Presentación Anyplex Tbc-mdr-xdr 2015

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    ANYPLEX II DETERMINACIN D

    TBC/MDR/XDR

    Blga. Marel Tello

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    ESTUDIOS

    EN PER

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    La tuberculosis (TB) y sus principales formas resistentey TB-XDR (sta virtualmente incurable) constituyen uproblemas de salud pblica ms importantes en el

    PRIMERA CAUSA DE MUERTE POR ENFERMEDAD INF

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    !egn cifraso"ciales de la #!$%&'T en el ao2006, cada hoa !"#$o%a$ fuerondiagnosticadas deTB y cada d&a'a((#c)#o% *

    personas por esta

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    !egn la M!, consideporcenta*e de detecci+n del y estimaciones del sub%regist--, #( %+,#o d# #%'#)%c#,#%a a 6 "o hoP#+.

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    !+lo las provincias de L),anoti"caron ms casos de 'olombia, #cuador, 0rgentin##22 y o1)#o% (a

    )%c)d#%c)a "o 003000 h,4$ a(a #% odo #( coa,#)ca%o, por encima Bolivia, 4uayana y de algundel 5frica !ubsa1ariana com

    #tiopa, #l 'ongo, Mo

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    *0 ,)((o%#$ d# ha)a%#$

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    No ha. dao$ "aa P#+

    XDR

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    0lta incidencia de TB.&rimer pas en 0mrica con mayor carga de TB M78 y TB

    ;-

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    La magnitud alcan6ada por la TB, la TB M78 y la Tel &er, *usti"ca /ue esta enfermedad sea dec#,#9#%c)a $a%)a)a %ac)o%a(para lograr la mde recursos del tesoro pblico y desarrollar un

    programa e*ecutivo de control /ue consrecomendaciones internacionales en el conte=e=periencia ganada en el pas.

    PER

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    Medidas >nmediatas?

    'reaci+n de un centro de referencia nacional.

    'entros de referencia regionales especiali6ados en "d)a9%7$)co y tratamiento de la TB, con la capacidad

    universali6aci+n de "#a$ d# $#%$))()dad "aaa,)#%o$ )%d)1)da():ado$al @--< de los afectado

    Tratamiento institucionali6ado de las principales formas1asta controlar su condici+n de transmisor.

    Brindar un subsidio a la persona afectada para cubrir las

    bsicas de su familia mientras dura su terapia.

    PER

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    R#$a%TBC

    T)#,d&a$

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    LINE=OLID#l Line6olid es un antimicrobianotratamiento de infecciones por bacteriapositivas resistentes y 1a sido repoestudios in vitro frente a M. tuberculosis,

    sugeridas en 1umanos son de 600,9 a "o d&a. !u uso 1a sido limitado debido a /ureportado serios efectos adversos? mielototo=icidad neuroptica, los cuales son depend

    la dosis y de la duraci+n del tratamiento

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    La rgani6aci+n Mundial de la !alud (clasi"cado a las drogas de segunda lneatratamiento de la TB MDR, considerando aldentro del grupo /ue incluye adems a lacloflaamo=icillinaAclavulanato, la t1ioaceta6oclaritromicina y elimipenem (llamado, 4rupembargo, para la TB XDR el tratamientencuentra estandari6ado y su e"cacia es inci

    LINE=OLID

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    COSTOTRATAMIEN

    TO TB

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    COSTO POR PACIENTE ENM>XICO

    TB sensible? @-%-- d+

    TB M78? @,-- % ,-- d

    SUD?FRICA) y 2!C - % Etratamiento preventivo con cotrimo=a6ol durmeses

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    COSTO ESTIMADO PERTRATAMIENTO 200@

    #n #s!alud?

    !A.@-- por paciente con TB sensible.

    !A. --- por paciente con TB M78.

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    '!T &8 T80T0M>#$

    M#$!20L? D :: FT80T0M>#$T !24#8>7 &

    M#!#!? @EG @F (!A.;-

    &8#'> !>$ '!T 7# 3!&>T0L>H0'>I$ 2

    07>'>$0L#!

    TRATAMIENTO DE XDRTB

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    0 000 MUESTRAS AL AO MDRY XDR

    PROPUESTA IOONH07 >$>'>0L?

    &'8 MTB y otros (@-7IL08#!)

    T80$!&8T#?

    7IL08#! 0$J&L#9 >> MTBAM78A978?

    @-- 7L08#!

    TOTAL< G DLARES

    TIEMPO< 2 DHAS

    TRATAMIENTO ACTUALH07 >$>'>0L?

    B0'>L!'&K0 (E 7IL08#!)

    M78 TB 4#$TJ?

    D 7IL08#!

    40!T! #9T80!?

    >T 7# #9T80''>I$

    >T 978 TB (E- E 7IL08#!)

    T80B0N078#! ( o D T80B0N078#!)

    T>#M& (D 7K0!)

