PREINFORME DE LABORATORIO DE BIOQUMICA METABLICA

1. ACTIVIDAD URESICA EN MUESTRAS DE ORIGEN BIOLGICO

2.

CAPACIDAD AMORTIGUADORA Y POTENCIAL AMORTIGUADOR (P DE MUESTRAS BIOLGICAS

3. DETERMINACIN DE CARBOHIDRATOS NO ESTRUCTURALES (CNE), EN FORRAJES, POR EL MTODO DE FENOL-CIDO SULFRICO

ERNESTO CARLOS MARTELO DIAZCODIGO: 7.920.500

CCAV: Simn Bolvar

MARIA GABRIELA ROMERO

ESCUELA ECAPMAMAYO DE 2014

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA UNAD

LABORATORIO 1

INTRODUCCINLa ureasa (EC 3.5.1.5) es una enzima que cataliza la hidrlisis de urea a dixido de carbono y amonaco. La reaccin ocurre de la siguiente manera:(NH2)2CO + H2O CO2 + 2NH3.

Se encuentra principalmente en semillas, microrganismos e invertebrados. La ureasa es esencial en el ciclo del nitrgeno ya que la mayora de las plantas solo pueden utilizar el nitrgeno en forma de nitrato y amonio

MAPA CONCEPTUAL

MENTEFACTO

MATERIALES Y MTODOS.

CUADRO I: LISTA DE EQUIPOS UTILIZADOSMateriales y equipos requeridos

MATERIA / EQUIPO

CARACTERSTICA

Tubo de ensayoPyrex mediano

GradillasMetlica

PinzasPara bureta

Erlemeyer125 ml

Pipetas graduadas5 a 10 ml

Matraz aforado100 ml

Bao termostatadoTemperatura 37 C

Beaker400 ml

Vareta25 ml

Soporte UniversalMetlico

MuestrasSuelo, forraje, harina

CUADRO II: LISTA DE REACTIVOS UTILIZADOSReactivos a utilizar

REACTIVOSFORMULACONCENTRACION

Clorur de mercurioHgCl21%

cido ClorhdricoHCI0,1N

Clorur de SodioNaCl1%

UreaH2NCONH0,25M

UreasaEn Buffer0,5%

PROCEDIMIENTO: Extraccin y solubiliza ion de ureasas en harina suelos o forraje (mtodo salting out): peso de la muestra +/- 1g, 10ml de NaCl 1 % en un tubo de centrifuga, agitar por 5 minutos, centrifugar a 3500 mpr por 5 minutos, el precipitado se descarta, tomar el sobrenadante y medir Vf = VS, rotular tubos de ensayo: EHAU (extracto de harina para actividad ureasica), ESAU ( extracto de suelo para actividad ureasica, EFAU( extracto de forraje para actividad Ureasica). CUANTIFICACIN DE LA AU: mezclar los reactivos como indica la tabla de la gua en la pgina 5. TITULACIN: tara y alistar montaje y enrazar la ureta con HCl 0.1 N, tomar 3 ml de B en Erlenmeyer con 3 gota de indicador tashiro, color azul verdoso prueba positiva para ion NH4. Titular B hasta color rosado violaceo (prueba positiva para ion NH4, registrar en tabla de datos ml de HCl gastados, repetir procedicmiento anterior con ST y las muestras.EN LABORATORIO Peso muestras: Wm; Extraccin con NaCl 1%; Centrifugacin; Filtracin; medida sobrenadante: Vs; Titulacin con HCl; Registro de mL gastados: VHCl; Tabla de datos

Muestras/TubosIndicadores

Wm(g)Vf(mL)V HCI(mL)

Suelo

Harina

Forraje

Standar

Blanco

Tipo de muestras analizadasOrigen, ubicacin, geografa, regin,

RESULTADOS ESPERADOS: La actividad de la enzima ser mayor en el suelo, intermedia en forrajes y menor en la harina, igualmente con la cantidad de HCl 0.1 N gastado.

GLOSARIO:

RBE: Reaccin Bioqumica Enzimtica, sigue cinemateca Michaelliana AU: Actividad ureasica: velocidad con que la ureasa hidroliza la urea, hasta convertirla en Amonio y gas carbnico NNP: Nitrgeno No proteico: Nitrgeno presente en molculas orgnicas como la urea e inorgnicas como Amonio y el Nitrato (NO3-) Urea

LABORATORIO 2

Ttulo de la prctica: Carbono orgnico, materia orgnica y capacidad amortiguadora de suelos

INTRODUCCION

El suelo es un mezcla heterognea y contiene componentes orgnicos e inorgnicos, con capacidad amortiguadora, que es el potencial qumico que tienen los sistemas edficos para regular y controlar su pH, cuando son sometidos a procesos de acidificacin y alcalinizacin; esta regulacin se da por la presencia de sistemas amortiguadores biolgicos, de la materia orgnica e inorgnica del suelo.

MATERIALES Y MTODOS.

Materiales & equipos requeridos

Material / Equipo Caractersticas Material / Equipo Caractersticas

Erlenmeyer De 125mL Erlenmeyer De 125mL

Pipetas graduadas De 10mL Pipetas graduadas De 10mL

Esptula metlica Esptula metlica

Probeta graduada De 100mL Probeta graduada De 100mL

Bureta De 25mL Bureta De 25mL

Soporte universal Metlico, con pinza para bureta. Soporte universal Metlico, con pinza para bureta.

Beaker De 250mL Beaker De 250mL

Potencimetro Resistor cuyo valor de resistencia es Variable. De esta manera, se puede controlar la intensidad de corriente que fluye.

