Práctica “Efecto de antibióticos sobre colonias de microorganismos”
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Universidad Nacional Autónoma de México
Escuela Nacional Preparatoria Plantel Núm. 2
“Erasmo Castellanos Quinto”
Práctica
“Efecto de antibióticos sobre colonias de microorganismos”
Integrantes del equipo:
Escorcia Márquez Heber Betsabe
García Basilio Jesús Adrián
Hernández Rosales Edgar Ricardo
Martínez del Castillo Ashley Alejandra
Grupo: 600c
Profesor: Pablo González Yoval
Fecha de entrega: 29-Noviembre-2011
Asignatura: Temas Selectos de Biología
INTRODUCCIÓN:
Marco Teórico.
Microorganismos.
La microbiología es una rama de la biología que estudia a los seres
microscópicos, también llamados microorganismos.
Los microorganismos existen como células independientes o, en algunos
casos, formando agrupaciones o colonias. En ellos, las células, ya sean
aisladas o unidas, son todas equivalentes y no presentan ninguna
especialización funcional. Cada una es capaz de llevar a cabo todos los
procesos vitales, como el crecimiento, la respiración y la reproducción, así
como de responder a los estímulos del ambiente y de modificarlo. Los
microorganismos tienen una extensa distribución taxonómica, incluyen a
hongos y bacterias, que son los más reconocidos (García, 1995).
Hongos.
Los hongos son organismos eucariotas, por lo que poseen núcleos verdaderos,
así como todas las estructuras internas características de estas células.
Poseen, además, una pared gruesa, semejante en grosor y en composición
química a la pared de las células vegetales.
Estos organismos son heterótrofos: para su nutrición, requieren de compuestos
orgánicos, y, como tales, obtienen su alimento de la materia orgánica, y
contribuyen, en gran medida, con la fertilidad de los suelos, pero también son la
causa del deterioro de alimentos, textiles y otros productos de importancia
económica. Producen, asimismo, enfermedades en el hombre, los animales y
principalmente en las plantas (García, 1995).
Bacterias.
Se considera que las bacterias son los organismos más pequeños de vida libre
existentes en la Naturaleza, ya que son capaces de crecer y reproducirse
utilizando nutrimentos del ambiente donde se encuentran.
La célula bacteriana es procariota, por lo cual es morfológicamente más
sencilla que los organismos superiores. En su exterior posee una pared celular
rígida que rodea la membrana citoplasmática y cuya función es proteger la
bacteria de daño mecánico. Internamente se encuentran el citoplasma y la
región nuclear (García, 1995).
Las bacterias presentan tres tipos morfológicos típicos: las formas esféricas,
llamadas cocos; las cilíndricas o bastoncitos, denominadas bacilos, y las que
presentan forma de espiral o resorte, llamados espirilos (Figura 1).
Fig. 1 Esquema de las principales formas de las bacterias (García, 1995)
Las células bacterianas, principalmente los cocos, presentan agrupaciones que
son características de la especie, por lo que el tipo de agrupación tiene valor
práctico en la identificación (García, 1995).
Los cocos forman diversas agrupaciones, debido a dos factores: el plano de
división celular y la tendencia de las células a permanecer unidas después de
la división. Esto da origen a patrones de agrupamiento conocidos como
estreptococos, estafilococos, tetracocos o tétradas y sarcinas (Figura 2).
Fig. 2 Diversas agrupaciones presentadas por las bacterias (García, 1995).
Antibióticos Naturales.
Se le denomina antibiótico a cualquier compuesto químico utilizado para
eliminar o inhibir el crecimiento de organismos infecciosos tanto en seres
humanos como en animales. Los antibióticos son elaborados por seres vivos:
plantas, animales, bacterias y hongos. Por lo que se puede decir que un
antibiótico puede definirse como una sustancia derivada de un organismo vivo,
generalmente un microorganismo o una modificación química de la misma, que
inhibe la reproducción, crecimiento o incluso destruir otros microorganismos y
células anormales (Cruz, 2004).
