada una de las ramas del tubo para
indicar si ocurre osmosis y en que dirección.
Pieza Antes Después Variación
A
B
C
D
E
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Explicación:______________________________________________________________
________________________________________________________________________
_________________________________________________________________
Explicación:______________________________________________________________
________________________________________________________________________
_________________________________________________________________
2. En el siguiente esquema se coloco un pistón para aplicar presión en la rama derecha
del tubo, la presión aplicada por este medio es de +0.18 MPa. En este mismo tubo se
determino que la presión osmótica ejercida por una solución 0.2 molar de manitol es
de 0.36 MPa. Con esta información y los datos adicionales que se muestran en la
grafica determina si hay o no osmosis y en que dirección.
Explicación:___________________________________________________________
_____________________________________________________________________
______________________________________________________________
3. En la siguiente ilustración, la membrana que separa las dos ramas del tubo es
permeable al agua y a la glucosa. Toma en cuenta las condiciones que se muestran y
determina si ocurre movimiento osmótico y en que dirección.
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Explicación:
_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
_______________________________________________________________
Conclusiones por el alumno: Escribe los datos que consideres relevantes
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Número de alumnos por unidad de práctica. La unidad de práctica esta
representada por el equipo de laboratorio, que deberá ser de 5 integrantes; determinando
un responsable para solicitar y entregar el material requerido para la práctica así como el
área de trabajo limpia al finalizar la práctica.
Introducción
El desplazamiento de las moléculas de una sustancia de una zona de mayor
concentración a otra de menor concentración recibe el nombre de difusión, esto permite
que la sustancia se distribuya de manera uniforme en el espacio que la contiene. La
difusión de moléculas persiste mientras exista un gradiente de concentración entre las
diferentes partes del sistema. La difusión termina cuando se alcanza el equilibrio y la
concentración de la sustancia es igual en todo el sistema.
Los diferentes factores que influyen en este fenómeno se expresan en la Ley de Fick de la
difusión, que establece que la velocidad de difusión por unidad de superficie en dirección
perpendicular a ésta es proporcional al gradiente de la concentración de soluto en esa
misma dirección. Esta ley se expresa con la siguiente fórmula matemática:
J=DA (C1 – C2)/d
En donde: J difusión, D coeficiente de difusión, A área de difusión, C1 mayor
concentración, C2 menor concentración, d distancia recorrida, (C1 – C2)/d gradiente
de concentración.
El coeficiente de difusión depende del tamaño de la molécula de la sustancia que difunde,
de su solubilidad en el medio que difunde, de la viscosidad del medio en el que difunde y
de la temperatura; esto se expresa como:
D= kT/6a
En donde k es la constante de Boltzmann, T es la temperatura absoluta, a es el radio de
la partícula en solución y la viscosidad del medio.
Es importante comprender los mecanismos que determinan la velocidad de difusión de
una sustancia debido a que este mecanismo de transporte está presente en una gran
cantidad de funciones que se realizan en los animales (y el ser humano). Como ejemplo
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se puede mencionar lo que ocurre con el oxígeno, el cual se introduce al organismo por la
respiración y llega a la sangre por difusión a través de la membrana alveolo-capilar, se
introduce al eritrocito también por difusión, llega a los tejidos periféricos para su uso.
De igual forma sucede con la movilización del CO2 desde los tejidos que lo producen
hacia el exterior del organismo. Por tanto, la difusión del oxígeno desde el aire
atmosférico hasta la sangre puede verse afectada si se modifica el gradiente de
concentración; por ejemplo al disminuir la concentración de oxígeno atmosférico, como
ocurre a grandes alturas, o bien al aumentar la distancia que tiene que recorrer el oxígeno
como consecuencia, por ejemplo, de un engrosamiento de la membrana alveolocapilar,
por fibrosis pulmonar.
Es necesario recordar que la difusión simple, que es la que estudiaremos en esta práctica,
sólo es válida para explicar las transferencias de ciertas sustancias tales como el oxígeno,
el bióxido de carbono y algunas otras moléculas sencillas, especialmente aquellas que no
son ionizables. Para la mayor parte de las sustancias que entran en la célula o salen de
ella, existe otro tipo de procesos de intercambio.
Propósitos específicos de la práctica:
Comprenderás el concepto de difusión para aplicarlo a los procesos celulares.
Identificarás los factores que afectan la difusión, para comprender como afectan los
procesos de difusión.
Criterios de desempeño:
Serás capaz de explicar los fenómenos de difusión a través de las membranas.
Serás capaz de resolver problemas, recuperar y analizar información de diferentes
fuentes.
Serás capaz de completar una técnica de laboratorio.
Serás capaz de que aplicar los conceptos de ensayo, variable dependiente, variable
independiente, modelo y contraste.
Serás capaz de generar gráficos, diagramas de flujo y modelos a partir de la
experimentación.
Manual de Prácticas de Fisiología Veterinaria
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Resultados esperados en relación a los Criterios de desempeño específicos de la
práctica.
Exponrás la información con sus compañeros y demostrarás los movimientos de difusión
a través de las membranas y los factores que la afectan.
Realizarás diferentes experimentos para observar la difusión y los factores que la afectan.
Contestarás el cuestionario de la práctica antes de abandonar la sesión de laboratorio.
Entregarás el reporte de práctica con tus observaciones y discusión acerca de la
importancia de la difusión a través de las membranas y su aplicación médica.
Medidas de seguridad:
o Es recomendable que te laves siempre las manos al término de un procedimiento y
antes de abandonar el laboratorio.
o No juegues durante la realización de la práctica para evitar accidentes.
o
a) Cuadro de disposición de desechos
Tipo de desechos Como descartarlos Tipo de contenedor
Material biológico Depositar en contenedor rojo
Soluciones y reactivos Al desagüe abriendo la llave para diluir
Material punzocortante Depositar en contenedor amarillo
Desarrollo de la práctica:
Efecto del gradiente de concentración sobre la velocidad de difusión.
1. Coloca volúmenes iguales de agua destilada en cinco vasos de precipitados. Verifica
que la temperatura sea igual en todos.
2. Enumera los recipientes del 1 al 5; en cada uno coloque un número de gotas de azul
de metileno igual a su propio número (1 gota en el recipiente 1, 2 gotas en el 2, etc.).
3. Mide el intervalo, al cual llamaremos “tiempo de difusión”, que exista entre el “tiempo
cero” (tiempo en que coloca el colorante) y el “tiempo final” (momento en que la
distribución del colorante es uniforme).
Efecto de la temperatura sobre la velocidad de difusión.
Manual de Prácticas de Fisiología Veterinaria
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1. Utilizando los mismos recipientes que en el experimento anterior (lavados y secos) y
con la misma cantidad de agua destilada, mida el “tiempo de difusión” del colorante en
las siguientes condiciones:
2. Coloca una gota de azul de metileno en varios recipientes cuya agua estará a diferente
temperatura: 5o, 15 o, temperatura ambiente, 50 o y 75 oC.
Efecto de la viscosidad del medio en la velocidad de difusión.
1. Utiliza dos cajas de petri, una con agua destilada y la otra con agar.
2. Coloca en el centro de cada una de ellas un cristal de azul de metileno y determina la
velocidad de difusión.
Evidencias de desempeño:
La correcta resolución de los ejercicios de la práctica, y tu participación con tus
compañeros en la resolución de los ejercicios, dará constancia el asistente del
laboratorio en la práctica mediante el sello y su firma.
Revisión del cuestionario y los ejercicios realizados durante la práctica al finalizar la
sesión de laboratorio.
Comprobar la adquisición de habilidades básicas, según corresponda en el formato
de documento (anexo 1).
Entregarás del reporte de práctica según formato de documento (anexo 2), el día
posterior a la sesión de laboratorio.
Evaluaciones intermedias con recomendaciones:
Dos días posteriores a la realización de la práctica se revisará tu reporte y se harán los
señalamientos necesarios, para su evaluación final en los días asignados en la carta
descriptiva de la materia.
Método de asignación de calificaciones:
Asistencia a práctica 5 %
Realización de la práctica 50 %
Reporte y cuestionario 45 %
Nota: Sin asistencia a la sesión de laboratorio el reporte carecerá de validez.
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Cuestionario de evaluación:
Efecto del gradiente de concentración sobre la velocidad de difusión.
1. Grafica los resultados en papel milimétrico
2. ¿Cuáles son las variables de este experimento y como deben situarse en los ejes
coordenados?__________________________________________________________
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
3. ¿Qué efecto tiene la concentración sobre la velocidad de
difusión?______________________________________________________________
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
4. ¿A qué obedecen los resultados observados?_______________________________
______________________________________________________________________
________________________________________________________________________
______________________________________________________________________
Efecto de la temperatura sobre la velocidad de difusión.
1. Grafica el resultado en papel milimétrico
Vaso Velocidad de difusión
5°C
15°C
Temperatura
ambiente
50°C
75°C
Vaso Cantidad de azul de metileno Velocidad de difusión
1
2
3
4
5
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2. ¿Cuáles son las variables de este experimento y como deben situarse en los ejes
coordenados?__________________________________________________________
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
3. ¿Qué efecto tiene la temperatura sobre la velocidad de difusión?
________________________________________________________________________
_________________________________________________________________
______________________________________________________________________
4. ¿A qué obedecen los resultados observados?_______________________________
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
5. ¿Qué aspectos del experimento le parecen poco exactos? _____________________
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
6. ¿Cómo podrían eliminarse estas deficiencias? _______________________________
______________________________________________________________________
________________________________________________________________________
______________________________________________________________________
Efecto de la viscosidad del medio en la velocidad de difusión.
1. Grafica el resultado en papel milimétrico.
Solución Velocidad de difusión
Agua destilada
Agar
2. ¿De dónde proviene la energía necesaria para el movimiento de las moléculas del
soluto que difunde?_____________________________________________________
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______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
3. Menciona tres ejemplos de procesos fisiológicos que se lleven a cabo por medio de la
difusión._____________________________________________________________
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
4. El enfisema pulmonar se caracteriza por la rotura de los tabiques interalveolares, lo que
ocasiona que grandes sacos de aire sustituyan a los alvéolos, y se produzca una
disminución de la superficie total de la membrana alveolocapilar. Con la ecuación de la
Ley de Fick, explica cómo se afecta la difusión del oxígeno a través de la membrana
alveolocapilar en estos casos.______________________________________________
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
Conclusiones por el alumno: Escribe los datos que consideres relevantes
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Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia
“Dr. Norberto Treviño Zapata”
María Lorena Torres Rdz, MC-MVZ.
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Número de alumnos por unidad de práctica. La unidad de práctica esta
representada por la computadora del laboratorio de informática, por lo tanto el trabajo será
individual.
Introducción
Una característica de toda célula viva es la existencia de un potencial a ambos lados de la
membrana en reposo. Este potencial se genera gracias a la característica semipermeable
de la membrana celular que produce una diferente distribución de cargas eléctricas a
ambos lados de ella. Por un lado, en el interior de la célula se encuentran las proteínas
que, aunque son anfipáticas al pH intracelular, se comportan como aniones y esta
ocasiona un exceso de cargas negativas en el interior de la célula que repele a otros
aniones y atrae cationes como el sodio y el potasio hacia el interior. Sin embargo, estos
aniones no atraviesan la membrana celular con la misma facilidad, ya que esta, en estado
de reposo, es poco permeable el sodio y muy permeable al potasio.
La concentración de un ion a ambos lados de la membrana celular depende, además de
la permeabilidad de la membrana celular depende, además de la permeabilidad de la
membrana al ion, de la magnitud de la fuerza que actúa sobre el. En el caso del potasio,
los aniones proteicos en el interior de la célula crean un gradiente eléctrico que mueve al
potasio hacia adentro de la célula; pero a medida que el potasio entra, la magnitud de
este gradiente disminuye debido a que la cantidad de cargas eléctrica negativas que
atraen al potasio se neutralizan por la entrada de este mismo ion. Al mismo tiempo, se va
creando un gradiente de concentración que tiene a sacar potasio de la célula, ya que la
concentración intracelular de potasio es mayor que la extracelular, hasta que llega a un
estado de equilibrio entre las 2 fuerzas que actúan sobre el potasio y ya no hay flujo de
potasio ni hacia el interior ni al exterior de la célula. Al potencial que se mide en este
momento se le da el nombre de potencial de de equilibrio del ion, en este caso el potasio,
y ala suma de las dos fuerzas que actúan sobre el movimiento de un ion hacia el interior o
el exterior de la célula se le llama gradiente electroquímico.
El potencial de equilibrio de cualquier ion puede calcularse por medio de la ecuación de
Nernst, y determina el potencial en el cual, a las concentraciones intra y extracelulares
dadas, no hay flujo neto del ion. Esta ecuación se expresa como:
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Eion= RT/Fz * In Cext/Cint
En donde: R= constante de los gases, T= temperatura absoluta, F= constante de Faraday,
In= logaritmo negativo, Cext= concentración extracelular, Cint= concentración intracelular
del ion.
Una vez que sustituye estas constantes y se utiliza el logaritmo de base 10, la ecuación
queda de la siguiente manera para una temperatura de 37 oC, obteniendo el valor en mV:
Eion= + - 61* Log Cint/Cext
Si se calcula el potasio de equilibrio del potasio con una concentración intracelular de 140
mmol/L y extracelular de 4 mmol/L, valores normales en los líquidos corporales, el EK+ es
igual a -94mV. En este caso se multiplica por -61 por tratarse de un ion positivo y cuando
el ion es negativo se multiplica por +61.
Si el potencial de membrana en reposo se genera exclusivamente por la diferente
distribución de iones potasio a ambos lados de la membrana, entonces el valor obtenido
con la ecuación de Nernst debería ser igual al potencial de membrana en reposo medido
de forma directa. Sin embargo, cuando se mide el potencial de membrana en reposo, el
valor obtenido es un poco menos negativo que el EK+. Esto es debido a que la membrana
celular, aunque un poco permeable al sodio, permite el paso de algunos de estos iones
sobre los cuales tanto el gradiente eléctrico como el gradiente de concentración tienden a
mantener en la célula. La bomba ATP-asa de Na-K conduce de nuevo a estos iones al
exterior, lo cual también contribuye con algo a mantener la negatividad en el interior de la
célula, ya que por cada 3 iones de sodio que saca, solo introduce a la célula 2 iones de
potasio
El otro ion que se toma en cuenta al hablar de potencial de membrana en reposo es el
cloro. A diferencia del sodio y el potasio, el cloro tiene una carga negativa, por lo que el
gradiente eléctrico lo saca de la célula, mientras que el gradiente de concentración
tienden a introducirlo a la célula debido a que su concentración extracelular es mayor que
la intracelular. El ECl- es muy cercana al potencial de la membrana en reposo a solo unos
cuantos mV mas negativo y la membrana celular nerviosas y musculares es permeable al
cloro, lo que permite a este atravesar la membrana de una u otra dirección en respuesta a
pequeñas variaciones en el potencial de la membrana en reposo para estar nuevamente
Manual de Prácticas de Fisiología Veterinaria
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en equilibrio con el nuevo valor del potencial de membrana; por lo que se dice que los
iones de cloro se distribuyen “pasivamente” a ambos lados de la membrana.
Lo importante que debe ser recordado en relación con el cloro es que su permeabilidad no
se modifica durante el potencial de acción.
De lo dicho anteriormente se deduce que para calcular el potencial de la membrana en
reposo deben tomarse en consideración todos los iones que atraviesan la membrana, así
como la permeabilidad de esta: para ello se utiliza la ecuación de campo constante de
Goldman, también conocido como ecuación de Goldman-Hodgkin-Katz:
Em= -61*log PK+[K+ i]+ log PNa+[Na+i]+ log PCl-[Cl-e]
PK+[K+e]+PNa+[Na+e]+PCl-[Cl-i]
Para la mayoría de las membranas celulares PK+ es aproximadamente 30 veces mayores
que PNa+. El valor de PCl
- es variable dependiendo del tipo celular, para la mayoría de las
células se sitúan éntrelos valores de PK+ y PNa
+, pero en algunas células, como las del
musculo esquelético, su valor es superior a PK+.
Otra forma de calcular el potencial de membrana en reposo es con la ecuación de la
conductancia de cable, que toma en cuenta la conductancia en lugar de la permeabilidad.
Conviene recordar que la conductancia en lugar de la permeabilidad. Conviene recordar
que la conductancia es la reciproca de la resistencia y la unidad de medición es el
Simenes (1 S – 1/ohmio); se representa con la letra g cuando se refiere a la conductancia
especifica de un ion y con la letras G cuando hace referencia a la conductancia total de la
membrana. Esta formula se expresa de la siguiente manera:
Em = gK+EK
+ + gNa+ENa
+ + gCl- ECl
- + gCa++ECa
++ .
gK+ + gNa
+ + gCl- + gCa
++
La principal diferencia entre la ecuación de Goldman y la de conductancia de cable es que
en la primera se utiliza la permeabilidad y en la segunda la conductancia. Estos dos
términos se usan con frecuencia como sinónimos; sin embargo, no representan
exactamente lo mismo. La permeabilidad depende de la composición y estructura de la
membrana, de su espesor y del tipo de sustancia química que difunde a través de ella y
se expresa en Henry por metro (H/m); mientras que la conductancia se refiere ala
cantidad de corriente eléctrica que mueve un ion a través de la membrana con una
diferencia de potencial eléctrico determinado y su unidad es el Siemens.
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Propósitos específicos de la práctica:
Comprenderás cómo las variaciones en la concentración del potasio, sodio y cloro en
el exterior o interior de la célula modifican el potencial de membrana en reposo.
Comprenderás cómo la variación en la conductancia de la membrana al potasio, sodio
y cloro modifican el potencial de equilibrio de cada ion y el potencial de membrana en
reposo.
Comprenderás el concepto de fuerza electroquímica de un ion.
Comprenderás por que el potasio es el principal ion que determina el potencial de
membrana en reposo.
Comprenderás la participación del sodio y el cloro en la generación del potencial de
membrana en reposo.
Criterios de desempeño:
Serás competente para explicar los movimientos de iones a través de las membranas.
Adquirirás la capacidad de predecir los cambios en el potencial de membrana de reposo
que se ocasionan por variaciones en la concentración o la conductancia de los iones.
Adquirirás la capacidad de calcular el potencial de equilibrio de un ion utilizando la
ecuación de Nernst.
Adquirirás la capacidad de calcular el potencial de membrana utilizando la ecuación de
Goldman y la ecuación de conductancia de cable.
Serás capaz de resolver problemas, recuperar y analizar información de diferentes
fuentes.
Serás capaz de completar una técnica de laboratorio.
Serás capaz de utilizar modelos informáticos y programas de simulación para reducir la
experimentación animal.
Serás capaz de que aplicar los conceptos de ensayo, variable dependiente, variable
independiente, modelo y contraste.
Serás capaz de generar gráficos, diagramas de flujo y modelos a partir de la
experimentación.
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Resultados esperados en relación a los Criterios de desempeño específicos de la
práctica.
Exponedrás la información con tus compañeros y explicarás los movimientos de iones a
través de las membranas.
Realizarás diferentes experimentos virtuales modificando las concentraciones ionicas para
observar los registros eléctricos del potencial de membrana.
Contestarás el cuestionario de la práctica antes de abandonar la sesión de laboratorio.
Entregarás el reporte de práctica con tus observaciones y discusión acerca de la
importancia del potencial de membrana en reposo para las comunicaciones celulares y su
aplicación médica.
Medidas de seguridad:
Las observables en el centro de computo y acatarás el reglamento de usuario del centro
de computo.
Desarrollo de la práctica:
Para demostrar como influye el potencial de membrana, la variación en la concentración
intra y extracelular de los iones de potasio, sodio y cloro, o bien la modificación de su
conductancia, se utiliza un programa de computación titulado POTENCIAL DE MEMBRANA
diseñado por el Dr. Michael J. Davis del departamento de Fisiología Medica del Texas
A&M University System Health Sciencie Center, y puede obtenerse de forma gratuita en la
siguiente dirección de internet: http://mphywww.tamu.edu/davis/Models/Davis-
models.html.
Si por alguna razón este programa no puede usarse, los problemas que aquí se presentan
pueden resolverse en forma manual utilizando la ecuación correspondiente; incluso si se
cuenta con el programa, es buen ejercicio calcular los potenciales de equilibrio y de
membrana en forma manual y comparar los resultados con los que se obtienen en el
programa.
Inicio del programa e instrucciones generales
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Si el programa no esta abierto en la pantalla de la computadora, pulsa el icono
correspondiente en la pantalla del escritorio; o bien, dar clic al botón INICIO, selecciona
programas, y de la lista que se despliegue seleccionar POTENCIAL DE MEMBRANA. Maximiza
la ventana dando clic en el cuadro que se encuentra en la esquina superior derecha. La
imagen desplegada debe ser como la que se muestra en la figura 8.1.
Fig. 8.1 Pantalla de inicio del programa POTENCIAL DE MEMBRANA.
En la pantalla se muestran tres cuadros de lado izquierdo en los que se dan los valores de
concentraciones extra e intracelulares y de conductancia de los cuatro principales iones
que modifican el potencial de membrana en reposo: Na+, K+, Ca++ y Cl-. El recuadro
superior corresponde a la CONCENTRACION EXTRACELULAR (EXTERNAL ION CONCENTRATIONS),
el siguiente a la CONCENTRACION INTRACELULAR (INTERNAL ION CONCENTRATIONS), y el inferior
a la CONDUCTANCIA para cada ion (IONIC CONDUCTANCES).
