USP 35

Figura 3. Distribución del volumen de los poros como grá­fica semilogarítmica.

CONTROL DEL DESEMPEÑO DEL INSTRUMENTO

Puesto que la técnica de porosimetría de mercurio es considerada una prueba comparativa, este capítulo no pro­porciona detalles sobre la misma. Sin embargo, se reco­mienda analizar un material de comparación estable de ma­nera rutinaria para monitorear la calibración y el desempeño del instrumento .• usP35

(271) PRUEBA PARA SUSTANCIAS FÁCILMENTE CARBONIZABLES

En las pruebas para sustancias fácilmente carboniz~bles, a menos que se indique algo diferente, agregar 1~ ca~t1dad especificada de la sustancia, reducida a polvo ftno SI se en­cuentra en forma sólida, en pequeñas porciones al reci­piente para comparación que es de vidrio incoloro resistente a la acción del ácido sulfúrico y contiene el volumen especi­ficado de ácido sulfúrico (ver en Especificaciones de Reactivos en la sección Reactivos, Indicadores y Soluciones).

Revolver la mezcla con una varilla de vidrio hasta comple­tar su disolución, dejar la solución en reposo durante 15 minutos, a menos que se indique algo diferente, y comparar el color de la solución con el del Líquido de Comparación especificado (ver Color y ~~romatismo (6_~ 1 )) utiliza_nd? ~n recipiente para comparac1on, que tamb1en es de v1dno Inco­loro y tiene las mismas dimensiones internas y cruzadas, ob­servando los líquidos transversalmente contra un fondo de porcelana blanca o de vidrio blanco.

Cuando se aplica calor para disolver la sustancia en el ácido sulfúrico, mezclar la muestra y el ácido en un tubo de ensayo, calentar según se. ~ndica y transferir la solució,n ~1 recipiente para comparaCton para observarla con el L1qu1do de Comparación designado (ver Color y Acromatismo (631 )).

Pruebas Químicas 1 (281) Residuo de Incineración 163

(281) RESIDUO DE INCINERACIÓN

Partes de este capítulo general han sido armonizadas con los textos correspondientes de la Farmacopea Europea y de la Farmacopea japonesa. Las partes que no están armonizadas se indican con los símbolos (• .). Los textos armonizados de estas farmacopeas son por lo tanto intercambiables y, en lugar de este capítulo general de la Farmacopea de fas Esta­dos Unidos, se pueden usar los métodos de fa Farmacopea Europea y/o la Farmacopea japonesa para demostrar el cum­plimiento con los requisitos. Estas farmacopeas se han com­prometido a no realizar ningún cambio unilateral a este ca­pítulo armonizado.

La prueba de Residuo de Incineración/Cenizas Sulfatadas emplea un procedimiento para medir la cantidad de sustan­cia residual no volatilizada de una muestra cuando ésta se incinera en presencia de ácido sulfúrico conforme al proce­dimiento que se describe a continuación. Generalmente esta prueba se emplea para determinar el contenido de impure­zas inorgánicas en una sustancia orgánica.

Procedimiento-Incinerar un crisol adecuado (por ejem­plo de sílice, platino, cuarzo o porcelana) a 600 ± 50° du­rante 30 minutos, enfriar el crisol en un desecador (gel de sílice u otro desecante adecuado) y pesarlo con exactitud. Pesar con exactitud •1 a 2 g de la sustancia o. la cantidad que se especifica en la monografía individual, en el crisol.

Humedecer la muestra con una pequeña cantidad (gene­ralmente 1 mL) de ácido sulfúrico y luego calentar suave­mente a una temperatura tan baja como sea posible hasta que la sustancia se carbonice totalmente. Enfriar; y lue~o •, a menos que se indique algo diferente en la monograf1a individual,. humedecer el residuo con una pequeña canti­dad (generalmente 1 mL) de ácido sulfúrico; calentar suave­mente hasta que no se generen humos blancos e incinerar a 600 ± 50° •, a menos que se especifique otra temperatura en la mono~rafía individual,. hasta que el residuo esté com­pletamente tncinerado. Asegurarse, durante todo el procedi­miento, de que no se produzcan llamas en ningún mo­mento. Enfriar el crisol en un desecador (gel de sílice u otro desecante adecuado), pesar con exactitud y calcular el por­centaje del residuo.

A menos que se especifique algo diferente, si la cantidad del residuo así obtenido excede el límite especificado en la monografía individual, humedecer nuevamente con ácido sulfúrico, calentar e incinerar como se indicó anteriormente, usando un período de incineración de 30 minutos, hasta que dos pesadas consecutivas del residuo no difieran en más de 0,5 mg o hasta que el porcentaje del residuo cumpla con el límite establecido en la monografía individual.

•Realizar la incineración en una campana bien ventilada, pero protegida de las corrientes de aire y a la menor tempe­ratura posible para lograr la combustión completa del car­bón. Puede usarse una mufla, si se desea, cuyo uso para la incineración final se recomienda a 600 ± 50°.

La mufla se puede calibrar empleando un termómetro digital adecuado y una sonda termopar de trabajo calibrada contra un termopar estándar rastreable al Instituto Nacional de Normas y Tecnología (NIST, por sus siglas en inglés).

Verificar la exactitud de los circuitos de medición y control de la mufla mediante la comprobación de la temperatura fijada para el uso previsto en distintas posiciones dentro de la mufla. Seleccionar las posiciones que reflejen el método de uso eventual con respecto a la ubicación de la muestra en análisis. La tolerancia es de ± 25° en cada posición me­dida .•

164 (291) Selenio 1 Pruebas Químicas

(291) SELENIO

Solución Madre-Disolver 40,0 mg de selenio metálico en 100 ml de ácido nítrico diluido (1 en 2) en un matraz volumétrico de 1000 ml, calentar moderadamente en un baño de vapor, si fuera necesario para completar la disolu­ción, agregar agua a volumen y mezclar. Pipetear 5 ml de esta solución y transferir a un matraz volumétrico de 200 ml, agregar agua a volumen y mezclar. Cada ml de la solu­ción resultante contiene la cantidad equivalente a 1 ¡.1g de selenio (Se).

Solución de Diaminonaftaleno-Disolver 1 00 mg de 2,3-diaminonaftaleno y 500 mg de clorhidrato de hidroxila­mina en ácido clorhídrico O, 1 N para obtener 100 m l. Pre­parar esta solución el mismo día de su uso.

Solución Estándar-Pipetear 6 ml de Solución Estándar y transferir a un vaso de precipitados de 150 ml, y agregar 25 ml de ácido nítrico diluido (1 en 30) y 25 ml de agua.

Solución de Prueba-La combustión completa del mate­rial de prueba es un factor importante para realizar la prueba. Para los compuestos que se queman mal y produ­cen hollín, la adición de óxido de magnesio por lo general da como resultado una combustión más minuciosa y reduce la formación de hollín. Cuando se haya detectado la necesi­dad de agre~ar óxido de magnesio, esta se especificará en la monograf1a individual. Utilizando un matraz de combus­tión de 1 000 ml y empleando 25 ml de ácido nítrico di­luido (1 en 30) como líquido absorbente, proceder según se indica en Combustión en Matraz con Oxígeno (471 ), em­pleando 1 00 mg a 200 mg de muestra de prueba, a menos que se indique algo diferente en la monografía individual. Al finalizar la combustión, colocar algunos ml de agua en el matraz, aflojar el tapón, luego enjuagar el tapón, el porta­muestras y las paredes del matraz con aproximadamente 1 O ml de agua. Transferir la solución a un vaso de precipitados de 150 ml con la ayuda de aproximadamente 20 ml de agua y calentar moderadamente hasta temperatura de ebu­llición. Calentar a ebullición durante 1 O minutos y dejar que se enfríe a temperatura ambiente.

Procedimiento-Tratar concomitantemente y en paralelo la Solución Estándar, la Solución de Prueba y el blanco de reactivos constituido por 25 ml de ácido nítrico diluido (1 en 30) y 25 ml de agua, según se indica a continuación. Agregar solución de hidróxido de amonio (1 en 2) para ajustar a un pH de 2,0 ± 0,2. Diluir con agua a 60 ml y transferir a un separador de vidrio con protección actínica con la ayuda de 1 O ml de agua, agregando los 1 O ml al separador. Agregar 200 mg de clorhidrato de hidroxilamina, agitar por rotación moderada para disolver; de inmediato agregar 5,0 ml de Solución de Diaminonaftaleno, tapar y mezclar por rotación suave. Dejar la solución en reposo a temperatura ambiente durante 100 minutos. Agregar 5,0 ml de ciclohexano, agitar vigorosamente durante 2 minutos y dejar que las capas se separen. Desechar la capa acuosa y centrifugar el extracto de ciclohexano para eliminar el agua dispersada. Determinar las absorbancias de los extractos de ciclohexano de la Solución de prueba y de la Solución están­dar en una celda de 1 cm, a la longitud de onda de má­xima absorción, aproximadamente a 380 nm, con un espec­trofotómetro adecuado, usando el extracto de ciclohexano del blanco de reactivos como blanco, y comparar las absor­bancias: la absorbancia de la Solución de Prueba no es mayor que la de la Solución Estándar cuando se ha tomado una muestra de prueba de 200 m~, o no es mayor que la mitad de la absorbancia de la Solucion Estándar cuando se ha to­mado una muestra de prueba de 1 00 mg.

USP 35

OTRAS PRUEBAS Y VALORACIONES

(301) CAPACIDAD NEUTRALIZANTE DE ÁCIDO

NOTA-Todas las pruebas se deben realizar a una tempera­tura de 37 ± 3°.

Calibración del Medidor de pH-Calibrar un medidor de pH usando soluciones amortiguadoras de calibración de biftalato de potasio 0,05 m y de tetraoxalato de potasio 0,05 m como se describe en pH (791 ).

Mezclador Magnético-Transferir 1 00 ml de agua a un vaso de precipitados de 250 ml que contenga una barra mezcladora magnética de 40 mm x 1 O mm (u otro tamaño adecuado) recubierta con teflón y con un anillo de giro en el centro. Ajustar la velocidad de la barra mezcladora, de forma que cuando la barra mezcladora se centra en el vaso de precipitados, la velocidad de mezclado sea de 300 ± 30 rpm, determinada con un tacómetro óptico adecuado.

Preparación de Prueba-Po/vos-Transferir a un vaso de precipitados de 250 ml,

la porción pesada con exactitud de la sustancia especificada en la monografía individual, agregar 70 ml de agua y mez­clar en el Mezclador Magnético durante 1 minuto.

Sólidos Efervescentes-Transferir a un vaso de precipitados de 250 ml, una cantidad pesada con exactitud, que equi­valga a la dosificación mínima declarada en la etiqueta, agregar 1 O ml de agua y mezclar por rotación moderada el vaso de precipitados mientras se reduce la intensidad de la reacción. Agregar 1 O ml más de agua y mezclar por rota­ción suave. Lavar las paredes del vaso de precipitados con 50 ml de agua, y mezclar en el Mezclador Magnético du­rante 1 minuto.

