Química Biológica

Seminario Enzimas

Definición

Son catalizadores biológicos

Principalmente de naturaleza proteíca

Difieren de la actividad de otros catalizadores

Mecanismo de acción

Modelos de acción

Modelo llave-cerradura Modelo de ajuste inducido

Características de la AE

• Son termolábiles

• Alta eficiencia

• Gran especificidad

• Están sujetas a una gran variedad de controles celulares, genéticos y alostéricos.

Clasificación

Según la reacción en la que participan:

• Hidrolasas

• Oxidoreductasas

• Transferasas

• Liasas

• Isomerasas

• Ligasas

Holoenzimas

Cofactor

Proteína +

Coenzima

Efecto de la temperatura

Efecto del pH

Inhibidores

Sustancia que hace disminuir la actividad enzimática,

Esta definición excluye todos aquellos agentes desnaturalizantes

Dos tipos de inhibidores:

I. Isostéricos: ejercen su acción sobre el centro activoII. Alostéricos: ejercen su acción sobre otra parte de la molécula.

Los inhibidores isostéricos pueden ser de dos tipos:

1. Inhibidor reversible:

E + I EI

2. Inhibidor irreversible:

E + I E’

ES + I ESI

Inhibición competitiva

Inhibición no competitiva

Parte experimental

Objetivo:

Identificar enzimas a partir de su actividad especifica.

Lipasa

Cataliza la hidrólisis de los TAG

Es secretada por el páncreas

Lipasa

Sacarasa

Cataliza la hidrólisis de sacarosa

La extraemos de levaduras

1 g Levadura

20 ml de Acetona

Centrifugar

Filtrar y

secar

Resuspender en buffer

Agregar 5 ml de agua

Sacarasa

Ensayo de Fehling

Catalasa

Enzima oxidoreductasa hepática

1 g de higado

+

5 ml de Peroxido de hidrogeno

O2

Inhibición enzimática

Inhibición de la GOD por azida de sodio

1 gr. de levadura

50 ml de buffer fosfato de sodio 0.01 M NaCl 0.1.

5 ml de glucosa 10 mM

Inhibición

Rvo de trabajo: GOD, POD, Fenol y 4 aminofenazona

Reacción de identificacion