Los antibióticos naturales son aquellos que no han sufrido modificaciones
dentro de un laboratorio y que se encuentran dentro de una gran variedad de
alimentos como lo son las frutas y las verduras, las propiedades de estos
antibióticos naturales han sido conocidas desde la antigüedad y han llegado a
ser una alternativa, ya que son fáciles de hacer, por lo que se pueden llevar a
cabo de manera casera. Otra de las ventajas de los antibióticos naturales es
que no son perjudiciales en comparación con los antibióticos artificiales, es
decir, los que han sido desarrollados en un laboratorio, e inclusive ayudan a
reforzar nuestras defensas y por consiguiente tener una mejor salud
(Cruz, 2004).
Algunos ejemplos de antibióticos naturales pueden ser el ajo y la cebolla, que a
continuación se explican.
Ajo.
Ante el éxito comercial de la penicilina durante los años 40, los científicos se
dedicaron a buscar otros enemigos naturales de las bacterias que pudieran
convertir en medicamentos. De hecho, en 1858 Louis Pasteur había observado
que las bacterias morían al ser expuestas a los efectos del ajo. En 1944,
Chester J. Cavallito aisló un antibiótico potente del ajo: la alicina. Pero la alicina
demostró ser tan esquiva y tener un ciclo de vida tan corto que fue imposible
fabricar un fármaco con ella. Es preciso administrarla en su empaque original:
el diente de ajo crudo (Carper, 1994).
El ajo es uno de los agentes antibacterianos más fuertes, complejos y de
amplio espectro que nos ofrece la naturaleza. Los experimentos demuestran
que el ajo mata o incapacita a por lo menos setenta y dos bacterias infecciosas
causantes de la disentería, el botulismo, la tuberculosis y la encefalitis, entre
otras enfermedades (Carper, 1994).
Cebolla.
También la cebolla es un antibiótico y antiséptico potente, y se utilizó para
tratar las infecciones de los soldados rusos heridos durante la Segunda Guerra
Mundial (Carper, 1994).
Esta verdura aloja en su interior un aceite esencial que contiene una sustancia
volátil llamada alilo, con propiedades bactericidas y fungicidas. Contiene
componentes minerales como calcio, magnesio, sodio, potasio y fósforo. Las
propiedades antibacterianas de la cebolla se han visto aumentadas debido a su
uso anti-fúngico.
Ciprofloxacino.
Posee una cobertura de amplio espectro contra las bacterias grampositivas y
gramnegativas. El uso oftálmico inicial estaba destinado para el tratamiento
contra las infecciones de la cornea y conjuntivales; sin embargo, también
ganaron amplia aceptación en la profilaxis de la endoftalmitis bacteriana
después de la cirugía intraocular (Ashok, 2007).
JUSTIFICACIÓN:
Al desarrollarse esta práctica, se pretende aplicar los conocimientos adquiridos
en clase de manera teórica, se realizará una práctica sencilla para ejemplificar
la elaboración de medios de cultivo con base en caldo de res y agar,
posteriormente crecerán colonias de diferentes microorganismos, con el fin de
identificarlos, y ver el efecto de los antibióticos naturales (Ajo y/o cebolla) y un
antibiótico artificial (Ciprofloxacino) sobre ellos.
OBJETIVO:
Comprobar la efectividad de los antibióticos naturales sobre cultivos de
colonias de microorganismos.
HIPÓTESIS:
Si creamos medios de cultivo para el desarrollo de micro-organismos y en
unas áreas [del cultivo] colocamos antibióticos (artificial o natural), entonces no
se reproducirán microorganismo en esas áreas, al menos que el
microorganismo sea resistente al antibiótico.
METODOLOGÍA:
1) Se colocan 300 mL de caldo de res en un vaso de precipitados de 500
mL.
2) Se pone el vaso de precipitados en la parrilla a una temperatura de
50ºC hasta que hierva el caldo.