Suspensiones y Otros Líquidos-Agitar el recipiente hasta que el contenido sea uniforme y determinar la densidad. Transferir a un vaso de precipitados de 250 ml una canti­dad de la mezcla uniforme, pesada con exactitud, que equi­valga a la dosificación mínima declarada en la etiqueta, agregar agua hasta obtener un volumen de aproximada­mente 70 ml y mezclar en el Mezclador Magnético durante 1 minuto.

Tabletas de Disolución Bucal-Pesar con exactitud no me­nos de 20 tabletas de disolución bucal y determinar el peso promedio. Seleccionar y pesar 2 tabletas de disolución bucal y transferirlas a un vaso de precipitados de 250 ml que contenga 70 ml de agua.

Tabletas No Masticables-Pesar con exactitud no menos de 20 tabletas y determinar el peso promedio de las table­tas. Moler las tabletas hasta un polvo fino, mezclar para obtener una mezcla uniforme y transferir a un vaso de preci­pitados de 250 ml una cantidad pesada con exactitud, que equivalga a la dosificación mínima declarada en la etiqueta. Si se desea humedecer, agregar no más de 5 ml de alcohol (neutralizado a un pH aparente de 3,5) y mezclar para hu­medecer bien la muestra. Agregar 70 ml de agua y mezclar en el Mezclador Magnético durante 1 minuto.

Tabletas Masticab/es-Preparar según se indica en Table­tas No Mosticables.

Tabletas que Deben Masticarse-Transferir 1 Tableta a un vaso de precipitados de 250 ml, agregar 50 ml de agua y mezclar en el Mezclador Magnético durante 1 minuto.

Cápsulas-Pesar con exactitud no menos de 20 cápsulas. Extraer completamente el contenido de las cápsulas con la ayuda de un hisopo de al.9odón si fuera necesario. Pesar con exactitud las cápsulas vac1as y determinar el peso promedio

USP 35

del contenido de cada cápsula. Mezclar el contenido combi­nado de las cápsulas para obtener una mezcla uniforme y proceder según se indica en Tabletas No Masticab/es, co­menzando donde dice "transferir una cantidad pesada con exactitud".

Procedimiento para Polvos, Sólidos Efervescentes, Suspensiones y Otros Líquidos, Tabletas de Disolución Bucal, Tabletas No Masticables, Tabletas Masticables y Cápsulas-Pipetear 30,0 ml de ácido clorhídrico 1 ,O N SV y transferir a la Preparación de Prueba mientras se continúa mezclando con el Mezclador Magnético. [NOTA-Cuando la capacidad neutralizante de ácido de la muestra en análisis es mayor de 25 mEq, usar 60,0 ml de ácido clorhídrico 1 ,O N SV, y hacer las modificaciones correspondientes en los cálcu­los.] Mezclar durante 15 minutos, cronometrados exacta­mente, después de agregar el ácido, comenzar a valorar de inmediato y en un período que no exceda los 5 minutos adicionales, valorar el ácido clorhídrico en exceso con hidró­xido de sodio 0,5 N SV para obtener un pH de 3,5 estable (durante 1 O a 15 segundos). Calcular el número de mEq de ácido consumido por la fórmula:

mEq totales = (30 x NHcl) - (VNaoH x NNaoH)

en donde NHcl y NNaoH son las normalidades del ácido clorhí­drico SV y del hidróxido de sodio SV, respectivamente; y VNaoH es el volumen de hidróxido de sodio SV usado para la valoración. Expresar el resultado como mEq del ácido consu­mido por g de la sustancia analizada.

Procedimiento para Tabletas que Deben Masticarse­Pipetear 30,0 ml de ácido clorhídnco 1 ,O N SV y transferir a la Preparación de Prueba mientras se continúa mezclando con el Mezclador Magnético durante 1 O minutos, cronome­trados con exactitud, después de agregar el ácido. Interrum­pir el mezclado brevemente y retirar sin demora cualquier base gomosa del vaso de precipitados usando una aguja larga. Enjuagar sin demora la aguja con 20 ml de agua, recogiendo los lavados en el vaso de precipitados y conti­nuar mezclando durante 5 minutos exactamente cronome­trados, después comenzar a valorar de inmediato y en un período que no exceda los 5 minutos adicionales, valorar el ácido clorhídrico en exceso con hidróxido de sodio 0,5 N SV para obtener un pH de 3,5 estable (durante 1 O a 15 segun­dos). Calcular el número de mEq de ácido consumido por la Tableta analizada por la fórmula:

mEq totales = (30 x NHcl) - (VNaOH x NNaoH)

en donde los términos son los definidos anteriormente.

(311) VALORACIÓN DE ALGINATOS

APARATO

El aparato necesario (ver Figura 7) contiene una válvula dosificadora capilar, A, seguida de un caudalímetro, B, para controlar y vigilar el flujo de nitrógeno a través del sistema.

Pruebas Químicas 1 (311) Valoración de Alginatos 165

Se emplean tubos de plástico vinílico halogenado* y una conexión de caucho, C, para conectar el caudalímetro a un brazo lateral de un matraz de reacción, D. El matraz D es un matraz de fondo redondo, de 250 ml, para ebullición, apo­yado en un manto de calefacción adecuado, E. El matraz D está equipado con un condensador de reflujo de bobina Hopkins de 225 mm, F. El condensador termina en una trampa en U, G, que contiene dos bandas de 25 g de cinc de malla 20; estas bandas están limitadas y separadas por tres tapones de lana de vidrio de 3 pulgadas. La trampa termina en un adaptador, H, que por medio de un tubo de plástico vinílico halogenado y un conector con llave de paso por torsión, 1, se conecta con un frasco lavador de gas de 250 ml, ). El tubo de entrada (burbujeo) se extiende casi hasta el fondo del frasco de lavado de gas y termina en un disco sinterizado con una porosidad gruesa. El tamaño de todas las juntas de vidrio es de 24 / 40, excepto la junta de 45/

so del frasco de lavado de gas.

G

D

E~= Figura 1. Aparato para Valoración de Alginatos.

APTITUD DEL SISTEMA

Empleando D-glucuronolactona como el estándar, proce­der como se ind1ca en el Procedimiento, pero no realizar Jos pasos previos a la ebullición. El sistema es adecuado si se cumplen los siguientes criterios: (1) la determinación con un blanco da como resultado un valor neto de volumetría, C, de entre 0,02 y 0,06 mEq, calculado de la siguiente manera:

Ab- Bb

en donde Ab es el número de mEq de hidróxido de sodio 0,25 N en los 25 ml utilizados y Bb es el número de mEq de ácido clorhídrico O, 1 N utilizado en la volumetría con un blanco; y (2) el porcentaje de dióxido de carbono, C02,

obtenido a partir del estándar está entre 24,2% y 25,7%.

*Este tipo de tubos se denominan comúnmente tubos Tygon. Esta nota se agrega a los efectos de una mayor claridad y no implica que la USP avale este producto.

166 (311) Valoración de Alginatos 1 Pruebas Químicas

PROCEDIMIENTO

A menos que se indique algo diferente en la monografía individual, transferir una muestra de aproximadamente 250 mg, pesados con exactitud, al matraz de reacción, D, agre­gar 50 mL de ácido clorhídrico O, 1 N, agregar varias perlas de ebullición y conectar el matraz al condensador de reflujo, F, empleando ácido fosfórico como lubricante. [NOTA-Se puede emplear grasa para llaves de paso para las otras co­nexiones.] Conectar la línea de nitrógeno al brazo lateral del matraz y ajustar el flujo de agua refrigerante aproximada­mente a 2 L por minuto.

[NOTA-Los pasos previos a la ebullición que se describen en este párrafo son opcionales y únicamente es necesario realizarlos cuando se sospecha de la presencia de carbonatos inorgánicos.] Mantener el flujo de nitrógeno a través del aparato a una velocidad de 90 mL a 1 00 mL por minuto. Acercar el manto de calefacción, E, hasta el matraz, calentar la muestra y llevarla a ebullición, y mantener una ebullición moderada durante 2 minutos. Apagar la fuente de calor, bajar el manto, E, y dejar que la muestra se enfríe durante aproximadamente 1 O minutos.

Conectar el frasco lavador de gas vacío, ], y purgar el sistema con nitrógeno a .una velocida~ de 90. mL a ~ 09 mL por minuto durante 5 mmutos. Reduc1r el flujo de n1trogeno hasta 60 mL a 65 mL por minuto, a<;_¡regar al frasco 1 O gotas de alcohol butílico, 25,0 mL de hidroxido de sodio 0,25 N SV y 50 mL de agua destilada, enjuagando hacia el interior del frasco lavador de gas y volver a colocar la tapa. Desco­nectar la conexión de caucho, C, del brazo lateral y agregar 46 mL de ácido clorhídrico a través del brazo lateral del matraz de ebullición. Volver a unir la línea de nitrógeno, acercar el manto de calefacción y calentar la mezcla de re­acción hasta ebullición. Después de 2 horas de ebullición, aumentar el flujo de nitrógeno hasta 90 mL a 1 00 mL por minuto, suspender el calentamiento y bajar el manto. Dejar que se enfne durante 1 O minutos. Desconectar y desmontar el frasco lavador de gas. Empleando un chorro dirigido de agua destilada, enjuagar bien todas las partes del tubo de burbujeo y tapar, recolectando los lavados en el frasco de lavado de gas. Emplear nitrógeno para forzar suavemente la salida de toda el agua del tubo de burbujeo. Agregar al frasco inmediatamente 1 O mL de solución de cloruro de ba­rio al 1 O% y una barra de agitación. Tapar herméticamente y mezclar lentamente durante 1 minuto. Dejar en reposo durante un mínimo de 5 minutos. Agregar tres gotas de fenolftaleína SR y valorar con ácido clornídrico O, 1 N SV. Realizar una determinación con un blanco (ver Valoraciones Volumétricas Residuales en Volumetría (541 )). Calcular el por­centaje de dióxido de carbono, co2, por la fórmula:

2200[(A - B) - C]/(1 OOOW)(1 - D)

en donde A es el número de mEq de hidróxido de sodio 0,25 N en los 25 mL empleados; B es el número d~ mEq de ácido clorhídrico O, 1 N empleado para la volumetna de la muestra o del estándar; C es el valor neto de volumetría calculado en la determinación con un blanco; W es el peso, en g, de la muestra o del est~~dar toma<;Jo; y D es el por-. centaje expresado hasta la dec1ma de umdad (1 lugar deci­mal), obtenido en la prueba de Pérdida por Secado para la muestra o para el estandar.

