Pruebas-bioquimicas Caracteristicas Fisiologicas Bacterianas
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Isolation(culture)Agarplate/coloniesLiquidmediatesttubebulk
Identification&taxonomyFamilyGenusSpeciesTypeStrain
Biochemical(physiological)testsMoleculartests
DNADNAhomology16SrRNAsequencingChemicalprofiling
NonculturebaseddetectionPolymerasechainreaction(PCR)Agglutination(antigendetection)StainSerology(antibodydetection)
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Familia:grupodegnerosrelacionados. Gnero:grupodeespeciesrelacionadas. Especies:grupodecepasrelacionadas. Tipo:grupodecepasdentrodeunaespecie(e.g.biotipos,
serotipos).
Cepa:unorganismoaisladodentrodeunaespecieenparticular.
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Relacinentrecaractersticafisiolgicayfuncincelular Relacinentrelasactividadesquellevanacaboensu
ambientenatural
Relacinconlostrayectosmetablicosmicrobianos
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FermentacindeAzcares
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http://textbookoXacteriology.net/themicrobialworld/metabolism.html
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Utilizacindecompuestosorgnicoscomofuentedecarbonoyenerga
Catabolismooxidacindemolculasorgnicasparaproducirenerga
Fermentacin Respiracin
Anabolismoutilizacindeenergaparasintetizarmaterialcelular
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Bacteriasoxidativas
Molculadeazcarserompecompletamente
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Oxidacinparcialdeuncompuestoorgnicoutilizandointermediariosorgnicoscomodonantesyaceptadoresdeelectrones
TodoelATPesproducidoporfosforilacina
niveldesustrato
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Homolctica Lactobacillus,LactococcusylamayoradelosStreptococcus
Mixta MayormenteEnterobacteriaceae Produccindecidolctico,actico,frmico,succinatoyetanol
Butanediol Klebsiella,Enterobacter
cidobutrico Clostridia cidoactico,CO2yH2
Butanolacetona Clostridiumacetobutylicum
cidoproponico PropionibacteriumandBifidobacterium
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Glucosa Lactosa Manitol Inositol Sorbitol Ramnosa Melibiosa
Amigdalina Adonitol Arabinosa Dulcitol
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Importanteenlaidentificacindebactericasentricas
comolasEnterobactericeae
Fermentadorasdelactosa:Escherichia,Klebsiella,Enterobacter
Nofermentadoras:Salmonella,ProteusyShigella
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Aerbicosyfacultativosanaerbicos Gramnegativo Noformadoresdeesporas Formadebacilo Fermentanlactosa,conproduccindecidoygasdentro
de48hra35oC
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ProduccindecidosrojofenolcomoindicadordepH
TuboDurhamproduccindegas Pruebasdefermentacinen:
glucosa,lactosaymanitol
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Tresazcares:glucosa,lactosaysucrosa
RojofenolcomoindicadordepH
ContienehierropermitedetectarlaproduccindeH2Sapartirdeamino
cidos
Puededetectarseproduccindegas
A.Salmonellasp.
B.EscherichiacoliC.Unknown
D.Proteusmirabilis
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Deteccindeactividadesenzimticasbacterianas ONPGsustratoartificialanlogodelalactosa Ureacompuestonitrogenadosencillo Casenaprotenaprincipaldelaleche Gelatinaprotenaderivadadelcolgenoanimal Almidnpolisacridodeorigenvegetal Lpidosograsas
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Produccindegalactosayonitrofenol
Amarilloencondicionesalcalinas
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UreasaatacaenlaceentrecarbonoynitrgenoprociendoCO2,aguayamonaco
Rojofenol
Urea
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PruebatilparadistinguirProteusdeotrasbacteriasentricasGram
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Protenapredominanteenlaleche Protenamuygrandeparapasarporlamembranapero
algunasbacteriasliberancaseinasaquedegradala
protenaeincorporanlosaminocidosqueseliberan
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Bacteriaspuedenproducirlaexoenzimagelatinasa,querompelaestructuradelagelatinaylalica
Lacapacidaddeunabacteriadeproducirgelatinasasepuedecorrelacionarconelgradodepatogenicidadovirulencia,yaquelaenzimapermitemoverseatravsdeltejidoconectivoenelcuerpo.
