Timol

UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE QUERÉTAROFACULTAD DE QUÍMICA

Laboratorio de Experimentación Biológica-Farmacéutica

Academia de QFB

CLAVE

956

Pre-requisito

05

Nombre de la práctica:

AISLAMIENTO DEL TIMOLPráctica

12

Páginas

5

Páginas de la

70 - 74

Realizó:Alegría González César LuisCruz Cruz YaotzinGallegos Reséndiz Mario JosúeHernández Elizarraga Víctor

Revisó: Autorizó:

Fecha: 15/03/2013 Fecha: Fecha:

Contenido Página

I. INTRODUCCIÓN 71

II. CONOCIMIENTOS PREVIOS 71

III. OBJETIVO 71

III. 1. Objetivo General 71

III. 2. Objetivos Particulares 71

IV. METODOLOGÍA 72

IV. 1. Material y equipo 72

IV. 2. Reactivos y soluciones 72

IV. 3. Requerimientos de seguridad 72

IV. 4. Disposición de residuos 72

IV. 5. Procedimiento 72

V. RESULTADOS 74

VI. DISCUSIÓN DE RESULTADOS 74

VII. CONCLUSIÓN 74

VIII. BIBLIOGRAFÍA 74



Academia de QFB

CLAVE

956

Pre-requisito

I. INTRODUCCIÓNEl tomillo (Thymus. vulgaris, Thymus Labiadas) es un condimento

muy.usado El aceite esencial de tomillo (1-2%) contiene fenoles (timol y carvacol) en cantidades variables según los tipos.

El carvacol y timol se han aislado de estas especis en forma de glucósidos.(Bruneton, 1984)

El timol (isopropil-m-cresol, alcanfor de tomillo, ácido tímico o 3-hidroxi-p-cimeno) son cristales blancos con color y sabor aromático, se obtiene a partir del aceite de tomillo u otros aceites; sintéticamente haciendo que reaccione el m-cresol con cloruro de isopropilo por el método de Friedel-Crafts a -10°C.

Se usa en la perfumería, agente antifúngico, microbiano, antioxidante y la síntesis de mentol.

(Hawley, 1993)

Figura 1.-Estructura del timol (de www.iqb.es)El timol posee una propiedad antioxidantecomparable a la BHA y BHT,

antioxidantes de síntesis que se emplean en la alimentación y cuyo uso cada vez es más discutido.

El hecho que el timol sea un componente natural de la dieta y que se use de manera generalizada como aditivo alimentario , además que sea rápidamente metabolizado y eliminado cuando es ingerido , hace que los posibles residuos que puedan quedar de un tratamiento con esta sustancia no sean considerados tóxicos para el hombre.

(Cassani)Algunos estudios sugieren que el timol tiene una modesta actividad

microbiana y actividad antivírica frente a los virus de influenza A y los virus sincitiales respiratorios. Las propiedades antifúngicas del timol frente a los



Academia de QFB

CLAVE

956

Pre-requisito

microorganismos que causan la onicomicosis son bien conocidas, igual parece potenciar la actividad antifúngica de la anfotericina B.

Tanto el timol, como su homólogo el carvacol, tienen efectos antioxidantes y efectos antimutagénicos, al proteger al ADN de la oxidación.

El timol induce algunas enzimas metabolizantes de xenobióticos.(Equipo de IQB, 2010)

II. CONOCIMIENTOS PREVIOSPropiedades del timol y solventes a usar

Nombre Fórmula Densidad (g/mL)

p.f. (°C)

p.e.(°C)

Solubilidad

Timol (CH3)2CHC6H3(CH3)OH

0.979 48-51

233 EtOH, CS2, CHCl3, CH3COOH,C2H5OC2H5

y aceites fijos volátiles

Cloroformo CHCl3 1.485 (20/20°C)

-63.5

61.2

EtOH, C6H6, C2H5OC2H5, CS2, CCl4, aceites fijos y volátiles

Diclorometano

CH2Cl2 1.335 (15/4°C)

-97 40.1

EtOH, C2H5OC2H5,

Metanol CH3OH 0.7927 -97.8

64.5

Alcoholes y C2H5OC2H5

(Hawley, 1993)Propiedades de los fenoles.Los fenoles y los alcoholes tienen casi la misma geometría del agua

alrededor del átomo de oxígeno. El ángulo del enlace R-O-H tiene aproximadamente un valor tetraédrico. Como el agua tienen valores altos en sus puntos de ebullición por el enlace de puente de hidrógeno.

Otra similitud con el agua es que los alcoholes y fenoles son ácidos y bases débiles.

Como bases débiles se protonan de manera reversible por ácidos fuertes para dar iones oxonio ROH2

+

Como ácidos débiles, se disocian ligeramente en disolución acuosa diluida donando un protón al agua que genera H3O+ y un ión alcóxido RO- o un ión fenóxido ArO-

Los fenoles son un millón de veces más ácidos que los alcoholes, por lo tanto son solubles an NaOH acuoso diluido y con frecuencia pueden separarse de una mezcla simplemente por la extracción básica en disolución acuosa, seguida por reacidificación.



Academia de QFB

CLAVE

956

Pre-requisito

Los fenoles son más ácidos que los alcoholes debido a que el anión fenóxido está estabilizado por resonancia. La deslocalización de la carga negativa sobre las posiciones orto- y para- de anillo aromático resulta en la estabilidad incrementada del anión fenóxido e relación al fenol no disociado y un ΔGo

consecuentemente bajo para la disociación.