3) Se pesan 9 gramos de carragenina y se van agregando poco a poco en
el caldo sin retirar el vaso de precipitados de la parrilla; y sin dejar de
mezclar en el caldo hasta disolver los grumos que se formen.
4) Ya que no quede ningún grumo en el caldo se cambia a un matraz
erlenmeyer que deberá ser cerrado completamente con un tapón de
algodón cubierto de cinta para evitar que se contamine.
5) Se introduce el matraz erlenmeyer en el autoclave aproximadamente 1
hora para eliminar los organismos que puedan estar en el caldo y poder
obtener un medio de cultivo puro.
6) En el cuarto donde se encuentra la campana de flujo laminar, se lleva a
cabo el proceso de colocar una capa delgada de caldo en cada caja
Petri, en este caso 10, evitando abrirla por completo y cerrándola para
evitar contaminarla.
7) Cuatro cajas se expondrán a un medio diferente para obtener
microorganismos que formaran colonias con las que trabajaremos,
mientras que otras 4 cajas Petri se dejaran en el refrigerador para evitar
su contaminación, posteriormente las 4 cajas que fueron contaminadas
se guardaran en la estufa para mantenerlas a una temperatura estable y
acelerar el crecimiento de microorganismos.
8) Una semana después se sacan las cajas Petri de la estufa y se
observan los microorganismos que en ellas crecieron en un microscopio
estereoscópico.
9) Se elige uno de los cuatro medios de cultivo contaminados para realizar
la siembra de microorganismos.
10)Posteriormente, en la campana de flujo laminar, se calienta el asa de
siembra con una lámpara de alcohol, se introduce en una sección del
medio contaminado, se raspa la colonia de microorganismos y se
siembran en las cuatro cajas Petri que estaban en cultivo puro y se
dejaron en el refrigerador.
11)Se colocan tres círculos de papel filtro en cada una de las cajas, de los
cuales el primero será mojado con el antibiótico natural, el segundo con
el antibiótico artificial y el tercero será el testigo, que sólo contendrá
agua, estos círculos se deberán ubicar en diferentes secciones de las
cajas Petri.
12) Los medios que han sido sembrados se dejaran en la estufa durante
una semana para permitir el desarrollo de las colonias de
microorganismos.
13) Se retiran los medios de la estufa y se procede a observar e identificar
las colonias que se formaron en cada medio, y posteriormente hacer el
conteo de estas colonias y en qué caso de los antibióticos tanto
naturales como artificiales y el testigo hubo un mayor desarrollo de
microorganismos. Anotar resultados.
RESULTADOS:
Como se muestra en la figura 3, los resultados aparentes muestran que el
antibiótico Natural (ajo) retraso el crecimiento de los hongos, mientras que el
antibiótico artificial aparentemente no tuvo mayor efecto sobre los
microorganismos, tal vez debido al tipo de estos (hongos) o a la baja
concentración del antibiótico. Aparentemente para un mejor registro de
resultados deben hacerse más experimentos incluyendo más cultivos de tipo
bacteriológicos.
Figura 3. Tabla de resultados de experimentacion
Fecha 18 de noviembre de 2011 22 de noviembre de 2011
Antibiótico Natural Artificial Testigo Natural Artificial Testigo
Caja 1 M M E M M
Caja 2 M M B M M
Caja 3 E M B M M B
Caja 4 E E M M E
Resultado
s
1 E
3
1 E
3 M
1 B
1 E
4 M
1 B
1 E
4 M
4 M 1 B
1 E
4 M
Contaminado por hongos
Limpio de microorganismos Contaminado un 10%-30% B
Contaminado un 31%-70% E
Contaminado un 71%-100% M
DISCUSIÓN:
Medio de cultivo 1
Hongos Verdes en 40 %
Hongos Blancos en 50 %
Hongos Naranjas 10 %
Medio de cultivo 2
Hongos Verdes en 95 %
Medio de cultivo 3
Hongos Blancos 45 %
Hongos Naranjas 55%
Medio de cultivo 4
Hongos Blancos 30%
Hongos Naranjas 70%
Al terminar la práctica y analizar los resultados pudimos corroborar el efecto que
tiene los antibióticos naturales y artificiales sobre las colonias de microorganismos
(bacterias y hongos principalmente).
