Platos para remoción de fosfolípidos -...

Platos para remoción de fosfolípidos

Remueve fosfolípidos

Remueve Proteínas

Sin Desarrollo de Métodos

2

Remueve proteínas de 96 muestras simultaneamente

Elimina fosfolípidos que ocasionan supresión de íones e ¡incrementa la vida útil de su columna!

No requiere Desarrollo de Métodos; un solo método para compuestos ácidos, básicos o neutros

Remueve proteínas Solvent Shielding Technology™ previene goteo del solvente orgánico permitiendo la precipitación de las proteínas dentro los pocillos del plato de remoción de fosfolípidos, Phree

Elimina fosfolípidosEl material sorbente de Phree elimina selectivamente los fosfolípidos de las muestras precipìtadas de plasma

© 2012 Phenomenex, Inc. Todos los derechos reservados.

Un método rápido, tres grandes ventajas

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2

3

Proteínas

Fosfolípidos

Analíto seleccionado

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“Se ha demostrado que los platos Phree para remoción de fosfolípidos proporcionaron > 98% de disminución de área en los picos de seis fosfolípidos que se monitorearon en plasma de rata; en comparación a una proteína de choque tradicional. Recomendamos ampliamente el uso de estos platos para alta productividad en la preparación de muestras bioanalíticas en LC-MS/MS.”

Nina Khoshaba WIL Research

3 pasos arriba de la precipitación tradicional de proteínas ..........pp. 4-5

Una mejor solución para remover fosfolípidos..............................pp. 6-7

Obvie el desarrollo de métodos .....................................................pp. 8-9

Soporte técnico .................................................................................p. 10

Información para ordenar ..................................................................p. 11

Elimine los fosfolípidos y proteínas

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1. La precipitación de proteínas no remueve fosfolípidosLos fosfolípidos endógenos son una fuente primaria para la supresión de iones y para los efectos de la matriz resultante en el trabajo bioanalítico en LC/MS. La supresión de iones causada por la presencia de fosfolípidos puede causar:

Resultados no reproducibles•

Problemas de cuantificación•

Pérdida de sensibilidad del método•

Sesgo de una matriz a otra•

3 pasos arriba de la precipitación tradicional de proteínas

Perfil total de fosfolípidosPrecipitación de proteínas vs platos Phree™ de remoción de fosfolípidos

20 4 6 8 101 3 5 7 9 11 min0

20011

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Aplic

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Aplic

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n #

2001

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Plasma extraída con Phree

Plasma con proteína precipitada

Remueva fosfolípidos selectivamente con Phree

Zoom: ~ 50 aumentos

Perfil monitoreado de fosfolípidos usando m/z 184-184

Limpieza de plasma: 100 µl de plasma más 300 µl de acetonitrilo con 1 % de ácido fórmico

Columna: Kinetex® 2.6 µm C18 100 ÅDimensiones: 50 x 2.1 mm

Nº de Parte: 00B-4462-ANFase móvil: A: Ácido fórmico en agua al 0.1 %

B: Ácido fórmico en metanol al 0.1 %Gradiente: Time (min)

0 0.515.515.5119.5

% B6095956060

Flujo: 400 µl/minDetección: Espectrómetro de masas (MS) @ 425 °C,

184 amuTemperatura: 22 °C


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Con

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Número de inyección (20 µl de Plasma)

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2. Reduce la supresión de ionesLa presencia de fosfolípidos en las muestras de plasma produce zonas de supresión de iones que tienen una directa correlación con la elución del perfil de fosfolípidos cuando se analiza en un espectrómetro de masas (MS).

3. Aumenta la sensibilidad y la vida de la columna Cuando con el tiempo aumentan los fosfolípidos, se reduce la sensibilidad de la señal del MS y el tiempo de vida de la columna.

Plasma con proteína precipitada Plasma extraída con Phree

La acumulación de fosfolípidos produce una pérdida importante en sensibilidad

Se inyectaron ~5,000 µl de plasma sin que haya una pérdida significativa de sensibilidad

Inmediartamente se observa la reducción en sensibilidad

Sensibilidad de la columna después de 250 inyecciones

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Inte

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0.2 0.6 1.0 1.4 1.8 2.2 2.6 min0.0

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0.2 0.6 1.0 1.4 1.8 2.2 2.6

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La zona de supresión es eliminada

Se observa supresión de iones

Aplic

ació

n #

2001

3

Aplic

ació

n #

2001

3

Zona de supresión

Fosfolípidos m/z 184-184

Amoxapina m/z 314-271

Dicoflenaco en plasma extraida con Phree

Dicoflenaco en plasma con proteína precipitada

La amoxapina fué infundida post-columna para establecer un perfil de supresión de iones aumentado tanto con plasma con proteína precipitada (izq.) como con plasma extraída con Phree (der.) como se puede observar Phree reduce exitosamente la supresión de iones.

Para evaluar el efecto de la acumulación de fosfolípidos, se hicieron inyecciones repetitivas de 20 µl de diclofenaco en proteína precipitada en plasma vs. diclofenaco en plasma extraída con Phree.


