Tinción de Ziehl-Neelsen
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Transcript of Tinción de Ziehl-Neelsen
• La mayoría de las bacterias se encuentran englobadas en 2 grandes grupos según la tinción de Gram sin embargo algunas bacterias del genero Mycobacteriun no pueden ser clasificadas por aquella tinción, dado a que estas bacterias una vez teñidas con colorantes básicos no se pueden decolorar con alcohol acido
• Robert Koch 1882 ideo esta tinción denominada BAAR y fue modificada por sus autores Ziehl y Neelsen
• Mycobacterias:• Bacterias de forma bacilar delgada rectas ó
ligeramente curvas con extremos redondos • No esporulados• No capsulados• No moviles• Aerobios estrictos
• Las Mycobacterias están recubiertas por un grueso material céreo (paredes lipidicas muy gruesas resistiendo el alcohol acido) que resiste la tinción; sin embargo una vez teñidas las células bacterianas resisten la decoloración con solventes orgánicos fuertes como el alcohol-ácido por este motivo estas bacterias se conocen como acidorresistentes fenómeno descubierto por Ziehl y Neelsen en 1882.
• Mycobacterias tienen una pared celular que contiene una capa de peptidoglicanos y mesodiaminopimelico arabinosa y galactosa siendo una característica importante de esta.
• Su alto contenido de lípidos (60%) la da la característica hidrofobica a la célula.
• Entre los lípidos están la cera D y los glicolipidos (micosidos) teniendo como componente principal a los ácidos micólicos los cuales aumentan este carácter hidrófobo
• Se tiñen con dificultad en ocasiones se tiñen irregularmente y se observan espacios claros o gránulos fuertemente teñidos
TinciónZiehl-Neelsen
Tinciones
• Kinyoun: (tinción acidorresistente) método en frio se usa un detergente activo de superficie como el tergitol en lugar de calor
• Tintura fluorocromo auramina y rodamina en microscopio de fluorescencia, las células bacterianas se ven amarillas con fondo oscuro usando permanganato de potasio como contratinción
Muestra
• Leche: alimento muy consumido por el hombre, el cual si no se maneja con la higiene adecuada y calidad puede contener una bacteria muy agresiva que si no es tratada puede ser mortal
Muestra
• Espectoraciones (flema o esputo)• LCR• Heces fecales• Leche• Biopsias• Orina• Jugos garstricos
Las micobacterias son microorganismos ampliamente distribuidos, típicamente se las encuentra en el agua (incluyendo el agua del grifo tratada con cloro) y en los alimentos. Algunas especies, sin embargo, son patógenos obligados, tales como las causantes de tuberculosis y lepra y no se las encuentra viviendo en el agua.
FrotisTinción Ziehl-Neelsen
1. Carbol fucshina 5 minutos calentando (mas soluble en sustancias lipidicas
2. Enfriar y lavar3. Decoloración alcohol acido (OH 95% + HCl
3%) gota a gota4. Lavar 5. Azul de metileno 1 min6. Lavar secar y observar 100x
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• (-) no se encuentran BAAR en 100 campos microscópicos observados
• (+) menos de 1 BAAR por campo en 100 campos observados
• (++) 1 a 10 BAAR por campo en 50 campos observados
• (+++) Mas de 10 BAAR por campo, en 20 campos observados