(341) AGENTES ANTIMICROBIANOS­

CONTENIDO

USP 35

Un componente esencial de las inyecciones conservadas en envases multidosis es el agente o los agentes que se incorporan para reduci~ el riesgo de que, en el mom.ent<? _de retirar parte del conten1do, se produzca una contamtnaCI~>n microbiana accidental del contenido restante. Es un reqUI­sito farmacopeico que la presencia y la cantidad agregada de tal(es) agente(s) consten en la etiqueta del envase. Los métodos proporcionados aquí para los agentes más usados deben emplearse para demostrar que el agente declarado está presente pero no excede la cantidad declarada en la etiqueta en más de 20%.

La concentración de un conservante antimicrobiano agre­gado a una preparación para uso oftálmico, nasal, ótico y parenteral, multidosis o monodosis, puede disminuir durante la vida útil del producto. Por ello, el fabricante debe deter­minar el nivel mínimo en el que el conservante resulta eficaz y debe formular el. producto de modo que se gar~ntic,e.que este nivel de efectividad exceda durante toda la v1da utll del producto. En el momento de su fabricación, el producto debe contener la cantidad declarada del conservante antimi­crobiano (dentro de un ±20% considerando las variaciones originadas en la fabricación y el an~lisi.s). La decl~ración de la cantidad de conservante que se md1ca en la et1queta, no pretende definir la cantidad de conservante a mantener du­rante la vida útil del producto; sino la cantidad que fue agregada, dentro de las limitaciones del proceso, y que no se excedió en más de 20%. Un ejemplo de tal declaración en la etiqueta es "_(unidad) agregado como conservante. " [NOTA-" __ (unidad)" es un número seguido de la uni­dad de medida, por ej. 0,015 mg por mL o O, 1 o/o.]

Los agentes más usados incluyen los dos derivados mercu­riales, mtrato fenilmercúrico y timerosal, los cuatro ésteres homólogos del ácido p-hidroxibenzoico, fenol, alcohol ben­cílico y clorobutanol. Para los dos primeros mencionados se emplea el método polarográfico, mientras que para la d~ter­minación de los otros agentes se emplea la cromatograf1a de gases cuantitativa.

MÉTODO GENERAL POR CROMATOGRAFÍA DE GASES

Los procedimientos generales que se establecen a conti­nuación son aplicables a la determinación cuantitativa de alcohol bencílico, clorobutanol, fenol y los ésteres metílico, etílico, propílico y butílico del ácido p-hidroxibenzoico; estos últimos se tratan como un grupo pero, si están presentes en forma individual, se los puede determinar por separado. Pre­parar la Solución de Estándar Interno y la Preparación Estándar para cada agente según se indica a continuación. A menos que se indique lo contrario, preparar la Preparación de Prueba a partir de porciones medidas con exact1tud de la Solución de Estándar Interno y la muestra de la prueba, de tamaño tal que la concentración del agente y la composi­ción del disolvente se correspondan estrechamente con la concentración y la composición de la Preparación Estándar. En la siguiente tabla se proporcionan los parámetros operati­vos recomendados para el cromatógrafo de gases; el gas transportador es helio o nitrógeno y el detector es del tipo de ionización a la llama.

USP 35 Pruebas Químicas 1 (341) Agentes Antimicrobianos-Contenido 167

Parámetros Operativos Recomendados para el Cromatógrafo de Gases

Dimensiones de la Columna Relleno de la Columna Velocidad de Flujo, Temperatura de

Aaente Lona. DI Fases v Sooorte ml oor mln. la Columna Alcohol Benzílico 18m 3 mm 5% Gl6/51A 50 140°

Clorobutanol 18m 2 mm 5% Gl6/51A 20 110°

Fenol 12m 3 mm 5%Gl6/51A 50 145°

Parabenos 18m 2 mm 5% G2/51A 20 150°

Alcohol Bencílico

Solución de Estándar Interno-Disolver aproximada­mente 380 mg de fenol en 1 O ml de metano! contenido en un matraz volumétrico de 200 ml. Agregar agua a volumen y mezclar.

Preparación Estándar-Disolver aproximadamente 180 mg de ER Alcohol Bencílico USP, pesados con exactitud, en 20,0 ml de metano! contenidos en un matraz volumétrico de 1 00 ml. Agregar la Solución de Estándar Interno a volu­men y mezclar.

Procedimiento-Inyectar por separado en el cromató­grafo volúmenes iguales (aproximadamente 5 J.1L) de la Pre­paración Estándar y de la Preparación de Prueba, registrar los cromatogramas con el aparato ajustado a los parámetros es­tablecidos en la tabla adjunta y medir las áreas correspon­dientes a los picos de alcohol bencOico y fenol. Calcular el contenido, en mg por ml, de alcohol bencílico (C7Hs0) en la muestra tomada, por la fórmula:

1 OO(C/V)(p1 /p2)(P2/P1)

en donde C es la concentración, en mg por ml, de alcohol bencOico en la Preparación Estándar; V es el volumen, en ml, de la muestra de la prueba usada para preparar cada 100 ml de la Preparación de Prueba; p1 y p2 son las áreas de los picos del alcohol bencílico y el fenol, respectivamente, obtenidos a partir de la Preparación de Prueba; y P1 y Pz son las áreas de los picos del alcohol bencílico y el fenol, respec­tivamente, obtenidos a partir de la Preparación Estándar.

Clorobutanol

Solución de Estándar Interno-Transferir aproximada­mente 140 mg de benzaldehído a un matraz volumétrico de 100 ml, agregar 1 O ml de metano! y agitar por rotación moderada para disolver. Diluir a volumen con agua y mez­clar.

Preparación Estándar-Transferir aproximadamente 125 mg de ER Clorobutanol USP, pesados con exactitud, a un matraz volumétrico de 25 ml. Agregar 2 ml de metanol, agitar por rotación moderada para disolver, diluir a volumen con agua y mezclar. Transferir 5,0 ml de esta solución y 5,0 ml de la Solución de Estándar Interno a un matraz de 25 ml y mezclar para obtener una solución con una concentración conocida de aproximadamente 2,5 mg de clorobutanol por m l.

Preparación de Prueba-Diluir cuantitativamente, si fuera necesario, un volumen medido con exactitud de la muestra de la prueba con metano! para obtener una solu­ción que no contenga más de aproximadamente 5,0 mg de clorobutanol por mL. Combinar 3,0 ml de esta solución con 3,0 ml de la Solución de Estándar Interno y mezclar.

Sistema Cromatográfico (ver Cromatografía (621 ))­[NOTA-Ver la tabla adjunta para determinar las dimensiones de la columna, el relleno de la columna con su fase y so­porte, la velocidad de flujo y la temperatura de la columna.] Mantener la temperatura del inyector a 180° y la del detec­tor, a 220°. Inyectar en el cromatógraf~ la Pr~pa.ración Es-tándar y registrar el.cromatograma s~9un se ~nd1ca en el . Procedimiento: los t1empos de retenc1on relat1vos son aprox1-

madamente 0,8 para el benzaldehído y 1 ,O para el clorobu­tanol; la resolución, R, entre el benzaldehído y el clorobuta­nol no es menor de 2,0; y la desviación estándar relativa para inyecciones repetidas no es más de 2,0%.

Procedimiento-Inyectar por separado en el cromató­grafo volúmenes iguales (aproximadamente 1 J.1L) de la Pre­paración Estándar y de la Preparación de Prueba, registrar los cromatogramas y medir las areas correspondientes a los pi­cos principales. Calcular la cantidad, en mg, de clorobutanol (C4 H7CI 30) en cada ml de la muestra sometida a la prueba, por la fórmula:

C(L/D)(Ru/Rs)

en donde C es la concentración, en mg por ml, de clorobu­tanol, calculada con respecto a la sustancia anhidra, en la Preparación Estándar; L es la cantidad declarada, en mg, de clorobutanol en cada ml de la muestra de prueba; D es la concentración, en mg por ml, de clorobutanol en la Prepa­ración de Prueba, respecto al volumen de la muestra some­tida a la prueba y el grado de dilución; y Ru y Rs son los cocientes entre el pico de clorobutanol y el pico de benzal­dehído obtenidos a partir de la Preparación de Prueba y de la Preparación Estándar, respectivamente.

Fenol

Solución de Estándar Interno-Pipetear 1 ml de ERAl­cohol BencOico USP y transferir a un matraz volumétrico de 500 ml, agregar metano! a volumen y mezclar.

Preparación Estándar-Disolver aproximadamente 75 mg de ER Fenol USP, pesados con exactitud, en 7,5 ml de m etanol contenidos en un matraz volumétrico de 100 m l. Agregar 20,0 ml de Solución de Estándar Interno, luego agregar agua a volumen y mezclar.

Procedimiento-Inyectar por separado en el cromató­grafo volúmenes iguales (aproximadamente 3 J.1L) de la Pre­paración Estándar y la Preparación de Prueba, registrar los cromatogramas con el aparato ajustado a los parámetros es­tablecidos en la tabla adjunta y medir las áreas correspon­dientes a los picos de fenol y alcohol bencílico. Calcular el contenido, en mg por ml, de fenol (C6H60) en cada ml de la muestra tomada, por la fórmula:

en donde C es la concentración, en mg por ml, de fenol en la Preparación Estándar; V es el volumen, en ml, de la mues­tra de la prueba usada para preparar 100 ml de la Prepara­ción de Prueba; p1 y pz son las áreas de los picos de fenol y alcohol bencílico, respectivamente, obtenidos a partir de la Preparación de Prueba; y P1 y Pz son las áreas de los picos de fenol y alcohol bencílico, respectivamente, obtenidos a par­tir de la Preparación Estándar.

Metilparabeno y Propilparabeno

Solución de Estándar Interno-Colocar aproximada­mente 200 mg de benzofenona en un matraz volumétrico de 250 ml, diluir a volumen con éter y mezclar.

168 (341) Agentes Antimicrobianos-Contenido 1 Pruebas Químicas USP 35

Preparación Estándar-Colocar 1 00 mg de ER Metilpa­rabeno USP y 1 O mg de ER Propilparabeno USP, pesados con exactitud, en un matraz volumétrico de 200 ml, diluir a volumen con Solución de Estándar Interno y mezclar. Colocar 1 O ml de esta solución en un matraz Erlenmeyer de 25 ml y proceder según se indica en la Preparación de Prueba, co­menzando desde donde dice "Agregar 3 ml de piridina".

Preparación de Prueba-Pipetear 1 O ml de la muestra sometida a la prueba y 1 O ml de la Solución de Estándar Interno en un separador pequeño. Agitar vigorosamente, permitir que las capas se separen, retirar la capa acuosa y ponerla en un segundo separador y transferir la capa de éter a un matraz pequeño a través de un embudo que contenga sulfato de sodio anhidro. Extraer la capa acuosa con dos porciones de éter de 1 O ml y filtrar también los extractos a través del sulfato de sodio anhidro. Evaporar los extractos combinados en una corriente de aire seco hasta que el volu­men se reduzca aproximadamente a 1 O ml y luego transfe­rir el residuo a un matraz Erlenmeyer de 25 ml. Agregar 3 ml de piridina, completar la evaporación del éter y hervir en una placa de calentamiento hasta que el volumen se reduzca aproximadamente a 1 ml. Enfriar y agregar 1 ml de un agente silanizante adecuado, como por ejemplo bis(trimetilsilil)trifluoroacetamida, bis(trimetilsilil)acetamida o una mezcla de hexametildisilazano y trimetilclorosilano [2:1 ó 3:1 (v/v)]. Mezclar y dejar en reposo durante no menos de 15 minutos.

