PLAQUETAS SANGUINEAS Y MEGACARIOCITOS CIRCULANTES EN LAS ENFERMEDADES MIELOPROLIFERATIVAS CRONICAS.

OBSERVACIONES ULTRAESTRUCTURALES E HlSTOQUlMlCAS

JORGE E. MALDONADO M.D., Ph.D., F.A.C.P. (Director, Laboratorio de microscopía electrónica hematológica y Consultor en las Secciones clínicas y de investigación de la división de Hematología del Departamento de Medicina de la Clínica Mayo. Profesor Asociado de Medicina, Escuela de Graduados y Facultad de Medicina

Mayo, Universidad de Minnesota Rochester, Minnesota)

Bajo el término de enfermedades mieloproliferativas se incluyen varios trastornos que aunque en sus formas clásicas tienen características muy pro- pias que los separan claramente unos de otros poseen suficientes bases co- munes e interrelaciones, así como for- mas de transición, que justifican el que se les considere como parte de un es- pectro nosológico. Se clasifican como trastornos mieloproliferativos crónicos la policitemia rubra vera, la leucemia granulocítica crónica, la trombocitemia primaria o idiopática y la mielofibrosis con metaplasia mieloide agnogénica (MALDONADO, 1968).

En nuestro laboratorio nos ocupa- mos en años recientes en estudiar las alteraciones ultraestructurales en los trastornos proliferativos medulares. Re- portamos aquí el resultado de ese aná-

lisis en cuatro pacientes con enferme- dad mieloproliferativa crónica en lo que hace relación a los hallazgos en sangre periférica, específicamente las alteraciones morfológicas de las pla- quetas sanguíneas y de las células nu- cleadas de esta línea megacariocítica - plaquetaria.

OBSERVACIONES CRONICAS

Caso núm. l. -Paciente de 65 años de edad seguido por un año y medio. El examen físico demostró una hepatoesplenomegalia de grado pro- minente. La médula ósea aunque hi- percelular en varias ocasiones mostró aumento definitivo de tejido fibroso. Aunque en principio se hizo el diag- nóstico de metaplasia mieloide agno-

(") Coniunicación patrocinada por el profesor Ramón Sarr6 (Acad6mico Numerario) y leida por el profesor Agustfn Gómez (Académico Numerario) en la sesión del día 16-X-73.

3 66 ANALES DE MEDICINA Y CZRUGZA Vol. LIII - N . O 234

génica el hallazgo del cromosoma Phl o Filadelfial sugirió la posibilidad de una fo,rma transicional hacia una leu- cemia granulocítica crónica.

En la sangre periférica se observó un cuadro leucoeritroblástico y la ,presen- cia de poiquilocitos en gota. De parti- cular interés fue la presencia de un nú- mero creciente de células identificadas como megacariocitos circulantes así co- mo de plaquetas de morfología anor- mal que discutiremos más adelante en detalle.

Caso núm. 2. -Paciente de 60 años de edad con anemia y tromboci- tosis de 6 años de duración. En 1968 se hizo el diagnóstico de mielofibrosis y metaplasia mieloide del bazo. Como el anterior, este paciente también ha mostrado crecimiento marcado del ba- zo y del hígado y un cuadro leucoeri- troblástico en sangre periférica con presencia igualmente de megacariocitos circulantes. La población plaquetaria ha sido heterogénea con formas apa- rentemente normales mezcladas con formas gigantes y displásticas. El aná- lisis cariotípico medular fue negativo para el cromosoma Phl. Ese estudio corroboró las observaciones clinicas sugestivas de la presencia de un sín- drome de Klinefelter.

hasta el nivel blástico. El diagnósti- co de leucemia granulocítica crónica (LGC) recibió corroboración adicio- nal en el estudio citogenético el cual mostró la presencia de cromosoma Fi- ladelfia (Ph,). Como en los otros pa- cientes se observaron megacariocitos y plaquetas de morfología atípica en la sangre circulante.