Figura 2.- Resonancia del anillo aromático para dar estabilidad al ión fenóxido (www.uam.es)

Los fenoles sustituidos pueden ser más ácidos o menos ácidos que el fenol dependiendo si el sustituyente es atractor de electrones o donador de electrones. Los fenoles con un sustituyente atractor de electrones son más ácidos debido a que estos sustituyentes deslocalizan la carga negativa; los fenoles con un sustituyente donador de electrones son menos ácidos debido a que sus sustituyentes concentran la carga negativa.

(McMurry, 2008)III. OBJETIVO

III. 1. Objetivo GeneralAislar el timol a partir del tomillo, purificarlo e identificarlo mediante las

técnicas de cromatografía en columna abierta y en capa fina.

III. 2. Objetivos ParticularesA) Obtener el extracto del tomillo y fracciones enriquecidas en timol

B) Purificar el timol

C) Identificar el timol purificado mediante CCF

I V. METODOLOGÍAIV.1. Material y equipo 100g de tomillo seco15 g de gel de sílice para cromatografía en columna abierta*



Academia de QFB

CLAVE

956

Pre-requisito

Cromatofolio de 1 x 10 cm*Cromatoplaca de gel de sílice de 3 x 8 cm*Equipo de destilación.Lámpara de UV-visParrilla eléctrica

IV. 2. Reactivos y soluciones500mL de cloroformo125mL de metanol RA10 ml de HCl concentrado20mL NaOH 0.1MSolución cérica amoniacal

IV. 3. Requerimientos de seguridadBataGuantesLentesMascarillaCuando se usan solventes orgánicos, se debe hacer en campana de

extracción.

IV.4 Disposición de residuosLos residuos orgánicos deben de verterse en los garrafones específicos

dispuestos para ese propósito en el laboratorio.Los residuos ácidos y básicos deben neutralizarse antes de desecharse en

los garrafones específicos dispuestos para ese propósito en el laboratorio.Los restos vegetales deben secarse en campana de extracción, colocarse

en bolsas de plástico y desecharse en los botes de basura comunes.

IV. 5. ProcedimientoA) Preparación del extracto100g de material vegetal se someten a meceración durante 5 días en un

matraz Erlenmeyer de 2L con 500mL de cloroformo. Pasado este tiempo se filtra y se recupera el CHCl3 por medio de destilación

Al extracto, se le realiza una cromatografía en capa fina (CCF), utilizando cromatofolios de gel de sílice con indicador de florescencia y como fase móvil CH2Cl2. Al terminar la elución, la placa se visualiza con luz ultavioleta y posteriormente se revela rociándola con una solución de sulfato cérico en H2SO4 y calentándola a unos 80 °C hasta aparición de las manchas.

B) Fraccionamiento del extracto



Academia de QFB

CLAVE

956

Pre-requisito

El producto obtenido se somete a dos análisis por separado mediante CCF en las que se emplearán como fases móviles CHCl3 y CHCl3-MeOH (97:3), respectivamente.

V. RESULTADOS

2g de extracto crudo (CHCl3)

Fase acuosa

Fase orgánica

Extracto fraccionado

Na2SO4 anhídro Destilación

Fase Acuosa (Desechar)

HCl concentrado 2<pH<3 CH2Cl2

Fase orgánica (Recuperar)

NaOH 1N (20mLx3)



Academia de QFB

CLAVE

956

Pre-requisito

Figura 3.- Placas cromatográficas vistas bajo luz UV. Extracto crudo con fase móvil CH2Cl2 (izquierda), extracto fraccionado en CHCl3 como fase móvil (centro) y extracto fraccionado en CH2Cl2, MeOH (97:3) (derecha).

Figura 4.- Placas cromatográficas después de ser reveladas con solución de sulfato cérico amoniacal en H2SO4 y expuestas al calor. Extracto crudo con CH2Cl2



Academia de QFB

CLAVE

956

Pre-requisito

como fase móvil (izquierda), extracto fraccionado en fase móvil CHCl3 (centro) y extracto fraccionado en fase móvil CH2Cl2-MeOH (97:3) (derecha).

Extracto crudo: 26.8gExtracto crudo= 24.99%

VI. DISCUSIÓNEn las placas lo que se observa al revelar son líneas y no sólo algunos

puntos, que evidencia la presencia de muchos compuestos, aparte del timol que es lo que se buscaba aislar. Además el hecho de no contar con una muestra de timol para comparar, no se puede negar o afirmar la presencia de este en los extractos, pero tomando en cuenta el tipo de extracciones que se hicieron es posible que se encuentre presente en los extractos, por separar compuestos fenólicos a través de sus propiedades químicas.

La cantidad de extracto crudo que se obtiene de la maceración y del extracto fraccionado a partir de extracto crudo, no tiene como ser comparado en la literatura, ya que esta habla principalmente del timol en aceite esencial del tomillo, pero no de extracto de la planta.

VII. CONCLUSIONESNo se pudo aislar solamente al timol del extracto fraccionado, en esta

aparece acompañado de muchos compuestos, no se identifico al timol debido a la falta de un estándar que sirva de comparación en CCF.

La purificación no se realizó en columna, lo que hubiera podido purificar al timol.

Solo se pudieron comparar CCF de los extractos enriquecidos obtenidos de extrcciones.

VIII. BIBLIOGRAFÍA

Hawley. 1993. Diccionario de productos químicosMcMurry J. 2008. Organic Chemistry. 7a Edition. Thomson, USA. pp. 599-605.Cassani H, J., es.scribd.com/doc/130203157/TimolIQB. 2010 www.iqb.es/monografia/fichas/ficha115.htm

Timol

Documents

Transcript of Timol