Procedimiento-Inyectar por separado en el cromató­grafo volúmenes i_guales (2 11L) de la solución silanizada de la Preparación Estandar y la Preparación de Prueba, registrar los cromatogramas con el aparato ajustado a los parametros establecidos en la tabla adjunta y medir las áreas correspon­dientes a los picos de metilparabeno, propilparabeno y ben­zofenona. Calcular el contenido, en 11g por ml, de metilpa­rabeno (CsHsOJ) en la muestra sometida a la prueba, por la fórmula:

en donde CM es la concentración, en 11g por ml, de metil­parabeno en la Preparación Estándar; V es el volumen, en ml, de la muestra tomada; P1 y Pl son las áreas de los picos del metilparabeno y la benzofenona, respectivamente, obte­nidos a partir de la Preparación de Prueba; y P1 y PJ son las áreas de los picos del metilparabeno y la benzofenona, res­pectivamente, obtenidos a partir de la Preparación Estándar. De modo similar, calcular el contenido, en 11g por ml, de propilparabeno (C1oH1zOJ) en la muestra sometida a la prueba, por la fórmula:

1 O(Cp/V)(pz/pl)(PJ!P2)

en donde Cp es la concentración, en 11g por ml, de propil­parabeno en la Preparación Estándar; V es el volumen, en ml, de la muestra tomada; Pz y Pl son las áreas de los picos del propilparabeno y la benzofenona, respectivamente, ob­tenidos a partir de la Preparación de Prueba; y P2 y PJ son las áreas de los picos del propilparabeno y la benzofenona, res­pectivamente, obtenidos a partir de la Preparación Estándar.

El etilparabeno y el butilparabeno pueden determinarse de modo similar.

MÉTODO POLAROGRÁFICO

Nitrato Fenilmercúrico

Preparación Estándar-Disolver aproximadamente 1 00 mg de nitrato fenilmercúrico, pesados con exactitud, en una solución de hidróxido de sodio (1 en 250) contenida en un

matraz volumétrico de 1000 ml y entibiar si fuera necesario para lograr una completa disolución, agregar la solución de hidróxido de sodio a volumen y mezclar. Pipetear 1 O ml de esta solución, transferir a un matraz volumétrico de 25 ml y proceder según se indica en la Preparación de Prueba, co­menzando desde donde dice "agregar 2 ml de solución de nitrato de potasio (1 en 1 00)."

Preparación de Prueba-Pipetear 1 O ml de la muestra de la prueba, transferir a un matraz volumétrico de 25 ml, agregar 2 ml de solución de nitrato de potasio (1 en 1 00) y 1 O ml de solución amortiguadora alcalina de borato de pH 9,2 (ver Soluciones Amortiguadoras en la sección Reactivos, Indicadores y Soluciones) y, si fuera necesario, ajustar a un pH de 9,2 agregando ácido nítrico 2 N. Agregar 1,5 ml de solución de gelatina recién preparada (1 en 1 000), luego agregar la solución amortiguadora alcalina de borato de pH 9,2 a volumen y mezclar.

Procedimiento-Pipetear una porción de la Preparación de Prueba y transferir a la celda polarográfica y desairear burbujeando nitrógeno a través de la solución durante 15 minutos. Insertar el electrodo de goteo de mercurio de un polarógrafo adecuado (ver Po/orografía (801)) y registrar el polarograma desde -0,6 hasta -1,5 voltios en comparación con el electrodo de calomel saturado. Determinar la co­rriente de difusión de la Preparación de Prueba, (id)u, como la diferencia entre la corriente residual y la corriente limitante. De forma similar y concomitante, determinar la corriente de difusión, (id)s, de la Preparación Estándar. Calcular la canti­dad, en 11g, de nitrato fenilmercúrico (C6HsHgNOJ) en cada ml de la muestra tomada, por la fórmula:

en donde C es la concentración, en 11g por ml, de nitrato fenilmercúrico en la Preparación Estándar.

Timerosal

Preparación Estándar-En el día de uso, colocar aproxi­madamente 25 mg de ER Timerosal USP, pesados con exac­titud, en un matraz volumétrico de 250 ml, agregar agua a volumen y mezclar. Proteger de la luz. Pipetear 15 ml de esta solución en un matraz volumétrico de 25 ml, agregar 1,5 ml de solución de gelatina (1 en 1 000), luego agregar solución de nitrato de potasio 1 en 1 00 a volumen y mez­clar.

Preparación de Prueba-Pipetear 15 ml de la muestra en analisis, transferir a un matraz volumétrico de 25 ml, agregar 1,5 ml de solución de gelatina (1 en 1 000), agre­gar solución de nitrato de potas1o (1 en 1 00) a volumen y mezclar.

Procedimiento-Transferir una porción de la Preparación de Prueba a la celda polarográfica y desairear burbujeando nitrógeno a través de la solución durante 15 minutos. Inser­tar ef electrodo de goteo de mercurio de un polarógrafo adecuado (ver Po/orografía (801 )) y registrar el polarograma de -0,2 a -1 ,4 voltios en comparación con el electrodo de calomel saturado. Determinar la corriente de difusión, (id)u, como la diferencia entre la corriente residual y la corriente limitante. De forma similar y concomitante, determinar la corriente de difusión, (id)s, de la Preparación Estándar. Calcu­lar la cantidad, en 11g, de timerosal (C6H9HgNaOzS) en cada ml de la muestra sometida a la prueba, por la fórmula:

en donde C es la concentración, en 11g por ml, de timerosal en la Preparación Estándar y los otros términos son los defi­nidos anteriormente.

USP 35

(345) VALORACIÓN DE ÁCIDO CÍTRICO/CITRATO Y FOSFATO

El siguiente procedimient<;> general de c_romatow_afía i?­nica se emplea para determina~ el conten1do de_ ae~do Cl­

trico/citrato y fosfato en los a;t1c_ulo~ ~armacope1cos, cuando se especifica en las monograf1as 1nd1v1du~les. Las pruebas de identificación de citrato y fosfato se explican por .s~par~do en el capítulo general de la USP Pruebas de ldentdicaoon-. General (191 ). El procedimiento para p_r~parar las Preparl?clo­nes Estándar empleadas para la valorae~on depende de_ SI se valoran el citrato y el fosfato concom1tantemente, segun se indica a continuación.

Estándares de Referencia USP (11 )-ER Ácido Cítrico USP.

Fase Móvil-Transferir un volumen adecuado de agua (de una resistividad de no m~~os de 18 m_egohm-cm) a un recipiente adecuado y desgas1f1car con hel1o durante no _me­nos de 20 minutos. Agregar un volum~n adecuado de hi­dróxido de sodio o hidróxido de potas1o al 50% (p/p) l1bre de carbonato, para obtener una solución de hidr~xido de potasio o de hidróxido de sodio 20 mM. Alternativamente, se puede generar un eluyente de hi~róxido d~ s_odio o hi­droxido de potasio 20 mM por med1os electron1cos em­pleando un generador automático de eluyente. [NOTA-Pro­teger la Fase Móvil del dióxido de carbono atmosférico.]

Preparaciones Estándar-Usar la Preparación Estándar 1 sólo para una valoración de ácido cítri~o/citrato. Usar _1~ Pre­paración Estándar 2 si se pretende realizar una valorae~on concomitante de citrato y fosfato.

Preparación Estándar 7-Disolver ER Ácido Cítrico USP en hidróxido de sodio 1 mM recién p_reparado_ para obten~r una solución con una concentrae~on conoc1da de aproxima­damente 20 Jlg de citrato (C6Hs07) por,ml.

Preparación Estándar 2-Disolve:r E~ :"-cido Cítri~o USP y fosfato monobásico de sodio en h1drox1do de sod1o 1 mM recién preparado para obtener una solución con concentra­ciones conocidas de aproximadamente 20 Jlg por ml y 12 Jlg por ml de citrato y fosfato (P04), respectivamente. ,

Preparación de Valoración para la y~Joración d_e Acido Cítrico/Citrato-A menos que se espec1flque algo diferente en la monografía disolver una cantidad adecuada de la forma farmacéuti~a sólida en hidróxido de sodio 1 mM re­cién preparado para obtener l!na solución qu~ contenga aproximadamente 20 Jlg d~, c1t~atc:> por ~~- S1 la forma far­macéutica es una f~>rmula~IO'; l1_qU1da, di1~1r co~ _agua y agregar una solucion de h1drox1do de sod1o rec1en prepa­rada para obtener una solución que ~on,te:nga aprox~mada­mente 20 Jlg de citrato por ml en h1drox1do de sod1o 1 mM.

Preparación de Valoración para la Valoración de Fosfato-A menos que se especifique algo diferente en la monografía, disolver una cantidad ad~cuada de la_ !orma far­macéutica sólida en hidróxido de sod1o 1 mM rec1en prepa­rado para obtener una solución que contenga aproximada­mente 12 Jlg de fosfato por mL. Si la forma farmacéutica es una formulación líquida, diluir con agua y agregar una solu­ción de hidróxido de sodio recién preparada para obtener una solución que contenga aproximadamente 12 Jlg de fos­fato por ml en hidróxido de sodio 1 mM.

Sistema Cromatográfico (ver Cromatografía (621 ))­Equipar un cromatógrafo de líquidos con una columna sepa­radora de aniones adecuada; una guarda columna de 4 mm x 50 mm y una columna analítica de 4 mm x 250 mm, , ambas rellenas con material L61; '1 un dete:ct<;>r electr?qUI­mico con detección de conductividad supnm1da med1ante una micromembrana supresora de aniones o un sistema de

Pruebas Químicas 1 (351) Valoración de Esteroides 169

supresión química adecuado. Mantener todas las columnas a una temperatura de 30° y eluir a una velocidad de flujo de 2 ml por minuto. [NOTA-Se debe colocar una columna para atrapar aniones antes del inyector para extraer las tra­zas de contaminantes aniónicos en la Fase Móvil.] Inyectar en el cromatógrafo la Preparación Estándar 7 o la Preparación Estándar 2, según corresponda, y registrar el crom~togr~ma según se indica en el Procedimiento: el factor de as1metna no es mayor de 2,0 y la desviación están~ar relativa de las áreas de los picos de CltratC? (y fosfato, segun .c,orresponda), para seis inyecciones repetidas de la Preparaoon Estandar 7 o de la Preparación Estándar 2, no es más de 1 ,5%.