En el recuadro de la derecha se representa el valor del potencial de membrana (Em) es el
lado izquierdo y sobre la grafica con una línea punteada. Los potenciales de equilibrio
Na+, K+, Ca++ y Cl- se representan con líneas de diferentes colores, de lado derecho hay
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un cuadro que permite identificar a que ion corresponde el color. En este recuadro se
grafica también la magnitud de la fuerza electroquímica que mueve a cada ion (DRIVING
FORCE DIAGRAM), que se representa por las flechas verticales que van desde el potencial
de equilibrio del ion hasta el potencial de membrana, a mayor longitud mayor fuerza
electroquímica. Estas flechas también indican la dirección en la que los iones tienden a
moverse: las flechas hacia abajo indican movimiento del ion hacia el interior de la célula y
la flecha hacia arriba, movimiento hacia el exterior.
La concentración interna o externa de cada uno de los cuatro iones se puede cambiar
deslizando el control correspondiente hacia arriba o abajo, tecleando la cantidad en la
casilla que esta en la parte superior de ese control, o haciendo clic en las flechas hacia
arriba o abajo que se encuentran ala izquierda de cada casilla.
Los controles horizontales en el recuadro inferior correspondiente ala conductancia para
cada uno de los cuatro iones y puede modificarse de la misma forma que la concentración
de los mismos. Los valores iniciales que se señalan corresponden a los valores de una
motoneurona espinal.
Para iniciar el programa presiona la flecha que esta a la izquierda en la barra de
herramientas (→), el programa corre en forma continua y cada vez que se cambia alguno
de los parámetros recalcula automáticamente el potencial de equilibrio de ese ion
utilizando la ecuación de Nernst, y el potencial de membrana utilizando la ecuación de
conductancia del cable.
Si deseas volver a los valores originales, dar clic en la barra de herramientas en OPERATE
y seleccionar REINITIALIZE ALL TO DEFAULT.
La figura 8.1 también servirá como control para detectar los cambios que ocurran cada
vez que realices alguna modificación en la concentración o conductancia de los iones.
Nota: para evitar confusiones al escribir los cambios en los potenciales, descríbanse como
un movimiento del potencial hacia el valor cero o alejándose de este, o bien como un
aumento en la hiperpolarización y no como un aumento o disminución del potencial.
1. Antes de iniciar las modificaciones en la pantalla, calcula el potencial de equilibrio para
el potasio, sodio y cloro utilizando la ecuación de Nernst, y el potencial de membrana
Manual de Prácticas de Fisiología Veterinaria
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utilizando la ecuación de conductancia de cable. La conductancia total se obtiene con
la suma de las conductancias individuales. Anota los resultados y compáralos con los
mostrados en la pantalla, las diferencias, si las hay deben ser decimales, debido al
redondeo durante el calculo.
Potencial de equilibrio del potasio___________
Potencial de equilibrio del sodio_____________
Potencial de equilibrio del cloro_____________
Potencial de membrana____________________
2. Observa y explica el efecto de aumentar 5 veces la concentración extracelular de
potasio sobre:
a) el potencial de equilibrio del potasio (EK+).
b) el potencial de equilibrio del sodio (ENa+).
c) el potencial de membrana (Em).
d) la fuerza electroquímica que actúa sobre el potasio (representada por las flechas
verticales).
e) la fuerza electroquímica que actúa sobre el sodio.
f) la fuerza electroquímica que actúa sobre el cloro.
3. Regresa a los valores iníciales seleccionando REINITIALIZE ALL TO DEFAULT en el menú
OPERATE, observa y explica el efecto de aumentar 5 veces la concentración intracelular
de sodio sobre:
a) el potencial de equilibrio del potasio (EK+).
b) el potencial de equilibrio del sodio (ENa+).
c) el potencial de membrana (Em).
4. Repite el mismo procedimiento después de aumentar la conductancia del sodio gNa a
un valor de 3. Explica las diferencias con los resultados previos.
a) el potencial de equilibrio del potasio (EK+).
b) el potencial de equilibrio del sodio (ENa+).
c) el potencial de membrana (Em).
Manual de Prácticas de Fisiología Veterinaria
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5. Explica las diferencias que se observan entre el aumento en la concentración del sodio
y lo que ocurrió al aumentar el potasio.
6. Regresa de nuevo a los valores iniciales y determina el valor de la concentración de
sodio intracelular en la que ENa es igual a cero. Explica el por qué del resultado.
7. Determina también el valor de la concentración extracelular de cloro en el que el ECl es
igual a cero. Explica el por qué del resultado.
8. Regresa a los valores iniciales, realiza cada uno de los siguientes pasos y vuelve al
valor inicial nuevamente en cada paso.
a) ¿Qué efecto se observa sobre el Em cuando gK aumenta en 10 veces? Explica por
qué ocurre este efecto.
b) ¿Qué efecto se observa sobre el Em cuando gK disminuye? Explica por qué ocurre
este efecto.
c) ¿Cuál es el efecto sobre el Em cuando gNa aumenta en 100 veces? Explica por qué
ocurre este efecto.
d) ¿Cuál es el efecto sobre el Em cuando gCl aumenta al máximo? Explica por qué
ocurre este efecto.
e) Coloca la gK = 1, y vea que ocurre en el Em cuando gCl aumenta. Explica por qué
ocurre este efecto.
9. Regresa a los valores iniciales y cambia unicamenta la conductancia iónica, encuentra
bajo que condiciones el sodio se mueve hacia afuera de la célula.
10. Regrese a los valores iniciales y determine de qué iones los cambios en la
conductancia iónica produce despolarización.
11. Regresa a los valores iniciales. Coloca la gCl en su valor mínimo y cambie la gNa hasta
que el valor de Em tenga un valor igual o cercano a -40 mV. ¿Cuál es el valor de gNa en
estas condiciones? ¿Cuál es el valor de la concentración interna del cloro que hace
que ECl sea igual al Em? Explica los resultados.
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12. Regresa a los valores iniciales y ahora ajusta el valor del Em en -20mV cambiando gNa,
¿Cuál es el valor de gNa en estas condiciones? ¿Cuál es el valor de la concentración
interna del cloro que hace que ECl sea igual al nuevo Em? Explica los resultados.
13. Este procedimiento semeja lo que ocurre con la distribución del cloro cuando se
lesiona un axón. ¿Por qué?
Evidencias de desempeño:
La correcta resolución de los ejercicios de la práctica, y tu participación con tus
compañeros en la resolución de los ejercicios, se dará constancia con el sello y la
firma del asistente del laboratorio en la práctica.
Revisión del cuestionario y los ejercicios realizados durante la práctica al finalizar la
sesión de laboratorio.
Comprobarás la adquisición de habilidades básicas, según corresponda en el
formato de documento (anexo 1).
Entregarás el reporte de práctica según formato de documento (anexo 2), el día
posterior a la sesión de laboratorio.
Evaluaciones intermedias con recomendaciones:
Dos días posteriores a la realización de la práctica se revisará tu reporte y se harán los
señalamientos necesarios, para su evaluación final en los días asignados en la carta
descriptiva de la materia.
Método de asignación de calificaciones:
Asistencia a práctica 5 %
Realización de la práctica 50 %
Reporte y cuestionario 45 %
Nota: Sin asistencia a la sesión de laboratorio el reporte carecerá de validez
Cuestionario de evaluación:
El cuestionario lo encontrarás incluido dentro de las actividades, utiliza esta sección para
tus respuestas.
Conclusiones por el alumno: Escribe los datos que consideres relevantes.
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Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia
“Dr. Norberto Treviño Zapata”
María Lorena Torres Rdz, MC-MVZ.
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Número de alumnos por unidad de práctica. La unidad de práctica esta
representada por la computadora del laboratorio de informática, por lo tanto el trabajo será
individual.
Introducción
En el ser humano los tejidos nervioso, muscular y glandular se clasifican como tejidos
excitables, ya que su principal característica es la capacidad para responder ante un
estimulo con un cambio en la magnitud de su potencial de membrana en reposo y, si el
estimulo pose la intensidad suficiente, generar potenciales de acción, que son señales
electroquímicas que se propagan a todo lo largo de la célula.
Los cambios en el potencial de membrana que se observan al aplicar un estimulo se
deben a modificaciones en la conductancia de la membrana a los iones que se producen
al abrirse o cerrarse canales específicos, lo que facilita o dificulta la entrada o salida de
uno o varios iones. Los principales iones intervinientes en el potencial de hacino en el
tejido nervioso son el sodio y el potasio. Al aplicarse un estimulo despolarizante se abren
canales de sodio, este entra en la célula movido por la fuerza electroquímica y acerca el
potencial de membrana al umbral. Esta entrada de sodio afecta el movimiento de potasio
al volver positivo el interior de la célula. Ya que las cargas positivas del sodio repelen el
potasio y lo mueven hacia el exterior, lo que tiende a mover el potencial de membrana
hacia la negatividad. De manera que al aplicar un estimulo aumenta la conductancia de la
membrana para el sodio, llevándolo hacia el exterior; como los canales de sodio se abren
mas rápido que los de potasio, la entrada de sodio es mayor, lo que permite, si el estimulo
es de suficiente intensidad, despolarizar la membrana hasta el umbral y desencadenar la
producción de los potenciales de acción.
Es importante recordar esta competencia entre el sodio y el potasio al aplicar un estimulo
debido a que es la base de la acomodación. La acomodación ocurre cuando el estimulo
se aplica lentamente, lo que permite que se abran suficientes canales de potasio para
contrarrestar el efecto despolarizante del sodio. En esta condiciones del potencial de
acción requiere para su producción un estimulo de mayor intensidad.
Una característica del potencial de acción es la existencia de los periodos refractarios
absoluto y relativo. Estos periodos refractarios protegen a la célula de una
sobreexcitación, ya que durante el periodo refractario absoluto no es posible
Manual de Prácticas de Fisiología Veterinaria
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desencadenar otro potencial de acción al aplicar un estimulo debido a que los canales de
sodio se encuentran cerrados y en estado inactivo. En el periodo refractario relativo si se
puede desencadenar otro potencial de acción al aplicar un estimulo, pero la intensidad del
estimulo debe ser superior ala intensidad requerida cuando la membrana se encuentra en
estado de reposo debido a que el periodo refractario relativo corresponde a la fase de
hiperpolarización del potencial de acción, por lo que la despolarización necesaria para
alcanzar el umbral es mayor. Por esta razón, los periodos refractarios determinan la
frecuencia máxima de producción de potencial de acción de una célula.
La excitabilidad de una célula, que es su capacidad para responder a un estimulo, se
modifica, entre otras cosas, por las variaciones en la concentración extracelular del
potasio y calcio. Cuando la concentración extracelular de potasio aumenta, se modifica el
potencial de equilibrio del potasio y el potencial de la membrana en reposo y disminuye el
gradiente de concentración de potasio, lo que ocasiona que las células se despolaricen y
por lo tanto sea más excitable. En el caso del calcio, el mecanismo por el que modifica la
excitabilidad es diferente; los canales de sodio tienen cargas negativas que atraen el
sodio y permiten su paso a través de el, pero también ejercen atracción sobre otros
cationes como el calcio, el cual, debido a su tamaño, no puede pasar por los canales de
sodio pero permanece en el exterior de la membrana junto a los canales, produciendo un
bloqueo parcial; de manera que cuando la cantidad de calcio extracelular disminuye este
bloque también disminuye y es mas fácil para el sodio atravesar la membrana, lo que
hace al célula mas fácilmente excitable. Ocurre lo contrario cuando el calcio extracelular
aumenta.
Es necesario hacer un par de observaciones en relación con los estímulos, esto se define
como todo aquello capaz de modificar el potencial de membrana y dependiendo de la
dirección de esta modificación se clasifica en despolarizantes o excitadores e
hiperpolarizantes o inhibidores.
Por otro lado, no todos los estímulos despolarizantes son capaces de llevar el potencial
de membrana hasta el umbral y producir potenciales de acción; aquellos que si lo logran
se clasifican como estímulos umbrales y los que no llegan como estímulos subumbrales.
En otra clasificación, se habla de estímulos máximo para definir el estimulo que produce
la máxima respuesta posible y estimulo supramáximo al que tiene una intensidad del 50 %
superior al estimulo máximo; estos se utilizan para asegurar la máxima respuesta.
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Propósitos específicos de la práctica:
Demostrarás algunas de las propiedades fisiológicas únicas del potencial de acción
neuronal.
Comprenderás como se relaciona la intensidad y duración de un estimulo para ejercer
su efecto.
Aprenderás a elaborar e interpretar una curva de intensidad-duración.
Comprenderás el concepto de acomodación.
Comprenderás como influyen los periodos refractarios en la generación del potencial
de acción.
Comprenderás como las variaciones en la concentración externa de potasio y calcio
producen despolarización espontánea.
Comprenderás la diferencia entre un estimulo catódico y un anódico.
Criterios de desempeño:
Serás competente para explicar los movimientos de iones a través de las membranas.
Adquirirás la capacidad de predecir los cambios en el potencial de membrana de reposo
que se ocasionan por variaciones en la concentración o la conductancia de los iones.
Adquirirás la capacidad de calcular el potencial de equilibrio de un ion utilizando la
ecuación de Nernst.
Adquirirás la capacidad de calcular el potencial de membrana utilizando la ecuación de
Goldman y la ecuación de conductancia de cable.
Serás capaz de resolver problemas, recuperar y analizar información de diferentes
fuentes.
Serás capaz de completar una técnica de laboratorio.
Serás capaz de utilizar modelos informáticos y programas de simulación para reducir la
experimentación animal.
Serás capaz de que aplicar los conceptos de ensayo, variable dependiente, variable
independiente, modelo y contraste.
Manual de Prácticas de Fisiología Veterinaria
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Serás capaz de generar gráficos, diagramas de flujo y modelos a partir de la
experimentación.
Resultados esperados en relación a los Criterios de desempeño específicos de la
práctica.
Expondrás la información con tus compañeros y explicarás los movimientos de iones a
través de las membranas.
Realizarás diferentes experimentos virtuales modificando las concentraciones ionicas para
observar los registros eléctricos del potencial de membrana.
Contestarás el cuestionario de la práctica antes de abandonar la sesión de laboratorio.
Entregarás el reporte de práctica con tus observaciones y discusión acerca de la
importancia del potencial de acción para las comunicaciones celulares y su aplicación
médica.
Medidas de seguridad:
Las observables en el centro de computo y acatarás el reglamento de usuario del centro
de computo.
Desarrollo de la práctica:
Para demostrar las propiedades fisiológicas del potencial de acción, se utiliza un
programa computacional titulado POTENCIAL DE ACCION, diseñado por el Dr. Michael J.
Davis del departamento de Fisiología Medica del Texas A&M University System Health
Science Center, y puede obtenerse en forma gratuita en la siguiente dirección de Internet:
http://mphywww.tamu.edu/davis/Models/Davis-models.html. Si por alguna razón este
programa no puede utilizarse los problemas que aquí se presentan pueden resolverse
utilizando los conocimientos básicos sobre la producción de potencial de acción.
Inicio del programa e instrucciones generales
Si el programa no esta abierto en la pantalla de la computadora, da clic en el icono
correspondiente en la pantalla del escritorio, o bien, dar clic al botón INICIO, selecciona
programas y de la lista que se despliegue seleccionar POTENCIAL DE ACCION. Maximiza la
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ventana dando clic en el cuadro que se encuentra en la esquina superior derecha. La
imagen desplegada debe ser como la que se muestra en la figura 9.1.
En la pantalla se observa del lado izquierdo tres recuadros, en el superior se dan los
valores de las CONCENTRACIONES EXTERNAS de sodio, potasio y calcio (EXTERNAL IONIC
CONCENTRATIONS), y en el segundo las CONCENTRACIONES INTERNAS (INTERNAL IONIC
CONCENTRATIONS). En ambos casos los valores pueden modificarse deslizando el control,
tecleando un nuevo valor en la casilla correspondiente o presionando la flechas hacia
arriba o hacia abajo, o a la izquierda de esta casilla. Inmediatamente debajo de las
concentraciones internas están los valores del potencial de equilibrio de cada ion: ENa, EK,
ECa, los cuales se calculan automáticamente al modificar los valores de los iones.
En el recuadro inferior se señalan los PARAMETROS DE ESTIMULACIÓN (STIMULUS
PARAMETERS), que son la AMPLITUD (AMPLITUDE) en miliamperios (mA), la DURACIÓN
(DURATION) en milisegundos y el momento en que el estimulo se aplica (START); es decir, el
tiempo en que transcurre antes que el estimulador envíe el estimulo. No tese que hay
dos estimuladores, por tanto se pueden aplicar dos estímulos (PULSE 1 Y PULSE 2). El
switch para seleccionar uno o dos estímulos es encuentra a la derecha de este cuadro (1
PULSE, 2 PULSE). En este sitio también hay un switch para seleccionar si el estimulo se
aplica como un pulso cuadrado (PULSE) o en forma de rampa (RAMP). Arriba de este switch
se señala el valor del potencial de membrana en reposo (Erest). Este valor se calcula
automáticamente al hacer modificaciones en las concentraciones de los iones.
Del lado derecho hay cuatro graficas que representan, de arriba hacia abajo, el potencial
de membrana (Em), la conductancia para el sodio y el potasio (gNa, gK), la corriente que
atraviesa la membrana (iMem) y el estimulo que se aplica (iStim). Un botón a lado de la
grafica para la corriente de la membrana permite seleccionar entre la corriente total (iTot),
la corriente del sodio (iNa) y la corriente del potasio (iK).
Para iniciar el programa presiona la flecha que esta a la izquierda en la barra de
herramientas (→), el programa corre en forma continua, y cada vez que cambias alguno
de los parámetros, recalcula automáticamente el potencial de equilibrio de ese ion, el
potencial de membrana en reposo y modifica las graficas.
Para volver a los valores originales selecciona REINITIALZE ALL TO DEFAULT en el menú
OPERATE.
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Fig. 9.1 Pantalla de inicio del programa POTENCIAL DE ACCION.
Umbral
Este ejercicio permite ilustrar la propiedad del todo o nada del potencial de acción. Inicia
el programa presionando la flecha de la parte superior izquierda o seleccionando RUN en
el menú OPERATE. Con el switch del estimulador en 1 PULSE, y en PULSE selecciona los
parámetros de estimulación como sigue: Duración 1 = 1 mseg, Start 1 = 4 mseg, la
amplitud 1 vaya incrementándola desde el valor inicial de cero, hasta que aparezca el
potencial de acción.
1. ¿Cuál es el valor umbral encontrado?
2. ¿en que unidades se mide el potencial de membrana?
3. ¿en que unidades se mide la conductancia?
4. ¿en que unidades se mide la corriente a través de la membrana?
5. ¿en que unidades se mide la intensidad del estimulo?
6. ¿Qué nombre recibe la corriente que aparece antes que se produzca el potencial de
acción?
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7. ¿Cómo se modifica la conductancia al sodio y al potasio antes que aparezca el
potencial de acción y una vez que el potencial de acción se genera? Para ver como es
la conductancia antes que se inicie el potencial de acción, regresa al valor de
intensidad previo ala aparición del potencial de acción.
8. ¿Cuál es la diferencia entre la corriente total a través de la membrana (iTot) y las
corrientes de sodio ( iNa) y potasio (Ik) cuando se produce el potencial de acción?
9. ¿Por qué tienen diferente dirección las corrientes de sodio y potasio?
10. ¿Qué dirección tiene la corriente total (iTot), hacia adentro o hacia fuera? ¿Por qué?
11. Relacione las diferentes fases del potencial de accion con la conductancia del sodio y
el potasio y describa como se encuentran los canales en cada fase.
Reposo:
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
Despolarización:
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
Repolarización:
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
Hiperpolarización:
________________________________________________________________________
12. ¿Qué ocurre si continua aumentando la intensidad del estimulo? ¿se modifica la
amplitud del potencial de acción? Explica por que.
13. Coloca la amplitud del estimulo en 5 y disminuye progresivamente la concentración
extracelular de sodio. Describe y explica los efectos sobre Em, ENa, iNa e iK .
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14. ¿Cuál es el valor del ENa, a partir del cual se modifica la amplitud del potencial de
acción?
15. ¿Cómo se relaciona el ENa y la amplitud máxima del potencial de acción a partir de
este valor? Explica este resultado.
16. Regresa a los valores iniciales y pon en amplitud el valor umbral del estimulo. Cambia
la duración del estimulo a 0.5 mseg, nota que el potencial de acción ya no se genera,
pero al volver a aparecer se aumenta la intensidad del estímulo; esto indica que a
menor intensidad del estimulo su duración debe ser mayor y viceversa.
17. Encuentra la amplitud del estimulo necesaria para generar un potencial de acción con
las siguientes duraciones (los valores menores de 0.5 mseg deben teclearse
directamente en la casilla):
Duración (mseg)
Amplitud (mA)
0.2
0.5
1.0
1.5
2.0
2.5
3.0
18. Grafica los valores que se obtuvieron en una curva de intensidad-duración y obten los
valores de reobase, tiempo de utilización y cronaxia.
