Técnicas histopatologicas e inmunohistoquimicas
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Técnicas histopatológicas e inmunohistoquímicas
Luca GarastoMarco LenziFederico Villani
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ESTRUCTURA DEL TRABAJO
1) Biopsia: que es y su diferentes tipologías.
2) En que consiste la inmunofluorescencia directa?
3) Describe los hallazgos de inmunofluorescencia directa en LPO, pénfigo y penfigoide.
4) Bibliografía
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BIOPSIA EN ODONTOLOGIA
BIOPSIA: QUE ES Y SU DIFERENTE TIPOLOGIAS
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PORQUE ES IMPORTANTE HACER BIOPSIAS?
Lesiones con morfología clínica o radiológica semejante
Proporciona diagnostico DEFINITIVO, Informaciones sobre el PRONOSTICO de la lesión,Da pautas sobre el TRATAMIENTO ESPECIFICO a seguir
PROCEDIMIENTO QUIRURGICO
Extirpación de un fragmento de tejido lesionado para remitirlo al
anatomo - patólogo.
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indicaciones
Lesiones sospechosas de malignidad
Lesiones precancerosas
Ulceraciones sin causa evidente
Lesiones que no mejoran > 2 semanas
Lesiones de etiología no clara
Las que interfieren con funciones orales
DX enfermedades muco-cutáneas con afectación de mucosa oral
contraindicaciones
Alteraciones leves del desarrollo
Lesiones que responden a TT especifico
Sospecha de melanoma SOLO EXCISIONAL
Lesión vascular solo EXCISIONAL y SOLO en HOSPITAL
Glándulas salivales mayores
Paciente con patología sistémica importante
Si esta cerca estructuras anatómicas complicadas
1)Penfigo 2)penfigoide3) liquen plano
Riesgo diseminació
n
Riesgo sangrado
Riesgo n. facial
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Tipos de biopsia
contenido
• Solido• liquido
finalidad
• Diagnostica• Terapéutica• experimental
• Incisional• Excisional
-PARCIAL de la lesión.-Se toman muchas de puntos distintos de la lesión -Se incluye tejido sano lateralmente y en profundidad
- Extirpación COMPLETA- En lesiones
pequeñas - Se incluyen 2-3 mm
tejido sano alrededor
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Mat
eria
l em
plea
do
Bisturí frio PunchPunción aspiraciónBisturí eléctricoLaser
Proc
esad
o m
uest
ra
En fresco MetacrilatoCongelaciónEn parafina
Loca
lizac
ión
Mucosa SubmucosaGl. SalivalesÓsea Ganglios linfáticosPiel
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Características de la lesión
Momento clínico de la toma
Directa Indirecta
PreoperatoriaIntraoperatoriaPostoperatoria
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INMUNOFLUORESCENCIA La inmunofluorescencia es una técnica de inmunomarcación, en
una biopsia tomada, que hace uso de anticuerpos unidos químicamente a una sustancia fluorescente para demostrar la presencia de una determinada molécula.
Técnica de inmuno ensayo [unión Ag-Ac(F)].
Prueba complementaria en estudio anatomopatologico
Técnica Inmunohistoquimica que se divide en :
a. DIRECTA
b. INDIRECTA
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INMUNOFLUORESCENCIA
Técnica de inmuno ensayo [unión Ag-Ac(F)]
1) Inmunofluorescencia
2) Precipitación
3) Aglutinación
4) Citometría de flujo
5) ELISA
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INMUNOFLUORESCENCIA
Prueba complementaria en estudio anatomopatológico
1) Inmunofluorescencia
2) Tinciones: Hematoxilina e Eosina, Fucsina, Rojo Congo, PAS, ...
3) Tecnica molecular: PCR
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INMUNOFLUORESCENCIA Se diferencia de otras técnicas inmunohistoquimicas en
que aquí la marca unida al anticuerpo es una molécula fluorescente tal como el isotiocianato de fluoresceína o rodamina.
El anticuerpo marcado se hace reaccionar contra un preparado biológico y luego se expone la muestra así tratada a una fuente de luz de onda corta (ultravioleta o azul) seleccionada por medio de un monocromador
Técnica inmunohistoquimica (IMH) que se divide en:
INDIRECTADIRECTA
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directa indirecta
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INMUNOFLUORESCENCIA DIRECTA
DIRECTA1) Más rápida
2) Menos sensible a interferencias debidas a reactividad cruzada de los anticuerpos o a reacciones no específicas
3) Alta especificidad y sensibilidad
4) Menor coste
INDIRECTA1) Mismo conjugado con
fluorocromos diferentes
2) Sensibilidad y coloración mayor
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INMUNOFLUORESCENCIA DIRECTA
APLICACIÓNES:
1) Detección de moléculas del complemento
2) Cuantificación Ig
3) Diagnostico enfermedades cutáneas
4) Diagnostico de neoplasia
5) Detección de virus, bacterias, hongos, …
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INMUNOFLUORESCENCIA DIRECTA
fibrinógeno
IgG
IgA
IgG y C3
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INMUNOFLUORESCENCIA.LPO El liquen plano es una enfermedad mucocutanea de
etiología desconocida.
Requiere un diagnostico tanto clínico como histológico.
Afecta piel, mucosa oral y otras mucosas.
3 formas clínicas: reticular, erosivo y atrófico.
IFD: positividad en membrana basal con fibrinógeno.
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INMUNOFLUORESCENCIA.LPO Histológicamente se caracteriza principalmente por:
vacuolización marcada de la capa basal, y un infiltrado inflamatorio en banda en la unión dermo-epidermica.
Inmunofluorescencia del liquen plano
existencia de depósitos globulares de IgM y menos frecuentemente otras inmunoglobulinas en la unión dermo-epidérmica.
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INMUNOFLUORESCENCIA. LPO
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INMUNOFLUORESCENCIA. PENFIGO
El pénfigo es un enfermedad autoinmune cuya lesión elemental es una ampolla.
El diagnostico requiere histología e inmunofluorescencia.
Mediante inmunofluorescencia: IgG, C3
En la membrana de queratinocitos (espacios intracelular)
Raramente: IgM
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INMUNOFLUORESCENCIA. PENFIGO
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INMUNOFLUORESCENCIA. PENFIGOIDE
El penfigoide es un grupo de enfermedades inflamatorias crónicas autoinmunes.
Se manifiestan como ampollas subepiteliales.
Dos tipos: Bulloso y PMM (más frecuente).
IFD en membrana basal: IgG y C3 ( IgA, IgM).
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INMUNOFLUORESCENCIA. PENFIGOIDE
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BIBLIOGRAFIA
Libro:
Scully C., Flint S.R., Bagán J.V., Porter S.R., Moos K.F. Oral and Maxillofacial Diseases. Fourth Edition. Informa Healthcare, 2010
Libro:
Cawson R.A., Odell E.W. Fundamentos de Medicina y Patología Oral. Octava Edición. Elsevier Churchill Livingstone, 2009
http://www.uv.es/derma/CLindex/CLliquen/CLliquen.html
http://www.actasdermo.org/es/penfigo/articulo/13078495/
http://scielo.isciii.es/pdf/odonto/v25n2/original2.pdf