Caso núm. 4. - Este paciente fue examinado por primera vez en 1965. Tenía entonces 39 años y presentaba un cuadro clínico y de laboratorio típi- co de mielofibrosis con metaplasia mie- loide esplénica. Mostró un cuadro leu- coeritroblástico así como trombocitosis con plaquetas de morfología anormal y megacariocitos circulantes. En 1971 se sometió a esplenectomía buscando alivio de los síntomas mecánicos cau- sados por el bazo que llenaba gran parte de la cavidad abdominal. Tanto las plaquetas como los megacariocitos circulantes aumentaron notablemente después de la esplenectomía. Hacia el término final de su enfermedad, du- rante la primera parte de 1972 alcanzó a tener 70.000 megacariocitos por mm3 de sangre. Este caso probablemente puede ser apropiadamente clasificado como una forma de leucemia megaca- riocítica que hizo su aparición en el

Caso núm. 3 . - Miijer de 24 años curso evolutivo de una mielofibrosis

de edad quien vino a consulta en oc- Con metaplasia mieloide esplénica. En

tubre de 1971 enviada con un diag- U i i estudio citogénico directo de la san-

nóstico de leucemia granulocitica cró- gre periférica no se encontró el cromo- nica. El examen físico revelo la presen- soma Filadelfial (Phl). Ni en este caso cia de esplenomegalia. Se confirmó una ni en los otros se demostró una línea leucocitosis marcada con inmadurez poliploide.

Octubre-Diciembre 1973 ANALES DE MEDICINA Y CIRUGIA 367

MATERIAL Y METODOS

En todos los pacientes y en un gru- po normal de control se obtuvieron extendidos sanguíneos. Para la obser- vación rutinaria con microscopia de luz se usó la coloración de Wright y se empleó un Fotomicroscopio Zeiss. Para el estudio ultraestructural se as- piró sangre por punción venosa ante- cubital. Como anticoagulantes se usa- ron heparina o citrato de sodio y oca- sionalmente solución ACD fórmula A.

Por medio de centrifugación dife- rencial se separaron el plasma rico en plaquetas (PRP) y un concentrado leu- cocitario. En este último se encontra- ron con mayor frecuencia las plaquetas de tamaño gigante y las formas plaque- tarias nucleadas o megacariocíticas. En algunas preparaciones se indujo agrega- ción espontánea de las plaquetas y de las formas nucleadas megacariocíticas mediante centrifugación repetida. Se controló la centrifugación celular por medio de microscopia de fase o de in- terferencia (sistema óptico de No- marski). Para la fijación inicial se usó Glutaral- dehido (Sabatini, 1963) en concentra- ciones del 1,25 al 3 % en un tampón de fosfato de 0,l M. Después de va- rios lavados por resuspensión en la misma solución tampón se hizo una segunda fijación en ácido ósmico al 2 % disuelto en el mismo tampón o en solución salina. Métodos tradicio- nales de deshidratación e inclusión en epón 812 fueron empleados en los pasos subsiguientes (LWFT, 196 1).

Como los resultados preliminares

del estudio ultraestructural revelaron alteraciones definitivas en el sistema tubular plaquetario se hizo uso de la técnica de la peroxidasa (BRETON - GORIUS y GUICHARD, 1972 y WHITE, 1972) para definir más exactamente el tipo de anomalía tubular existente. Concentrados plaquetarios y leucocita- rio obtenidos de la manera previamen- te descrita y fijados en glutaraldehido o en glutaraldehido-paraformaldehido se incubaron en el medio de GRAHAM y KARNOVSKY siguiendo las modifica- ciones de BRETON - GORIUS y GUI- CHARD y WHITE a Ph 6, 7.6 y 9.0. Como controles se usaron muestras incubadas en medios sin Diamino-ben- cidina o sin agua oxigenada. Luego de la incubación se continuó el pro- ceso de rutina ya descrito.