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Una mejor solución para la remoción de fosfolípidos

Remueve toda clase de fosfolípidosLas lisofosfatidicolinas y fosfatidicolinas contribuyen a los efectos de la matriz. Remueva toda clase de fosfolípidos usando platos Phree™ para remoción de fosfolípidos.

10 2 3 4 5 6 7 8 9 10 min0

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Aplic

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n #

2001

5

Agilent es una marca comercial registrada de Agilent Technologies, Inc. Supelco y HybridSPE son marcas comerciales registradas de Sigma-Aldrich Co.Las separaciones comparativas pueden no ser representativas de todas las aplicaciones.

Phree es más efectivo para remover fosfolípidos

Zoom ~25 aumentos


Phenomenex® Phree

Agilent® Captiva™ NDLipids

Supelco® HybridSPE®

Limpieza de plasma: 100 µl de plasma más 300 µl de acetonitrilo con 1 % de ácido fórmico




0 0.515.515.5119.5

% B6095956060




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Capacidad para fosfolípidos ampliadaEl sorbente Phree tiene una capacidad ampliada para fosfolípidos, permitiéndole cargar hasta 400 µl de plasma sin una ruptura significativa de fosfolípidos.

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Aplic

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2004

6

Waters Corporation establece que el volumen real máximo recomendado de plasma, que puede procesarse usando los platos Ostro, es de 350 µl debido a las limitaciones de volumen del pocillo. Ostro es una marca comercial de Waters Corporation. Las separaciones comparativas pueden no ser representativas de todas las aplicaciones.

Zoom ~ 40 aumentos


Phenomenex® Phree™

Waters® Ostro™

Limpieza de plasma: 400 µl de plasma más 1.2 ml de acetonitrilo con 1 % de ácido fórmico




0 0.515.515.5119.5

% B6095956060




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Sugerencia

1. Preparación El volumen del solvente orgánico dentro los pocillos del plato de remoción de fosfolípidos Phree™ debe ser de 3 a 4 veces el volumen de la muestra de plasma. El volumen de solvente orgánico no debe exceder 1.2 ml. Vea abajo la lista de solventes orgánicos recomendados.

2. Añadir De 25 a 400 µl de plasma directamente al solvente orgánico en cada pocillo del plato Phree de remoción de fosfolípidos, mantenga una proporción final de 3:1 a 4:1 (solvente:plasma).

3. Vortex* Durante 2 minutos a la velocidad máxima posible, cuidando de no permitir contaminación cruzada. La muestra puede permanecer hasta 25 minutos.

4. Filtrado Centrifuga: Coloque el plato Phree de remoción de fos-folípidos arriba del plato de recolección y centrifugue a 500g por 5 min. O hasta que el filtrado sea recoletado.

Vacío: Ponga el plato Phree de remoción de fosfolípidos sobre un adecuado manifold de 96 pocillos de muestra o un robot. Asegurese que el plato de 96 pocillos está ubicado adentro del manifold o bajo el plato Phree de remoción de fosfolípidos. Hacer vacío a 2-7 pulg. de Hg por 5 min. o hasta que se recolecte el filtrado.

Presión positiva: Coloque plato Phree de remoción de fosfolípidos arriba del plato de recolección y aplique de 2 a 5 psi de presión usando un manifold de presión positiva.

* Cuando se use un instrumento de manejo de líquidos o automatización, deben usarse ciclos de aspiración/dispensa para promover mezclado y la precipitación en el extremo. Esto va a asegurar la precipitación y filtración total. No es necesario hacer vórtice cuando se lleva a cabo el mezclado en la punta.

ACNor

MeOH

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1

Solventes orgánicos recomendadosSolvente Volumen de solvente Volumen de plasma

Acetonitrilo con 1 % de ácido fórmico 300 µl 100 µl

Metanol con 1 % de ácido fórmico 400 µl 100 µl

Un solo método para compuestos ácidos, bases y neutros

Los platos de recolección y la esterilla Phenomenex ajustan perfectamente con plato Phree™ de remoción de fosfolípidos. Vea la lista completa de platos de recolección y las esterillas de sellado en la página 11.

Sin desarrollo de métodos

o


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Alta recuperación de analitos objetivoEl protocolo general Phree se ha desarrollado para producir altas recuperaciones de ácidos, bases, y neutros al mismo tiempo que remueve toda clase de fosfolípidos.

Absoluta recuperación de ácidos, bases y neutros

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Ácidos

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Los datos de recuperación se obtuvieron calculando las recuperaciones absolutas promedio de los analitos extraidos con 3 platos Phree


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Nuestros especialistas en preparación de muestras están listos para asistirle

Nivel 1Contacte a alguno de nuestros dedicados especialistas en preparación de muestras para asistencia inmediata en desarrollo de métodos.

Nivel 2Envíe su muestra a nuestro grupo de servicios ana-líticos para desarrollo de métodos personalizado. Visite www.phenomenex.com/PhenoLogix para más información.

