Método científicoTécnicas biológicas

Método científico

• Es el proceso que se elabora para resolver un problema

• Es una forma de experimentación

• Los pasos para llegar a una hipótesis

• Complementos teóricos y Prácticos

• Problema

• Observación

• Hipótesis

• Experimentación

• Resultados

• Conclusión

• Publicación

Técnicas Biológicas

• Localización del organismo a estudiar Captura

• Transporte al laboratorio Estudios en vivo

• Estudios en vivo Cultivos

• Fijación Inclusión

• Cortes al micrótomo Tinción

• Deshidratación Aclaramiento

• Montaje Limpieza

• Etiquetaje

Técnicas biológicas

• Son un conjunto de pasos a seguir para preparar organismos y poderlos estudiar

Localización del organismo estudiado

• La localización de los organismos representa la búsqueda del problema de estudio, por lo tanto consume recursos que dependiendo del problema deben ser considerados

Estudios en vivo

• Las investigaciones que se realizan en el lugar de colecta requieren permanencia en el lugar por periodos definidos por el investigador y por el objeto de estudio requiere de la no intervención directa y son descriptivos.

• Puede incluir muestras programadas o no, e incluso la recolección de ejemplares.

Captura• La captura de organismos debe

realizarse de manera ética, profesional, limitada y en casos extremos que involucren sólo 1 o 2 ejemplares.

• Si los organismos se encuentran en peligro de extinción, las capturas se realizan en videos o fotografías, en el caso de animales se pueden utilizar trampas o redes “no letales” para su liberación o periodos de cautiverio menores a 6 meses.

Captura

• En el caso de plantas los ejemplares deben incluir, raíz, tallo, hojas, flores y frutas, se conserva una copia en fresco y si se requiere una para herbolaria.

Fijación

• La fijación consiste en aplicar sustancias químicas que maten al organismo del modo más rápido posible con la intensión de conservar sus estructuras lo más cerca posible de las condiciones naturales.

Deshidratación

• Los tejidos requieren ser sumergidos en alcoholes graduales comenzando al 30% hasta el 100% lo que remplaza el agua y deja espacios vacíos para una correcta inclusión

Inclusión

• Todos los espacios vacíos que dejó el agua van a ser ocupados por parafina líquida a 60°C por 24 horas, se deja enfriar era obtener un bloque rígido y poder cortar

Cortes en micrótomo

• Los bloques de cera se montan en un micrótomo que de manera estándar puede hacer cortes de 1 a 15 micras. En casos especiales los micrótomos pueden ser de congelación o de resina

Tinción• Los tejidos requieren contraste

para la observación dependiendo de la estructura que se quiere hacer notar se aplican diferentes tintes.

• La técnica más usada se conoce como “hematoxilina-eosina”, la cual tiñe de colores violeta y rosado según la basicidad o la acidez de la estructura

Tinción • La hematoxilina tiene preferencia por los ácidos del núcleo y la eosina tiñe las proteínas del citoplasma.

• Existen muchos tipos de tintes específicos pero se clasifican en 2 grandes grupos; colorantes vitales y colorantes no vitales

Aclaramiento

• Los tejidos son sumergidos por algunos minutos en solventes orgánicos como xilol con el fin de retirar el exceso de parafina, el exceso de colorante y transparentar el tejido.

Montaje

• Los tejidos ya tratados se colocan en portaobjetos previamente sumergidos en grenetina y se tapan con un cubreobjetos que puede ser sellado con resinas como el bálsamo de Canadá o barniz transparente.

Limpieza

• Muestras de organismos grandes siguen un proceso de taxidermia, muestras pequeñas o de láminas se limpian periódicamente con alcohol

Etiquetado • Todas las muestras deben contener una etiqueta que incluya los datos del autor (investigador) la técnica usada y el tipo de tejido que es.

• En herbarios o animales se incluyen etiquetas con los mismos datos además se pueden anexar un número de referencia o clave a una bitácora o a un catálogo