De los tejidos incluidos en plástico se hicieron cortes gruesos (1 y) para orientación. Esos cortes se colorearon con azul de metileno o azul de tolui- dina. Cortes ultrafinos (aproximada- mente 700 A) fueron obtenidos con ultramicrótomo LKB 111 (Estocolmo, Suecia) dotado de cuchillas de diaman- te (Dupont, Delaware EE.UU. o IVIC, Caracas, Venezuela). A excepción de parte del material preparado para la reacción de la peroxidasa los cortes fueron observados después de ser con- trastados con coloración doble con ci- trato de plomo y acetato de uranilo. Se empleó un microscopio electrónico Hitachi HU - 12 a un voltaje de ace- leración de 50 k v y empleando una apertura en la lente objetiva de 30 a 40 micras. La impresión original se

368 ANALES DE: MEDICINA Y ClRUGlA Vol. LIII - N.O 234

hizo en placas de vidrio Kodak de alto línea así como formas inmaduras mo- contraste que se procesaron fotográfi- nonucleadas de difícil clasificación. El

citoplasma de estos megacarioblastos

I (fig. 4) corresponde en su apariencia a las "plaquetas azules" mostrando

RESULTADOS con frecuencia pseudópodos. La cro- matina nuclear es fina y se pueden dis-

Haremos alusión aquí únicamente a cernir varios nucléolos. Solamente la aquellos cambios directamente perti- correlación con el análisis ultraestmc- nentes a la 1íIIea m e g a ~ a r i ~ ~ í t i ~ a - pla- tural permitió con certeza colocar es- quetaria. tos elementos dentro de la línea mega-

cariocítica. Microscopia de luz: En los 4 pa-

cientes y a lo largo de su curso de ob- servación se encontraron los mismos ULT-STRUCTURA cambios variando solamente en el gra- do cuantitativo. La alteración morfo- pbquetas: las figuras y 6 lógica plaquetaria predominante con- se demuestra la estructura normal pla- sistió en la presencia de formas gigan- quetarja. ~1 examen con el microsco~ tes Y de un 'olor ("plaquetas puso en clara eviden- les"). Estas formas en cia alteraciones profundas en la estruc- podía predecirse que carecían de la tura de las plaquetas, en los pacientes granulación característica de las pla- con enfermedad mieloproliferativa cró- quetas ("granulómero" de la nomen- nica que estudiamos. Esos cambios clatura antigua). El dihmetro plaque- consistieron principalmente de: tario alcanzaba a 20 (fig. 1). Aniso- J

citosis y poiquilocitosis plaquetaria eran fenómenos evidentes. En los ex- 1. Presencia de formas gigantes y tendidos corrientes en las preparacio- esferoides. nes frescas sobre vidrio examinadas sin

2. Alteración en el número o en coloración se observaron con frecuen-

la proporción relativa de las cia grandes pseudópodos en la peri- feria de las plaquetas (fig. 2). Así como distintas organelas.

áreas de densidad aumentada hacia el centro de la plaqueta (fig. 3). a) Disminución marcada o au-

El espectro de células nucleadas que sencia de gránulos.

se clasificaron como megacariocitos es b) Aumento en el número de amplio. Incluye fragmentos megacario- mitocondrias. cíticos típicos, con elenientos cuyo nú- cleo posee el aspecto caractenstico de e) Hipertrofia del sistema tu-

las formas medulares maduras de esa bular denso.

Octubre-Diciembre 1973 ANALES D E MEDICINA Y CIRUGIA 369

Figur~i l. - E\tcii~lido de sangre periférica. Obsérvese 1 ; ~ anisocitosis p!;iquetaria pero particiilarmente Iir presencia de formas gigantes de iin color azul. Coloracicín de Wright.

Aumento 1.200 X .