Equipo de titulacin Bureta y un matraz Erlenmeyer. Equipo de titulacin Bureta y un matraz Erlenmeyer.

Balanza analtica Balanza analtica

EspectrofotmetroSirve para medir, en funcin de la longitud de onda, la relacin entre valores de una misma magnitud fotomtrica relativos a dos haces de radiaciones y la concentracin o reacciones qumicas que se miden en una muestra

Celdas espectrofotomtricas

EmbudosEl embudo es un material empleado para canalizar lquidos y materiales gaseosos granulares en recipientes con bocas angostas.

Papel filtroPapel que se corta en forma circular y se introduce en un embudo de filtracin, con el fin de ser filtro para las impurezas insolubles y permitir el paso a la solucin a travs de sus poros

Muestras de sueloFraccin de suelo

REACTIVOS A UTILIZAR

REACTIVOFROMULACONCENTRACION

cido sulfricoH2SO4Concentrado

Dicromato de potacio, 1NK2Cr2O7 1N

cido fosoforicoH3PO4

DifelinaminaC12H11N

Hidroxido de Sodio 0, 1NNaOH 0 1N

cido Clorhidrico 0, 1NHCL 0 1N

FenolftaleinaC20H14O4

Agua destiladaH2O

Solucion Bufer fosfato

PROCEDIMIENTO

En Campo Se deben muestrear 500 g de suelo

En laboratorio Carbono Orgnico (CO), Mtodo de titulacin volumtrica Carbono Orgnico (CO), Mtodo Espectrofotomtrico Capacidad amortiguadora , Mtodo Potenciomtrico

DIAGRAMA DE FLUJO

Datos para determinacin de carbono orgnico, mtodos volumtricos y espectrofotomtricos

Muestras Peso (Wm) VFeSO4 Absorbancia (A)

M1

M2

Blanco (B)

Datos pontenciomtricos para capacidad amortiguadora de suelos

MuestrasPeso (Wm)Volumen(mL)pH1pH2

Suelo 1

Suelo 2

Agua Destilada

Solucin Buffer

RESULTADOS ESPERADOS:

Hallar los valores de carbono orgnico, materia orgnica y Nitrgeno total en las muestras estudiadas. Hallar los valores de capacidad y potencial amortiguador de las muestras analizadas

LABORATORIO 3

Ttulo de la prctica: Determinacin de carbohidratos no estructurales, en forrajes, por el mtodo de fenol-cido sulfrico INTRODUCCIN

La catalasa en una enzima que la podemos encontrar en muchos organismos vivos, y cataliza la reaccin de descomposicin del perxido de hidrgeno en agua y oxgeno. En esta prctica, la actividad de catalasa se determinar por el mtodo permanganomtrico, en el cual se titula el perxido residual, es decir, el que no particip en la RBE, con una solucin de permanganato de potasio (KMnO4) de concentracin conocida MENTEFACTO DIAGRAMA CONCEPTUAL

MATERIALES Y EQUIPOS

MATERIA / EQUIPO

CARACTERSTICA

Soporte universalMetlico con pinzas para bureta

Pipeta GraduadaDe 5 y 10 ml

Probeta GraduadaDe 100 ml

BeakerDe 400 ml

Tubos de ensayoCon gradilla

ErlemeyerDe 125 ml

BuretaDe 25 ml

REACTIVOS A UTILIZAR

REACTIVOFROMULACONCENTRACION

Buffer fosfatoH2O20,03 M

cido sulfricoH2SO42N

Permanganato de fosfatoKMnO40,01 M

PROCEDEMIENTO

EN CAMPO:

Se toman frutas, verduras y suelos concentrados en muestras picadas o pulverizada (2g) para determinar los extractos de las mismas para la catalasa.

EN LABORATORIO:

Wm, centrifugacin, filtracin, Vf, agitacin, rotulacin y determinacin de extracto para catalasa.

ESQUEMA

Muestras /tubos Indicadores Wm (g) Vf (mL) VKMnO4 (mL)

Suelo

Harina

Forraje

Verdura

Blanco

Tipo de muestras Analizadas

Origen, ubicacin geogrfica, regin, agro climatologa

RESULTADOS ESPERADOS: Determina la cantidad de carbohidratos totales No estructurales, basndose en su contenido de almidones hidrolizables y azcares solubles.

GLOSARIO

ESPECTROFOTMETRO: Instrumento usado en el anlisis qumico que sirve para medir, en funcin de la longitud de onda, la relacin entre valores de una misma magnitud fotomtrica relativos a dos haces de radiaciones y la concentracin o reacciones qumicas que se miden en una muestra.

TRANSMITENCIA: Es una magnitud que expresa la cantidad de energa que atraviesa un cuerpo en la unidad de tiempo (potencia).

ABSORBENCIA: Es la cantidad de intensidad de luz que absorbe la muestra.

BIBLIOGRAFIA

Granados, J.,(2010),Modulo Bioqumica Metablica, Unidad 2,cap 2; ECAPMA; UNAD Granados, J.,(2010),Protocolo prcticas de laboratorio, Paginas 3-8; ECAPMA; UNAD Granados., J; Garca, J.,(2000),Fsico-Qumica Aplicada; Cap 11, Ed Antropos, Bogot, Colombia

http://amortiguadoresbiologicos.blogspot.com/ es.wikipedia.org/wiki/Compuesto_orgnico www.wordreference.com/definicin/heterogneo

http://es.wikipedia.org/wiki/Absorbancia

http://es.wikipedia.org/wiki/transmitencia

ERNESTO CARLOS MARTELO DIAZ CCAV: SIMON BOLIVAR, CARTAGENAemartelo@unadvirtual.edu.co