Procedimiento-Inyectar por separado en el croma!ó­grafo 1 O Jll de la Preparación Estándar y de la Preparaoón de Valoración correspondientes, registrar los cromatogram?s y medir las áreas de los picos de citrato y de fosfato segun corresponda. Determinar la concentración de citrato o de fosfato en la porción de Preparación de Valoración tomada, por la fórmula:

Cs(ru/rs)

en donde C5 es la concentración de citrato o fosfato, en ¡.¡g por ml, en la Preparación Estándar correspondiente;_ y ru y rs son las áreas de los picos de citrato o fosfato obten1dos a partir de la Preparación de Valoración y de la Preparación Estándar, respectivamente.

(351) VALORACIÓN DE ESTEROIDES

El siguiente procedi_miento se aplica para detern:'inar los esteroides Farmacope1cos que poseen grupos funcionales re­ductores tales como a-cetoles.

Preparación Estándar-Disolver en alcohol una cantidad adecuada del Estándar de Referencia USP especificado en la monografí~ individual, previamen,te. se~a.do en las condicio­nes especificadas en la monograf1a md1v1dual y pesado con exactitud, y diluir cuantitativamente y e~ diluciones sucesi­vas con alcohol para obtener una solucion co~ una concen­tración de aproximadamente 1 O ¡.¡g por m l. P1petear 20 ml de esta solución y transferir a un matraz Erlenmeyer de 50 ml con tapón de vidrio.

Preparación de Valoración-Preparar según se indica en la monografía individual.

Procedimiento-A sendos matraces que contienen la Preparación de Valoración y la Preparación Estándar, respecti­vamente, y a un matraz similar que contenga 20,0 _t;ll de alcohol como blanco, agregar 2,0 ml de una soluc1on pre­parada por disolución de 50 mg de azul de tetrazolio en 1 O ml de metano! y mezclar. Agregar después a cada matraz 2 O ml de una mezcla de alcohol e hidróxido de tetrameti­l;monio SR (9: 1 ), mezclar y dejar en reposo en la _oscuridad durante 90 minutos. Sin demora, determinar al m1smo tiempo las absorbancias de las soluciones de la Preparación de Valoración y la Preparación Estándar aproximadamente a 525 nm utilizando un espectrofotómetro adecuado, contra el blanc~. Calcular el resultado por la fórmula dada en la monografía individual, en donde Ces la concentración, en ¡.1$) por ml, del Estándar de Referencia en la Preparación Es­tandar; y ,Au y As son l~,s absorbancias ~e las ~oluciones de _la Preparacion de Valoraoon y la Preparaoon Estandar, respecti­vamente.

170 (361 >Valoración de Barbitúricos 1 Pruebas Químicas

(361) VALORACIÓN DE /

BARBITURICOS

Estándar Interno, Solución del Estándar Interno, Preparación Estándar y Preparación de Valoración-Pre­parar según se indica en la monografía individual.

Sistema Cromatográfico-En condiciones típicas, equi­par un cromatógrafo de gases con un detector de ionización a la llama y con una columna de vidrio de 4 mm x 0,9 m rellena con fase líquida Gl O al 3% sobre soporte 51 A de malla 80 a 1 OO. Mantener la temperatura de la columna a 200° ± 1 0° y mantener el inyector y el detector aproxima­damente a 225°, la temperatura de la columna puede variar dentro de la tolerancia especificada, según sea necesario, para cumplir las especificaciones de Aptitud del Sistema y proporcionar tiempos de retención apropiados. Emplear un gas trasportador adecuado, tal como nitrógeno seco, a una velocidad de flujo apropiada, como por ejemplo de 60 ml a 80 ml por minuto. Emplear inyeccion directa en la co­lumna. [NOTA-Si el instrumento no está equipado para in­yección directa en la columna, emplear un inyector recu­bierto de vidrio que se haya lavado sucesivamente con una solución de limpieza de ácido crómico, agua, metanol, clo­roformo, una solución 1 en 1 O de trimetilclorosilano en clo­roformo y cloroformo.]

Aptitud del Sistema (ver Cromatografía (621 ))-Inyec­tar en el cromatógrafo cinco inyecciones repetidas de la Pre­paración Estándar y registrar el cromatograma según se in­dica en el Procedimiento: la desviación estándar relativa para el cociente Rs no es más de 1 ,5o/o. En un cromatograma apropiado, la resolución, R, entre el ácido barbitúnco y el Estándar Interno no es menor que el valor dado en la mono­grafía individual y el factor de asimetría, T, para cada uno de los dos picos no es mayor de 2,0.

Procedimiento-Inyectar en un cromatógrafo de gases apropiado una porción adecuada (aproximadamente 5 ¡.tl) de la Preparacion estándar y registrar el cromatograma. De modo similar, inyectar una porción adecuada de la Prepara­ción de Valoracion y registrar el cromatowama. Calcular el contenido de barbiturato o ácido barbiturico en la muestra de valoración por la fórmula que se proporciona en la mo­nografía individual, en donde Ru es el cociente de respuesta entre los picos del ácido barbitúrico y del Estándar Interno en la Preparación de Valoración; Os es el cociente entre el peso del barbitúrico en la forma de ácido y el del Estándar Interno en la Preparación Estándar; C es la concentración, en mg por ml, de Estándar Interno en la Solución de Estándar Interno; y Rs es el cociente de respuesta entre los picos del ácido barbitúrico y del Estándar Interno en la Preparación Estándar.

(371) VALORACIÓN DE COBALAMINA CON MARCADOR

RADIOACTIVO

Todas las determinaciones de radioactividad requeridas por este método deben hacerse con un equipo de conteo apropiado, durante un período de tiempo que sea óptimo de acuerdo con el equipo de conteo específico empleado. Todos los procedimientos deben realizarse varias veces para obtener la mayor exactitud posible.

USP 35

Estándares de Referencia USP (11 )-ER Cianocobalamina USP.

Reactivo Marcador de Cianocobalamina-Diluir con agua un volumen medido con exactitud de una solución de cianocobalamina radioactiva* para producir una solución que tenga una radioactividad entre 500 y 5000 conteos por minuto por ml. Agregar 1 gota de cresol por litro de solu­ción preparada y almacenar en un refrigerador.

Estandarización-Preparar en agua una solución de una cantidad de ER Cianocobalamina USP, pesada con exactitud, que contenga 20 )lg a 50 )lg por ml. Realizar la valoración entera de una porción de 10,0 ml de esta solución, proce­diendo según se indica en la Preparación de Valoracion, co­menzando donde dice "Agregar agua para obtener un volu­men medido".

Solución de Cresol-Tetracloruro de Carbono-Mezclar volúmenes iguales de tetracloruro de carbono y cresol re­cientemente destilado.

Solución de Fosfato-Cianuro-Disolver 1 00 mg de cia­nuro de potasio en 1 000 ml de una solución saturada de fosfato dibásico de sodio y mezclar.

Solución de Butanoi-Cioruro de Benzalconio-Diluir una solución de cloruro de benzalconio (17 en 1 00) con agua (3:1) y mezclar con 36 volúmenes de alcohol butílico.

Columna de Alúmina-Resina-Colocar un trozo de lana de vidrio en el fondo de un tubo de vidrio que posea una constricción en uno de sus extremos, como por ejemplo una bureta de 50 ml. Sosteniendo el tubo en posición verti­cal, agregar un volumen de una suspensión acuosa espesa de resina de intercambio iónico (ver en la sección Reactivos, Indicadores y Soluciones), suficiente para obtener una co­lumna de resina sedimentada de 7 cm de alto. Cuando el sólido se haya sedimentado parcialmente, dejar que el agua drene, de manera que quede sólo 1 cm de l1quido encima de la columna de resina y comprimir la resina suavemente. Luego agregar una suspensión acuosa espesa de alúmina anh1dra (que no esté lavada con ácido) suficiente para au­mentar la altura de la columna sedimentada a 1 O cm; dejar que drene el agua hasta que quede aproximadamente a 1 cm por encima de la alúmina. Agregar un trozo de lana de vidno y lavar la columna, empleando un total de 50 ml de agua y drenar nuevamente hasta un nivel de 1 cm por en­cima de la columna. Preparar una columna nueva para cada determinación.

Preparación de Valoración-Transferir a un vaso de pre­cipitados una cantidad pesada o un volumen medido de la preparación a valorar, con una actividad de vitamina 812

equivalente a la de 200 ¡.tg a 500 )lg de cianocobalamina. Agregar agua para obtener un volumen medido de no me­nos de 25 ml; luego agregar 5,0 ml de Reactivo Marcador de Cianocobalamina. TrabaJando bajo una campana, agregar 5 mg de nitrito de sodio y 2 mg de cianuro de potas1o por cada ml de la solución resultante. Ajustar la solución con ácido clorhídrico diluido hasta pH 4 aproximadamente y ca­lentar en baño de vapor durante 15 minutos. Enfriar y ajus­tar la solución con hidróxido de sodio 1 N hasta un pH en­tre 7,6 y 8,0. Centrifugar o filtrar para eliminar cualquier sólido no disuelto.

Procedimiento-Transferir la Preparación de Valoración a un frasco de centrífuga de 250 ml, agregar 1 O ml de Solu­ción de Cresoi-Tetracloruro de Carbono, cerrar adecuada­mente el frasco con un tapón de vidrio, de polietileno o de goma envuelto en papel de aluminio, agitar vigorosamente durante 2 a 5 minutos y centrifugar. Retirar y _guardar la capa de disolvente inferior. Repetir la extraccion empleando una porción de 5 ml de Solución de Cresoi-Tetracloruro de Carbono y combinar los extractos de las capas de disolvente inferiores en un frasco de centrífuga o separador de 50 ml a 100 ml de capacidad.

*Una solución de cianocobalamina, transformada en radioactiva mediante la incorporación de 6°Co, está disponible de Merck and Co., lnc., Rahway, NJ 07065.

USP 35 Pruebas Químicas 1 (381) Tapones Elastoméricos para Inyectables 171

Lavar los extractos combinados con porciones sucesivas de 1 O mL de ácido sulfúrico 5 N hasta que el último lavado sea prácticamente incoloro (dos lavados bastan general­mente). Durante cada lavado, agitar durante 2 a 5 minutos, dejar que las capas se separen, centrifugar si fuera necesario y descartar la capa ácida. La~?r luego con dos porciones sucesivas de 1 O mL de SoluCJon de Fosfato-C1anuro. Fmal­mente, lavar con 1 O mL de agua. Descartar todos los lavados.

Al extracto lavado agregarle 30 mL de una mezcla de Solución de Butanoi-Cioruro de Benzalconio y tetracloruro de carbono (2:1 ). Extraer con dos porciones de agua de 5 mL cada una, agitando vigorosamente cada vez durante 1 mi­nuto, centrifugar, retirar y guardar la capa superipr acuosa.