    D M5O2

    T80$!

    '!T

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    &'8 vs B0'>L!'&K0

    PCR #% T)#,"o R#a(

    Ba$ada #% (a a,"()cac)7%d# $#cc)o%#$ #$"#c&ca$ d#

    %a #9)7% d#( ADN #"#,)# $a# $) #$ TB"o$))1o "(,o%a oa&")co8

    A(a #$"#c)c)dad @;J8

    Bac)(o$co"&

    E$ %a Kc%)ca d# )"#,)# 1)$a():a d4")da $) #( "ac)#%#

    Ba5a #$"#c)c)dad 0*0J 'a($o$ %#9a)1oa #c)) % aa,S/8G008

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    SEEENE 1$ AIN

    ANYPLEX II TBC/MDR/XDR

    Basada en la novedosa tcnicaTOCE /ue es un &'8 multiple= entiempo real basado entemperaturas de melting.

    #n un solo procedimiento y co% %) "od#,o$ $a# $) #("ac)#%# #$ TB $#%$)(#3 MDRTB o XDR TB8'!T? @-- 7IL08#! (>$'L2J# >T7# #9T80''>I$).

    T>#M&? ; hoa$

    ENOTYP

    !u tcnica est bah))d):ac)7%, la cualde ser utili6ada debi

    especi"cidad y alta 'a($o$ "o$))1o$.S# #)##% * e=tracci+n, uno de M978.'!T? 0&89>M07

    7IL08#!

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    PARA PROCESAR G000 MUESTRAS AAOL!'&K0>T M78 TB 4#$TJ>T 978 TB 4#$TJ!$0L (0&89>M070M#$T# D)>T 7# #9T80''>I$ (&8 &0'>#$T#)

    E 7IL08#!D 7IL08#E- E 7ILD--- !L#!@@ 7IL08#

    &8 &0'>#$T# !# 40!T08K0 2$ 0&89>M07!A.D-, - P transporte P 'onstrucci+n del laborator

    M/uinas P D veces ms en tiempo para otorgar el

    H

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    TECNOLOH

    A SEEENE

    DPO

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    E%$a.o MLTIPLEX

    8esultados mltiples ysimultneos.

    2na sola muestra y el mismoproceso para los anlisis.

    7os o ms targets o mutacionesen los genes.

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    E%$a.o MLTIPLEX

    7etecci+n e identi"caci+n de agentesinfecciosos (Pa%#(#$ d# "a79#%o$).

    >denti"caci+n de des+rdenesgenticos (Pa%#(#$ d# targets"aa,ac)o%#$).

    &ermite la elecci+n de la droga y ladosis (Pa%#(#$ d#'a,aco9#%K)ca).

    $os ayuda a la evaluaci+n del

    progreso de la enfermedad y el

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    Cambio del paradigma en el DiagnsticoMolecular con la Estrategia de S##9#%#

    DPOTM

    ,TTOCETM

    0lto Multiple= de &'8 en Tiempo 8eal

    @plataforma para T7! losensayos de 7= Molecular

    &at+genoMutaci+n!$&

    &anel Maestro

    Ba*o costo por prueba$ue

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    Principales Caractersticas de la Tecnologde S##9#%#

    @. Ms de G0"(#Qen &'8 convencional o d

    . !e ampli"ca de manera e"ciente y e/los targets.

    7&TM

    T'#TM

    mT'#TM

    @. Ms de 20"(#Qen &'8 en tiempo real.

    .Tan sensible como una simple &'8 e(2niple=).

    @. 7etecta ms de 20 ,ac)o%#$en un &'8 e

    . Lo su"cientemente sensible para detectar uencuentre en menos de Q-,@

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    Evolucin Histrica del Diagnstico Molecul&atenteA

    &aperTecnologa 'ompaa

    3omogneos(!istema'errado)

    Multiple=(R @-ple=)

    'uanti"caci+n(R @- analitos)

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    Diagnstico Molecular Ideal para futuro

    @) Multi detecci+n de targets.

    ) !istema cerrado? &'8 en tiempo real.

    D) Multi cuanti"caci+n.

    E) 7etecci+n de Mutaci+n? 8esistencia a las 7rogas y e

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    0lta Multiplicidad en el 7iagn+stiMolecular

    @er7esafo

    Deteccin de Mltiples Targets PCR M()

    i i l Ob l l C

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    Principales Obstculos en el PC!Multiple"

    @. 2niones no espec"cas deprimers.

    . Sormaci+n de dmeros deprimers.