Acomodación
1. Regresa a los valores iniciales, selecciona una duración del estimulo de 15 mseg y
encuentra la amplitud a la que se genera el potencial de acción.
2. Manten estos parámetros, pero coloca el switch que selecciona el tipo de estimulo en
rampa (RAMP), nota como se modifica la forma del estimulo en la grafica inferior. ¿Qué
ocurre con el potencial de acción y por qué?
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3. Con estos mismos parámetros aumenta progresivamente la intensidad del estimulo
hasta que se produzca nuevamente el potencial de acción, ¿Cuál es la intensidad
requerida?
4. ¿Es igual la forma de potencial de acción a la que se obtuvo con la aplicación del
estímulo cuadrado? Mueve el switch de PULSE a RAMP, para ver las diferencias.
5. Describe y explica las diferencias que encuentras.
6. El mecanismo que explica estas diferencias es el de acomodación, explícalo y
relaciónalo con los resultados obtenidos.
Periodos refractarios
1. Regresa a los valores iniciales y selecciona los siguientes parámetros de
estimulación: duración 1= 1 mseg, duración 2= 1 mseg, Start 1= 4 mseg, Start 2 =20
mseg, coloca el switch para seleccionar el numero de estímulos en 2 pulsos y
establezca la amplitud 1 y la amplitud 2 con el valor umbral obtenido en el primer
ejercicio.
2. Compara los dos potenciales de acción que se producen ¿son iguales?
3. Ahora coloca Start 2= 11 mseg, ¿Qué ocurre con el segundo potencial de acción?
Explique este resultado.
4. Aumenta progresivamente el valor de Start 2 hasta que aparezca otro potencial de
acción. ¿Cuál es el valor de Start 2 en este punto?
5. Calcula la frecuencia máxima de disparo de esta célula tomando en cuenta el tiempo
que debe separar a los dos estímulos para que produzcan dos potenciales de
acción:____________Hz.
6. Coloca nuevamente el valor de Start 2 en 11 mseg y aumenta la amplitud 2 hasta que
se produzca el segundo potencial de acción. ¿Cuál es el valor de la amplitud del
estimulo?
7. ¿Los dos potenciales que se producen son iguales o diferentes? Explica este
resultado.
8. Coloca Start 2 en 10 mseg. ¿Cuál es el valor de la amplitud 2 que se requiere para
producir el segundo potencial de acción?.
9. ¿Por qué este valor es diferente al obtenido en el ejercicio anterior?
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Despolarización espontánea
1. Regresa a los valores iniciales. Manten la amplitud 1= 0 y aumenta progresivamente la
concentración externa de potasio hasta que se produzca un potencial de acción. ¿Cuál
es el valor de la concentración externa de potasio en este punto?
2. ¿Cómo es el potencial de acción comparado con el obtenido en el primer ejercicio que
hizo para obtener el valor umbral?
3. ¿Cuál es el valor del potencial de la membrana en reposo en este punto?
4. ¿Cuál es el valor del potencial de equilibrio del potasio en este punto?
5. Continúa aumentando la concentración externa de potasio hasta un valor cercano a
los 18 mM ¿Qué ocurre?
6. ¿Cuál es el valor del potencial de membrana en reposo y del potencial de equilibrio del
potasio en este punto?
7. Explica por que se produce un potencial de acción si no hay estimulo.
Variaciones en la concentración externa de calcio
1. Regrese a los valores iniciales. Incremente la amplitud 1 hasta 2 mA, este estímulo
produce una despolarización subumbral sin llegar a generar un potencial de acción.
Ahora vea lo que ocurre al disminuir progresivamente la concentración externa del
calcio desde 1.5 a 0.4 mM. Explique el resultado.
2. ¿Qué ocurre si disminuye la concentración externa de calcio asta 0.2 mM? Explique el
resultado.
Estimulación anódica
1. Regresa a lo valores iniciales. En los ejercicios anteriores se aplico siempre el
estímulo catódico, que es despolarizante; ahora se vera lo que ocurre al aplicar el
estimulo anódico. Disminuye progresivamente el valor de amplitud 1 a valores
negativos. Describe y explica los cambios que se observan en el potencial de
membrana con este tipo de estímulo.
2. ¿Este tipo de estímulo es excitador o inhibidor? ¿Por qué?
3. Continúa aplicando un estímulo anódico hasta llegar a un valor mayor a -16 mA. con
este valor se produce un potencial de acción, efecto que se llama interrupción anódica
(anodal break). Explica las posibles causas de este efecto.
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Evidencias de desempeño:
La correcta resolución de los ejercicios de la práctica, y tu participación con tus
compañeros en la resolución de los ejercicios, se dará constancia con el sello y la
firma del asistente del laboratorio en la práctica.
Revisión del cuestionario y los ejercicios realizados durante la práctica al finalizar la
sesión de laboratorio.
Comprobar la adquisición de habilidades básicas, según corresponda en el formato
de documento (anexo 1).
Entregarás del reporte de práctica según formato de documento (anexo 2), el día
posterior a la sesión de laboratorio.
Evaluaciones intermedias con recomendaciones:
D días posteriores a la realización de la práctica se revisará tu reporte y se harán los
señalamientos necesarios, para su evaluación final en los días asignados en la carta
descriptiva de la materia.
Método de asignación de calificaciones:
Asistencia a práctica 5 %
Realización de la práctica 50 %
Reporte y cuestionario 45 %
Nota: Sin asistencia a la sesión de laboratorio el reporte carecerá de validez
Cuestionario de evaluación:
El cuestionario lo encontrarás incluido dentro de las actividades, utiliza esta sección para
tus respuestas.
Conclusiones por el alumno: Escribe los datos que consideres relevantes.
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Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia
“Dr. Norberto Treviño Zapata”
María Lorena Torres Rdz, MC-MVZ.
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Número de alumnos por unidad de práctica. La unidad de práctica esta
representada por la computadora del laboratorio de informática, por lo tanto el trabajo será
individual.
Introducción
La transmisión de información de una célula a otra se lleva a cabo a través de la sinapsis,
que puede ser química o eléctrica. En la sinapsis eléctrica el flujo de corriente iónica
ocurre por uniones en hendidura entre células adyacentes, por ejemplo, entre células de
músculo liso y entre células miocardicas. En el sistema nervioso las sinapsis eléctricas
son raras; el tipo de sinapsis predominante es la química.
En la sinapsis química las células participantes no establecen contacto directo y por ello
se denominan uniones funcionales. En este tipo de sinapsis la comunicación entre las
células presináptica y postsináptica se da mediante un mediador químico que recibe el
nombre de neurotransmisor. Este neurotransmisor se sintetiza y almacena en las
terminaciones nerviosas de la célula presináptica. Canales de calcio regulados por voltaje
se abren cuando un potencial de acción llega ala terminal sináptica, lo que permite la
entrada de calcio a la célula, el cual moviliza las vesículas con el neurotransmisor para
que se unan a la membrana y este se libere por exocitosis ala hendidura sináptica. Una
vez que el neurotransmisor se encuentra en la hendidura, que mide alrededor de 20 nm,
se difunde hasta alcanzar la membrana postsináptica, donde se une con su receptor,
modifica la conductancia para uno o varios iones y genera un potencial postsináptico que
puede ser excitador (despolarización) o inhibidor (hiperpolarización).
Aunque esta es la secuencia de hechos en la mayor parte de las sinapsis químicas, se
observan variaciones, como en la que utiliza oxido nítrico como neurotransmisor. Como en
este caso el neurotransmisor no se almacena en vesículas, no se libera por exocitosis y
tampoco se une a un receptor en la membrana celular de la célula postsináptica.
Es necesario que se generen potenciales de acción para que la información que llega ala
célula postsináptica se propague en ella. Como un potencial postsináptico excitador único
es incapaz de producir una despolarización de suficiente magnitud para llevar el potencial
del membrana hasta el umbral y generar un potencial de acción; se requiere la suma de
varios potenciales para llegar al umbral. Esta sumación puede ser temporal, como cuando
Manual de Prácticas de Fisiología Veterinaria
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en una misma sinapsis se producen varios potenciales postsinápticos con un intervalo de
tiempo muy corto entre ellos. La forma de sumación es la espacial; en este caso los
potenciales ocurren al mismo tiempo pero en botones sinápticos distintos y las corrientes
se suman al viajar por el soma neuronal para llegar al cono axónico y producir el potencial
de axón, los dos tipos de sumación ocurren al mismo tiempo y su efecto es modificado por
las constantes de tiempo y de longitud, cuyo valor depende de las características de la
membrana en la célula postsináptica.
La constante de tiempo se define como el tiempo necesario para que una célula ala que
se inyecta corriente eléctrica tenga un valor 37% menor que el voltaje máximo que
alcanza (fig. 10.1). Se representa como τ = 1/e, donde e es el número neperiano con valor
de 2.72. El valor de la constate de tiempo depende de características de la membrana,
como resistencia (Rm) y capacitancia (Cm). A mayor resistencia se requiere mas tiempo
para despolarizar la membrana y a mayor capacitancia se necesita mas tiempo para
descargar el condensador de la membrana; por tanto: τ = RmCm. El valor de esta
constante varia entre 5 y 50 mseg en las diferentes células.
Fig. 10.1 Constante de tiempo
La constante de longitud tiene importancia particular en células alargadas como los
axones. Esta constante corresponde a la distancia que la corriente recorre desde el sitio
de inyección hasta el sitio en que el valor del potencial es igual a 37% del potencial
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máximo (fig. 10.2). Se representa como λ = 1/e. su valor, que depende de la resistencia
de la membrana (Rm) y de la resistencia interna de la célula (Ri), es mayor cuando la
resistencia de la membrana es alta y la resistencia interna es baja, de manera que la
corriente fluye por el sitio de menor resistencia; esta situación se presenta en los axones
gruesos y por tanto λ = √Rm/Ri. Su valor varía entre 0.1 y 5 mm en las diferentes células.
Cada sinapsis constituye información que llega a la neurona postsináptica; la función de
esta neurona es integrarla para dar una respuesta, que considere en la producción o no
de potenciales de acción y que depende de que si la suma de la corriente de los
potenciales postsinápticos que alcanzo. El cono axonómico llega o no al umbral. En
consecuencia la neurona postsináptica integra la información contenida en los cientos de
sinapsis que ocurren en ella. No todos los potenciales postsinápticos son iguales: algunos
son excitadores (PEPS) mientras que otros son inhibidores (PIPS). Además no todos los
potenciales son de la misma magnitud y el flujo de la corriente electrónica de cada uno de
ellos se enfrenta a diferentes constantes de tiempo y longitud, por ejemplo. La constante
de longitud es menor en una sinapsis que ocurre en la porción distal de una dendrita en
comparación con la de una sinapsis en el soma. Por ultimo, la respuesta de la neurona
depende de que la corriente que llegue el cono axónico tenga la magnitud suficiente para
llevar el potencial umbral; en este caso se producen potenciales de acción cuyo numero
esta en función del tiempo que el potencial permanezca por arriba del umbral.
Fig. 10.2 Constante de longitud
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Propósitos específicos de la práctica:
Comprenderás los principios fisiológicos básicos de la sinapsis química neuroneuronal.
Entenderás como ocurren las sumaciones temporal y espacial, y su importancia en la
transmisión sináptica.
Comprenderás en que consisten las constantes de tiempo y longitud, y su importancia
en la trasmisión sináptica.
Conocerás el mecanismo de producción de la inhibición presináptica.
Diferenciarás entre inhibición postsináptica e inhibición presináptica.
Criterios de desempeño:
Serás competente para explicar los movimientos de iones a través de las membranas.
Adquirirás la capacidad de predecir los cambios en el potencial de membrana de reposo
que se ocasionan por variaciones en la concentración de neurotransmisores.
Serás capaz de resolver problemas, recuperar y analizar información de diferentes
fuentes.
Serás capaz de completar una técnica de laboratorio.
Serás capaz de utilizar modelos informáticos y programas de simulación para reducir la
experimentación animal.
Serás capaz de que aplicar los conceptos de ensayo, variable dependiente, variable
independiente, modelo y contraste.
Serás capaz de generar gráficos, diagramas de flujo y modelos a partir de la
experimentación.
Resultados esperados en relación a los Criterios de desempeño específicos de la
práctica.
Expondrás la información con tus compañeros y explicarás la función de los
neurotransmisores en la comunicación celular.
Realizarás diferentes experimentos virtuales modificando las concentraciones de
neurotransmisores para observar los registros eléctricos del potencial de membrana.
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Contestarás el cuestionario de la práctica antes de abandonar la sesión de laboratorio.
Entregarás el reporte de práctica con tus observaciones y discusión acerca de la
importancia del potencial de membrana en reposo para las comunicaciones celulares y su
aplicación médica.
Medidas de seguridad:
Las observables en el centro de computo y acatar el reglamento de usuario del centro de
computo.
Desarrollo de la práctica:
Para demostrar las propiedades fisiológicas de una sinapsis química neuronal se utiliza un
programa computacional titulado Sinapsis, diseñado por el doctor Michael J. Davis del
Departamento de Fisiología Médica del Texas A&M University System Health Sciencie
Center, que puede obtenerse en forma gratuita en la siguiente dirección de Internet:
http://mphywww.tamu.edu/davis/Models/Davis-models.html. Si por alguna razón resulta
imposible emplear este programa, los problemas que aquí se presenta pueden resolverse
con base en los conocimientos básicos del funcionamiento de una sinapsis química.
Inicio del programa e instrucciones generales
Si el programa no esta abierto en la pantalla de la computadora, de clic en el icono
correspondiente en la pantalla del escritorio o en el botón INICIO, seleccione Programas y,
de la lista que se despliega, haga clic en SINAPSIS. Maximice la ventana mediante un clic
en el cuadro que se encuentra en la esquina superior derecha. La imagen debe ser como
la que se muestra en la figura 10.3.
Del lado izquierdo de la pantalla que se despliega aparece un cuadro con el esquema
animado de dos neuronas presináptica (A y B) y una neurona postsináptica (C); en esta
ultima esta colocado, cerca del cono axónico, el electrodo para registrar los cambios en el
potencial de membrana. En este modelo las dos neuronas presináptica se estimulan
mediante la aplicación de estímulos eléctricos de intensidad suficiente para que cada uno
genere un potencial de acción, que viaja por el axón y llega ala terminal sináptica para
liberar el neurotransmisor. Debe notarse que el estimulador no se muestra en el esquema.
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Los valores iniciales están establecidos para que, al correr el programa, la célula
presináptica A se estimule con un pulso a la frecuencia de disparo mas baja, que es 1.
Para correr el programa, presiona la flecha que esta en la parte superior izquierda (→) o
selecciona RUN en el menú OPERATE.
Fig. 10.3 Pantalla de inicio del programa SINAPSIS.
Si presionas el botón con dos flechas que se halla a la derecha de la flecha que inicia el
programa, este corre de manera continua, para detenerlo, presione el botón Stop que esta
a la derecha del anterior y para regresar a los valores iniciales, deten el programa y
selecciona REINITIALIZE ALL TO DEFAULT en el menú OPERATE corre el programa y utiliza
estos tres botones para observar su funcionamiento.
Debajo del esquema de la sinapsisneuroneuronal se encuentran los controladores que
permiten modificar de forma independiente los parámetros de estimulación de las dos
neuronas presinàpticas:
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1. Status: indica si la neurona está enviando estímulos (Fire) o si se encuentra inactiva
(Silent).
2. Firing rate: es la frecuencia con la que se aplican estímulos sucesivos: la mínima
posible es 1 y la máxima 10.
3. Pulse delay: es el tiempo que separa el estímulo de la neurona A del estímulo
generado en la neurona B.
4. Conductance: selecciona el ion o iones para el o los que el neurotransmisor modifica la
conductancia en la célula postsináptica.
Los controles de las propiedades de la neurona postsináptica incluyen:
1. Constante de tiempo (Time constant): es el tiempo que tarda el potencial de
membrana en tener el 37% menos del voltaje máximo que alcanza.
2. Constante de longitud (Lenght constant): es la que recorre el potencial antes de
alcanzar 37% del voltaje máximo inicial.
También hay dos controles generales:
1. Número de pulsos (#PULSE): es el número de estímulos que se aplican a las neuronas
presináptica.
2. Conexión (WIRING): establece con cual neurona hace sinapsis la neurona A; puede ser
la B o la C.
Del lado derecho de la pantalla se grafican los cambios en el potencial de membrana (Em)
de la célula C a partir de un potencial en reposo de -70mV. Una línea punteada señala el
valor umbral en -60 mV. En la parte inferior de la misma grafica aparecen los estímulos
que se aplican. En esta caso cada estimulo aplicado a las neuronas presinápticas
representa un potencial de acción que llega al botón sináptico y libera neurotransmisor.
Debajo de esta gráfica se hallan dos controladores adicionales:
1. Mantener el registro anterior (Remember previoustrace): si se activa (ON), los trazos
que obtenidos no se borran y pueden compararse trazos consecutivos.
2. Velocidad de la pantalla (Display speed): permite disminuir la velocidad a la que se
dibuja la respuesta; esto puede ser útil en computadoras muy rápidas.
Sumación temporal
En esta actividad se demuestra como la estimulación de una sola célula presináptica
genera potencial postsinápticos que se suman en el tiempo. Inicie como los valores
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originales (REINITIALIZE ALL TO DEFAULT) y selecciona estimulación (Fire) para las neuronas
A. Comienza el programa presionando la flecha de la parte superior izquierda o
seleccionando RUN del menú OPERATE. Observa como se dibuja el cambio en el
potencial de membrana en la grafica, junto con el estímulo que se aplico.
1. ¿Qué nombre recibe este potencial?
_____________________________________________________________________
___________________________________________________________________
2. ¿Cuáles son las características de este tipo de potencial postsináptico?
_____________________________________________________________________
___________________________________________________________________
3. Nota que el potencial generado se caracteriza por un asenso rápido y un descenso
mas lento ¿Por qué ocurre esto?
_____________________________________________________________________
___________________________________________________________________
4. Aumenta el número de pulsos a 4 (# PULSE) y observa el resultado. Advierte que
aparecen 4 estímulos y 4 potenciales independientes. A continuación incrementa la
frecuencia de disparo (Firing rate) de uno en uno hasta un valor de 9; puedes poner
recordar el trazo anterior (Remember previous trace) en ON para observar los cambios
entre estímulos. Observa como se modifican el potencial y la distancia entre los
estímulos.
5. Dibuja la respuesta observada, que corresponde ala sumación temporal.
6. ¿Qué amplitud alcanza el potencial excitador postsináptico con la frecuencia de
disparo de 9?____________ mV.
7. Explica en que consiste la sumacion temporal.
_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
__________________________________________________________________
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8. En tanto mantiene la frecuencia de disparo en 9, aumenta el numero de pulsos (#
PULSES) de uno en uno. Observe que ocurre con el potencial de membrana y
determina el número de pulsos necesarios para llegar al valor umbral: _________
pulsos.
9. ¿Qué debería ocurrir una vez que el potencial de membrana llega al valor umbral?
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
La siguiente actividad muestra por que no se observa la respuesta esperada.
Efecto de la constante de tiempo sobre la sumación temporal
1. Sin modificar los parámetros, frecuencia de descarga de 9 y número de pulsos
necesarios para llevar el potencial al umbral, cambia la constante de tiempo de 0.4 a
0.5 y corra el programa. ¿Qué ocurre? Describe y explica el efecto.
2. Para ver los efectos de la constante de tiempo sobre los potenciales postsinápticos
aislados, vuelve a los valores originales (Reinitialize all to default) y cambia la
constante de tiempo. Observa los cambios; puedes activar Remember previous trace
para una mejor comparación.
3. ¿Cómo modifican la magnitud del potencial postsináptico los cambios en la constante
de tiempo?
_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
__________________________________________________________________
4. ¿Cómo se modifica la duración del potencial postsináptico al cambiar la constante de
tiempo y qué significa?
_____________________________________________________________________
___________________________________________________________________
5. Define constante de tiempo.
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_____________________________________________________________________
___________________________________________________________________
Sumación espacial
1. En esta actividad se demuestra como la sinapsis que ocurren en diferentes lugares se
suman. Regresa a los valores originales y enciende Recordar el trazo anterior para
comparar los potenciales postsinápticos que se producen cuando la neurona A se
estimula sola y cuando las neuronas A y B se estimulan al mismo tiempo.
2. Estimula primero solo la neurona A (A=FIRE) ¿Cuál es el voltaje del potencial? ______
mV.
3. Ahora estimule A y B (A y B=Fire), ¿Cuál es el voltaje del potencial? __________ mV.
4. Para observar con más claridad como ocurre la sumación espacial, aumenta el retraso
(Delay) de la célula B a 1.4. ¿Cuál es ahora el voltaje de la respuesta? ______ mV.