Pasar los extractos acuosos combinados a traves de la Co­lumna de Alúmina-Resina a una velocidad de aproximada­mente 1 mL por minuto, mantener una capa de 1 cm de líquido sobre la parte superior de la columna, agregando agua según sea necesario. Descartar los primeros mL incolo­ros (generalmente alrededor de 5 mL) y recoger el eluato coloreado (generalmente alrededor de 1 O mL) en un tubo de centrífuga o separador de 50 mL que contenga 500 ¡1L de ácido acético diluido. Extraer el eluato agitando durante 2 a 5 minutos con 5 mL de Solución de Cresoi-Tetracloruro de Carbono y desechar la capa acuosa superior. Agregar al extracto 5,0 mL de agua, 5 mL de tetracloruro de carbono y 1 O mL de alcohol butílico. Agitar, dejar que se separe hasta que la capa superior esté transparente y retirar la capa supe­nor acuosa.

Determinar las absorbancias del extracto acuoso en una celda de 1 cm, a 361 nm y 550 nm, con un .esp~ctr~f?tó­metro apropiado, empleando una fuente de ilummaCion de tungsteno. Hacer la lectura a 361 nm empleando un filtro capaz de reducir la luz dispersada. Calcular el cociente A361/ A550: la pureza del extracto acuoso es aceptable si el co­ciente es entre 3,1 O y 3,40. Si se observa un cociente fuera de este intervalo, purificar el extracto acuoso repitiendo el ciclo de extracción, procediendo según se indica en el pá­rrafo anterior.

Si se observa un cociente de absorbancia aceptable en el extracto acuoso, determinar la radioactividad, en conteos por minuto, empleando un equipo de conteo apropia~o du­rante un período de tiempo ópt1mo de acuerdo al equ1po de conteo específico empleado. Promediar los resultados y corregir el promedio por la radioactividad de fondo obser­vada durante dos o más períodos de 30 minutos.

Cálculos-Calcular el contenido de cobalamina, expre­sado en f19 de cianocobalamina, de la porción tomada para la valoracion, por la fórmula:

R(Cs/Cu)(Au/ As)

en donde R es la cantidad, en ¡1g, de cianocobalamina en la porción de la solución estándar tomada; Cs y Cu son los valores de radioactividad promedio corregidos, expresados en conteos por minuto por mL, de la solución estándar y de la solución de valoración, respectivamente; y Au y As son las absorbancias, determinadas a 361 nm, de la solución de valoración y de la solución estándar, respectivamente.

/

(381) TAPONES ELASTOMERICOS PARA INYECTABLES

INTRODUCCIÓN

Los tapones elastoméricos para los envases usados en los tipos de preparaciones definidas en el capítulo de pruebas generales Inyectables (1 ), están hechos de materiales obteni­dos por vulcanización (entrecruzamiento), polimerización, poliadición, o policondensación de sustanc1as orgánicas ma­cromoleculares (elastómeros). Las formulaciones de los tapo­nes contienen elastómeros naturales o sintéticos y aditivos orgánicos e inorgánicos para facilitar o controlar la vulcani­zación, impartir propiedades físicas y químicas o color, o estabilizar la formulación del tapón.

Este capítulo se refiere a tapones usados para el almacena­miento a largo plazo de preparaciones definidas en el capí­tulo de pruebas generales Inyectables (1 ). Dichos tapones se utilizan generalmente como parte de un vial, frasco o sis­tema de envasado de una jeringa prellenada.

Este capítulo se refiere a tapones formulados con sustan­cias elastoméricas naturales o sintéticas. No concierne a ta­pones hechos de elastómero de silicona; sin embargo, sí se refiere a tapones tratados con silicona (p.ej., Dimet1cona, NI} Al efectuar las pruebas de este capítulo, no es necesario tratar los tapones con silicona, aunque ninguna restricción prohíbe el uso de tapones siliconizados.

Este capítulo también se refiere a tapones recubiertos con otros materiales lubricantes (p.ej., materiales unidos química o mecánicamente al tapón) no destinados a proporcionar una barrera para el elastómero base, y que de hecho no funcionan como tal. Al efectuar las pruebas, los tapones con recubrimientos lubricantes sin función de barrera deben analizarse en su estado recubierto.

Los siguientes comentarios se refieren únicamente a los tapones laminados o recubiertos con materiales destinados a proporcionar, o que funcionan como, una barrera para el elastómero base (p.ej., recubrimientos de PTFE o laca). No se permite usar un material de barrera en un tapón que no cumpla con los requisitos farmacopeicos para convertirlo en uno que sí los cumpla. Por lo tanto, todas las Pruebas Fisico­químicas conciernen a la fórmula base de dichos tapones, así como sobre el tapón recubierto o laminado. Con el fin de obtener los resultados de las Pruebas Fisicoquímicas, éstas de­ben efectuarse sobre tapones del mismo compuesto elasto­mérico sin recubrimiento o laminado, así como al tapón re­cubierto o laminado. Las Pruebas de Funcionalidad corresponden y deben efectuarse usando el tapón elastomé­rico laminado o recubierto. Las Pruebas Biológicas conciernen tanto al material de laminación o recubrimiento como a la fórmula base. Las Pruebas Biológicas pueden efectuarse sobre el tapón laminado o recubierto, o sobre el material de !ami­nación o recubrimiento y los tapones del mismo compuesto elastomérico sin recubrimiento o laminado. En este último caso, los resultados deben informarse por separado. La fór­mula base usada para las pruebas fisicoquímicas o biológi­cas, destinada a sustentar la conformidad farmacopeica de un tapón recubierto con material de barrera, debería ser similar al tapón recubierto correspondiente en cuanto a con­figuración y tamaño.

Para todas las pruebas de este capítulo, Tapones Elastomé­ricos para Inyectables (381 ), efectuadas sobre cualquier tipo de tapón, es importante documentar el tapón en análisis, incluyendo una descripción completa del elastómero y de cualquier lubricante, recubrimiento, laminación o trata­miento aplicado.

Este capítulo establece los límites de prueba para los tapo­nes elastoméricos Tipo 1 y Tipo 11. Los tapones Tipo 1 son usados generalmente para preparaciones acuosas. Los tapo-

172 (381) Tapones Elastoméricos para Inyectables 1 Pruebas Químicas USP 35

nes Tipo 11 son los destinados generalmente a preparaciones no acuosas, que si bien tienen propiedades optimizadas para usos especiales, es posible que no cumplan con todos los requisitos listados para los tapones Tipo 1 debido a su configuración física, a material de construcción o a ambos. Si un tapón no cumple con uno o más de los requisitos de prueba para Tipo 1 pero cumple con los requisitos para Tipo 11, se le asigna una clasificacion final de Tipo 11. Todos los tapones elastoméricos adecuados para usar en preparaciones inyectables deben cumplir con los límites de prueba para Tipo 1 o Tipo 11. Sin embargo, no se pretende que esta espe­cificación sirva como único criterio de evaluacion para la selección de dichos tapones.

El uso de este capítulo resulta apropiado al identificar tapones elastoméricos que pueden ser aceptables para usar en preparaciones inyectables basándose en su reactividad biológica, las propiedades fisicoquímicas de su extracto acuoso y su funcionalidad.

Los siguientes requisitos para la evaluación de los tapones están fuera del alcance de este capítulo:

- El establecimiento de pruebas y especificaciones para la identificación de tapones

- La verificación de la compatibilidad fisicoquímica entre el tapón y el producto

- La identificación y determinación de seguridad de los lixiviados de los tapones que se encuentran en el pro­ducto envasado

- La verificación de la funcionalidad del tapón del pro­ducto envasado bajo condiciones reales de almacena­miento y uso

El fabricante del producto inyectable (el usuario final) debe obtener del proveedor del tapón la garantía de que la composición del tapón no varía y que es igual a la del ta­pón usado durante las pruebas de compatibilidad. Cuando el proveedor informa al usuario final de cambios en la com­posición, se deben repetir las pruebas de compatibilidad, total o parcialmente, dependiendo de la naturaleza de los cambios. Los tapones deben almacenarse apropiadamente, limpiarse para remover los contaminantes ambientales y las endotoxinas, y para procesos asépticos, esterilizarse antes de usar en el envasado de productos inyectables.

CARACTERÍSTICAS

Los tapones elastoméricos son translúcidos u opacos y no tienen un color característico; éste depende de los aditivos usados. Son homogéneos y prácticamente libres de rebabas y materiales adventicios (p.e¡., fibras, partículas extrañas y residuos de goma).

IDENTIFICACIÓN

Los tapones se hacen de una gran variedad de materiales elastomericos y recubrimientos poliméricos opcionales. Por esta razón, está más allá del propósito de este capítulo espe­cificar pruebas de identificación que abarquen todas las po­sibles presentaciones de los tapones. Sin embargo, es res­ponsabilidad del proveedor del tapón y del fabricante del producto inyectable (el usuario final) verificar la formulación elastomérica del tapón y cualquier recubrimiento o material laminado usado, de acuerdo con las pruebas de identifica-

ción apropiadas. Ejemplos de algunas de las metodologías analíticas de prueba que se pueden usar incluyen peso espe­cífico, análisis del porcentaje de cenizas, determinación del contenido de azufre, prueba FTIR-ATR, cromatografía en capa delgada de un extracto, espectrofotometna de absor­cion UV de un extracto o espectrofotometría de absorción IR de un pirolisado.

PROCEDIMIENTOS DE PRUEBA

Los tapones elastoméricos deben ajustarse a los requisitos biológicos, fisicoquímicos y de funcionalidad, tanto cuando son enviados por el proveedor de tapones al fabricante del producto inyectable (el usuario final) como cuando el usua­rio final los pone .en su estado definitivo, listos para usar.

Para aquellos tapones elastoméricos procesados por el proveedor antes de la distribución al usuario final, el provee­dor deberá demostrar el cumplimiento con los requisitos far­macopeicos de los tapones expuestos a dichos pasos de procesamiento y/o esterilizacion. De igual manera, si los ta­pones elastoméricos recibidos por el usuario final son poste­riormente procesados o esterilizados, el usuario final es res­ponsable de demostrar que los tapones siguen cumpliendo con los requisitos farmacopeicos después de dichas condi­ciones de procesamiento y/o esterilización (es decir, en su estado listo para usar). Esto es especialmente importante si los tapones se deben exponer a procesos o condiciones que podrían impactar significativamente las características bioló­gicas, fisicoquímicas o de funcionalidad del tapón (p.ej., ra­diación gamma).

Para tapones que normalmente se lubrican con silicona antes de usar, está permitido efectuar las pruebas fisicoquí­micas en los tapones no lubricados con el fin de evitar una posible interferencia del método y/o dificultades en la inter­pretación de los resultados de la prueba. Para tapones sumi­nistrados con otros recubrimientos lubricantes sin función de barrera, todas las pruebas se deben efectuar usando el tapón recubierto.