    D. 7isminuci+n de la sensibilidad.

    E. 7i"cultad en la optimi6aci+n.

    SUPERADO POR LA TECNOLOHA DPOTMDE S

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    Principio de la Tecnologa DPOTM

    7& es un nuevo concepto en el diseo deprimers/estructural y funcionalmente diferente de losprimersconv

    para &'8.Unin de Polideoxiinosina DPO P),# D

    O()9o%c(#7

    ADN molde SitioTarget

    Principio de la Tecnologa DPOTM

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    Principio de la Tecnologa DPO

    P),# P),# Da(#l a:o G, /ue es el ms largo, preferentemal 07$ molde y se inicia la h))dac)7% #$a

    S#9%do P),# Da(#l a:o *, /ue es el ms corto, se une selecsitio ob*etivo y "#,)# # $# "#(o%9ac)7%.

    A,#%a (a #$"#c)c)dad "aa (a $#c#%c)a d

    Principio de la Tecnologa DPOTM

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    Principio de la Tecnologa DPO

    E(),)%ac)7% d#primers%o #$"#c&co$

    0un/ue el largo bra6o U se una un sitio no ob*etivotermodinmica, la porci+n DU $# #$)$# a (a#$"#c&ca (o#a%do #'#c)1a,#%# (a #(o%9

    7ebido a las limitaciones termodinmicas, #( a$o(o %o "#d# %)$# a( target a la tem1ibridaci+n del ensayo.

    #enta$a de la Tecnologa DPOTM

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    $ gDPOV "#,)# #%$a.o$

    ,()"(#Q "aa ((#1a a caoco,o $)%9(#"(#Q

    DPOV $"#a (a d(a o"),):a

    7etecci+n de pat+genos enmuestras clnicas (carriles @%E).

    DU%0mpli"caci+n 07$c "nal (D$dufs.

    V7& W A,"()cac)7%E)1a(#%#X

    8endimiento e/uivalente como

    sin le le= vs multi le=

    V7& W F4O"),):

    8endimiento e/utodo un rango

    @. &rico

    . &ri

    DPO % supera obstculos de PC

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    DPO supera obstculos de PCMultiple"

    @.2niones no espec"casdeprimers.

    .Sormaci+n de dmerosdeprimers.

    D.7isminuci+n de lasensibilidad.E.7i"cultad en la

    optimi6aci+n.

    &'8 'onvencional 7&TM&'

    Limitaci+n en laMultiplicidad

    @.&rimer espec"c.$o forma dmeD.!ensible co

    singleple=.

    E.Tolerante a la de la temper1ibridaci+n.

    0mpli"caci+n conMltiples targ

    7iagn+sticos Mo

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    0lta detecci+n de mltiples target&'8 en tiempo real.

    do7esafo

    Mltiples Targets en un solocanal

    A%4()$)$ d# (a T#,"#d# Melting

    M&todos 'ctuales de Tm

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    M&todos 'ctuales de Tm!onda 7ual Marcada

    So%daTaMa%

    So%da Mo(#c(aB#aco%No

    ))d):ada

    No

    ))d):ada

    No

    ))d):ada

    No))d):a

    da

    ))d):ada

    ))d):ada

    Wa)ac)7% d# (a $#c#%c)a#% (o$ targetsd# (a $o%da #$(a #% ca,)o$ #% (a T,Multi lexidad

    M&todo Ideal para Tm para un PC!

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    p p multiple" en tiempo real

    1.Libertad de variacin de secuencia en el sitio d2.Tm Controlado.3.Ensayo homogneo (una reaccin / un tubo).4.Alta especificidad y reproducibilidad.

    Puede alcanzar

    Tecnologa TOCETMde Seegene

    Principio de la Tecnologa TOCET

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    p g OC

    D"(#Q Cach# es independiente del targetamplicon, conduciendo a una co%$)$#%#T,8

    Poc)7%,acada

    ADN

    ,o(d#

    Mo(d# a)c)a(

    (eneficios de TOCETMPoc)7%

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    2n Tm pre%determinado (o controlada) permite la dde mltiples targetsen un solo canal

    Poc)7%,acada

    ADN,o(d#

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    DEMOSTRACIN

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    NLABORATORIO

    YUEN-RHOS

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    PACIENTE N *

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    PACIENTE N *

    PACIENTE N *

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    PACIENTE N *

    PACIENTE N *

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    PACIENTE N *

    PACIENTE N G

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    PACIENTE N G

    PACIENTE N G

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    PACIENTE N G

    PACIENTE N G

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    PACIENTE N G

    CONCLUSIONES

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    CONCLUSIONES

    7ebido a la clara asociaci+n entre "oTB, la disminuci+n de todas las formas del &er, debe ser considerada co

    )%d)cado d# (a #cac)a d# (a$ acc)o(cha co%a (a "o#:a /ue el peruano se 1a propuesto lograr.

    CONCLUSIONES

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    #sta #a()dad %ac)o%a( y la propuesta dedebe ser conocida por la clase poltica del pblico en general para /ue se recono6cad),#%$)7% d#( )#$9o d)a)o en el /uepoblaci+n y se tome la decisi+n polticontrolar y erradicar esta enfermedad del pa

    CONCLUSIONES