5. Explica por qué son diferentes las magnitudes de los potenciales postsinápticos
obtenidos en las tres situaciones anteriores. _______________________________
_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
__________________________________________________________________
6. Incrementa el retraso (Delay) de la célula B y observe la respuesta ¿Con qué valor de
retraso no hay sumación? ___________________________________________
_____________________________________________________________________
___________________________________________________________________
7. Explica en que consiste la sumación temporal ____________________________
_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
_______________________________________________________________
8. Identifica semejanzas y diferencias entre las sumaciones temporal y espacial.
_____________________________________________________________________
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_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________
Efecto de las variaciones en la constante de longitud sobre la sumación espacial
Regresa a los valores originales y compara los potenciales postsinápticos que se obtienen
al modificar de manera progresiva la constante de longitud de 1 a 0.1.
1. Explica por qué disminuye la magnitud del potencial postsináptico
_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
_________________________________________________________________
2. Coloca el número de pulsos en 3 y la frecuencia de descarga en A en 9, y compara la
magnitud del potencial postsináptico cuando la constante de longitud es 1 y cuando es
0.1. Explica por qué la magnitud es distinta al variar la constante de longitud.
_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
_________________________________________________________________
Combinación de sumación espacial y temporal
Regresa a los valores originales y seleccione A = Fire, # pulses = 5 y Firing rate de A = 8.
Esto significa que la neurona A se estimulará con 5 pulsos a una frecuencia de 8. Corre el
programa.
1. ¿Cuál es la amplitud máxima del potencial excitador postsináptico (PEPS)? ________
mV.
2. ¿Qué tipo de sumación ocurre? __________________________________________
_____________________________________________________________________
___________________________________________________________________
Manual de Prácticas de Fisiología Veterinaria
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Estimula ahora también la célula B a una frecuencia de 5 (B = Fire, Firing rate = 5).
3. ¿Cuál es la amplitud máxima del PEPS? _________________ mV.
4. ¿Qué tipo de sumación se presenta? _____________________________________
_____________________________________________________________________
___________________________________________________________________
5. Incrementa en forma progresiva la frecuencia de estimulación de la célula B y observa
la respuesta. ¿A qué frecuencia se llega al umbral y se produce un potencial de
acción? ___________________________________________________
6. Manten estos parámetros y aumenta el retraso de estimulación de la célula B (Delay) a
1.2 ¿Qué ocurre?
_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
_________________________________________________________________
Para observar otro ejemplo de interacción entre sumación espacial y temporal regresa a
los valores originales y seleccione: A = Fire, B = Silent, Firing rate de A = 9, # pulses = 5,
constante de tiempo = 0.6. Corre el programa para ver este efecto. Este ejemplo muestra
que la célula B funciona como una especie de interruptor de encendido o apagado que
controla si la información de la célula A pasa a la célula B o no lo hace.
7. Explica la importancia de las sumaciones espacial y temporal, y de las constantes de
tiempo y longitud, en la transmisión de información sináptica.
_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
_________________________________________________________________
Efecto de variar la conductancia a diferentes iones en la célula postsináptica (variación en
el neurotransmisor o en el tipo de receptor)
Manual de Prácticas de Fisiología Veterinaria
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La conductancia a diferentes iones en la célula postsináptica se modifica de acuerdo con
el neurotransmisor y el receptor al que éste se une. Esta actividad ejemplifica lo que
ocurre según la conductancia que se modifica. Para observar mejor los cambios es
recomendable correr el programa en forma continua: dé clic con el botón con las dos
flechas que se encuentra en la parte superior izquierda de la barra de herramientas.
1. Regresa a los valores originales. Nota que la conductancia que varia es la de Na y K.
Aplica un estímulo y mide la magnitud del potencial obtenido _________________ mV.
2. Escribe un ejemplo de neurotransmisor cuya acción consista en modificar la
conductancia del sodio y el potasio
_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
__________________________________________________________________
3. ¿Por qué se produce una despolarización a pesar de que hay salida de potasio?
_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
__________________________________________________________________
4. Para ver el efecto del potasio sobre el potencial postsináptico cambie la conductancia
que se modifica a la del Na solo y compare la magnitud del potencial postsináptico que
se produce con el valor obtenido en el caso anterior _________________ mV.
5. Como se explica este resultado?
_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
_________________________________________________________________
6. Cambia ahora la conductancia que se modifica a la del cloro y aplica el estímulo ¿Cuál
es la magnitud de la PEPS? _____________________ mV.
7. ¿Por qué ocurre esta respuesta con el cloro?
_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
__________________________________________________________________
Manual de Prácticas de Fisiología Veterinaria
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8. A continuación cambia la conductancia que se modifica a K y Cl, y aplica un estímulo
¿Cuál es la magnitud del potencial? __________ mV.
9. ¿Qué nombre reciben estos potenciales negativos?
____________________________________________________________________
10. Si el potencial de membrana no se modifica al aumentar la conductancia al cloro, ¿por
qué la amplitud del potencial inhibidor postsináptico (PIPS) es menor cuando se
incrementa la conductancia al K y el Cl que cuando se aumenta sólo para el K?
____________________________________________________________________
11. ¿Cómo se llama este tipo de inhibición?
____________________________________________________________________
Inhibición presináptica
1. Para ejemplificar este tipo de inhibición se requiere cambiar la forma en la que las tres
neuronas están interconectadas. Regresa a los valores iniciales y cambia conexión
(Wiring) a A > B. El dibujo se modifica y ahora la neurona A hace sinapsis con la
neurona B. Corre el programa y explica la respuesta que se obtiene con este nuevo
arreglo.
2. Estimula la célula B, no la A; para ello seleccione A = Silent y B = Fire. Explica la
respuesta que observa y anota la magnitud del potencial de membrana ___________
mV.
3. Aplica ahora un estímulo a las dos células (A y B) (A = Fire y B = Fire). Escribe la
magnitud de la respuesta __________________________ mV.
4. ¿Cómo es la magnitud de la respuesta en relación con la obtenida cuando sólo se
estimula B y por que ocurre este cambio?
_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
_________________________________________________________________
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5. Con estos mismos parámetros aumenta de manera progresiva el retraso de
estimulación de B (Delay) hasta un valor de 3. Describe y explica los cambios en el
potencial postsináptico.
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
Evidencias de desempeño:
La correcta resolución de los ejercicios de la práctica, y tu participación con tus
compañeros en la resolución de los ejercicios, se dará constancia con el sello y la
firma del asistente del laboratorio en la práctica.
Revisión del cuestionario y los ejercicios realizados durante la práctica al finalizar la
sesión de laboratorio.
Comprobar la adquisición de habilidades básicas, según corresponda en el formato
de documento (anexo 1).
Entregarás del reporte de práctica según formato de documento (anexo 2), el día
posterior a la sesión de laboratorio.
Evaluaciones intermedias con recomendaciones:
Dos días posteriores a la realización de la práctica se revisará tu reporte y se harán los
señalamientos necesarios, para su evaluación final en los días asignados en la carta
descriptiva de la materia.
Método de asignación de calificaciones:
Asistencia a práctica 5 %
Realización de la práctica 50 %
Reporte y cuestionario 45 %
Nota: Sin asistencia a la sesión de laboratorio el reporte carecerá de validez
Cuestionario de evaluación:
El cuestionario lo encontrarás incluido dentro de las actividades, utiliza esta sección para
tus respuestas.
Conclusiones por el alumno: Escriba los datos que considere relevantes.
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Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia
“Dr. Norberto Treviño Zapata”
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Número de alumnos por unidad de práctica. La unidad de práctica esta
representada por el equipo de laboratorio, que deberá ser de 5 integrantes; determinando
un responsable para solicitar y entregar el material requerido para la práctica así como el
área de trabajo limpia al finalizar la práctica.
Introducción
El movimiento corporal existe gracias al sistema musculo esquelético; el músculo, al
contraerse, mueve las articulaciones a través de las inserciones óseas, ya sean directas o
mediante tendones. Las fibras musculoesqueléticas son fibras alargadas multinucleadas y
de aspecto estriado que requieren estimulación nerviosa para contraerse. Tal estimulación
la proporcionan las motoneuronas alfa que se encuentran en el asta interior de la médula
espinal. Estas motoneuronas reciben información proveniente de centros motores
superiores como la corteza cerebral, el cerebelo y los núcleos basales, reticulares y
vestibulares, así como información periférica proveniente del huso muscular y el órgano
tendinoso de Golgi, tanto del mismo músculo como de músculos antagonistas. La
información llega a la motoneurona através de la sinápsis y se procesa. Si el potencial
que accede al cono axónico alcalnza el umbral, la motoneurona no produce potenciales
de acción y el músculo no se contrae.
La secuencia de eventos que ocurren durante la contracción del mùsculo esquelético es la
siguiente:
1. Producción de potenciales de acción en la motoneurona alfa.
2. Ingreso del potencial de acción a la terminal presináptica y liberación del
neurotransmisor acetilcolina en la placa mioneural.
3. Unión de la acetilcolina con sus receptores nicotínicos en la membrana de la célula
muscular.
4. Aumento de la conductancia de Na+ y K+ en la membrana muscular.
5. Generación del potencial de placa terminal.
6. Generación del potencial de acción en la célula muscular.
7. Propagación del potencial de acción a través de los túbulos T.
8. Liberación de Ca++ de las cisternas terminales del retículo endoplásmico.
9. Unión del Ca++ con la subunidad C de la troponina.
10. Deslizamiento de tropomiosina y liberación de los sitios de unión de la actina.
11. Formación de enlaces cruzados entre la actina y la miosina.
Manual de Prácticas de Fisiología Veterinaria
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12. Desplazamiento de los filamentos delgados sobre los gruesos, lo que produce
acortamiento de la sarcómera.
Vale la pena recordar que la cantidad de acetilcolina es varias veces superior al mínimo
necesario para llevar el potencial de la célula muscular al umbral; esto se conoce como
factor de seguridad. Puesto que en la motoneurona se procesó gran cantidad de
información, cuyo resultado es la producción de potenciales de acción para contraer el
músculo, debe asegurase su contracción. También hay que recalcar que todas las
sinapsis en el músculo esquelético son excitadoras, por lo que la relajación no es otra
cosa que la falta de excitación.
Las etapas del proceso de relajación son las siguientes:
1. Liberación de Ca++ de su unión con la troponina.
2. Bloqueo del sitio de unión de la actina por la tropomiosina.
3. Bombeo de Ca++ al interior del retículo sarcoplásmico.
4. Suspensión de la interacción entre actina y miosina.
Los elementos contráctiles se acortan durante la contracción muscular. Sin embargo,
como los músculos poseen elementos elásticos y viscosos dispuestos en serie con el
mecanismo contráctil, es posible que la contracción ocurra sin que la longitud total del
músculo disminuya de manera apreciable: esta contracción se denomina isométrica. La
contracción con acortamiento apreciable del músculo pero sin variación importante del
tono se denomina isotónica.
Sherrington introdujo el término de unidad motora para referirse a una motoneurona alfa y
a todas las fibras musculares inervadas por ella. El número de fibras musculares
inervadas por una sola motoneurona varía de acuerdo con la precisión del movimiento
que se realiza. Los movimientos finos requieren la contracción de unas cuantas fibras
musculares, por lo que las unidades motoras son pequeñas, por ejemplo, los músculos
extraoculares; los movimientos posturales gruesos demandan la contracción simultánea
de muchas fibras y por tanto las unidades motoras son de gran tamaño.
Una breve contracción seguida de relajación se produce cuando un potencial de acción
aislado llega a la fibra muscular; esta respuesta se denomina sacudida muscular o
sacudida simple. La actividad de un grupo de motoneuronas controla cada músculo
corporal y regula su contracción en varias formas. Una de ellas consiste en modificar el
Manual de Prácticas de Fisiología Veterinaria
María Lorena Torres Rodríguez Página 126 de 144
número de motoneuronas activas y por tanto controlar la cantidad de fibras musculares
que se contrae; este proceso recibe el nombre de reclutamiento y, como su nombre lo
indica, la fuerza de contracción se incrementa conforme más fibras musculares que se
contraen se agregan o se reclutan.
Otra forma de controlar la contracción muscular comprende la variación de la frecuencia
de los potenciales de acción que las motoneuronas producen. Cuando la frecuencia de
estos potenciales es menor de 5 Hz, hay tiempo suficiente para que el músculo se relaje
entre un potencial y el siguiente, de manera que ocurren contracciones individuales o
sacudidas simples. Sin embargo, con una frecuencia de estimulación de 5 Hz a 15 Hz, el
músculo aún no se relaja por completo antes de que el siguiente potencial de acción
llegue; ello produce una sumación de la respuesta contráctil, con una fuerza de
contracción superior a la de l contracción aislada porque el calcio intracelular todavía no
regresa por completo al retículo sarcoplásmico. Cuando la frecuencia de estimulación es
superior a 15 Hz resulta difícil distinguir una contracción de la siguiente y el mùsculo entra
en un estado de contracción sostenida que recibe el nombre de tetania, cuya intensidad
es varias veces superior a la de la sacudida simple.
El músculo liso difiere histológicamente del músculo estriado (esquelético y cardiaco), ya
que carece completamente de estrías transversales, presenta un retículo sarcoplásmico
no muy bien constituido y, aunque contiene filamentos de actina y miosina, no se conoce
exactamente su disposición como en el caso de los otros tipos de músculos
El músculo liso en un mismo órgano parece ser diferente en varios aspectos, tales como
su tamaño, su organización en haces musculares o laminares, responde de diferente
manera dependiendo del tipo de estímulos aplicados; además, posee diferente
innervación y tiene funciones especificas.
El músculo liso este presente en el organismo en dos formas: como músculo liso visceral
y como músculo liso multiunitario.
Propósitos específicos de la práctica:
Explicarás los fenómenos de sacudida simple, reclutamiento, sumación y tétanos
como parte de la contracción muscular para demostrar la comunicación celular.
Manual de Prácticas de Fisiología Veterinaria
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Comprobarás las formas en las que el sistema nervioso regula la fuerza durante una
contracción muscular, para demostrar la comunicación celular.
Realizarás preparaciones fisiológicas para observar la actividad eléctrica y mecánica
de las células en el laboratorio.
Integrarás los conocimientos adquiridos para explicar el funcionamiento normal del
músculo estriado esquelético y liso intestinal.
Criterios de desempeño:
Serás competente para diseccionar tejidos específicos cuando, leas la práctica, obtengas
información acerca de la anatomía del sujeto de estudio y practiques la disección.
Serás capaz de operar instrumentos de registro fisiológicos así como de manipular
organismos para la determinación de variables fisiológicas en condiciones de laboratorio.
Serás competente para elaborar preparaciones fisiológicas con el objetivo de registrar la
actividad tanto eléctrica como mecánica del músculo en respuesta a un estímulo.
Serás capaz de resolver problemas, recuperar y analizar información de diferentes
fuentes.
Serás capaz de completar una técnica de laboratorio.
Serás capaz de utilizar modelos animales para experimentación con apego a la Ley
Federal de Sanidad Animal y al Código de Etica Profesional del Médico Veterinario
Zootecnista en México.
Serás capaz de que aplicar los conceptos de ensayo, variable dependiente, variable
independiente, modelo y contraste.
Serás capaz de generar gráficos, diagramas de flujo y modelos a partir de la
experimentación.
Resultados esperados en relación a los Criterios de desempeño específicos de la
práctica.
Manual de Prácticas de Fisiología Veterinaria
María Lorena Torres Rodríguez Página 128 de 144
Expondrás la información con tus compañeros y demostrarás la comunicación celular al
generar una contracción muscular en la preparación fisiológica.
Contestarás el cuestionario de la práctica antes de abandonar la sesión de laboratorio.
Entregarás reporte de práctica con revisión de información acerca del microscopio y su
utilización, así como de las preparaciones frescas.
Medidas de seguridad:
o Es recomendable que te laves siempre las manos al término de un procedimiento y
antes de abandonar el laboratorio.
o No juegues durante la realización de la práctica para evitar accidentes.
o Efectuar en cada proceso el montaje adecuado con especial cuidado, fijando todas las
piezas de acuerdo a su función a realizar.
o Precaución al manipular animales.
a) Cuadro de disposición de desechos
Tipo de desechos Como descartarlos Tipo de contenedor
Material biológico Depositar en contenedor rojo
Soluciones y reactivos Al desagüe abriendo la llave para diluir
Material punzocortante Depositar en contenedor amarillo
Desarrollo de la práctica:
1. Obtener una preparación bulbo espinal de la rana
a) Realiza una incisión circular en la región abdominal de la rana después,
b) Procede a desprender la piel desde el abdomen hasta los miembros posteriores,
quedando totalmente descubiertos los músculos de dichos miembros,
c) Procede a diseccionar los músculos gemelos o gastrocnemio;
d) Comprime ligeramente cerca del extremo cortado.
e) Observa si se presentan contracciones musculares.
f) Repite la operación y anota los resultados.
2. Respuesta a estímulos térmicos:
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Corta el pequeño segmento de nervio en donde estuvo estimulando. Calienta la varilla de
vidrio y aproxímela al extremo cortado del nervio, procurando no llegar a tocarlo. Observa
si ocurre alguna respuesta y anota los resultados.
3. Respuesta a estímulos osmóticos:
Corta el extremo del nervio cerca del sitio anteriormente estimulado; coloca un pequeño
cristal de NaCl sobre la parte terminal del nervio seleccionado. Espera un poco y observa
si hay contracciones del músculo.
4. Respuesta a estímulos eléctricos:
Realiza las conexiones necesarias para utilizar el carrete de inducción, coloca los
electrodos sobre el nervio y cierra el circuito durante 1 seg.
5. Bloqueo mioneural:
Agrega unas gotas de solución de d-Tubocurarina al 1% al músculo, después de 5 min
estimula directamente el músculo y anota los resultados.
Desmedula la rana y obten una preparación neuromuscular. Sujeta la preparación por la
cabeza del fémur con la pinza y por la parte inferior del gastrocnemio a la pajilla por medio
de un hilo; posteriormente introduzca los dos cables monopolares en el músculo.
6. Sacudida simple
Este fenómeno se produce aplicando un único estimulo de intensidad umbral
directamente (MUSCULO) o indirectamente (nervio). El quimógrafo debe de girar ala
velocidad de 1.2 mm/seg. Ponga a funcionar el motor del quimógrafo y estimule,
deteniendo la marcha del cilindro cuando este haya dado vuelta completa, para evitar la
superposición del registro sobre el papel ahumado.
7. Sumación de estímulos subumbrales:
Excita el músculo empleando estímulos subumbrales, con una frecuencia de un estimulo
por segundo o medio segundo.
8. Fenómeno de escalera
Estimula varias veces con intensidad umbral durante varios segundos y trate de que el
intervalo de tiempo entre cada uno de ellos sea mayor que el que ocupa una sacudida
Manual de Prácticas de Fisiología Veterinaria
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simple en su totalidad; observara cambios en las respuestas debido al trabajo previo.
9. Tétanos incompleto
Para obtener este registro, aplica estímulos sucesivos con intervalos mínimos al iniciarse
el periodo de relajación.
10. Tétanos completo
Aumenta la frecuencia de estimulación, disminuyendo el intervalo que separa un estimulo
de otro, es decir, antes de que empiece el periodo de relajación, para obtener una
frecuencia mayor a la empleada para provocar el tétanos incompleto. Observa los
resultados.
11. Relación longitud del músculo-fuerza de concentración
La longitud del músculo de su preparación puede ser modificada aumentando la distancia
entre las dos barras a las que esta sujeta, provocando una modificación en su fuerza
contráctil. Se procederá a colocar pesas en la pajilla, dependiendo del tamaño de la
preparación. Cada vez que se ponga una pesa en la pajilla, se debe proporcionar un
estimulo eléctrico de intensidad umbral y se registrara en el quimógrafo. Anote sus
resultados.
12. Obtener preparación de músculo liso
a) Sacrifica el animal (no deben utilizarse anestésicos para realizar la eutanasia, ya
que interfieren con la actividad de la musculatura lisa), se incide en la parte media
ventral para exponer las asas intestinales. Se obtienen varios tramos de asas
intestinales de 3-5 cm de longitud y se colocan en una caja de petri que contenga
solución de Tyrode; se provee de aire al tejido.
b) Utiliza el oxigenador lave un tramo de intestino con la jeringa que contenga
solución de Tyrode, verificando que se vacié el contenido intestinal.
c) El tramo de intestino lavado se une por ambos extremos con hilo delgado,
procurando no manipular el tejido con los dedos.
d) Uno de los extremos del hilo se fija a la varilla del oxigenador y se introduce a la
copa de la cámara de órganos aislados que deberá contener Sol. de Tyrode a
37ºC. Ajusta la salida del aire para formar una corriente continua; el otro extremo
Manual de Prácticas de Fisiología Veterinaria
María Lorena Torres Rodríguez Página 131 de 144
del hilo se sujeta ala varilla inscriptora, la cual debe formar un ángulo recto con la
pared del tambor del quimógrafo.
e) Una vez terminadas estas maniobras, no se deberán mover los aparatos para
evitar que se registren artefactos en el papel. En cada evento indica sobre el papel
ahumado el momento de su inicio.
13. Respuesta a estímulos térmicos
Lava la preparación y añada Sol. Tyrode a 4º C; pon el quimógrafo a girar a una
velocidad de 0.24 mm/seg; en el momento en que el tejido comience a manifestar su
actividad mecánica, cambia la velocidad a 1.2 mm/seg hasta que llegue a 37º C. Observa
y anota.