E'igiira 2. - E\tendiclo clc s:ingre pcrifcrica. En el centro del campo iiay iinn plaqiieta gigante (aprosiniad;iniente 16 micras de tliámelro) con pseudópodos perifCricos. Coloración

de Wright. Aumento 1.200 X .

Figura 3. -Extendido de sangre perifcrica. E\l;i pl;iqueta azul demiic\tr;i iin área de densidad aumentada hacia su parte central. Nóte\e qiie no se disciernen gránulos. Colo-

ración de Wright. Aumento 1.200 X .

Figura 4. -Extendido de sangre periférica. Obsérvese el número ahiintlante tle pl:iqiietas azules. Las células nucleadas son pleomórficas e inmaduras. Hay formas binucleadas y mitóticas. Nótese la similitud del citoplasma de estas células con las plaquetas aziiles.

Coloración de Wright. Aumento 480 X .

Octiihre-Diciembre 1973 ANALES DE MEDIC'INA Y C I R U G I A 371

Figiira 5. - Plaqueta de apariencia ~iltraestruct~iral normal. Corte perpendicular al plano eciiatorial de una forma discoide. Los microtúhulos (Mt) aparecen en corte transversal en los polos. Se ohservan gránulos (G), mitocondrias (M) y elementos canaliculares claros del sistema canicular ahierta (sca). Los elementos tiibulares densos (+) aparecen en la

cercanía de los microtúbulos. Aumento 36.000 X .

3 72 ANALES DE MEDICINA Y CIRUGIA Vol. LIII - N." 234

Figura 6. - Grnpo de plaquetas normales seccionadas en distintos planos: perpendicular ( 1 ) y cuasiecuatorial (2). Nótese en esta última la banda de microtúbulos en la periferia.

Aumento 21.000 X.

3. Inmadurez:

a) Presencia de retículo endo- pidsmico granular.

b) Formas nucleadas.

e) Fragmentos megacariocíti- cos con membranas de de- marcación.

4 La presencia frecuente de Aparato de Golgi, de cen- tríolos y formas mitóticas.

Un número elevado de las plaquetas alcanzaba diámetros de 15 a 20 ~ l , y en contraste con la configuración nor- mal discoide las formas esferoides se

encontraban frecuentemente. La ana- tomía interna se demostraba trastor- nada cualitativa y particularmente cuantitativamente. Así se observaron formas constituidas por fragmentos ci- toplásmicos muy pobres o caso caren- tes de organelas y solamente recono- cidas como plaquetas por la presencia ocasional de estructuras características de esos elementos como los microtúbu- los o del sistema tubular denso o ca- nalicular abierto (figs. 7 y 8). En al- gunas plaquetas uno de estos elemen- tos, más frecuentemente el sistema tu- bular denso, aparecía francamente hi- pertrófico y displástico. En otros casos eran las mitocondrias las que aparc-

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Antibiótico y quimioteráplco de las infecciones amigdalares en la INFANCIA COMPOSICION POR SUPOSITORIO

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C ANTIN

Octubre-Diciembre 1973 ANALES DE MEDICINA Y CIRUGIA 373

Figura 7. - Plaqueta gigante (diámetro de 5 micras) y aparentemente esferoide. Hay una notable pobreza de gr5nulos (g) y relativa abundancia de los sistemas tubulares. Se observa

iin microtúbulo (+). Aumento 25.000 X.

374 A N A L E S DE MEDICINA Y ('IRIIGIA Vol. I J I I - N." 234

Figura 8 . -Otra forma gigante (diámetro de 5 n1icr:is) y también esferoide. Se observan unas pocas mitocondrias ( M ) y varias vaciiolas del Sistema caniciilar abierto (Sca). Aii-

mento 25.000 X .

cían abundantes. Una de las alteracio- microscopio electrónico rcvclo qiic cl nes más notables fue la hipogranulari- Arca densa observada cn cicrtas pla- dad quc afectaba a los tipos de gránu- quctas (fig. 3) se debía a una aciimu- los fundamentales (fig. 8). lación de las or_canclas presentes

El análisis corrclacionado de la mi- (membranas de los sistema tubulares, croscopia de luz y del examen con el iiiitocondrias y gránulos).