Para tapones recubiertos o laminados con recubrimientos destinados a proveer una barrera (p.ej., recubrimientos de PTFE o laca), las pruebas farmacopeicas fisicoquímicas se aplican al elastómero base no recubierto, así como al tapón recubierto. En este caso, los proveedores son responsables de demostrar el cumplimiento con los requisitos fisicoquími­cos farmacopeicos tanto del tapón recubierto como del no recubierto, procesado o tratado de forma tal que se simulen las condiciones usadas para los tapones recubiertos antes del envío al usuario final. E tapón no recubierto sujeto a las pruebas fisicoquímicas debería ser similar en tamaño y confi­guración al tapón recubierto correspondiente. Los usuarios finales de los tapones recubiertos son responsables también de demostrar el continuo cumplimiento con los requisitos fisicoquímicos farmacopeicos del tapón recubierto, proce­sado o tratado en una forma que simule las condiciones típicas empleadas por el usuario final previo al uso.

En todos los casos, al informar los resultados de las prue­bas es apropiado documentar todas las condiciones del pro­cesamiento, pretratamiento, esterilización o lubricación de los tapones.

La Tabla 7 resume los requisitos de prueba de los tapones y las responsabilidades del proveedor y del usuario final.

Tabla 1

Tipos de Tapones (Tal como Requisitos de Prueba se Suministran o Utilizan) Pruebas Flslcoquímlcas Pruebas de Funcionalidad Pruebas Blolóqlcas

Tapón con o sin • Estas oruebas son obljg_atorias. • Estas pruebas son obliqatorias. • Estas pruebas son obliqatorias. Recubrimiento de Silicona • El uso de silicona es OQ_cional. • El uso de silicona es opcional. • El uso de silkona es opcional.

• Responsibilidad: proveedor y • Responsibilidad: proveedor y • Responsibilidad: proveedor y usuario final. usuario final. usuario final.

USP 35 Pruebas Químicas 1 (381) Tapones Elastoméricos para Inyectables 173

Tabla 1 (Continuación)

Tipos de Tapones (Tal como se Suministran o Utilizan) Pruebas Fisicoquímicas

Tapones con Recubrimiento • Estas pruebas se deben Lubricante (Material realizar sobre el tapón recu-Sin Función de Barrera; Dile- bierto.

rente de Silicona) • Responsibilidad: proveedor y usuario final.

Tapones con Recubrimiento • Estas pruebas se deben realizar de Barrera sobre los tapones recubiertos.

• Responsibilidad: proveedor y usuario final.

Y:

• Estas pruebas se deben realizar sobre los tapones sin recubri-miento (fórmula base).

• Responsibilidad: proveedor.

PRUEBAS BIOLÓGICAS

Se establecen dos etapas de pruebas. La primera etapa es la realización de un procedimiento de prueba in vitro según se describe en el capítulo de ~ruebas generales Pruebas de Reactividad Biológica, In Vitro (87). Los materiales que no cumplen con los requisitos de la prueba in vitro están suje­tos a la segunda etapa de pruebas, que es la realización de pruebas in vivo, Prueba de Inyección Sistémica y Prueba lntra­cutánea, según los procedimientos presentados en el capí­tulo de pruebas generales Pruebas de Reactividad Biológica, In Vivo (88). Los materiales que cumplen con los requisitos de las pruebas in vitro no necesitan someterse a pruebas in vivo.

Los tapones Tipo 1 y Tipo 11 deben cumplir con los requisi­tos de las pruebas de reactividad biológica in vitro o in vivo. [NOTA-Ver también el capítulo de información general Bio­compatibilidad de los Materiales Usados en Envases de Medica­mentos, Dispositivos Médicos e Implantes (1 031 ).]

PRUEBAS FISICOQUÍMICAS

Preparación de la Solución S

Colocar dentro de un recipiente de vidrio adecuado, tapo­nes enteros, sin cortar, que equivalgan a un área superficial de 1 00 ± 1 O cm2 • Cubrir los tapones con 200 mL de Agua Purificada o Agua para Inyección. Si no es posible conseguir el área superficial de tapon prescrita (1 00 ± 1 O cm2) usando tapones sm cortar, seleccionar el número de tapones que se aproximen mejor a los 1 00 cm2, y ajustar el volumen de agua usado al equivalente de 2 mL por cada 1 cm2 de área superficial real de tapón utilizada. Calentar a ebullición du­rante 5 minutos y enjuagar cinco veces con Agua Purificada o Agua para Inyección.

Colocar los tapones lavados en un matraz Erlenmeyer de vidrio Tipo 1 con cuello ancho (ver Envases-Vidrio (660)), agregar la misma cantidad de Agua Purificada o Agua para Inyección agregada inicialmente a los tapones, y pesar. Cu­brir la boca del matraz con un vaso de precipitados de vi­drio Tipo l. Calentar en un autoclave hasta alcanzar una temperatura de 121 ± 2° dentro de 20 a 30 minutos y man­tenerla durante 30 minutos. Enfriar a temperatura ambiente durante un periodo de aproximadamente 30 minutos. Agre­gar Agua Purificada o Agua para Inyección para completar de nuevo la masa original. Agitar e inmediatamente decan-

Requisitos de Prueba Pruebas de Funcionalidad Pruebas BioiQgicas

• Estas pruebas se deben realizar • Estas pruebas se deben realizar sobre el tapón recubierto. sobre el tapón recubierto.

• Responsibilidad: proveedor y • Responsibilidad: proveedor y usuario final. usuario final.

• Estas pruebas se deben realizar • Estas pruebas se deben realizar sobre los tapones recubiertos. sobre los tapones recubiertos.

• Responsibilidad: proveedor y 0: usuario final.

• Estas pruebas se deben realizar sobre los tapones sin recubri-miento (fórmula base) y al mate-rial de laminado/recubrimiento (los resultados se informan por separado).

• Responsibilidad: proveedor y usuario final.

tar y recoger la solución. [NOTA-Esta solución se debe agi­tar antes de usarse en cada una de las pruebas.]

Preparación del Blanco

Preparar una solución blanco en forma similar, usando 200 mL de Agua Purificada o de Agua para Inyección, pero omitiendo los tapones.

Apariencia de la Solución (Turbidez/ Opalescencia y Color)

Determinación de Turbidez (Opalescencia) NOTA-La determinación de turbidez se puede efectuar

por comparación visual (Procedimiento A), o instrumental­mente, con un turbidímetro de relación adecuado (Procedi­miento B). Para mayor información sobre turbidimetría, ver Espectrofotometría y Dispersión de Luz (851 ). La evaluación instrumental de transparencia constituye una prueba más sensible que no depende de la agudeza visual del analista.

Solución de Sulfato de Hidrazina-Disolver 1 ,O g de sulfato de hidrazina en agua y diluir con agua hasta 100,0 m l. Dejar en reposo durante 4 a 6 horas.

Solución de Hexametilentetramina-Disolver 2,5 g de hexa­metilentetramina en 25,0 mL de agua en un matraz Erlen­meyer de vidrio tapado de 1 00 m L.

Suspensión Madre de Opalescencia-Agregar 25,0 mL de Solucion de Sulfato de Hidrazina a la Solución de Hexametilen­tetramina en el matraz. Mezclar y dejar en reposo durante 24 horas. Esta suspensión es estable durante un período de 2 meses, siempre y cuando se almacene en un envase de vidrio sin defectos en su superficie. La suspensión no debe adherirse al vidrio y debe mezclarse bien antes de usar.

Suspensión del Estándar de Opalescencia-Preparar una suspensión diluyendo 15,0 mL de la Suspensión Madre de Opalescencia con agua hasta 1000,0 m l. La Suspensión del Estándar de Opalescencia es estable durante aproximada­mente 24 horas después de la preparación.

Suspensiones de Referencia-Preparar de acuerdo con la Tabla 2. Mezclar y agitar antes de usar. [NOTA-Las suspen­siones de formacma estabilizada que se pueden usar para preparar estándares de turbidez estables y diluidos, están disponibles comercialmente y se pueden usar después de la comparación con los estándares preparados como se ha descrito.]

174 (381) Tapones Elastoméricos para Inyectables 1 Pruebas Químicas USP 35

Tabla 2

Suspensión de Referen- Suspensión de Referen- Suspensión de Referen- Suspensión de Referen-da A cia 8 cia e cla D

Estándar de Opalescencia 5O ml 10 O ml 30 O ml 50 O ml Aqua 95 O ml 90 O ml 70 O ml 50 O ml Unidades de Turbidez Ne- 3 NTU 6 NTU 18 NTU 30 NTU felométrica

Procedimiento A: Comparación Visual-Usar tubos de prueba idénticos, de vidrio neutro, incoloro y transparente con base plana y un diámetro interno de 15 a 25 mm. Llenar un tubo hasta una altura de líquido de 40 mm con Solución S, un tubo hasta la misma altura con agua y cuatro tubos más hasta la misma altura con Suspensiones de Refe­r~ncia A, B,. C y D. Comparar las solucion.~s bajo luz diurna d1fusa 5 mmutos despues de la preparae~on de las Suspensio­nes de Referencia, observándolas verticalmente contra un fondo negro. Las condiciones de luz deben ser tales que la Suspensión de Referencia A puede distinguirse fácilmente del agua y la Suspensión de Referencia B puede distinguirse fácil­mente de la Suspensión de Referencia A.

Requi~ito-La Solucic(m S no es más opalescente que la Suspens1on de ReferenCia B para tapones Tipo 1 y no más opalescente que. )a Suspensió.n de Referencia C para tapones T1po. 11. La Soluoon S se cons1dera transparente si su transpa­rencl~ ~~ 1gual .que la del agua cuando se examina se$lún se descnb1o antenormente o SI su opalescencia no es mas pro­nunciada que la de Suspensión de Referencia A (ver la Tabla 3).

Procedimiento B: Comparación Instrumental-Medir la tur­bidez de las Suspensiones de Referencia en un turbidímetro calibrado adecuado (ver Espectrofotometría y Dispersión de Luz (851)). Medir el blanco y corregir los resultados por el blanco. Las Suspensio_nes de Referen~ia A, B, C y o, represen­tan 3, 6, 18 y 30 Un1dades de Turb1dez Nefelometrica (NTU por sus siglas en inglés), respectivamente. Medir la turbidez' de la Solución S con el turbidímetro calibrado.

Requisito-La turbidez de la Solución S no es mayor que 1~ de la Suspensión de Referencia B (6 NTU FTU) para tapones T1po 1 y no es mayor que la de la Suspensión de Referencia C (18 NTU FTU) para tapones Tipo 11 (ver la Tabla 3).