Dos niveles de soporte en el desarrollo de métodos

“El soporte técnico inmediato es muy importante para nosotros, agradecemos el apoyo constante de Phenomenex.”

Allena Ji Wyeth


Comience ahora:Hable con su especialista en preparación de muestras:

Por teléfono: 310-212-0555 o contacte a su representante local de Phenomenex

Por correo electrónico: [email protected]

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Sugerencia

Para más información acerca de los productos Phenomenex para preparación de muestras, por favor visite:

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Nº de parte: Descripción Unidad Precio8E-S133-TGB Platos Phree de remoción de fosfolípidos, de 96 pocillos 2/caja

Platos de recolección (pocillos profundos, polipropileno)AH0-7192 Plato de recolección Strata® de 96 pocillos de 350 µl/pocillo 50/paq.AH0-7193 Plato de recolección Strata de 96 pocillos de 1 ml/pocillo 50/paq.AH0-7194 Plato de recolección Strata de 96 pocillos de 2 ml/pocillo 50/paq.AH0-8635 Plato de recolección Strata de 96 pocillos de 2 ml cuadrado/redondo-cónico 50/paq.AH0-8636 Plato de recolección Strata de 96 pocillos de 2 ml, redondo/redondo, 8mm 50/paq.AH0-7279 Plato de recolección Strata de 96 pocillos de 1 ml/pocillo redondo, 7mm 50/paq.

Esterillas de selladoAH0-8597 Esterillas de sellado, perforables de 96 pocillos cuadrados, de silicón 50/paq.AH0-8598 Esterillas de sellado, precortadas de 96 pocillos cuadrados, de silicón 50/paq.AH0-8631 Esterillas de sellado, perforables de 96 pocillos redondos de 7 mm, de silicón 50/paq.AH0-8632 Esterillas de sellado, precortadas de 96 pocillos redondos de 7 mm, de silicón 50/paq.AH0-8633 Esterillas de sellado, perforables de 96 pocillos redondos de 8 mm, de silicón 50/paq.AH0-8634 Esterillas de sellado, precortadas de 96 pocillos redondos de 8 mm, de silicón 50/paq.AH0-7362 Cinta de sellado 10/paq.

Manifold de vacíoAH0-8950 Manifold Strata para placa de 96 pocillos, con medidor de vacío c/u

Términos y Condiciones Sujeto a los términos y condiciones estándar de Phenomenex los cuales pueden consultarse en: www.phenomenex.com/TermsAndConditions.

Marcas ComercialesStrata y Kinetex son marcas comerciales registradas de Phenomenex. Phree y Solvent Shielding Technology son marcas comerciales de Phenomenex. Captiva es una marca comercial de Agilent Technologies, Inc. Supelco y HybridSPE son marcas comerciales registradas de Sigma-Aldrich Co. Waters es una marca comercial registrada, y Ostro es una marca comercial de Waters Corporation.

Límite de ResponsabilidadPhenomenex no está afiliado en forma alguna con Agilent Technologies, Inc., Sigma-Aldrich, o Waters Corporation.Las separaciones comparativas pueden no ser representativas de todas las aplicaciones.

Las opiniones vertidas en los testimonios de los clientes no representan necesariamente las de la compañía u organización.

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Si los platos de remoción de fosfolípidos Phree no le dan cuando menos los mismos o mejores resultados que sus platos de remoción actuales, envíenos sus datos comparativos dentro los 45 días siguientes a su compra y quédese con los platos de remoción de fosfolípidos Phree ¡totalmente GRATIS!


www.phenomenex.comLos productos Phenomenex están disponibles en todo el mundo. Parar el distribuidor en su país, contacte al Departamento Internacional de Phenomenex USA, en: [email protected]


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Alemania 06021-58830-0 06021-58830-11 [email protected]

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Austria 01-319-1301 01-319-1300 [email protected]

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Canada(800) 543-3681 (310) 328-7768 [email protected]

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Dinamarca4824 8048 +45 4810 6265 [email protected]

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Estados Unidos(310) 212-0555 (310) 328-7768 [email protected]

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Finlandia09 4789 0063 +45 4810 6265 [email protected]

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Francia01 30 09 21 10 01 30 09 21 11 [email protected]

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India 040-3012 2400 040-3012 2411 [email protected]

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Irlanda 01 247 5405 +44 1625-501796 [email protected]

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Italia 051 6327511 051 6327555 [email protected]

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Luxemburgo+31 (0)30-2418700 +31 (0)30-2383749 [email protected]

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México001-800-844-5226 001-310-328-7768 [email protected]

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Noruega 810 02 005 +45 4810 6265 [email protected]

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Nueva Zelanda09-4780951 09-4780952 [email protected]

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Países Bajos030-2418700 030-2383749 [email protected]

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Puerto Rico (800) 541-HPLC (310) 328-7768 [email protected]

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Reino Unido 01625-501367 01625-501796 [email protected]

t: f:

Suecia 08 611 6950 +45 4810 6265 [email protected]

t: f:

Todos los demas países: Oficinas Corporativas en USA (310) 212-0555 (310) 328-7768 [email protected]

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