Unapruebagelatinaseevalaobservandolaconsistenciaenfro
SeutilizaparadiferenciarentreS.aureusyS.epidermidis
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Algunasbacteriaspuedenproduciramilasa,produciendodextrinas,glucosaymaltosa
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Produccindelipasasparaproducircidosgrasosyglicerol
PruebasellevaacaboenagarSpiritBluequetieneunindicadordepH.LahidrlisisbajaelpHocurriendouncambiodecoloraazulintenso
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ParalosbacilosGramnegativos Indol Rojometilo(MR) VogesProskauer(VP) Citrato(C)
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Hidrlisisdetriptfanoproduciendoindol,cidopirvicoyamonaco
Elindolseacumulaenelmedioporquenoestilalabacteria
SeaadereactivodeKovacquereaccionaconelindolproduciendouncompuestorojizorosado
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Pruebaparalafermentacinmixtapresenciadecidosacticos,lactico,frmicoysuccnico
Laadicinderojodemetilo,quedistinguegradosdeacidez:amarilloapH8,incoloroapH7yrojoapHde4
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Produccindealcoholy2,3butanodiolenlugardecidosapartirdeunazcar
EspeciesdeEnterobacterySerratiayalgunasGrampositivocomoBacillus
Semideacetonaqueesunprecursorde2,3butanodiol Luegodeperododeincubacinseaadeelreactivode
Barrit:alfanaftol5%yKOH40%enalcoholabsoluto Pruebapositivaeslaformacindeuncomplejorojo
rosado
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Algunasbacteriaspuedenutilizarcitratocomonicafuentedecarbonoencondicionesaerbicas
LapermeasadecitratopermiteeltransportedecitratoalinteriordelaclulaylaenzimacitrasaconvierteelcitratoencidopirvicoyCO2
Mediocontienecitratodesodio,salesdeamonioyazulbromotimolcomoindicadordepH
ElCO2liberadosecombinaconelsodioyaguayformancarbonatodesodioqueesalcalinocambiandoelbromotimoldeverdeaazulintenso
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TSITripleSugarIronAgar SIMSulfideIndoleMotility
FermentacindeazcaresyproduccindeH2S
ProduccindeH2Symotilidad
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Remocindelgrupoaminodefenilalaninaporfenilalanasaproduciendocidofenilpirvico
Diferenciaentregnerosdeenterobacterias Seaadesolucin10%clorurofrrico
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RemocindelgrupocarboxilodelosaminocidosqueproducenaminasyCO2
Seutilizancaldosquecontienenelaminocidocorrespondiente,glucosayunindicadordepHcomobromocresolvioleta
Seaadeaceitemineralparacrearcondicionesanaerbicas Loscidosproducidosporlafermentacinactivala
decarboxilasaqueproducenaminasalcalinasqueneutralizanelmediolocualcambiaelmediodeamarillo(cido)avioleta
Pruebanegativamedioamarillo
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Pruebaquecombinadiferentesreacciones Fermentacindeazcares
Lactosa
Reaccionesdehidrlisis Casena
Lechedesnatadaal10%conlitmus(azolitmin)comoindicadordepH
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Bacteriasquimioorganoheterotrficasutilizanelnitratocomoaceptadorfinaldeelectronesduranterespiracinanaerbica
NO3+2e+2H+NO2+H2O
Relacinalciclonitrgeno Elmediodecultivocontieneextractodecarne,peptonay
nitratodepotasio(KNO3)
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Serequierelaadicindecidosulfanlico(A)ydimetilnaftilamina(B)
Sedetectalapresenciadenitrito
Pruebapositivacolorrojo
SeconfirmapruebanegativaconZn
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Detectalaproduccindeunaenzimaquecoagulalasprotenasdelasangre
Sehaceenmedioquetieneplasma
TpicadelasGrampositivo
S.aureus
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Detectapresenciadedeoxiribonucleasa
PruebatpicaparacocosGrampositivo
TpicodebacteriaspatgenasquerompenDNAenclulasdelhospedero
EltintesepegaalascargasnegativasdelDNA;ausenciadeltinte,ausenciaDNA
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DetectapresenciadecatalasaoperoxidasaquerompeelperxidoenaguayO2
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Pruebarepresentativadelosprocesosaerbicospropiosdebacteriasoxidativas
BacteriasoxidativasenergaapartirdecompuestosorgnicosutilizandooxgenoyliberandoCO2yagua
Lasoxidasassonenzimasimportantesenlacadenadetransportedeelectronesduranterespiracinaerbica
Pruebaimportanteparadistinguirciertosgruposdebacterias Pruebarequiereelusodetetrametilpfenilendiaminaque
reaccionanhaciauncolorazuloscuroalreaccionarconlacitocromacoxidada
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Lasenterobacteriassonoxidasanegativa
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API20E
EnterotubeII
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Pruebasrpidas:sistemaparalaidentificacinbioqumicadeEnterobacteriacaeyotrasbacteriasGramneg.
Consistedetirasplsticascon20uldesustratosdeshidratadosqueseutilizanparadetectarcaractersticasbioqumicas.
Lossustratossoninoculadosconcultivospurossuspendidosensalina.
Luegodeunperodode5hr24hrslas20pruebassonconvertidasaunalecturade79dgitos.
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LimitadoabacteriasGram,oxidasaneg
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ONPG(galactosidase);ADH(argininedihydrolase);LDC(lysinedecarboxylase);ODC(ornithinedecarboxylase);CIT(citrateutilization);H2S(hydrogendisulphideproduction);URE(urease);TDA(tryptophandeaminase);IND(indoleproduction);VP(VogesProskauertestforacetoin);GEL(gelatinliquefaction);thefermentationofglucose(GLU),mannitol(MAN),inositol(INO),sorbitol(SOR),rhamnose(RHA),sucrose(SAC);Melibiose(MEL),amygdalin(AMY),andarabinose(ARA);andOI(oxidase).
positive
negative
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OI0
ARA22+AMY0
MEL4+
SAC27+RHA1+
SOR4+INO05
MAN1+
GLU4+GEL04VP0
IND4+TDA04
URE0
H2S0CIT01 ODC1+
LDC4+ADH05ONPG1+
normal7digitcode5144572=E.coli
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EnterotuboIIenterobacteriasoxidasaneg EntericTek Oxi/FermGramNegativeRodsIdentificationpara
bacteriasoxidasaposyoxidasaquenofermentanglucosa
APIStaphIdentpara13especiesdeestafilococos
Biolog MicroIDenterobacteriasoxidasaneg Minitek