En donde se coloco el antibiótico natural se desarrollo una nula cantidad de
bacterias, mientras que en el antibiótico artificial se presento un crecimiento aún
mayor, con notables diferencias en los 4 medios de cultivo, al evaluar los
resultados logramos deducir que el crecimiento anormal en los medios de cultivo se
debía a dos factores principalmente:
Primero: Tipo de bacteria, ya que unas presentaban mayor resistencia al mismo
antibiótico (natural o artificial), esto es debido a la estructura de cada bacteria, pues
como se sabe las bacterias van adquiriendo propiedades que las hace inmunes [a
los antibióticos], he ahí el porque existen diversos tipos de penicilina
(García,1995).
Segundo: Concentración del antibiótico sobre la disolución total, este fue un factor
muy importante, nuestro antibiótico natural de ajo tuvo una concentración de 50 gr
sobre 100 mL de agua, lo que ocasiono un antibiótico concentrado y eficaz,
mientras que el antibiótico artificial al ser diluido en una cantidad excesiva de agua
perdió características inhibidoras importantes, lo que ocasiono una reacción débil
frente a los microorganismos, por lo cual en los medios de cultivo existió un claro
desarrollo de ellos, (teóricamente se suponía que al ser un antibiótico de laboratorio
[artificial] tenia que ser más fuerte al natural, debido a las modificaciones que se
hacen al producirse), en cuanto a nuestros resultados obtuvimos una mejor
inhibición con el antibiótico natural coincidiendo con la descripción previa del ajo,
pues mientras se mantuvo activo el ajo evito completamente la aparición de
microorganismo, pero como se dice claramente que los antibióticos naturales tiene
un efecto de corta duración, la segunda vez que observamos los cultivos notamos
la invasión de microorganismos a el disco con antibiótico natural.
En general obtuvimos resultados buenos, pues en el área donde se deposito el
disco con agua existió una rápida y excesiva población de bacterias, se respeto los
resultados antes previstos.
CONCLUSIONES:
Los antibióticos han sido muy importantes (desde hace muchos años,
principalmente los naturales) para contrarrestar el efecto malicioso que
provocan algunos microorganismos sobre otros organismos, ocasionando
enfermedades.
De acuerdo a los resultados obtenidos en el equipo podemos concluir que:
Los antibióticos naturales presentan mejores propiedades inhibidoras
contra microorganismos, por lo tanto los antibióticos naturales son
mejores.
El efecto de un antibiótico depende de la concentración y de la cantidad
que sea depositada sobre un microorganismo, de igual manera al tipo de
microorganismo que sea aplicada (bacterias, hongos)
Es difícil aislar a un sólo microorganismo, se necesitan las condiciones
necesarias y especificas para lograrlo, ya que se contaminan los medios
de cultivo fácilmente por otro microorganismo independiente al cultivo,
llegando a dificultar el estudio del mismo.
Es muy interesante estudiar (además de importante) a los microorganismo, su
contexto histórico, sus funciones, su estructura, los tipos, los daños que
provocan (el saber como poder contrarrestarlos) y conocer que también tiene
muchos beneficios, respecto a esta práctica, que es posible comprobar
mediante la experimentación los efectos de los antibióticos sobre los
microorganismo.
BIBLIOGRAFÍA:
García, V. (1995). Introducción a la microbiología. Costa Rica: Editorial
Universidad Estatal a Distancia. Pp. 35-41,83-86.
Cruz, A. (2004). Antibióticos naturales. México: Fernández. Pp. 27-29.
Carper, J. (1994). Los alimentos: medicina milagrosa. Colombia: Norma.
Pp. 512-514.
Ashok, G. (2007). Tratamiento antibiótico. México: Panamericana. Pp.
151-152.