14. Respuesta a la anoxia
Toma un registro basal a 37º C, suspende el paso de aire durante 1 o 2 minutos, después
restablezca el suministro de aire y registra durante 3 minutos. Grafica tus resultados.
15. Respuesta a la adrenalina, la acetilcolina y al sulfato de atropina
Realiza un registro basal. Añade a la preparación 0.5 a 0.1 ml de Adrenalina 1:10,000,
indicando en el papel de registro el momento de su aplicación. Observa el efecto y espere
a que la preparación se recupere. Efectúa dos lavados y vuelve a llenar la copa con Sol.
Tyrode a 37º C. Una vez que la actividad del músculo ha regresado a su normalidad,
añade 0.2 a 1.0 ml de Sol. de Acetilcolina 1:10,000. Cuando el efecto haya sido
observado y registrado, lava dos veces y vuelve a llenar la copa con Sol. Tyrode a 37º C.
Cuando el registro vuelva a ser normal, agrega 0.5 a 1.0 ml de Sulfato de atropina
1:20,000; espera aproximadamente 5 min. Y administra a la preparación 0.5 ml de
Acetilcolina 1:10,000. Observa y anota tus resultados.
Evidencias de desempeño:
La correcta ejecución de los procedimientos de laboratorio, y tu participación
durante el desarrollo de la misma, se dará constancia con el sello y la firma del
asistente del laboratorio en la práctica.
Revisión del cuestionario de la práctica al finalizar la sesión de laboratorio.
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Comprobar la adquisición de habilidades básicas, según formato de documento
(anexo 1).
Entregarás el reporte de práctica según formato de documento (anexo 2), el día
posterior a la sesión de laboratorio.
Evaluaciones intermedias con recomendaciones:
Dos días posteriores a la realización de la práctica se revisará tu reporte y se harán los
señalamientos necesarios, para su evaluación final en los días asignados en la carta
descriptiva de la materia.
Método de asignación de calificaciones:
Asistencia a práctica 5 %
Realización de la práctica 50 %
Reporte y cuestionario 45 %
Nota: Sin asistencia a la sesión de laboratorio el reporte carecerá de validez
Cuestionario de evaluación:
1. Explica el mecanismo especifico mediante el cual se induce la excitabilidad nerviosa a
través de los siguientes estímulos:
a) mecánicos____________________________________________________________
b) térmicos_____________________________________________________________
c) osmóticos____________________________________________________________
d) Eléctricos ____________________________________________________________
2. -Explica lo sucedido durante el bloqueo mioneural inducido por la d-Tubocurarina.
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
____________________________________________________________________
3. Explica el mecanismo de acción de los bloqueadores neuromusculares y mencione
sus utilidades.
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
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________________________________________________________________________
__________________________________________________________________
4. Explica porque se produce el fenómeno de escalera.
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
____________________________________________________________________
5. Explica por que existen diferencias en las respuestas contráctiles observadas cuando
se aumenta la intensidad de los estímulos eléctricos, si se supone que las fibras
musculares responden a la ley de “todo o nada”.
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
____________________________________________________________________
5. ¿Que característica fisiológica del músculo esquelético permite su
tetanización?__________________________________________________________
_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
___________________________________________________________________
6. ¿Qué efecto ejerce la anoxia sobre el tono y el ritmo del músculo liso?
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________
7. ¿Qué papel desempeña la acetilcolina sobre el músculo liso visceral?
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
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____________________________________________________________________
8. ¿Es la adrenalina un mediador químico del la actividad del músculo liso visceral?
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
____________________________________________________________________
9. ¿Cuál es el mecanismo de acción del sulfato de atropina?
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
____________________________________________________________________
10. ¿Qué efecto ejerce la temperatura sobre el tono y el ritmo del músculo liso visceral?
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
____________________________________________________________________
11. Menciona tres propiedades fisiológicas del músculo liso.
12. Conclusiones por el alumno: Escribe los datos que consideres relevantes
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Número de alumnos por unidad de práctica. La unidad de práctica esta
representada por el equipo de laboratorio, que deberá ser de 5 integrantes; determinando
un responsable para solicitar y entregar el material requerido para la práctica así como el
área de trabajo limpia al finalizar la práctica.
Introducción:
En principio el proceso de reproducción celular conocido con el nombre de mitosis, es
esencialmente la misma en células vegetales y animales, pues sólo existen diferencias en
los detalles. Es difícil lograr la observación de los detalles morfológicos y estructurales en
las células vivas, por lo que se recurre a fijarlas o teñirlas, cortándolas o extendiéndolas
mediante compresión.
La mitosis, puede ser estudiada eligiendo un material constituido por células que se hallen
en continua división. Esta condición la reúnen los meristemos terminales o primarios, tales
como los que se encuentran en el ápice de las raíces.
Un bulbo de cebolla cuya base se mantenga en contacto con el agua durante 4 ó 5 días,
nos proporciona abundante cantidad de raicillas jóvenes, muy apropiadas para la
obtención de muestras destinadas a observar figuras de mitosis.
Existen principios generales que gobiernan la meiosis tanto en las plantas como en los
animales, pero al igual que en el caso de la mitosis existen diferencias de detalle.
Las células que se requieren para estos trabajos se localizan en los órganos
reproductores y proceden de células que contienen el número cromosómico diploide (2n)
el cual es reducido a la mitad durante la meiosis; así se obtienen células con el número
cromosómico haploide (n). Una serie de acontecimientos se suceden para producir estos
tipos celulares o gametos.
Propósitos específicos de la práctica:
Observarás e interpretarás figuras de distintas fases de la mitosis en células
eucariotas para comprender los procesos de división celular.
Diferenciarás claramente los procesos de división celular meiosis y mitosis para
identificar las células que utilizan cada uno de ellos.
Manual de Prácticas de Fisiología Veterinaria
María Lorena Torres Rodríguez Página 137 de 144
Criterios de desempeño:
Serás competente para identificar y localizar en el microscopio las diferentes fases de la
mitosis y la meiosis celular, cuando leas la práctica, obtengas información acerca de las
diferentes fases de cada uno de estos procesos de división celular.
Serás capaz de explicar la importancia de cada uno de los procesos de división celular,
cuando obtengas la información y la análisis con tus compañeros de clase.
Serás competente para observar las células en etapa de división celular cuando, realices
preparaciones frescas de tejidos en crecimiento o regeneración.
Serás competente para utilizar el microscopio como herramienta diagnóstica.
Serás competente para elaborar preparaciones frescas para su observación al
microscopio.
Serás capaz de resolver problemas, recuperar y analizar información de diferentes
fuentes.
Serás capaz de completar una técnica de laboratorio.
Resultados esperados en relación a los Criterios de desempeño específicos de la
práctica.
Expondrás la información con tus compañeros e identificarás las células en división y sus
diferentes etapas en la preparación fresca del tejido en crecimiento.
Contestarás el cuestionario de la práctica antes de abandonar la sesión de laboratorio.
Entregarás reporte de práctica con revisión de información acerca del proceso de división
celular y sus diferentes etapas como parte del ciclo celular y su utilización médica.
Medidas de seguridad:
o Cuidado del microscopio
1. El microscopio es un instrumento caro que debe cuidarse esmeradamente.
2. Siempre se debe tomar por el brazo y colocar en su base la otra mano.
3. Nunca debe ponerse en la orilla de la mesa.
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María Lorena Torres Rodríguez Página 138 de 144
4. No debe inclinarse, ya que el equilibrio del instrumento no es el adecuado en esta
posición y puede caerse fácilmente.
5. Para limpiar las lentes solo use el papel adecuado, así evitarás ralladuras.
6. Al terminar el trabajo coloca nuevamente el objetivo de menor aumento en línea recta
con el tubo y suba éste a 1 cm. de la platina.
7. Ve que las pinzas no queden hacia afuera de la platina.
8. Colócalo nuevamente en su lugar.
9. Lava los porta y cubreobjetos.
o Es recomendable que te laves siempre las manos al término de un procedimiento y
antes de abandonar el laboratorio.
o No juegues durante la realización de la práctica para evitar accidentes.
b) Cuadro de disposición de desechos
Tipo de desechos Como descartarlos Tipo de contenedor
Material biológico Depositar en contenedor rojo
Soluciones y reactivos Al desagüe abriendo la llave para diluir
Material punzocortante Depositar en contenedor amarillo
Desarrollo de la práctica:
1. Unos cinco días antes de realizar la práctica, se colocará un bulbo de cebolla tapando
la boca de un frasco, que se llena hasta que el agua toca la base de la cebolla. Se
logra así el desarrollo de numerosas raicillas jóvenes, cuando éstas tengan una
longitud de 3 centímetros es el momento adecuado para hacer la preparación.
2. Corta con unas tijeras finas o navaja de afeitar, los 5 últimos milímetros de las raicillas,
depositalas en un vidrio de reloj.
3. Cubre la muestra con orceína acética clorhídrica. Aproximadamente unas 2-3 gotas de
orceína.
4. Deja que actué el colorante durante 10 minutos.
Manual de Prácticas de Fisiología Veterinaria
María Lorena Torres Rodríguez Página 139 de 144
5. Toma el vidrio de reloj por los bordes, ayudándote con una pinza para vidrio de reloj y
calientalo suavemente a la llama del mechero, evitando la ebullición y espera hasta
que se emitan vapores tenues.
6. Con las pinzas finas toma con cuidado una raíz y colocala sobre un porta, cortar los
últimos 2 ó 3 milímetros y desecha el resto.
7. Coloca el cubreobjetos y encima una almohadilla hecha con papel de filtro sobre la
que se ejerce presión con el dedo pulgar, primero suave, después más intensa, para
aplastar la muestra, técnica conocida como “squash”.
8. Aspira con el papel de filtro el exceso de colorante.
9. Observa al microscopio primero a pequeño aumento y luego con aumentos mayores,
recorriendo diversos campos para descubrir en las células observadas, las distintas
fases de la mitosis.
La preparación presenta el aspecto de una dispersión de células por todo el campo que
abarca el microscopio. Se observarán células en distintas fases o estados de división
celular, con esta técnica de tinción se ven los cromosomas impregnados por la orceína en
color morado, el aspecto reticulado, así como el mayor tamaño de algunos núcleos,
corresponde a las células que se encontraban en los procesos iniciales de la división
mitótica.
10. Fija las yemas florales de diferentes tamaños en alcohol-acético aísla las anteras al
microscopio de disección y macérelas en el colorante (acetocarmín), comprime sobre
la preparación, y observa al microscopio compuesto.
Evidencias de desempeño:
La correcta ejecución de los procedimientos de laboratorio, y tu participación
durante el desarrollo de la misma, se dará constancia con el sello y la firma del
asistente del laboratorio en la práctica.
Revisión del cuestionario de la práctica al finalizar la sesión de laboratorio.
Comprobar la adquisición de habilidades básicas, según formato de documento
(anexo 1).
Manual de Prácticas de Fisiología Veterinaria
María Lorena Torres Rodríguez Página 140 de 144
Entregarás del reporte de práctica según formato de documento (anexo 2), el día
posterior a la sesión de laboratorio.
Evaluaciones intermedias con recomendaciones:
Dos días posteriores a la realización de la práctica se revisará tu reporte y se harán los
señalamientos necesarios, para su evaluación final en los días asignados en la carta
descriptiva de la materia.
Método de asignación de calificaciones:
Asistencia a práctica 5 %
Realización de la práctica 50 %
Reporte y cuestionario 45 %
Nota: Sin asistencia a la sesión de laboratorio el reporte carecerá de validez
Cuestionario de evaluación:
1. ¿Se observa la membrana nuclear cuando los cromosomas son claramente visibles?
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2. ¿En qué forma se realiza la separación entre las dos células hijas?
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3. ¿Cuántos cromosomas se observan en las preparaciones?
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________________________________________________________________________
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4. ¿En qué momento de la mitosis se observan los cromosomas con mayor facilidad?
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5. En algunas células se notan los cromosomas formados por dos hilos paralelos, las
cromátidas, que están unidas por una constricción llamada centrómero. ¿Es posible
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considerar a la presencia de esos dos hilos como debida a la división del cromosoma o
a su duplicación?
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6. Posteriormente los cromosomas se separan y se forman grupos, ¿cuántos
cromosomas hay en cada uno de ellos? (7) Realice un esquema
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7. ¿Qué diferencias importantes tienen la meiosis y la mitosis?
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8. ¿Las observaste con claridad en tus preparaciones?
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Conclusiones por el alumno: Escribe los datos que consideres relevantes
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Bibliografía:
Alberts B; Bray D; Hopkin K; Johnson A; et al. Essential cell biology. 2ª edición. Garland
Science Plublishing Inc. España. 2004.
Alberts B; Bray D; et al. Biología Molecular de la célula. 4ª edición. Ed. Garland Science
Publishing Inc. NY, USA. 2002.
Almazán GC. Técnicas de Diagnóstico en Parasitología Veterinaria. 1ª edición. Facultad
de Medicina Veterinaria y Zootecnia. Universidad Autónoma de Tamaulipas. Cd.
Victoria, Tam. 1999.
Cooper GM; Hausman RE. La Célula. 4ª edición. Ed. Marbán. Madrid, España. 2008.
Fernández GN. Manual de laboratorio de fisiología. 3ª edición. Ed. McGraw-Hill
Interamericana. México, DF. 2005.
Gavino G. Técnicas biológicas selectas de laboratorio y de campo. 1ª edición. Ed. Limusa.
México, DF. 1979.
Günther M. Diagnóstico Clínico Veterinario. Ed. Acribia. Zaragoza, España. 1982.
Junqueira -Carneiro. Biología celular y Molecular. 6ª edición. Rd. McGraw-Hill. 1997.
Kandel ER; Schwartz JH; Jessell TM. Principios de Neurociencia. 4ª edición. Ed.
McGraw-Hill Interamericana. Mexico, DF. 2001.
López ZR; Morales AL; Prácticas de Fisiología, 1ª edición. Facultad de Medicina
Veterinaria y Zootecnia. Universidad Autónoma de Tamaulipas. Cd. Victoria, Tam.
1991.
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Anexos
Lista de cotejo (reproducir para cada sesión de laboratorio).
Actividad
Evaluación profesional
en formación
Evaluación instructor
Final Observaciones
¿Leíste la práctica antes de asistir al laboratorio?
¿Utilizaste la bata de laboratorio de manera adecuada?
¿Trajiste el material completo?
¿Trajiste el equipo de disección?
¿Utilizaste los guantes durante la práctica?
¿Realizaste los cortes conforme a las instrucciones?
¿Realizaste correctamente la preparación fisiológica?
¿Montaste correctamente las preparaciones frescas para observarlas al microscopio?
¿Pudiste observar las estructuras en el microscopio?
¿El microscopio está limpio, con el objetivo de menor tamaño puesto, desconectado y con su funda puesta?
¿Limpiaste el equipo y material una vez finalizada la práctica?
¿Limpiaste tu área de trabajo?
¿Dispusiste de los desechos cómo indica el manual?
¿Contestaste el cuestionario?
¿Llevaste a revisión tu manual?
¿mostraste trato digno a los animales de experimentación?
¿Trabajaste en equipo?
Manual de Prácticas de Fisiología Veterinaria
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Formato de indicaciones para reporte escrito:
El reporte es un escrito sencillo donde con tus propias palabras describirás el proceso
realizado y debe contener los siguientes apartados:
Portada. El formato deberá estar de acuerdo a las características especificadas en el
manual de tesis de la facultad (disponible para su consulta en la biblioteca).
Introducción. Es una breve descripción del proceso realizado y su importancia medica
Objetivo. Es el propósito, la razón o motivo del por qué realizaste el proceso.
Metodología. Es la descripción sobre lo que hiciste durante la práctica. Puedes
escribirla en forma de relato o como si fuera una receta de cocina.
Resultados. Es la parte medular de tu reporte. Aquí agrega los cuadros comparativos
que realizaste junto con tus compañeros. Señala lo que te llamó la atención. Es
conveniente que anexes tablas, dibujos, fotografías o esquemas de lo que observaste
durante la práctica.
Discusión. Esta es la parte más difícil de escribir, pero es la más importante. Aquí
debes señalar la importancia del tema tratado en relación a su utilidad médica. Puedes
utilizar cuadros comparativos u otra herramienta que te sea útil para presentar la
información.
Bibliografía. Debes citar SIEMPRE la fuente de donde obtuviste la información.
Manual de Prácticas de Inmunología
Dr. Jesús Genaro Sánchez Martínez Página 1
Elaborador: Dr. Jesús Genaro Sánchez Martínez, Biól, M.Sc., Ph.D.
Revisor:
Recepción por el H. Consejo Técnico:
Cd. Victoria, Tamaulipas, 2013
D-RS-05-18-03
Manual de Prácticas de Inmunología
Dr. Jesús Genaro Sánchez Martínez Página 2
Directorio Institucional
Rector
M.E.S. JOSE Ma. LEAL GUTIERREZ
Secretaria General
DRA. OLGA HERNANDEZ LIMON
Subsecretario Académico
ING. JOSE ANDRES SUAREZ FERNANDEZ
Subsecretario Administrativo
ING. MARCO ANTONIO DELGADO BARRIO
Directorio FMVZ
Director
DR. RIGOBERTO LOPEZ ZAVALA
Secretario Académico
MVZ SAID HERNANDEZ CONTRERAS
Secretario Administrativo
MVZ MIGUEL A. GUEVARA GUERRERO
D-RS-05-18-03
Manual de Prácticas de Inmunología
Dr. Jesús Genaro Sánchez Martínez Página 3
INDICE
DIRECTORIO INSTITUCIONAL ............................................................................. 2
I N D I C E ............................................................................................................... 3
PRÁCTICAS DE INMUNOLOGÍA ........................................................................... 4
COMPETENCIAS PROFESIONALES .................................................................... 4
NIVELES DE DESEMPEÑO ................................................................................... 4
PROGRAMA DEL SISTEMA DE PRÁCTICAS ...................................................... 6
PRÁCTICAS GENERALES DE SEGURIDAD. REGLAMENTOS Y
PROCEDIMIENTOS GENERALES ........................................................................ 8
BIOSEGURIDAD ................................................................................................. 8
NORMAS BASICAS PARA PREVENIR ACCIDENTES EN EL LABORATORIO 8
REGLAMENTO DEL LABORATORIO DE VIROLOGÍA E INMUNOLOGÍA . ..... 9
CRITERIOS DE DESEMPEÑO COMUNES A TODAS LAS PRÁCTICAS ........... 10
EVIDENCIAS PARA CADA CRITERIO DE DESEMPEÑO .................................. 11
BIBLIOGRAFÍA COMÚN A TODAS LAS PRÁCTICAS ....................................... 11
PRACTICA NO. 1 RESISTENCIA NATURAL INESPECIFICA ........................... 12
PRACTICA NO. 2 PODER BACTERICIDA DEL SUERO NORMAL ................... 17
PRACTICA NO. 3 TITULACION DE UN ANTIGENO DE SUPERFICIE ............. 23
PRÁCTICA NO. 4 PURIFICACION DE LA SANGRE POR EL SISTEMA
RETICULO ENDOTELIAL. ................................................................................... 28
PRÁCTICA NO. 5 CONTEO DIFERENCIAL LEUCOCITARIO ........................... 33
PRÁCTICA NO. 6 ANTÍGENOS DE SUPERFICIE CELULAR ............................ 39
PRÁCTICA NO. 7 PREPARACION DE UNA BACTERINA ................................ 44
PRÁCTICA NO. 8: DIAGNOSTICO DE BRUCELOSIS (PRUEBA DE
AGLUTINACION EN TUBO) ................................................................................. 51
PRÁCTICA NO. 9 DIAGNOSTICO DE BRUCELOSIS (PRUEBA DE
AGLUTINACION EN TARJETA). ......................................................................... 57
SISTEMA DE EVALUACIÓN. ............................................................................... 61
INSTRUCCIONES PARA EL FORMATO GENERAL DE LOS REPORTES POR
ESCRITO .............................................................................................................. 62
Manual de Prácticas de Inmunología
Dr. Jesús Genaro Sánchez Martínez Página 4
Prácticas de Inmunología
Presentación
Las últimas décadas han sido testigo de grandes avances en el desarrollo de los conocimientos de los mecanismos moleculares que permiten el funcionamiento exacto del sistema inmune, derivado de la aplicación de técnicas y métodos antiguos y recientes.
Este Manual de Practicas de Inmunología recopila múltiples técnicas que son útiles para diferentes áreas de la inmunología.
Este manual, como complemento del curso de Inmunología, te permitirá como alumno comprender las bases de la respuesta inmune, así como la obtención de muestras que te servirán para diagnóstico. Las prácticas sobre obtención de antígenos, preparación de inmunógenos y técnicas de inmunización van ligadas a la obtención de efectores de la respuesta inmune humoral: obtención de antisueros y precipitación de gamma-globulinas. Una vez que como alumno hayas adquirido estos conocimientos, los emplearás endiferentes métodos de detección de sistemas antígeno-anticuerpo, realizando precipitaciones y aglutinaciones. Incluídas en estas prácticas se encuentran técnicas de aplicación clínica, resaltando las de aplicación veterinaria.
