Tinción de GramReactivos

• Metil violeta 6B al 0.5% o cristal violeta al 0.5 %

• Solución de Lugol.• Alcohol absoluto o

acetona.• Carbol-fucsina diluida,

rojo-neutro o safranina como contraste.

Método

• Se prepara una extensión, se deja secar y fijar suavemente al calor.

• Aplicar la solución (metil o cristal violeta) durante 30 segundos.

• Sustituir la anterior solución aclarando suavemente con agua, aplicar la solución de lugol y dejar actuar durante 30-60 segundos.

• Decolorar lavando con alcohol absoluto o acetona y continuar hasta que no se arrastre más colorante de la preparación.

• Lavar una vez más con agua • Aplicar la solución que funcionará como contraste (Carbol-

fucsina, rojo neutro o safranina) durante 2 minutos.• Aclarar con agua y secar con papel y suavemente con calor.

Bacterias gram positivas vistas sobre la superficie de una célula epitelial. (De Winn WC Jr, et al. Koneman’s Color Atlas and Textbook of Diagnostic Microbiology. 6th ed. Philadelphia, PA: Lippincott Williams & Wilkins; 2006.)

Loosely coiled Gram-negative spirochetes.Borrelia burgdorferi shown here, is the etiologic agent (cause)of Lyme disease. (From Winn WC Jr, et al. Koneman’s ColorAtlas and Textbook of Diagnostic Microbiology. 6th ed.Philadelphia, PA: Lippincott Williams & Wilkins; 2006.)

AL OBSERVAR AL MICROSCOPIO.

Bacterias gram-postivas se observan en color violeta.

Bacterias gram-negativas se observan en color rojo.

Gram positivas Gram negativas

Técnica