Diapositiva 1 - fmed.uba.ar .Cocos Gram positivos Tinción de Gram ... API E Serotipificación ...

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  • Diagnstico Microbiolgico

    Toma de muestras clnicas representativas

    Esputo

    Orina(miccin espontnea o

    al acecho)

    Material fecal

    Sangre/LCR

    Biopsia de tejidos

    Sitios no contaminados con Flora Normal

    Sitios contaminados con Flora Normal

    Orina(puncin suprapbica)

    http://images.google.com.ar/imgres?imgurl=http://www.scielo.org.ve/img/fbpe/ic/v46n2/Frame5.JPG&imgrefurl=http://www.scielo.org.ve/scielo.php%3Fscript%3Dsci_arttext%26pid%3DS0535-51332005000200004%26lng%3Des%26nrm%3Diso%26tlng%3Des&h=263&w=287&sz=14&hl=es&start=8&um=1&tbnid=yrPtpAzYGE8ygM:&tbnh=105&tbnw=115&prev=/images%3Fq%3Dbiopsia%2Bde%2Btejido%2Bcultivo%26um%3D1%26hl%3Deshttp://www.anec.org.co/aa/img_upload/625447367e451338563a322f9cfba43e/jeringa.jpeghttp://images.google.com.ar/imgres?imgurl=http://www.canalejo.org/Comun/Lab_Micro/lprjc/image7.jpg&imgrefurl=http://quimicosclinicosxalapa04.spaces.live.com/%3F_c11_BlogPart_pagedir%3DPrevious%26_c11_BlogPart_handle%3Dcns!204AC1C68E772D5!1499%26_c11_BlogPart_BlogPart%3Dblogview%26_c%3DBlogPart%26partqs%3Dcat%253DPARASITOLOGIA%252BCLINICA-VETERINARIA&usg=__R6I7k_ENfXhZw1JkY4IJ8hplg1c=&h=403&w=217&sz=9&hl=es&start=10&um=1&tbnid=d6_kZwArqK06TM:&tbnh=124&tbnw=67&prev=/images%3Fq%3Dlaboratorio%2Bmateria%2Bfecal%2Bpruebas%26hl%3Des%26um%3D1http://www.anec.org.co/aa/img_upload/625447367e451338563a322f9cfba43e/jeringa.jpeg
  • Diagnstico microbiolgicoMuestra clnica

    TRANSPORTE

    Material necesario

    Medio semislido: Medio StuartMedio AmiesMedio Cary & Blair

    Medio lquido: Agua peptonada (Vibrio cholerae)PRAS/TAB (anaerobios)

    Medio

    Frasco estril: orina, materia fecal.

    Hisopo en medio semislido: fauces, recto, endocervix, uretra.

    Frasco con medio para anaerobios: anaerobios

    Frasco de hemocultivo: sangre

  • Conservacin de las muestrasTIPO DE MUESTRA TEMPERATURA AMBIENTE HELADERA (4c)

    SANGRE X

    ORINA X

    EXUDADOS FARINGEOS X

    ESPUTO Y MUESTRAS RESPIRATORIAS X

    EXUDADOS GENITALES X ( hisopo en medio Amies o Stuart

    para Neisseria gonorrhoeae)

    LCR X

    Punciones o biopsias de PIEL Y TEJ. BLANDOS

    X

    EXUDADOS OCULARES X

    MUESTRAS PARA ANAEROBIOS X

    MATERIA FECAL X

    Diagnstico microbiolgico

  • Observacin microscpica

    CultivoDeteccin de antgenos bacterianos

    Mtodos moleculares

    Pruebas Bioqumicas

    Identificacin

    Sensibilidad antibitica

    Medios Selectivos

    Medios diferenciales

    Medios de enriquecimiento

    Diagnstico Microbiolgico

  • Microscopia

    Cultivo

    TincinFresco

    Aislar

    Identificar

    Conocer el patrn de susceptibilidad antibitica

    Presencia o no de bacterias

    Morfologa

    Movilidad

    Clulas epiteliales

    Leucocitos

    Hemates

    Candidas (hongo)

    GRAM

    ZIEHL NIELSEN

    GIEMSA

    OTROS

    Procesamiento de la muestraDiagnstico microbiolgico

  • Exmen en fresco

    Candida spp. (hongo)