Competencias Profesionales
Este manual de prácticas contribuye a tu formación profesional ayudándote a
comprender los métodos de defensa de los diferentes organismos y a hacer
uso de métodos serológicos para la realización de diagnósticos presuntivos
durante tu desarrollo profesional.
Niveles de Desempeño
Al terminar el desarrollo durante el semestre de éste manual de prácticas serás
capaz de tener un nivel de desempeño de Nivel 3, ya que podrás trabajar solo
o en equipo durante el desarrollo de actividades complejas de laboratorio,
como titulación de antígenos, producción de bacterinas, y diagnóstico de
enfermedades, después de recibir instrucciones, trabajando con un grado
moderado de responsabilidad, y desarrollando un nivel importante de toma de
decisiones.
Manual de Prácticas de Inmunología
Dr. Jesús Genaro Sánchez Martínez Página 5
Nivel 1.- Se realizan funciones rutinarias de baja complejidad. Se reciben
instrucciones. Se requiere baja autonomía.
Nivel 2.- Se realizan un conjunto significativo de actividades de trabajo, variadas y
aplicadas en diversos contextos. Algunas actividades son complejas y no
rutinarias. Presenta un bajo grado de responsabilidad y autonomía en las
decisiones. A menudo requiere colaboración con otros y trabajo en equipo.
Nivel 3.- Se requiere un importante nivel de toma de decisiones. Tiene bajo su
responsabilidad recurso materiales con los que opera su área. Así como
control de recursos financieros para adquisición de insumos, ó
responsabilidades comparables.
Nivel 4.- Se desarrollan un conjunto de actividades de naturaleza diversa, en las que
se tiene que mostrar creatividad y recursos para conciliar intereses. Se debe
tener habilidad para motivar y dirigir grupos de trabajo.
Nivel 5.- Se desarrollan un conjunto de actividades de naturaleza diversa, en las que
se tiene que mostrar un alto nivel de creatividad, así como buscar y lograr la
cooperación entre grupos e individuos que participan en la implantación de la
solución a un problema de magnitud institucional.
Manual de Prácticas de Inmunología
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PROGRAMA DEL SISTEMA DE PRÁCTICAS
Tema Práctica o prácticas programadas
Ámbitos de
desarrollo
Duración en
horas para
cada práctica, y
semana del
semestre en
que se realizará
Inmunidad
Innata
1, 2, y 4 Laboratorio
1 hora por sesión.
Semanas 2, 3 y 5.
Antígenos y
Antigenicidad
3 Laboratorio
1 hora.
Semana 4.
Inmunidad
Específica
5, 6 y 7 Laboratorio
1 hora por sesión.
Semanas 6, 7 y 8
Técnicas de
Diagnóstico
8 y 9 Laboratorio
1 hora por sesión.
Semanas 9 y 10.
Nombre de la Práctica Tiempo Nivel de
Desempeño
Práctica no. 1: RESISTENCIA NATURAL INESPECIFICA
1 Hora 2
Práctica no. 2: PODER BACTERICIDA DEL SUERO NORMAL
1 Hora 2
Práctica no. 3: TITULACION DE UN ANTIGENO DE SUPERFICIE
1 Hora 2
Práctica no. 4 PURIFICACION DE LA SANGRE POR EL SISTEMA RETICULO ENDOTELIAL
1 Hora 2
Práctica no. 5: CONTEO DIFERENCIAL LEUCOCITARIO
1 Hora 2
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Práctica no. 6: GRUPOS SANGUINEOS. ERITROCITICOS
1 Hora 3
Práctica no. 7: PREPARACION DE UNA BACTERINA
1 Hora 3
Práctica no. 8: DIAGNOSTICO DE BRUCELOSIS PRUEBA DE AGLUTINACION EN TUBO
1 Hora 3
Práctica no. 9: DIAGNOSTICO DE BRUCELOSIS (PRUEBA DE AGLUTINACION EN TARJETA)
1 Hora 3
Total de horas 9 Horas
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PRÁCTICAS GENERALES DE SEGURIDAD. REGLAMENTOS Y PROCEDIMIENTOS GENERALES
BIOSEGURIDAD
La bioseguridad es el manejo técnico adecuado en un laboratorio cuya eficiencia en gran parte refleja el entrenamiento del personal, además de significar la protección individual. La observancia de sus lineamientos repercute en la calidad de los resultados del laboratorio.
El trabajo que se realiza en los laboratorios siempre implica riesgos especiales de contagio de enfermedades infecciosas para el personal que labora en ellos. Es por ello que cada laboratorio debe implementar medidas de bioseguridad correspondientes a la peligrosidad de los agentes que maneja, y tener un control estricto para que estas medidas se lleven a cabo.
NORMAS BASICAS PARA PREVENIR ACCIDENTES EN EL LABORATORIO
a).- No debes pipetear con la boca b).-No te está permitido comer, beber, fumar, almacenar alimentos, aplicarte cosméticos etc., en el área de trabajo de laboratorio. c).-Debes mantener el laboratorio libre de materiales no relacionados con la práctica en curso. d).-Deberás lavarte las manos después de manipular agentes infecciosos y no infecciosos, animales, material contaminado, y cuando abandones el laboratorio. e).-Mantendrás la superficie de trabajo de trabajo individual (mesas) descontaminada, para lo cual usarás un papel absorbente esponja o gasa humedecida con un desinfectante al iniciar y finalizar cada práctica. f).-Realizarás todos los procedimientos cuidadosamente para evitar contaminación y obtener los resultados correctos. g).-Descontaminarás todo residuo contaminado líquido y sólido mediante esterilización (autoclave) antes de ser desechado. h).-Deberás utilizar guantes durante aquellos procedimientos que impliquen contacto directo con material infeccioso.
EN CASO DE EMERGENCIA DEBERÁS RECURRIR AL RESPONSABLE DEL AREA.
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REGLAMENTO DEL LABORATORIO DE VIROLOGÍA E INMUNOLOGÍA
1.- Los alumnos deberán entrar al laboratorio utilizando una bata blanca limpia y debidamente abrochada. 2.- No se permite introducir o ingerir bebidas y alimentos en el laboratorio. 3.- Los alumnos deberán presentarse a sus prácticas con su manual del laboratorio correspondiente y materiales que se les haya solicitado previamente. 4.- Los alumnos no podrán entrar al laboratorio después de 5 minutos de haberse iniciado la práctica. 5.- Una vez en el laboratorio, los alumnos no podrán salir del mismo hasta que finalice la práctica salvo por indicación expresa del instructor. 6.- Durante la realización de la práctica los alumnos deberán respetar el área de trabajo de los diferentes equipos y guardar un buen comportamiento. 7.- Al concluir la práctica, los alumnos deberán limpiar debidamente su área de trabajo y dejar los instrumentos y reactivos ordenados. 8.- La basura orgánica, inorgánica o contaminada resultante de la práctica deberá ser depositada en el recipiente correspondiente. 9.- El alumno que sea sorprendido manchando o rayando las mesas de trabajo o las paredes del laboratorio se hará acreedor al pago correspondiente para su reparación. 10.- Cuando la práctica involucre la utilización de algún animal vivo, los alumnos deberán tratarlos humanísticamente y evitar el maltrato de los mismos. 11.- Solamente el coordinador del edificio y el jefe del laboratorio podrán autorizar el uso del laboratorio.
Cualquier sanción por el incumplimiento del reglamento será aplicado por el jefe del laboratorio, el coordinador del edificio o la administración de la facultad según sea requerida.
Dr. Andrew Charles Snydelaar H. M.C. Jaime Rábago Castro.Jefe del laboratorio de Virología Coordinador del Edificio Multidisciplinario II
y de Inmunología.
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CRITERIOS DE DESEMPEÑO COMUNES A TODAS LAS PRÁCTICAS
Cuando: (criterios de desempeño)
Antes
Leerás las instrucciones y los procedimientos a realizar durante la práctica.
Llegarás 5 minutos antes del inicio de la práctica al laboratorio.
Te presentarás con la indumentaria y el material adecuado requerido por la práctica.
Acomodarás el material necesario para la práctica en tu mesa de laboratorio de acuerdo a las instrucciones del facilitador.
Durante
Después
Limpiarás tu área de trabajo.
Dispondrás de los desechos en los lugares indicados por el instructor.
Entregarás un reporte con las observaciones y discusiones generadas durante la práctica.
En las prácticas que lo requieran, entregarás un dictamen del resultado de la práctica.
Guardarás tus prácticas revisadas y firmadas por el facilitador para conformar tu portafolios de evidencias.
Ítem Resultados Esperados Tiempo de término
Entregarás un reporte de la práctica. 2 días después de la práctica.
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EVIDENCIAS PARA CADA CRITERIO DE DESEMPEÑO
Criterio de desempeño Evidencia propuesta (descripción)
Te informarás de las instrucciones y los procedimientos a realizar durante la práctica.
Estarás familiarizado con los procedimientos de la práctica.
Llegarás 5 minutos antes del inicio de la práctica al laboratorio.
Estarás en tu lugar de trabajo cuando el facilitador inicie la práctica.
Te presentarás con la indumentaria y el material adecuado requerido por la práctica.
Tendrás tu bata de laboratorio puesta y tu material de trabajo sobre la mesa.
Acomodarás el material necesario para la práctica en tu mesa de laboratorio de acuerdo a las instrucciones del facilitador.
Tu material estará acomodado de manera que te facilite el desarrollo de la práctica.
Limpiarás tu área de trabajo Tu área de trabajo estará limpia al terminar la práctica
Dispondrás de los desechos en los lugares indicados por el instructor
Los desechos estarán en los lugares correspondientes.
Entregarás un reporte con las observaciones y conclusiones de la práctica
Reporte por escrito de la práctica.
Presentarás las evidencias de desempeño especificadas en cada práctica.
Anexarás evidencias al reporte de práctica.
Presentarás tu portafolios de evidencias al finalizar el curso
Entregarás el portafolios de evidencias con todas tus practicas calificadas.
BIBLIOGRAFÍA COMÚN A TODAS LAS PRÁCTICAS
Tizard. Inmunología Veterinaria. 6ª Edición McGraw-Hill.
Abbas, A.K. y Lichtman, A.H. Inmunología celular y molecular. 5ª Edición. Saunders
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PRACTICA No. 1
RESISTENCIA NATURAL INESPECIFICA
Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia.
Dr. Jesús Genaro Sánchez Martínez.
Lisozima
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Número de profesionales en formación por unidad de práctica: 5/equipo
Introducción
En muchas enfermedades el desenlace de la misma comúnmente es decidida antes de que los anticuerpos puedan producir una acción efectiva. Los mecanismos de resistencia involucrados no son completamente entendidos en la actualidad pero indudablemente varía en relación al agente, el hospedador y la vía de entrada.
Objetivo de la práctica
Demostrarás la presencia de lisozimas en exudados lagrimales para determinar la presencia de inmunidad innata no específica en líquidos corporales.
Criterios de desempeño durante la práctica Manejarás con cuidado y de acuerdo a las instrucciones del facilitador el cultivo bacteriano.
La obtención de secreción lagrimal se realizará teniendo cuidado de no causar daño al sujeto de estudio, según la metodología establecida en el desarrollo de la práctica.
Mantendrás condiciones de esterilidad durante la práctica.
Discutirás con tu equipo y en grupo los resultados obtenidos.
ítem Resultados Esperados Tiempo de término
Entregarás un reporte de la práctica. Un día después de la práctica.
Normas de seguridad específicas de la práctica.
Tipo de peligro Como evitarlo Como proceder en caso de un accidente…
Contaminación bacteriana
Mantener esterilidad Informar al facilitador. Lavar con agua y jabón el área afectada
Esterilizar el asa bacteriológica antes y después de usarla.
Cuadro de disposición de desechos
Tipo de desechos Como descartarlos Tipo de contenedor
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Biológicos Esterilización por autoclave
Bolsas para desechos biológicos
Desarrollo de la práctica
Esta práctica se desarrollará en 4 momentos
Primer Momento: Toma de lista y revisión de la indumentaria adecuada y materiales para la práctica.
Segundo Momento: Procedimiento de la práctica.
Tercer Momento: Discusión en equipo y en grupo de los resultados de la práctica
Cuarto Momento: Entrega de reporte con evidencia de desempeño.
Materiales.
Solución salina fisiológica Tubos de ensaye con tapón de rosca estériles Hisopos estériles 2 Solución salina fisiológica Cultivo de Micrococos luteus Papel filtro, una tira Asa bacteriológica Una placa de agar soya tripticaseína Mecheros Gradilla Pipetas de 5ml.
Procedimiento.
1.- Añade 5ml de suero fisiológico a un tubo estéril.
2.-Con la punta de un hisopo estéril obtén una muestra de un cultivo con Micrococos luteus y mézclala en la solución salina, la turbidez producida en el tubo será notoria
3.-De esta solución turbia pon un ml en cada uno de dos tubos.
4.-Humedece con secreciones lagrimales una pequeña tira de papel de filtro estéril, poniendo un extremo en el saco conjuntival inferior, y cerrando el parpado encima de él.
5.-Corta la porción humedecida de la tira y déjalo caer en uno de los tubos.
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6.- En el otro tubo corta y deja caer una porción no tratada del papel filtro para que este sirva de testigo.
7.-Agita bien los tubos y obsérvalos en 30 minutos.
8.-Toma un hisopo estéril, sumerje la punta en una solución original de M. luteus y realiza una siembra en una caja de petri con agar de soya tripticaseína.
9.-Divide en dos partes una placa de agar soya tripticaseína y en un lado de la placa pon una tira de papel filtro con lisozima, al otro lado ponga una tira no tratada como testigo.
Observaciones
El tubo con lisozima continuara turbio mientras que el que contiene lisozima se volverá totalmente transparente. El lado testigo de la caja de petri tendrá micrococos creciendo en todo su alrededor, mientras que el lado de la caja con la lisozima tendrá mostrará un área limpia y clara a su alrededor debido a la acción inhibidora de la lisozima.
Medidas de bioseguridad.
Mantener la esterilidad en todo momento.
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Evidencias de desempeño:
Reportarás por escrito* los resultados obtenidos en la práctica 2 días después de
la misma.
En tu reporte describirás de manera sucinta y clara el objetivo de la misma, la
metodología usada y los resultados obtenidos.
Documentarás con una foto la ausencia de contaminación en las placas de Petri.
Además analizarás y discutirá las observaciones hechas durante la práctica y
describirás la manera como éstas impactan en tu formación.
Al final de tu reporte por escrito, contestarás el siguiente cuestionario de
evaluación:
1. Qué es la lizosima?
2. Qué función tiene la inmunidad innata en la protección de un organismo?
3. Por qué no hubo crecimiento bacteriano en la mitad de la placa con el papel
filtro impregnado de lágrimas?
4. Que otros ejemplos de imnunidad innata puede mencionar?
*Ver instrucciones para el formato general de los reportes por escrito al final
de este manual de prácticas.
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PRACTICA No. 2
PODER BACTERICIDA DEL SUERO NORMAL
Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia.
Dr. Jesús Genaro Sánchez Martínez.
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Dr. Jesús Genaro Sánchez Martínez Página 18
Número de profesionales en formación por unidad de práctica: 5/equipo
Introducción
El suero normal fresco contiene sustancias capaces de matar microorganismos. Esta habilidad varía con la especie y el tipo de microorganismo, con certeza algo de esta actividad es debido a anticuerpos normales pero hay otros factores humorales también involucrados. Por ejemplo suero fresco no sometido a tratamiento térmico contiene una sustancia conocida como complemento la cual bajo ciertas condiciones juega un papel en la destrucción de microorganismos. Esta sustancia puede ser destruida si previamente es sometido el suero a un tratamiento térmico (56°C durante 30 minutos). El propedín (una globulina presente en el plasma sanguíneo) es otro ejemplo de un conocido factor humoral que contribuye a la inmunidad innata.
Objetivo de la práctica
Manual de Prácticas de Inmunología
Dr. Jesús Genaro Sánchez Martínez Página 19
Reconocerás los efectos que las sustancias bactericidas presentes en el suero normal tienen sobre patógenos bacterianos, para determinar la presencia o ausencia de factores de la inmunidad innata como el complemento en el suero.
Criterios de desempeño durante la práctica Manejarás con cuidado y de acuerdo a las instrucciones del facilitador el cultivo bacteriano.
Mantendrás condiciones de esterilidad durante la práctica.
Realizarás diluciones de suero sanguíneo.
Demostrarás los efectos de la inmunidad innata del suero en bacterias siguiendo la metodología establecida en el desarrollo de la práctica.
Discutirás en equipo y en grupo las observaciones obtenidas.
ítem Resultados Esperados Tiempo de término
Entregarás un reporte de la práctica. 2 días después de la práctica.
Normas de seguridad específicas de la práctica.
Tipo de peligro Como evitarlo Como proceder en caso de un accidente…
Contaminación bacteriana
Mantener esterilidad Informar al facilitador. Lavar con agua y jabón el área afectada
Esterilizar el asa bacteriológica antes y después de usarla.
Cortadura por Vidrios Rotos.
Manejar con cuidado pipetas, cajas de Petri y tubos de ensaye.
Lavar herida con agua y jabón. Informar al facilitador. Aplicar desinfectante y cubrir herida.
Cuadro de disposición de desechos
Tipo de desechos Como descartarlos Tipo de contenedor
Biológicos Esterilización por autoclave
Bolsas para desechos biológicos
Desarrollo de la práctica
Esta práctica se desarrollará en 4 momentos
Primer Momento: Toma de lista y revisión de la indumentaria adecuada y
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materiales para la práctica.
Segundo Momento: Procedimiento de la práctica.
Tercer Momento: Discusión en equipo y en grupo de los resultados de la práctica
Cuarto Momento: Entrega de reporte con evidencia de desempeño.
Materiales:
a).-Cultivos en caldo de E. coli y Staphylococos aureus
b).-Solución salina fisiológica
c).-Tubos de ensaye de 16 x 150 con tapón de rosca
d).-Pipetas de 10 ml estériles
e).-Pipetas de 1ml estériles 1/100
f).-Cajas de petri
g).-Agar
h).-Gradilla
i).- Suero normal
j).- Suero tratado con calor.
Procedimiento:
1.-Pon en una gradilla 5 tubos de ensayo.
2.-Prepara 5 diluciones de cada microorganismo en solución salina estéril de la manera siguiente
a).-0.1 ml de cultivo en 9.9 ml de solución salina estéril – 1:100 b).-0.1 ml de 1:100 en 9.9 de soluc8ión salina estéril – 1:10,000 c).-1.0ml de 1:10,000 en 9.9mlde s0lución salina estéril -1:100,000 d).-1.0ml de 1:100,000 en 9.9 ml de solución salina estéril -1:1,000,000 e).-1.0ml de 1:1 millón en 9.9ml de solución salina estéril – 1:10,000,000
Manual de Prácticas de Inmunología
Dr. Jesús Genaro Sánchez Martínez Página 21
Nota: Utiliza una pipeta distinta para cada dilución.
3.-Utilizando técnicas asépticas, prepara 3 tubos para cada una de las 3 diluciones mayores de los dos microorganismos de la siguiente manera:
a) 0.5 ml de suero sin tratamiento térmico + 0.5ml Dilución del cultivo1:100,000
b) 0.5 ml de Suero normal con tratamiento térmico + 0.5 ml Dilución delcultivo 1:100,000
c) 0.5 ml de solución salina estéril + 0.5ml de Dilución del cultivo1:100,000
4.-Repite la operación para las diluciones de cultivo de 1:1,000,000 y la de 1:10,000,000.
5.-Agita bien el contenido de todos los tubos(nueve por microorganismo) incuba a 37°C en baño maría durante 1 hora.
6.-Después de incubar, pon el contenido de cada tubo en una caja de Petri estéril debidamente rotulada.
7.-Agrega 10ml de agar (medio de cultivo) en cada caja de petri y agita suavemente de tal forma que se produzca una distribución uniforme de microorganismos en el medio
8.-Después de que el agar se haya solidificado, incuba a 37°C durante 36 a 48 horas.
9.-Después de la incubación realiza cuidadosamente conteos en las cajas de petri.
Manual de Prácticas de Inmunología
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Compara y explica los resultados:
Organismo Número de organismos vivos restantes
Suero tratado Suero sin tratar
Medidas de bioseguridad:
Asegurar que se trabaja de manera aséptica en todo momento.
Evidencias de desempeño:
Reportarás por escrito* los resultados obtenidos en la práctica 2 días después de
la misma.
En tu reporte describirás de manera sucinta y clara el objetivo de la misma, la
metodología usada y los resultados obtenidos.
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Documenta la ausencia de contaminación en tus placas con diluciones, y la
exactitud de tus diluciones mediante una foto.
Además analizarás y discutirá las observaciones hechas durante la práctica y
describirás la manera como éstas impactan en tu formación.
Al final de tu reporte por escrito, contestarás el siguiente cuestionario de evaluación:
1. Qué es una dilución seriada?2. Que sucede al calentar elsuero?3. Explique las diferencias que observa en la cantidad de colonias crecidas con los2 tipos de suero.4. Cuáles son los factores que existen en el suero que inhiben el crecimiento delas bacterias?5. De qué manera ocurre la inhibición del crecimiento bacteriano?
*Ver instrucciones para el formato general de los reportes por escrito al finalde este manual de prácticas.
