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1. Estandarización de los datos 2.1. Datos de toxicidad para los organismos del suelo La toxicidad de una sustancia para los organismos del suelo depende de su biodisponibilidad, que está fuertemente influenciada por las propiedades físicas y químicas del suelo. Por ello, los datos de toxicidad se normalizan respecto a las características de un suelo estándar de forma que estos datos se puedan utilizar para cualquier tipo de suelo. En el caso de sustancias orgánicas neutras, el factor del suelo que más afecta a la biodisponibilidad de una sustancia es el contenido en materia orgánica, como lo demuestran diferentes estudios en la literatura 54 . Por tanto, es posible relacionar la toxicidad de una sustancia para los organismos del suelo en dos suelos diferentes atendiendo a su contenido en materia orgánica y en consecuencia, los datos de toxicidad obtenidos en un suelo experimental se deben referir a un suelo estándar según la siguiente ecuación: NOEC o L(E)C50 estándar = NOEC o L(E)C50 experimental. Fom suelo estándar / Fom suelo experimental NOEC o L(E)C50 estándar NOEC o L(E)C50 experimental Fom Fom

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1. Estandarizacin de los datos

2.1. Datos de toxicidad para los organismos del suelo

La toxicidad de una sustancia para los organismos del suelo depende de su biodisponibilidad, que est fuertemente influenciada por las propiedades fsicas y qumicas del suelo. Por ello, los datos de toxicidad se normalizan respecto a las caractersticas de un suelo estndar de forma que estos datos se puedan utilizar para cualquier tipo de suelo. En el caso de sustancias orgnicas neutras, el factor del suelo que ms afecta a la biodisponibilidad de una sustancia es el contenido en materia orgnica, como lo demuestran diferentes estudios en la literatura54 . Por tanto, es posible relacionar la toxicidad de una sustancia para los organismos del suelo en dos suelos diferentes atendiendo a su contenido en materia orgnica y en consecuencia, los datos de toxicidad obtenidos en un suelo experimental se deben referir a un suelo estndar segn la siguiente ecuacin:

NOEC o L(E)C50 estndar = NOEC o L(E)C50 experimental. Fom suelo estndar / Fom suelo experimental

NOEC o L(E)C50 estndar NOEC o L(E)C50 experimental

FomFom

NOEC o L(E)C50 en suelo estndarmg kg-1

NOEC o L(E)C50 en suelo experimentalmg kg-1

Fraccin de materia orgnica en suelo estndarkg kg-1

Fraccin de materia orgnica en suelo experimentalkg kg-1

La fraccin de materia orgnica para un suelo estndar (Fom suelo estndar ) se asume igual a 0,034 kg kg-1, equivalente a un contenido en carbono orgnico del suelo de 0.02 kg C orgnico kg-1

suelo.2.0. Ensayos de ecotoxicidad con las muestras de suelo

Para realizar estos ensayos, adems del suelo de ensayo, es necesario disponer de muestras de suelo de referencia y de suelo control y de dilucin.

2.1.1. Suelo de referencia

Siempre que sea posible, se utilizar como suelo de referencia un suelo de caractersticas similares al que debe ensayarse, que no haya estado expuesto a actividades humanas contaminantes, y cuya ausencia de toxicidad est comprobada. Este suelo se utilizar como control en los ensayos de ecotoxicidad realizados con las muestras de suelo de ensayo sin diluir.

2.1.2. Suelo control y de dilucin

Se utilizar como suelo control y de dilucin un suelo que no enmascare la toxicidad de los posibles contaminantes presentes en la muestra. Se recomienda la utilizacin de un suelo que cumpla las siguientes caractersticas:

contenido en arena 70%

pH 5.5-7.5

contenido en carbono orgnico: 0.5 - 1.5 %

Este suelo se utilizar en los ensayos realizados con las muestras de suelo de ensayo a diferentes diluciones como control y para preparar las diluciones de suelo necesarias para determinar la CL(E)50.

2.2. Ensayos de ecotoxicidad con las muestras de lixiviado

Segn se describe en las guas de la OCDE, el medio de cultivo especfico para cada ensayo (algas, Daphnias y peces) se utilizar como control y para preparar las correspondientes diluciones de los lixiviados. Sin embargo, el contenido de nutrientes en los lixiviados va a tener gran influencia sobre los resultados del ensayo. Por este motivo, se recomienda utilizar un control adicional, que facilitar la interpretacin de los resultados, minimizando los efectos debidos a las caractersticas propias del medio. Como control adicional se pueden utilizar los lixiviados obtenidos con el suelo control o de referencia, o bien, preparar un control con el mismo contenido en nutrientes que los lixiviados obtenidos con el suelo de ensayo.

2.3. Concentraciones de ensayo recomendadas

La metodologa propuesta para la realizacin de los ensayos toxicolgicos se ha diseado para poder obtener la informacin necesaria para cubrir simultneamente todos los objetivos de la caracterizacin toxicolgica. As, se propone analizar en el mismo ensayo las muestras de suelo olixiviado no diluidas.

3. Tratamiento de los datos de los ensayos toxicolgicos

El anlisis de los datos ser diferente segn se trate de muestras de suelo y lixiviados sin diluir o diluidas. Estas diferencias se refieren fundamentalmente al suelo respecto al cual se va a medir el porcentaje de efecto obtenido con el suelo de ensayo (suelo de referencia o suelo control) y al mtodo estadstico utilizado para el anlisis de los datos, segn se expone a continuacin:

3.1. Datos obtenidos con las muestras de suelo y lixiviado no diluidas

Los datos de toxicidad obtenidos con las muestras de suelo no diluidas se compararn con los obtenidos con el suelo de referencia y con el suelo de dilucin. Segn se ha descrito anteriormente, el suelo de referencia presenta unas caractersticas fisicoqumicas similares al suelo de ensayo, pero no ha estado expuesto a actividades humanas contaminantes. De esta forma se eliminan los posibles efectos sobre los organismos debidos a caractersticas del suelo diferentes al nivel de contaminacin existente.