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Contar células

Métodos para contar células

Métodospara contar

célulasElectrónicos

Basados en lamicroscopía

Medidores dela resistencia

Citometríade flujo

Análisis deimagen

Hemocitómetro

Incorporación de

colorantes fluorescentes

Tinción de cultivosen monocapa

Aproximados

Peso

Contenido de ADN

Contenido de proteínas

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Contar células

El hemocitómetro o cámara de Neubauer

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Contar células

(rojo)

(azul)

(verde)

(amarillo)

(gris)

1 mm

Profundidad = 0,1 mm

La cuadrícula del hemocitómetro

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Contar células

Se introduce la suspensión de células en el hemocitómetro

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Contar células

La región de recuento del hemocitómetro

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Contar células

Observación con microscopio óptico y recuento de células

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Contar células

Diferencias entre células vivas y muertas

Célula viva

Célula muerta

De las tres líneas,la del centro es laque corresponde allímite del cuadrado

 

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Contar células

Tinción de cultivos en monocapa 

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Contar células

Hay tres tipos de contadores electrónicos 

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Contar células

Contador de células electrónico (CASY) 

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Contar células

Resultados del recuento de células

Es importante poner límites (inferior ysuperior) a los tamaños que se miden

 

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Contar células

Recuento mediante análisis de imagen 

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Contar células

Fundamento del recuento de células por análisis de imagen 

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Contar células

Recuento de células por análisis de imagen 

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Contar células

Esquema del análisis de la imagen 

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Contar células

Citometría de flujo 

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Contar células

Citometría de flujo

La difracción de luz frontal permitecontar las células y, a la vez, nos

da información sobre su tamaño.

 

é

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Contar células

Estimación del número de células a partir del peso 

C él l

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Contar células

Estimación del número de células a partir contenido proteico 

C él l

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Contar células

Método de Bradford: fundamento 

C t él l

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Contar células

Método de Bradford: protocolo 

C t él l

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Contar células

Estimación del número de células a partir contenido de ADN 

C t él l

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Contar células

Determinación de ADN por la fluorescencia del H33258 

C t él l

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Contar células

Estimación del ADN por la absorbancia en el ultravioleta 

C t él l

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Contar células

Comparación de los diversos métodos para contar células 

Contar cél las

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Contar células

Métodos para determinar la viabilidad de las células

Métodos paradeterminar laviabilidad delas células

Síntesis de novo de proteínas

Incorporación de3H-timidina al ADN

Exclusión del azul tripán

Marcaje fluorescentecon naranja de acridina

y ioduro de propidio

 

Contar células

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Contar células

Viabilidad celular mediante tinción con azul tripán 

Contar células  

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Contar células

Naranja de acridina: atraviesala membrana celular y tiñe los

ácidos nucleicos, generando unaintensa fluorescencia de colorverde a bajas concentraciones.

Ioduro de propidio: noatraviesa la membrana decélulas intactas, pero sí la de

las células dañadas. Se une alos ácidos nucleicos,desplazando al naranja deacridina y genera una intensafluorescencia de color rojo.

Viabilidad celular: Naranja de acridina + Ioduro de propidio

Células vivas

Células muertas

 

Contar células

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Contar células

Medida de la viabilidad celular a partir de la síntesis de proteínas 

Contar células

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Contar células

Medida de la viabilidad celular a partir de la síntesis de ADN