PRACTICA No. 3
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TITULACION DE UN ANTIGENO DE SUPERFICIE
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Dr. Jesús Genaro Sánchez Martínez.
Número de profesionales en formación por unidad de práctica: 5/equipo
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Introducción
El propósito de esta práctica es ilustrar el significado de “titulación de una sustancia”. Una titulación es la determinación de la actividad o contenido de un reactivo. Aunque no será utilizado suero en esta práctica el mismo método en general es usado para la dilución del contenido de anticuerpos en un suero.
Objetivo de la práctica
Realizarás correctamente la titulación de un antígeno de superficie para conocer su concentración.
Criterios de desempeño durante la práctica Manejarás con cuidado y de acuerdo a las instrucciones del facilitador las saponinas que se facilitarán.
Mantendrás condiciones de esterilidad durante la práctica.
Harás diluciones adecuadas de acuerdo al procedimiento del desarrollo de la práctica
Titularás un antígeno basado en el grado de hemólisis observado.
ítem Resultados Esperados Tiempo de término
Entregarás un reporte de la práctica. 2 días después de la práctica.
Normas de seguridad específicas de la práctica.
Tipo de peligro Como evitarlo Como proceder en caso de un accidente…
Irritación por contacto Usar guantes Informar al facilitador. Lavar con abundante agua el área afectada
Cortadura por Vidrios Rotos.
Manejar con cuidado pipetas, cajas de Petri y tubos de ensaye.
Lavar herida con agua y jabón. Informar al facilitador. Aplicar desinfectante y cubrir herida.
Cuadro de disposición de desechos
Tipo de desechos Como descartarlos Tipo de contenedor
Reactivos Inactivación Bolsa reactivos no biológicos.
Desarrollo de la práctica
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Esta práctica se desarrollará en 4 momentos
Primer Momento: Toma de lista y revisión de la indumentaria adecuada y materiales para la práctica.
Segundo Momento: Procedimiento de la práctica.
Tercer Momento: Discusión en equipo y en grupo de los resultados de la práctica
Cuarto Momento: Entrega de reporte con evidencia de desempeño.
Materiales:
a) Tubos serológicosb) Gradillasc) Solución salina fisiológicad) Saponinae) Pipetasf) Eritrocitos
Procedimiento:
1.- Pon una serie de tubos serológicos en una gradilla.
2.-Añade 0.5ml de solución salina fisiológica en los tubos 2 al 10
3.-Añade 0.5 ml. De una dilución de 1.50 de saponina a los tubos 1 y 2.
4.-Mezcla el contenido en el tubo 2 y transfiere 0.5ml al tubo 3,mezcla y transfiere 0.5ml al tubo 4 etc. hasta el tubo 9 incluído,
Manual de Prácticas de Inmunología
Dr. Jesús Genaro Sánchez Martínez Página 27
5.-Elimina 0.5ml después de mezclar el contenido del tubo 9
6.-Agrega 0.5ml de eritrocitos al 2% a cada tubo
7.-Mezcla y luego incuba a 37˚C en baño maría durante 30 minutos.
8.-Registra la hemólisis con el parámetro de +2 +3 y +4.
9.-El título es la dilución más alta del reactivo que proporciona cualquier evidencia de la reacción deseada.
Hemólisis
Medidas de bioseguridad:
Asegurar que se trabaja de manera aséptica en todo momento.
Evidencias de desempeño:
Reportarás por escrito* los resultados obtenidos en la práctica 2 días después de
la misma.
En tu reporte describirás de manera sucinta y clara el objetivo de la misma, la
metodología usada y los resultados obtenidos.
Además analizarás y discutirá las observaciones hechas durante la práctica y
describirás la manera como éstas impactan en tu formación.
Documentar la titulación del antígeno con una fotografía de los tubos con
diferentes concentraciones de saponinas y eritrocitos.
Al final de tu reporte por escrito, contestarás el siguiente cuestionario de
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evaluación:
1. ¿Qué es la hemólisis?2. ¿Qué entiendes por titulación?3. En qué dilución se observó menor titulación de l antígeno? Explique surespuesta.
*Ver instrucciones para el formato general de los reportes por escrito al finalde este manual de prácticas.
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PRÁCTICA No. 4
PURIFICACION DE LA SANGRE POR EL SISTEMA RETICULO ENDOTELIAL.
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Número de profesionales en formación por unidad de práctica: 5/equipo
Introducción
La inmunidad innata también es influenciada grandemente por factores celulares en el cuerpo animal. El más importante de estos es la fagocitosis (engullido de partículas foráneas) por los leucocitos y otras células del sistema retículo endotelial. Los aspectos celulares de la inmunidad se encuentran íntimamente asociados con los aspectos mediados por anticuerpos. Además de la asociación por anticuerpos, las células y tejidos del sistema retículo endotelial constituyen un aparato basto y muy diseminado que filtra partículas extrañas de la sangre con eficiencia a medida que la sangre pasa por los órganos con tejido retículo endotelial. En ésta práctica, bacterias vivas serán utilizadas como indicador para determinar en que lugar del cuerpo son extraídas de la circulación estas partículas.
Objetivo de la práctica
Describirás el efecto purificante del sistema retículo endotelial de los animales, para comprender el destino de los antígenos cuando invaden el cuerpo de un animal.
Criterios de desempeño durante la práctica Mantendrás un ambiente de profesionalidad al trabajar con un organismo vivo (conejo).
Sacrificarás de una manera humana y sin dolor al conejo.
Realizarás diluciones de muestras de suero y órganos de acuerdo a la metodología establecida en el procedimiento de la práctica.
Cuantificarás el número de colonias bacterianas en crecimiento en diferentes diluciones y tiempos después de la infección.
Trabajarás en condiciones de esterilidad.
ítem Resultados Esperados Tiempo de término
Entregarás un reporte de la práctica. 3 días después de la práctica.
Normas de seguridad específicas de la práctica.
Tipo de peligro Como evitarlo Como proceder en caso de un accidente…
Contaminación con bacterias
Usar guantes / Trabajar en condiciones de esterilidad.
Informar al facilitador. Lavar con abundante agua y jabón el área afectada
Cortadura por Vidrios Rotos.
Manejar con cuidado pipetas, cajas de Petri y
Lavar herida con agua y jabón. Informar al facilitador. Aplicar
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tubos de ensaye. desinfectante y cubrir herida.
Cuadro de disposición de desechos
Tipo de desechos Como descartarlos Tipo de contenedor
Biológicos Esterilización por autoclave
Bolsas para desechos biológicos
Desarrollo de la práctica
Esta práctica se desarrollará en 4 momentos
Primer Momento: Toma de lista y revisión de la indumentaria adecuada y materiales para la práctica.
Segundo Momento: Procedimiento de la práctica.
Tercer Momento: Discusión en equipo y en grupo de los resultados de la práctica
Cuarto Momento: Entrega de reporte con evidencia de desempeño.
Materiales:
1 Un conejo 1 Cepa de E. Coli 2 Jeringas con aguja de 3 ml 2 Tubos vacutainer con EDTA 5 Tubos serológicos 5 Pipetas de 1 ml 5 Cajas de petri 1 Microscopio 1 Gradilla 1 Pipeteador 1 Mortero Solución salina estéril Papel filtro Agar para métodos Standard 1 Contador de colonias Anestésico
Procedimiento:
Anestesia al conejo. Inyecta de manera intravenosa una solución que contenga 100 millones de bacterias.
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1.- Determina el número de bacterias presentes en la sangre de un conejo inmediatamente después de una inyección intravenosa con 100 millones de bacterias (E.coli).
a) Prepara diluciones de la muestra sanguínea de 1:1000, 1:10,000,y 1:100,000.
b) Prepara 4 cajas de Petri utilizando 1 ml de las diluciones arribaseñaladas.
2.- Determina el número de bacterias presentes en la sangre de un conejo 30 minutos después de la inyección
a) Pon diluciones de la muestra sanguínea de 1:10, 1:100, y1:1,000.
b) Prepara 4 cajas de Petri utilizando 1 ml de las dilucionesanteriores.
3.- Determina el número de bacterias presentes en la sangre de un conejo 60 minutos después de la inyección
a) Prepara diluciones de la muestra sanguínea 1:10 y 1:100.
b) Prepara 4 cajas de Petri usando 1ml de las diluciones señaladasy 1 ml de la sangre entera.
4.- Determina el número de bacterias presentes en el hígado, pulmón, bazo y corazón del conejo 60 minutos después de la inyección.
a) Pon 1 g de cada órgano en un mortero estéril individual y macereperfectamente el tejido. Agregue 100 ml de solución salina estérily filtre la suspensión para eliminar las partículas mayores.
b) Prepara diluciones 1:100. 1:1,00 y 1:10,000, de cada órgano ensuspensión.
c) Prepara 4 cajas de Petri utilizando 1 ml de las solucionesanteriores arriba señaladas.
Permíte al medio en las cajas solidificar e incuba a 37˚C durante 48 hr.
Después de la incubación realiza conteos por caja y registra la información en el siguiente cuadro.
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MUESTRA TIEMPO Organismos/ml
Sangre Inmediatamente
Sangre 30 minutos
Sangre 60 minutos
Corazón 60 minutos
Hígado 60 minutos
Pulmón 60 minutos
Bazo 60 minutos
Medidas de bioseguridad:
Asegurar que se trabaja de manera aséptica en todo momento. Usar guantes y bata.
Evidencias de desempeño:
Reportarás por escrito* los resultados obtenidos en la práctica 2 días después de
la misma.
En tu reporte describirás de manera sucinta y clara el objetivo de la misma, la
metodología usada y los resultados obtenidos.
Además analizarás y discutirá las observaciones hechas durante la práctica y
describirás la manera como éstas impactan en tu formación.
Documentarás mediante fotografías la esterilidad de tus cultivos y el número de
colonias que crecen a diferentes tiempos después de la infección.
Al final de tu reporte por escrito, contestarás el siguiente cuestionario de evaluación:
1. Cuál es la capacidad del sistema retículo endotelial para eliminar sustanciasextrañas de la sangre?2. Qué células son las que se encargan de eliminar estas sustancias?3. En que órganos se observaron más / menos bacterias después de la inyecciónintravenosa de éstas?
*Ver instrucciones para el formato general de los reportes por escrito al finalde este manual de prácticas.
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PRÁCTICA No. 5
CONTEO DIFERENCIAL LEUCOCITARIO
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Número de profesionales en formación por unidad de práctica: 5/equipo
Introducción
En la sangre circulante pueden encontrarse una gran variedad de leucocitos. Solo ciertos tipos de estos son fagocíticos, estas células se clasifican primordialmente de acuerdo a su morfología y sus reacciones a la tinción de Wright. Con frecuencia hay que saber si hay un incremento o una disminución en el por ciento de los tipos celulares del individuo ya que esta información es indicativa de ciertos procesos patológicos, contando 100 leucocitos representativos y registrando la incidencia de los tipos de leucocitos específicos estos conteos son obtenidos sin mayor dificultad.
Objetivo de la práctica
Aplicarás la técnica de Wright, para reconocer y contabilizar las diferentes células sanguíneas.
Criterios de desempeño durante la práctica Harás un frotis de sangre de acuerdo con la metodología descrita en el desarrollo de la práctica.
Identificarás y cuantificarás los diferentes tipos de leucocitos presentes en la sangre.
Discutirás en equipo y en grupo las observaciones obtenidas.
ítem Resultados Esperados Tiempo de término
Entregarás un reporte de la práctica. 2 días después de la práctica.
Normas de seguridad específicas de la práctica.
Tipo de peligro Como evitarlo Como proceder en caso de un accidente…
Cortadura por Vidrios Rotos.
Manejar con cuidado pipetas, cajas de Petri y tubos de ensaye.
Lavar herida con agua y jabón. Informar al facilitador. Aplicar desinfectante y cubrir herida.
Cuadro de disposición de desechos
Tipo de desechos Como descartarlos Tipo de contenedor
Biológicos Esterilización por Bolsas para desechos
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autoclave biológicos Vidrio o Cristal Disponer en el contenedor
adecuado.
Desarrollo de la práctica
Esta práctica se desarrollará en 4 momentos
Primer Momento: Toma de lista y revisión de la indumentaria adecuada y materiales para la práctica.
Segundo Momento: Procedimiento de la práctica.
Tercer Momento: Discusión en equipo y en grupo de los resultados de la práctica
Cuarto Momento: Entrega de reporte con evidencia de desempeño.
Materiales:
1.- 10 ml de sangre completa fresca 2.-Portaobjetos limpios 3.-Colorante de Wright 4.-Microscopio
Procedimiento:
1.-Pon una pequeña gota (0.5ml) de sangre completa fresca en un extremo de una laminilla limpia.
2.-Con rapidez haz un frotis, tocando con el extremo de otro portaobjetos limpio la gota de sangre, y moviéndolo hacia el extremo opuesto, haciendo que esta gota deje una película fina con el uso del segundo portaobjetos
.
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3.-Después de que seque tiñe con el colorante de Wright.
4.-Examina microscópicamente los frotis con el objetivo de inmersión. -Los lugares más aptos son aquellos en los que la extensión de los glóbulos
se ha conseguido en una sola capa, están bien teñidos y no se han
producido precipitados de los colorantes. Cuando se observe una zona
apta, pasar a aumentos más fuertes.
5.-Cuenta 100 leucocitos de áreas representativas de la laminilla y registre la incidencia de cada uno de los siguientes tipos:
LINFOCITOS ------------------------------------------ MONOCITOS ------------------------------------------ NEUTOFILOS ------------------------------------------ EOSINOFILOS ------------------------------------------ BASOFILOS --------------------------------------------
Total 100
1. En el campo del microscopio, se verán con un dominio predominante losglóbulos rojos, hematíes o eritrocitos , teñidos en color rojo. No tienennúcleo y son más delgados por el centro que por los bordes. Los glóbulosblancos o leucocitos de identifican fácilmente por la presencia de núcleo.Hay varias clases de glóbulos blancos:
o los linfocitos algo mayores que los glóbulos rojos, con un núcleo muyvoluminoso que ocupa casi todo el glóbulo, aparece fuertementeteñido en color violeta oscuro.
o los monocitos son los leucocitos mayores, poco frecuentesnormalmente, hay que desplazarse por la preparación para encontraralguno. Tienen un núcleo muy grande y redondeado que apareceteñido en color violeta.(Es bueno que recuerdes su función que es lade fagocitosis).
o los polinucleares presentan el núcleo como fragmentado o conaspecto arrosariado.
o los eosinófilos, con granulaciones abundantes de color rojizo y elnúcleo teñido de color azul marino. Estos glóbulos aumentan sunúmero en caso de parasitosis o procesos alérgicos.
o los basófilos presentan un núcleo teñido de rojo y las granulacionesdel citoplasma de color muy oscuro.
o Las plaquetas aparecen como pequeños fragmentos teñidas de colorvioleta. Estas células intervienen en el proceso de coagulaciónsanguínea.
2. El número promedio de glóbulos rojos en el hombre es de 5.000.000 pormm3 de sangre. La cifra media de glóbulos blancos es de 7.000 a 8.000 por
Manual de Prácticas de Inmunología 6 de enero de 2009
Dr. Jesús Genaro Sánchez Martínez Página 38
mm3. Hay por tanto un glóbulo blanco por cada 600 ó 700 glóbulos rojos. Por lo tanto para ver todos los tipos de glóbulos blancos debes buscarlos en distintos campos de la preparación. El número de plaquetas es de unas 250,000 por mm3
CELULAS TAMAÑO FORMA
Neutrófilos 9 -12 µm 2 a 5 lobulos unidos por fila-
mentos delgados y bandas
anchas.
Eosinófilos 9 – 12 µm Generalmente de 2 lóbulos´.
Basófilos 9 – 12 µm Forma de roseta o ligeramente polimórficos
Monocitos 14 – 18 µm Forma de frijol
Linfocitos 7 – 13m Redondo u ovalado ralo
o fuertemente indentado.
Medidas de bioseguridad:
Asegurar que se trabaja de manera aséptica en todo momento.
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Evidencias de desempeño:
Reportarás por escrito* los resultados obtenidos en la práctica 2 días después de
la misma.
En tu reporte describirás de manera sucinta y clara el objetivo de la misma, la
metodología usada y los resultados obtenidos.
Además analizarás y discutirá las observaciones hechas durante la práctica y
describirás la manera como éstas impactan en tu formación.
Al final de tu reporte por escrito, contestarás el siguiente cuestionario de evaluación:
1. Para que sirve el conteo diferencial leucocitario?2. Que significa un incremento de monocitos en la sangre?3. Cuáles son los valores normales de los diferentes leucocitos en las diferentesespecies de animales domésticos?
*Ver instrucciones para el formato general de los reportes por escrito al finalde este manual de prácticas.
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PRÁCTICA No. 6
ANTÍGENOS DE SUPERFICIE CELULAR
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Número de profesionales en formación por unidad de práctica: 5/equipo
Introducción
Los antígenos de superficie celular se encuentran en todas las células de un animal, un ejemplo clásico para demostrar la presencia de antígenos de superficie es diferenciando entre los diferentes grupos sanguíneos.
La membrana celular de los glóbulos rojos contiene en su superficie diferentes proteínas, las cuales son las responsables de los diferentes tipos de sangre. Existen principalmente dos tipos de proteínas que determinan el tipo de sangre, la proteína A y la B.
TIPOS DE GRUPOS DE SANGRE
Según las diferentes combinaciones de las proteínas de la superficie de los glóbulos rojos dan como resultado los 4 grupos sanguíneos existentes:
Grupo A: Tiene proteína A en la superficie del glóbulo rojo. Grupo B: Tiene proteína B en la superficie del glóbulo rojo. Grupo AB: Tiene ambas proteínas A y B. Grupo O: No tiene ninguna (A o B) en la superficie del glóbulo rojo.
El Rh es otra proteína que si está presente en la superficie del glóbulo rojo será rh positivo y si está ausente, es rh negativo.
De esta forma una persona debe de tener un grupo sanguíneo formado por la proteína A, B ó las dos y además será Rh positivo o negativo.
Manual de Prácticas de Inmunología 6 de enero de 2009
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Objetivo de la práctica
Determinarás la presencia de antígenos de superficie, para diferenciar entre los diferentes grupos sanguíneos mediante pruebas serológicas.
Criterios de desempeño durante la práctica Te harás una punción en tu dedo, siguiendo métodos asépticos, para evidenciar la existencia de antígenos de superficie.
Identificarás tu tipo sanguíneo siguiendo la metodología expuesta en el desarrollo de la práctica.
Discutirás en equipo y en grupo los resultados obtenidos.
ítem Resultados Esperados Tiempo de término
Entregarás un reporte de la práctica. 2 días después de la práctica.
Normas de seguridad específicas de la práctica.
Tipo de peligro Como evitarlo Como proceder en caso de un accidente…
Cortaduras Manejar con cuidado las lancetas y portaobjetos.
Lavar herida con agua y jabón. Informar al facilitador. Aplicar desinfectante y cubrir herida.
Medidas de bioseguridad:
Asegurar que se trabaja de manera aséptica en todo momento. Asegurarse de usar lancetas diferentes para cada alumno.
Cuadro de disposición de desechos
Tipo de desechos Como descartarlos Tipo de contenedor
Biológicos Esterilización por autoclave
Bolsas para desechos biológicos
Vidrio o Cristal Disponer en el contenedor adecuado.
Desarrollo de la práctica
Esta práctica se desarrollará en 4 momentos
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Primer Momento: Toma de lista y revisión de la indumentaria adecuada y materiales para la práctica.
Segundo Momento: Procedimiento de la práctica.
Tercer Momento: Discusión en equipo y en grupo de los resultados de la práctica
Cuarto Momento: Entrega de reporte con evidencia de desempeño.
Materiales:
a).-Suero Anti- A B).-Suero Anti-B C).-Suero Anti – Rh D).-Portaobjetos, E).- 3 Palillos F).- Una lanceta estéril G).- Torundas con alcohol.
Procedimiento:
1.-Desinfectarse con alcohol la yema de un dedo y puncionar con una lanceta.
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2.-Coloca 3 gotas de sangre sobre el portaobjetos
3.-Coloca en la primera gota el suero anti – A en la segunda el suero anti-B y en la tercera el suero anti-Rh
4.-Mezclar con los palillos por separado y esperar 2 minutos para la lectura.
5.-Observar y leer.
INTERPRETACION:
1.-Aglutinacion en la primera gota ………………A
2.-Aglutinacion en la segunda gota…… ………...B
3.-Aglutinacion en la 1ª y 2ª gotas………………….AB
4.-Aglutinacion en la 3ª gota…………………………RH+
5.-Sin aglutinación en la 1ª y 2ª gotas……………….O
6.-Sin aglutinación en la tercera gota…………RH-
Evidencias de desempeño:
Reportarás por escrito* los resultados obtenidos en la práctica 2 días después de
la misma.
En tu reporte describirás de manera sucinta y clara el objetivo de la misma, la
metodología usada y los resultados obtenidos.
Además analizarás y discutirá las observaciones hechas durante la práctica y
describirás la manera como éstas impactan en tu formación.
Documentarás tus resultados mediante una fotografía.
