Pericias Químicas de Manchas de Sangre

Unidad III

Parte 4

Antígenos-Anticuerpos. Enzimas y Proteínas Polimórficas: su aplicación en manchas de sangre.

Antígeno• sustancia que puede provocar una

respuesta inmune. • molécula que puede inducir la formación de

Anticuerpos. • En general son sustancias que no se

encuentran usualmente en el cuerpo.

Antígeno• Muchos tipos de moléculas pueden ser

antígenos: proteínas, polisacáridos y ácidos nucleicos.

• Cada antígeno está definido por su anticuerpo, los cuales interactúan por complementariedad espacial.

Anticuerpos

Anticuerpos• son glucoproteínas secretadas por los

plasmocitos.• tienen afinidad específica y alta por los

Antígenos.• Su producción forma parte de la respuesta

inmune humoral.• Propósito: reconocer cuerpos extraños

invasores: bacterias y virus para mantener al organismo libre de ellos.

• Los plasmocitos : proliferación y diferenciación: linfocitos B activados.

Anticuerpos• En el ser humano existen cinco clases de

anticuerpos, conocidos con el nombre de Inmunoglobulinas:

• G (IgG)• A (IgA)• M (IgM)• D (IgD)• E (IgE) difieren

TamañoCarga eléctricaAAAzúcares

Anticuerpos: tipos IgG: 80% del total, puede atacar a

cualquier tipo de patógeno: virus, bacterias y hongos, bloqueando sus toxinas. Tiene cuatro subtipos, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4.

IgA : 15 al 20% . Actúa contra patógenos que contactan con la superficie corporal, ingeridos o inhalados. Existen dos formas: IgA1 e IgA2.

Anticuerpos: tipos• IgM: puede detectar el tipo de

ABO sanguíneo de una persona. También es importante en el diagnóstico de fase aguda de distintas infecciones.• IgD: 1% , en la membrana plasmática de los

linfocitos B. Participa en el desarrollo de células de memoria en los linfocitos B.

Anticuerpos: tiposIgE: en suero y secreciones externas, representa apenas el 0,002% de las Ig. Se encuentra en la membrana de los basófilos y del mastocito. Participa en las reacciones de hipersensibilidad, y en la respuesta a parásitos.

Tipos de reacción Ag-Ac

La unión Ag-Ac se lleva a cabo mediante distintos tipos de reacciones:• Neutralización

• Aglutinación• Precipitación• Activación del Complemento• Citotoxicidad celular

[Ag-Ac]Neutralización de toxinas o patógenos: impidiendo su unión a los receptores de la membrana de las células diana y su penetración al citoplasma. Aglutinación de los antígenos que se encuentran en la superficie celular facilitando su destrucción por los macrófagos. Precipitación de moléculas antigénicas disueltas mediante la formación de complejo antígeno/anticuerpo. Activación del sistema del complemento que permite la lisis u opsonización de los patógenos. Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos.

Anticuerpo monoclonal

• Un anticuerpo monoclonal es un anticuerpo homogéneo producido por una célula híbrida producto de la fusión de un clon de linfocitos B descendiente de una sola y única célula madre y una célula plasmática tumoral.

• Mab, del inglés monoclonal antibody • Es posible producir anticuerpos monoclonales

que se unan específicamente con cualquier molécula con carácter antigénico. Este fenómeno es de gran utilidad en bioquímica, Biología Molecular y Medicina.

Usos o aplicaciones• Los anticuerpos monoclonales se utilizan en muchos campos como:• La investigación biomédica, como la identificación y clonación de

genes, la identificación y aislamiento de proteínas, la activación de enzimas, conocimiento de la estructura molecular y morfogénesis.

• Diagnóstico: En medicina, gracias a la gran especificidad y capacidad prácticamente ilimitada de los anticuerpos monoclonales para reconocer cualquier estructura química, permite la detección de hormonas, vitaminas, citocinas; la monitorización de drogas, detección de enfermedades infecciosas en microbiología; la detección de alergenos en alergia, hematología, marcadores tumorales e infartos de miocardio, aplicaciones forenses, inmunoescintografía.

• En las ténicas diagnósticas se emplean diversas herramientas de biología molecular como ELISA, EIA, citometría, inmunohistoquímica, inmufluorescencia.

• Los anticuerpos monoclonales son unas de las sustancias más utilizadas en los laboratorios de diagnóstico.

Aplicaciones

• Una vez que se han producido anticuerpos monoclonales que se unen a determinadas sustancias, estos pueden ser usados para detectar la presencia y cantidad de esta sustancia, gracias a la prueba de Western blot, que detecta una sustancia en una solución o con una prueba de inmunofluorescencia, que detecta una sustancia en una célula entera.

• Los anticuerpos monoclonales también son usados para purificar una sustancia con técnicas llamadas inmunoprecipitación y cromatografía.

ventajasLos anticuerpos monoclonales muestran una serie de ventajas sobre los anticuerpos policlonales como:• Mayor homogeneidad. • Reproductibilidad de sus efectos, como

consecuencia de su homogeneidad. • Mayor capacidad potencial de seleccionar

los mejores anticuerpos en afinidad, tipo de reconocimiento.

• Catálisis: Los anticuerpos monoclonales se han utilizado como catalizadores de múltiples reacciones químicas.

• Biosensores: Los anticuerpos monoclonales acoplados a transductores electrónicos pueden detectar tanto moléculas orgánicas como inorgánicas como la contaminación de metales pesados en alimentos y agua, detección de gases tóxicos, etc. Un biosensor es un instrumento analítico formado por un material biológico inmovilizado como una enzima, anticuerpo, célula entera, orgánulo o combinaciones de los mismos, en íntimo contacto con un sistema transductor adecuado que convierta la señal bioquímica en una señal eléctrica cuantificable.

• Tratamiento: Las aplicaciones terapéuticas constituyen el campo más importante de los anticuerpos monoclonales, ya que son capaces de erradicar ciertas infecciones y destruir células, incluidas las tumorales, mediante distintos mecanismos. Por esta razón, son excelentes sustancias para el tratamiento de enfermedades infecciosas, enfermedades autoinmunes, el cáncer o en trasplantes para evitar el rechazo. Existen varios anticuerpos monoclonales aprobados para su uso en determinadas enfermedades.

Reacción de Inmunoprecipitación

Inmunodifusión o Test de Ouchterlony.

Inmunodifusión

Inmunodifusión