    Clulas epitelialesHemates

    Leucocitos

    Diagnstico microbiolgico

  • Cocos Gram positivos

    Tincin de Gram

    En cadena Ej: Streptococcus spp

    Microscopio ptico

    En racimo Ej: Staphylococcus aureus

    Diagnstico microbiolgico

  • Bacilos gram-positivos

    Bastones o cilindros

    Microscopio ptico

    Diagnstico microbiolgico

    Corynebacterium diphteriae(agrupamiento como letras chinas)

  • Tincin de Ziehl-Neelsen

    Microscopio ptico

    Diagnstico microbiolgico

  • CultivoMedio slido

    (aislar)

    Medio lquido

    (enriquecer)

    Diagnstico microbiolgico

  • Medios Selectivos y Diferenciales

    Chapman

    Levine

    o EMB

    CultivoDiagnstico microbiolgico

  • Identificacin bacteriana

    Pruebas bioqumicas Identificacin de antgenos bacterianos

    API E

    Serotipificacin

    Diagnstico microbiolgico

  • Serotipificacin

    Se utilizan anticuerpos

    especficos para detectar antgenos

    en la superficie de la envoltura bacteriana

    1 gota de

    Ac

    1

    colonia

    aislada

    Aglutinacin = positivo

    Diagnstico microbiolgico

  • Cultivo

    Microorganismo patgeno

    Diagnstico microbiolgico

    Repaso

    Pruebas de susceptibilidad antibitica

    Aislamiento- identificacin-

  • OBJETIVOS

    Determinar la sensibilidad de una cepa

    bacteriana a un determinado antibitico

    Determinar la eficacia de un antibitico

    Pruebas de susceptibilidad antibitica

  • Antibiograma de difusin o mtodo de

    Kirby & Bauer

  • Significado clnico de la prueba de Kirby & Bauer

    Bacterias sensiblesBacterias de susceptibilidad intermediaBacterias resistentes

  • E-Test

    Gradientede concentracionesen la tira (g/ml)

    La diferencia con el disco, es que el disco contiene una nicaconcentracin del antibitico

    Esta es la CIM

  • Agente etiolgico Mtodo diagnstico serolgico

    Treponema pallidum IF (FTA-abs)/ HA (MHA-Tp)VDRL

    Brucella spp. Aglutinacin/ ELISA

    Chlamydia trachomatis IFD/ELISA

    Leptospira interrogans Aglutinacin

    Coxiella burnetti IFIFC: Fijacin de complemento IF: inmunofluorescencia HA: hemoaglutinacin

    FTA-abs: Fluorescent Treponemal Antibody with absorption.

    MHA-Tp: Microhemaglutinacin del Treponema pallidum

    Diagnstico Microbiolgico Indirecto:

    deteccin de anticuerpos sricos

  • EJEMPLO

    NIO DE 3 AOS LLEGA A LA GUARDIA CON LOS SIGUIENTES SINTOMAS:

    FIEBRE ALTA (38 a400C)

    VOMITOS FUERTE DOLOR DE CABEZA

    Y FOTOFOBIA

    RIGIDEZ DE NUCA

    AL DIA CON EL CALENDARIO DE VACUNACION

  • Diagnstico microbiolgico de meningitis

    Lquido cefalorraqudeo (2 tubos de ensayo)

    Fisicoqumico

    Cultivo

    PROCESAMIENTO INMEDIATO

    TRANSPORTE SIN REFRIGERAR (N.meningitidis)

    X 3HEMOCULTIVO

  • Resiembra a ciegas

    menos de 24 h de incubacin

    y a intervalos hasta 7 das de incubacin, sin

    esperar la observacin del desarrollo en el

    frasco

    S

    Deteccin Visual: Turbidez ,

    Formacin de gas, de pelculas,

    cogulos o pequeas colonias en

    los frasco

    SUBCULTIVOS

  • SUBCULTIVO slo

    de hemocultvos positivos

  • DIAGNSTICO MICROBIOLGICO

    LCR

    Sin centrifugar Centrifugado

    Observacin en fresco

    (mvil)-Giemsa-Tricrmico

    sobrenadante

    sedimentoDiagnostico

    directoVirus

    Aislamiento

    Bsqueda cidos nucleicos

    LATEX

    CIEF

    ELISA

    PCR

    ZN

    Gram

    Tinta china

    Cultivo

    Identificacin por pruebas bioqumicas

    Antibiograma