Al final de tu reporte por escrito, contestarás el siguiente cuestionario de evaluación:
1. Que significa que se aglutine la gota A?2. Una persona con tipo de sangre A, puede recibir una transfusión de unapersona con tipo de sangre B? O?3. A que se deben los diferentes tipos sanguíneos?4. Qué es el factor Rh?
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*Ver instrucciones para el formato general de los reportes por escrito al finalde este manual de prácticas.
PRÁCTICA No. 7
PREPARACION DE UNA BACTERINA
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Número de profesionales en formación por unidad de práctica: 5/equipo
Introducción
Las explotaciones avícolas, bovina, porcinas, etc., especialmente las explotaciones domésticas, con frecuencia se ven diezmadas en su población por enfermedades que que en la mayoría de las veces son resultado de la acción combinada de 1 o más patógenos como las bacterias, e.g. Cólera y Tifoidea aviar causada por una una pasteurelosis combinada con salmonellas.
Algunas veces, el carácter extremadamente sobreagudo de algunas de estas enfermedades no permite a veces realizar un tratamiento curativo satisfactorio, ya que las muertes se presentan sin una sintomatología aparente.
Como la incidencia de algunas de estas enfermedades es especialmente en las épocas de cambios ambientales de invierno a verano y viceversa, es preferible anticiparse haciendo una vacunación preventiva que en la práctica se observa con mucha efectividad.
La vacunación entonces, se hace utilizando una bacterina contra estas enfermedades es la forma más idónea para mantener sin problema una explotación comercial.
La preparación de bacterias vivas atenuadas o muertas de una o varias especies, suspendida en un líquido que se inyecta para estimular los mecanismos específicos contra las infecciones determinadas por bacterias de la misma clase reciben el nombre de bacterinas. También se preparan vacunas antibacterianas con fracciones antigénicas de la bacteria: p.ej., con cápsulas (antineumocócica, antimeningocócica), lipopolisacárido de la pared (antipseudomonas), etc.
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Objetivo de la práctica
Fabricarás un producto biológico (bacterina), para determinar la inocuidad y esterilidad del mismo, para su uso animal.
Criterios de desempeño durante la práctica Manejarás con cuidad y en condiciones de esterilidad el cultivo bacteriano
Realizarás la inactivación de la bacterina siguiendo las instrucciones del facilitador, de acuerdo a la metodología descrita en el desarrollo de la práctica.
Manejarás con cuidado al ratón, para que éste no sufra demasiado estrés.
Describirás en equipo y en grupo los resultados obtenidos.
Reportarás la inocuidad de la bacterina mediante un informe profesional anexado al reporte de la práctica.
ítem Resultados Esperados Tiempo de término
Entregarás un reporte de la práctica. 2 días después de la práctica.
Normas de seguridad específicas de la práctica.
Tipo de peligro Como evitarlo Como proceder en caso de un accidente…
Cortaduras Manejar con cuidado las lancetas, jeringas y portaobjetos.
Lavar herida con agua y jabón. Informar al facilitador. Aplicar desinfectante y cubrir herida.
Contaminación bacteriana
Usar guantes, mantener esterilidad.
Lavar herida con agua y jabón. Informar al facilitador. Aplicar desinfectante y cubrir herida
Medidas de bioseguridad:
Asegurar que se trabaja de manera aséptica en todo momento. Asegurarse de usar lancetas diferentes para cada alumno.
Cuadro de disposición de desechos
Tipo de desechos Como descartarlos Tipo de contenedor
Biológicos Esterilización por autoclave
Bolsas para desechos biológicos
Vidrio o Cristal Disponer en el contenedor
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adecuado.
Desarrollo de la práctica
Esta práctica se desarrollará en 4 momentos
Primer Momento: Toma de lista y revisión de la indumentaria adecuada y materiales para la práctica.
Segundo Momento: Procedimiento de la práctica.
Tercer Momento: Discusión en equipo y en grupo de los resultados de la práctica
Cuarto Momento: Entrega de reporte con evidencia de desempeño.
Materiales:
1.-Cultivo de (Salmonella gallinarum) de 18 horas en fase logarítmica.
2.-Frasco con formol al 10%
3.-Baño María.
4.-Nefelómetro de MacFarland, hemocitómetro y/o espectofotómetro
5.-Pipetas estériles de 1ml cada una 1/100.
6.-Solución salina fisiológica (SSF) como diluyente.
7.-Medios de cultivo para la prueba de esterilidad: Caldo tioglicolato, Caldo triptosa, agar inclinado.
8.-Jeringas de tuberculina estériles con aguja No. 27 ¼”
9.-Ratones para la prueba de inocuidad.
10.-Equipo para tinción de Gram.
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Procedimiento:
1.-Efectuar un frotis y hacer la tinción de Gram* para observar la exclusiva presencia del microorganismo
Bacterias Gram negativas Bacterias Gram positivas
2.-Cosecha del germen 3 ml.
3.-Agregar 0.15ml de formol al 10% para obtener la concentración final de 0.5%
4.-Inactivar por calentamiento a 56°C /30 minutos en baño maría.
5.-Centrifugar a 1500 rpm/30 min ó a 3000 rpm/15 min.
6.-Descartar el sobrenadante y obtener el paquete celular.
7.-Estandarización del germen con el nefelómetro de MacFarland.
8.-La estandarización se lleva a cabo añadiendo SSF al paquete celular hasta que se obtiene la concentración deseada.
El resultado se expresa en número de bacterias por ml.
INTERPRETACION:
a).-Realizar la prueba de esterilidad sembrando en uno de los medios de cultivo una gota (0.03 ml), se identificara y se observarán en 7 días. El resultado ideal será que no exista crecimiento en ninguno de los medios de cultivo.
b).-Inoculación de ratones vía intraperitoneal (IP) con 0.1 ml. También se
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observará durante 7 días.
Medidas de bioseguridad:
Asegurar que se trabaja de manera aséptica en todo momento. Bata y guantes.
Evidencias de desempeño:
Reportarás por escrito* los resultados obtenidos en la práctica 2 días después de
la misma.
En tu reporte describirás de manera sucinta y clara el objetivo de la misma, la
metodología usada y los resultados obtenidos.
Además analizarás y discutirá las observaciones hechas durante la práctica y
describirás la manera como éstas impactan en tu formación.
Al final de tu reporte por escrito, contestarás el siguiente cuestionario de evaluación:
1. Qué es una bacterina?2. Por qué se inocula el ratón IP en la prueba de inocuidad?3. Que resultados esperaría en la prueba de inocuidad?4. Cómo comprobarías la eficacia de la bacterina que hiciste?
*Ver instrucciones para el formato general de los reportes por escrito al finalde este manual de prácticas.
*Tinción de Gram
Dejar secar a temperatura ambiente
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Fijar la muestra con metanol durante un minuto o al calor (flameado 3 vecesaprox.)
Agregar azul violeta (cristal violeta o violeta de genciana) y esperar 1 min.Este tinte dejará de color morado las bacterias Gram positivas.
Enjuagar con agua. Agregar lugol y esperar 30 segundos Enjuagar con agua. Agregar alcohol acetona y esperar 15 s Enjuagar con agua. Agregar safranina y esperar 1 min Este tinte dejará de color rosado las
bacterias Gram negativas. Enjuagar con agua.
Para observar al microscopio óptico es conveniente hacerlo a 100x con aceite de inmersión
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PRÁCTICA No. 8:
DIAGNOSTICO DE BRUCELOSIS (PRUEBA DE AGLUTINACION EN TUBO)
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Número de profesionales en formación por unidad de práctica: 5/equipo
Introducción
Seroglutinación en tubo o placa con pocillos, enfrenta diluciones crecientes del
suero problema a una cantidad constante de B. abortus. Este antígeno reacciona
tanto con anticuerpos de esa especie como frente a los de B. melitensis y B. suis,
que son las tres especies responsables en la práctica de la totalidad de enfermos
con brucelosis. El título positivo de 1/160 se considera, en un país endémico, el
punto de corte en el diagnóstico de la enfermedad, no siendo raros los títulos de
1/640 o superiores en las fases iniciales de la enfermedad. Su interpretación
requiere conocer los antecedentes del enfermo y valorar las características
clínicas presentes puesto que, al inicio de la enfermedad o en casos muy
avanzados de la misma, la prueba puede ser, como el Rosa de Bengala, negativa.
Debido a que los anticuerpos responsables de la seroaglutinación son
fundamentalmente de la clase IgM, lo habitual es que vayan descendiendo en el
transcurso de 3-6 meses, con o sin curación de la enfermedad.
Esta es una prueba satisfactoria y de gran confiabilidad en la detección de infecciones en procesos evolutivos.
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Objetivo de la práctica
Determinarás la presencia de anticuerpos específicos a Brucella sp., para hacer un diagnóstico de la presencia de la enfermedad. .
Criterios de desempeño durante la práctica Manejarás con cuidado y en condiciones de esterilidad el antígeno bacteriano
Realizarás las diluciones como te lo indique el facilitador.
Discutirás en equipo y en grupo las observaciones que se tengan.
Emitirás un dictamen de los resultados obtenidos.
ítem Resultados Esperados Tiempo de término
Entregarás un reporte de la práctica. 2 días después de la práctica.
Normas de seguridad específicas de la práctica.
Tipo de peligro Como evitarlo Como proceder en caso de un accidente…
Cortaduras Manejar con cuidado las lancetas, jeringas y portaobjetos.
Lavar herida con agua y jabón. Informar al facilitador. Aplicar desinfectante y cubrir herida.
Contaminación bacteriana
Usar guantes, mantener esterilidad.
Lavar herida con agua y jabón. Informar al facilitador. Aplicar desinfectante y cubrir herida
Medidas de bioseguridad:
Asegurar que se trabaja de manera aséptica en todo momento. Asegurarse de usar lancetas diferentes para cada alumno.
Cuadro de disposición de desechos
Tipo de desechos Como descartarlos Tipo de contenedor
Biológicos Esterilización por autoclave
Bolsas para desechos biológicos
Vidrio o Cristal Disponer en el contenedor adecuado.
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Desarrollo de la práctica
Esta práctica se desarrollará en 4 momentos
Primer Momento: Toma de lista y revisión de la indumentaria adecuada y materiales para la práctica.
Segundo Momento: Procedimiento de la práctica.
Tercer Momento: Discusión en equipo y en grupo de los resultados de la práctica
Cuarto Momento: Entrega de reporte con evidencia de desempeño.
Materiales:
1.-Tubos de vidrio pirex de 13 x 100 mm
2.-Gradilla
3.-Pipetas de Bang (0.02ml) graduadas
4.-Jeringa automática de 2.0 ml
5.-Antígeno de B. abortus al 0.045% de concentración celular diluido en solución salina fenolada al 0.5%
6.-Suero sanguíneo.
Procedimiento:
1.-Antes de iniciar la prueba se retira el suero y el antígeno del refrigerador y se expone a temperatura ambiente durante 30 a 60 minutos
2.-Por cada muestra deben utilizarse 5 tubos que corresponderán a las diluciones 1/25 1/50 1/100 1/200 1/400.
3.-El primer tubo se identificará con el número de la muestra del suero.
4.-Con una pipeta de bang se obtiene el suero problema y se ajusta a la marca 0.0 aplicando la pipeta contra el fondo del tubo. Se deposita 0.08ml de suero en el primer tubo, en el segundo 0.04ml,en el tercer tubo 0.02ml en el cuarto 0.01ml y 0.005ml en el último tubo
Manual de Prácticas de Inmunología
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5.-Con una jeringa automática se depositan 2ml de antígeno dentro de cada tubo resultando las diluciones 1/25 1/50 1/100 1/200 y 1/400
6.-Agitar los tubos para lograr la homogenización de las mezclas
7.-Incubarlos a 37°C / 48 horas.
Método de dilución múltiple (Para determinar el título final):
1.-Dejar el suero y el antígeno a temperatura ambiente durante 30 a 60 minutos antes de iniciar la prueba.
2.-Se utilizan 5 o más tubos por muestra de suero.
3.-Identificar el primer tubo por cada muestra de suero.
4.-Con una pipeta bang se obtiene el suero y se afora al menisco en la parte superior de la pipeta.
5.-En el fondo del primer tubo se depositan 0.16ml del suero y 4.0 ml de antígeno diluido.
6.-En los siguientes tubos se colocan exclusivamente 2.0 ml de antígeno.
7.-Con una pipeta de 2.0ml se trasladan 2.0 ml del primero al quinto tubo.
Observaciones.
Nunca se utilizará una pipeta dos veces para efectuar la misma operación.
Lectura:
Aglutinación completa: Clarificación total del líquido sobrenadante,y al agitar el tubo levemente los conglomerados formados no desaparecen.
Aglutinación incompleta: Clarificación parcial del líquido sobrenadante y no desaparición de los conglomerados formados al agitar el tubo.
No hay reacción: No hay clarificación alguna del líquido sobrenadante,y al agitar los tubos los conglomerados desaparecen.
Interpretación.
Se efectúa en la misma forma que la prueba de aglutinación en placa.
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Positivo: Presencia de grumos rodeados por líquido sobrenadante. Negativo: No hay alteración en los reactivos
Medidas de bioseguridad:
Asegurar que se trabaja de manera aséptica en todo momento.
Evidencias de desempeño:
Reportarás por escrito* los resultados obtenidos en la práctica 2 días después de
la misma.
En tu reporte describirás de manera sucinta y clara el objetivo de la misma, la
metodología usada y los resultados obtenidos.
Documentarás con fotografías la aglutinación observada y la usarás para emitir tu
dictamen.
Emitirás un dictamen firmado sobre la presencia o ausencia de Brucelosis en las
muestras experimentales.
Además analizarás y discutirá las observaciones hechas durante la práctica y
describirás la manera como éstas impactan en tu formación.
Al final de tu reporte por escrito, contestarás el siguiente cuestionario de evaluación:
1. Que significa la aglutinación observada?2. Que ventajas considera que tiene la prueba realizada?3. Que podría ocasionar una falla en la prueba de detección?4. Cómo te asegurarías que no hubiera falsos positivos o negativos?
*Ver instrucciones para el formato general de los reportes por escrito al finalde este manual de prácticas.
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PRÁCTICA No. 9
DIAGNOSTICO DE BRUCELOSIS (PRUEBA DE AGLUTINACION EN TARJETA).
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Dr. Jesús Genaro Sánchez Martínez.
Manual de Prácticas de Inmunología
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Número de profesionales en formación por unidad de práctica: 5/equipo
Introducción
Prueba rápida, sencilla y muy sensible, es positiva mucho antes que la prueba de aglutinación y aun antes que con las demás pruebas complementarias, debe efectuarse por lo menos 2 veces al año, en los hatos bajo vigilancia.
Objetivo de la práctica
Realizarás e interpretarás la prueba de aglutinación en tarjeta utilizada para el diagnóstico de la brucelosis.
Criterios de desempeño durante la práctica Manejarás con cuidado y en condiciones de esterilidad el antígeno bacteriano
Realizarás la aglutinación en tarjeta como te lo indique el facilitador, de acuerdo al procedimiento especificado en el desarrollo de la práctica.
Interpretarás los resultados que obtengas y emitirás un dictamen de los mismos.
ítem Resultados Esperados Tiempo de término
Entregarás un reporte de la práctica. 2 días después de la práctica.
Normas de seguridad específicas de la práctica.
Tipo de peligro Como evitarlo Como proceder en caso de un accidente…
Cortaduras Manejar con cuidado las lancetas, jeringas y portaobjetos.
Lavar herida con agua y jabón. Informar al facilitador. Aplicar desinfectante y cubrir herida.
Contaminación bacteriana
Usar guantes, mantener esterilidad.
Lavar herida con agua y jabón. Informar al facilitador. Aplicar desinfectante y cubrir herida
Medidas de bioseguridad:
Asegurar que se trabaja de manera aséptica en todo momento.
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Cuadro de disposición de desechos
Tipo de desechos Como descartarlos Tipo de contenedor
Biológicos Esterilización por autoclave
Bolsas para desechos biológicos
Vidrio o Cristal Disponer en el contenedor adecuado.
Desarrollo de la práctica
Esta práctica se desarrollará en 4 momentos
Primer Momento: Toma de lista y revisión de la indumentaria adecuada y materiales para la práctica.
Segundo Momento: Procedimiento de la práctica.
Tercer Momento: Discusión en equipo y en grupo de los resultados de la práctica
Cuarto Momento: Entrega de reporte con evidencia de desempeño.
Materiales:
1.- Antígeno de B. abortus 1119-S a una concentración del 8% teñido con rosa de bengala y un PH de 3.65.
2.- Placa de vidrio
3.- Suero problema o plasma
4.- Palillos
Procedimiento:
1.-Sobre la placa de vidrio se distribuyen volúmenes iguales de suero y antígeno (0.03ml)
2.-Se mezclan con palillos 4 minutos y se efectúa la lectura.
INTERPRETACION: POSITIVO: Presencia de grumos rodeados por líquido sobrenadante claro NEGATIVO: No hay alteraciones en los reactivos.
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Medidas de bioseguridad:
Asegurar que se trabaja de manera aséptica en todo momento.
Evidencias de desempeño:
Reportarás por escrito* los resultados obtenidos en la práctica 2 días después de
la misma.
En tu reporte describirás de manera sucinta y clara el objetivo de la misma, la
metodología usada y los resultados obtenidos.
Documentarás los resultados obtenidos mediante una fotografía de la prueba de
tarjeta.
Emitirás un dictamen firmado profesional sobre los resultados obtenidos de las
muestras experimentales.
Además analizarás y discutirá las observaciones hechas durante la práctica y
describirás la manera como éstas impactan en tu formación.
Al final de tu reporte por escrito, contestarás el siguiente cuestionario de evaluación:
1. Describa la apariencia de los sueros usados.2. A que se debe la aglutinación?3. Que otros métodos similares a la prueba de tarjeta existen?4. Que ventajas poseen los métodos serológicos para la detección de antígenos?
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*Ver instrucciones para el formato general de los reportes por escrito al finalde este manual de prácticas.
ANEXOS
SISTEMA DE EVALUACIÓN.
a) Evidencia de desempeño: Las descritas de manera general para
el manual de prácticas y de manera particular para cada práctica.
b) Evaluaciones intermedias: Habrá una evaluación intermedia no
calificatoria al final de la semana 6. Será una evaluación oral, por
equipo, acerca de las técnicas y eventos cubiertos por las diferentes
prácticas.
c) Método de asignación de calificaciones:
1. Asistencia: 15%
2. Criterios de desempeño: 15%
3. Reporte por escrito en tiempo y forma: 70%
d) Portafolios de evidencias: Al final del curso entregarás un
portafolios con todas las prácticas entregadas y revisadas.
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INSTRUCCIONES PARA EL FORMATO GENERAL DE LOS REPORTES POR ESCRITO
El reporte es un escrito sencillo donde con tus propias palabras describirás el
proceso de disección del pez. Este debe contener lo siguiente:
Introducción. Es una breve descripción sobre la historia de las disecciones, su uso,
importancia, utilización, etc. Recuerda que es la forma de atraer la lectura hacia tu
trabajo, por lo que debes mantenerla CORTA y SUSTANCIOSA.
Objetivo. Es el propósito, la razón o motivo del por qué realizaste la disección.
Metodología. Es la descripción sobre lo que hiciste durante la práctica. Puedes
escribirla en forma de relato o como si fuera una receta de cocina.
Resultados. Es la parte medular de tu reporte. Aquí agrega los cuadros
comparativos que realizaste junto con tus compañeros. Señala lo que te llamó la
atención. Es conveniente que anexes tablas, dibujos, fotografías o esquemas de lo
que observaste durante la práctica.
Discusión. Esta es la parte más difícil de escribir, pero es la más importante. Aquí
debes señalar las diferencias y similitudes que hallaste sobre los órganos internos
de los peces que disectaste y los de otros animales que conozcas. Puedes utilizar
cuadros comparativos u otra herramienta que te sea útil para presentar la
información.
Bibliografía. Debes citar SIEMPRE la fuente de donde obtuviste la información, ya sea escrita o visual. Puedes utilizar revistas, libros o Internet.
Manual de Prácticas de Inmunología
Dr. Jesús Genaro Sánchez Martínez Página 64
Lista de Cotejo para el Alumno.
Actividad
Evaluación
profesional
en
formación
Evaluación
instructor Final Observaciones
¿Utilizaste la bata de
laboratorio de manera
adecuada?
¿Trajiste el Material
completo?
¿Trajiste el Equipo de
disección?
¿Utilizaste los guantes
durante la práctica?
¿Realizaste la práctica
conforme a las
instrucciones?
¿Al final de la práctica
limpiaste tu área de trabajo?
¿Dispusiste de los desechos
de cómo indica el manual?
¿Mantuviste las condiciones
de esterilidad necesarias?
¿Te comportaste con la
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profesionalidad requerida?
Dictamen de Brucelosis
Apellido Paterno Apellido Materno Nombre(s) Teléfono
Domicilio Población y municipio Estado
Nombre del Rancho Ubicación
Fecha de muestreo
Fecha de prueba anterior
Se probó la totalidad del hato:
Tipo(s) de Prueba Realizadas
( ) Tarjeta ( ) Aglutinación en tubo ( ) Otra.
Fecha de Prueba
Fecha de Prueba Próxima
Firma Fecha
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