Tabla 3

Método de Comoaraclón Procedimiento

Requisitos de Procedimiento A 8 Ooalescencla (VIsual) (Instrumental)

Tapones Tipo 1 No más opalescente que No más de 6 NTU la Susoensión B

Tapones Tipo 11 No más opalescente que No más de 18 la Suspensión C NTU

Determinación de Color Estánqar. de Color-Prepa.r?r una solución diluyendo 3,0

mL de L1qwdo de Comparaoon O (ver Color y Acromatismo (631 )) con 97,0 mL de ácido clorhídrico diluido.

Procedimiento-Usar tubos idénticos de vidrio neutro, in­coloro y transparente con base plana y un diámetro interno de 15 a 25 mm. Llenar un tubo hasta una altura de líquido de 40 mm con Solución S y el segundo con Estándar de Color. Comparar los líquidos bajo luz diurna difusa obser­vándolos verticalmente contra un fondo blanco. '

Requisito-La Solución S no está más intensamente colore­ada que el Estándar de Color.

Acidez o Alcalinidad

Solución de Azul de Bromotimoi-Disolver 50 mg de azul de bromot1mol en una mezcla de 4 mL de hidróxido de

sodio 0,02 M y 20 mL de alcohol. Diluir con agua hasta 1 00 m l.

Procedimiento-A 20 mL de Solución S, agregar O, 1 mL de Solución de Azul de Bromotimol. Si la solución es amarilla, valorar con hidróxido de sodio 0,01 N hasta alcanzar un punto final azul. Si la solución es azul valorar con ácido clorhídr!~o 0,01 N hasta alcanzar un punto final amarillo. Si 1~ ,solue~on es verde, es neutra y no se requiere una valora­CIOn.

Corrección del Blanco-Probar 20 mL de Blanco de manera similar. Corregir los resultados obtenidos para la Solución S, sustrayendo o agregando el volumen de la solución volumé­trica requerida para el Blanco según sea apropiado. (Ver Vo­lumetría (541 ).)

Requisito-No más de 0,3 mL de hidróxido de sodio 0,01 N producen un color azul, o no más de 0,8 mL de ácido clorhídrico 0,01 N producen un color amarillo o no se requiere una valoración.

Absorbancia

Procedimiento-[NOTA-Efectuar esta prueba dentro de las 5 horas de la preparación de la Solución S.] Pasar la Solución S a través de ~n filtro con tamaño de poro 0,45 ¡.Lm, dese­chando los pnmeros mL de filtrado. Medir la absorbancia del filtrado a una longitud de onda entre 220 y 360 nm en una celda de 1 cm, usando el blanco en una celda pareada en el haz de referencia. Si se requiere diluir el filtrado antes de medir la absorbancia, corregir los resultados de la prueba por la dilución.

Requisito-Las absorbancias a estas longitudes de onda no exceden de 0,2 para tapones Tipo 1 o 4,0 para tapones T1po 11.

Sustancias Reductoras

Procedimiento-[NOTA-Efectuar esta prueba dentro de las 4 hor.~s de la preparación de la Solución S.] A 20,0 mL de Soluoon S, agregar 1 mL de ácido sulfúrico diluido y 20,0 mL de permanganato de potasio 0,002 M. Calentar a ebulli­ción ~urante 3 minut.os. En!riar, agregar 1 g de yoduro de potasio, y valorar de mmed1ato con t1osulfato de sodio 0,01 M, usando 0,25 mL de solución de almidón SR como indicador. Efectuar una valoración usando 20,0 mL de blanco y anotar la diferencia en volumen de tiosulfato de sodio 0,01 M requerido.

Requisito-La diferencia entre los volúmenes de las valora­ciones no es mayor de 3,0 mL para tapones Tipo 1 y no es mayor de 7,0 mL para tapones Tipo 11.

Metales Pesados

Procedimiento-Proceder según se indica en Método 1 en Metales Pesados (231 ). Preparar la Preparación de Prueba usando 10,0 mL de Solución S.

Requisito-La Solución S contiene no más de 2 ppm de metales pesados como plomo.

USP 35 Pruebas Químicas 1 (381) Tapones Elastoméricos para Inyectables 175

Cinc Extraíble

Solución de Prueba-Preparar una Solución de Prueba dilu­yendo 10,0 mL de Solución S con ácido clorhídrico O, 1 N hasta 100 m l. Preparar un blanco de prueba de forma simi­lar, usando el Blanco en lugar de la Solución S.

Solución Estándar de Cinc-Preparar una solución (1 O ppm de Zn) disolviendo sulfato de cinc en ácido clorhídrico 0,1 N.

Soluciones de Referencia-Preparar no menos de tres Solu­ciones de Referencia, diluyendo la Solución Estándar de Cinc con ácido clorhídrico O, 1 N. Las concentraciones de cinc en estas Soluciones de Referencia deben abarcar el límite espe­rado para la Solución de Prueba.

Procedimiento-Usar un espectrofotómetro de absorción atómica apropiado (ver Espectrofotometría y Dispersión de Luz (851 )) equipado con una lámpara de cinc de cátodo hueco y una llama de aire-acetileno. Se puede usar un procedi­miento alterno tal como un análisis de plasma inductiva­mente acoplado (ICP, por sus siglas en inglés) apropiada­mente validado.

Probar cada una de las Soluciones de Referencia en la línea de emisión de cinc a 213,9 nm por lo menos tres veces. Registrar las lecturas estables. Enjuagar el aparato con la so­lución del blanco de prueba cada vez, para garantizar que la lectura retorna al valor inicial del blanco. Preparar una curva de calibración a partir de la media de las lecturas obtenidas para cada Solucion de Referencia. Registrar la absorbancia de la Solución de Prueba. Determinar la concentración de cinc en ppm de la Solución de Prueba usando la curva de calibración.

Requisito-La Solución S contiene no más de 5 ppm de cinc extraíble.

Amonio

Solución de Tetrayodomercuriato de Potasio Alcalina-Pre­parar una solución de 1 00 mL que contenga 11 g de yo­duro de potasio y 15 g de yoduro mercúrico en agua. Inme­diatamente antes de usar, mezclar 1 volumen de esta solución con un volumen igual de una solución de hidró­xido de sodio de 250 g por L.

Solución de Prueba-Diluir 5 mL de Solución S con agua hasta 14 ml. Alcalinizarla, si fuera necesario, agregando hi­dróxido de sodio 1 N y diluir hasta 15 mL con agua. Agre­gar 0,3 mL de Solución de Tetrayodomercuriato de Potasto Alcalina y cerrar el recipiente.

Solución Estándar de Amonio-Preparar una solución de cloruro de amonio en agua (1 ppm NH4). Mezclar 1 O mL de la solución de cloruro de amonio de 1 ppm con 5 mL de agua y 0,3 mL de Solución de Tetrayodomercuriato de Potasio Alcalina. Cerrar el recipiente.

Requisito-Después de 5 minutos, cualquier color amarillo en la Solución de Prueba no es más oscuro que el de la Solución Estándar de Amonio (no más de 2 ppm de NH4 en la Solución S).

Sulfuros Volátiles

Procedimiento-Colocar tapones, cortados si fuera necesa­rio, con un área superficial total de 20 ± 2 cm2 en un matraz dE. 1 00 mL y agregar 50 mL de una solución de ácido cí­trico de 20 g por L. De la misma manera y en forma simul­tánea, preparar una solución de control en otro matraz de 1 00 mL, disolviendo O, 154 mg de sulfuro de sodio en 50 mL de una solución de ácido cítrico de 20 g por L. Colocar un trozo de papel de acetato de plomo sobre la boca de cada matraz y asegurarlo en posición, poniendo sobre él un frasco para pesada invertido. Calentar los matraces en un autoclave a 121 ± 2o durante 30 minutos.

Requisito-Cualquier mancha negra en el papel, produ­cida por la solución de prueba, no es más intensa que la producida por la solucion de control.

PRUEBAS DE FUNCIONALIDAD

NOTA-Las muestras tratadas según se describió para la preparación de la Solución S y secadas al aire, se deben usar par?, las Pruebas de Funcionalidad de Penetrabilidad, Fragmen­tacton y Capactdad de Autosellado. Las Pruebas de Funcionali­dad se efectúan en tapones destinados a ser perforados por una aguja hipodérmica. La prueba de Capacidad de Autose­llado se requiere sólo para tapones destinados a envases mul~ido.sis. L~ aguja especificada para cada prueba es una aguja h1poderm1ca lubncada de b1sel largo (ángulo de bisel: 12±2°)1.

Penetrabilidad

Procedimiento-Llenar con agua 1 O viales adecuados hasta el volumen nominal, colocar los tapones a examinar y asegurar con una tapa. Usando una aguja hipodérmica nueva, según se describió a~teriormente, para cada tapón, perforar el tapón con la aguja perpendicular a la superficie.

Requisito-La fuerza de la perforación no es mayor que 1 O N (1 kgf) para cada tapón, determinada con una exacti­tud de ± 0,25 N (25 gf).

Fragmentación

. Tapr;mes. para Preparaciones Líquidas-Llenar con agua 12 v1ales hmp1os hasta 4 mL menos de la capacidad nominal. Colocar los tapones a examinar, asegurarlos con una tapa y dejar en reposo durante 16 horas.

Tapones para Preparaciones Secas-Colocar los tapones a examinar en 12 viales limpios y asegurar cada uno con una tapa.

Procedimiento-Usando una aguja hipodérmica según se describió anteriormente,, colocada en una jeringa limpia, in­yectar dentro de cada v1al 1 mL de agua mientras se retira 1 mL de aire. Repetir este procedimiento cuatro veces para cada tapón, perforando cada vez en un sitio diferente. Usar una aguja nueva para cada tapón, verificando que no se vuelva roma durante la prueba. Filtrar el volumen total de líquido en todos los viales a través de un único filtro con un tamaño de poro nominal no mayor que 0,5 ¡.tm. Contar los fragmentos de caucho que se puedan ver a simple vista en la superficie del filtro.

Requisito-No hay más de cinco fragmentos visibles. Este límite se basa en la suposición de que los fragmentos con un d;ámetro >50 ¡.tm se pueden ver a simple vista. En caso de duda o controversia, examinar las part1culas microscópi­camente para verificar su naturaleza y tamaño.

Capacidad de Autosellado

Procedimiento-llen?r 1 O viales adecuados con agua hasta el volumen nom1nal. Colocar los tapones a examinar y tapar. Usando una jeringa hipodérmica nueva para cada ta­pon, según se describió anteriormente, perforar cada tapón 1 O veces en un sitio diferente cada vez. Sumergir los 1 O viales en u. na soluc!<?n de azul de metileno al O, 1 o/o (1 g por L) y reduc1r la pres1on externa en 27 kPa durante 1 O minu­tos. Restablecer la presión atmosférica y dejar los viales su­mergidos durante 30 minutos. Enjuagar el exterior de los viales.

Requisito-Ninguno de los viales contiene vestigios de so­lución azul. 1 Consultar ISO 7864, Agujas hipodérmicas estériles para único uso con un diámetro externo de 0,8 mm (Calibre 21 ).