Octubre-Diciembre 1973 A N A L E S D E M E D I C I N A Y C I R U G I A 375

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Figiira Y. - Reacción de la peroxidasa a pH 9,0. Forma plaq~iitaria de tamaño grande qiie mueitra abundancia del sistema tiibular denso. El osmio negro aparece en loi túbulos en forma de banda\. Preparacihn con contraite aiimentado mediante doble coloración con

citrato de plomo y acetato de uranilo. Alimento 30.000 X .

La rcacción de la peroxidasa nos En una población plaquctaria nor- sirvió para demostrar quc el sistema tu- mal no cs raro encontrar ocasionalmen- hular que con mayor frecuencia prc- te células con una u otra característica dominaba cn el tubular denso (fig. 9). de inmadurez. Sin embargo en los 4

En las plaquetas normales circulan- casos con enfermedad mieloprolifcra- tcs se cncucntra una banda dc micro- tiva que reportamos aquí, una o varias túbulos cn la periferia (figs. 5 y 6). En de esas características eran conspicuas. los pacicntc$ reportados cn este tra- Es sabido quc las plaquetas jóvenes bajo cn un número apreciable dc las son inás grandes y más densas que las plaquetas csa banda con frecuencia plaquctas senescentes. Bajo condicio- cstaba dcsorgani7ada o representada nes de stress (ejemplo: sangría total o solamcntc por escasos túbulos (fig. 7). remoción selectiva de plaquctas) au-

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376 ANALES DE MEDICINA Y CIRUGIA Vol. LIII - N." 234

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-. Figura 10. -En este macrotrombocito hay abundantes canales claros del sistema cana- licular abierto. Se observan numerosa5 mitocondrias y algunos gránulos. Ob\érve\e la presencia del retículo endoplásmico granular organizado o 1;imelar (+) y de grániilo\

ribosómicos. Aumento 28.000 X .

mentan en la sangre circulante esas plaquetas normales cs raro encontrar formas jóvenes. retículo endoplásmico granular. E n

Aunque existe evidencia sugestiva nuestro? pacientes se hallaron numcro- de que las plaquetas adultas normales sas formas dotadas d e cste retículo, así sintetizan proteínas el número de ribo- como de ribosomas librcs (fig. 10). Más sornas es escaso y ciertamente en las aún en algunos cortes se observó con-

Octubre-Diciembre 1973 ANALES DE MEDICINA Y CIRUGIA 377

Figura 11. - Segmento plaquetario a gran aumento para demostrar la continuidad (+) del retículo endoplásmico granular (REG) y del sistema tubular denso (std) agranular. Au-

mento 87.500 X.

tinuidad del retículo granular con el animales (ejemplo, aves). En los ca- sistema tubular denso (fig. 1 l). La sos en discusión se observó un espec- reacción peroxidásica fue positiva en tro que iba desde fragmentos citoplás- ambos sistemas corroborándose la ín- micos con las organelas características tima relación de los dos sistemas ca- de la plaqueta (fig. 12) hasta formas niculares. que se aproximaban o aún mejor se

Solamente en forma excepcional se confundían con los megacariocitos cir- observa plaquetas nucleadas en especí- culares la que luego hacemos relación menes sanguíneos humanos normales. (figura 13). Esto en contraste con varias especies En otros casos se observaron frag-

378 A N A L E S D E MEL)I<'INA Y C'IRUGIA Vol. 1JI1-N." 234

Figura 12. - Fragmento de citoplasma rnegacariocítico. En este campo se observan grá- nulos, rnitocondri;i.; y elenientos del sistema c;inalicular abierto mejor definidos en este caso

como parte del sistema de demarcaci6n (-+). Aumento 18.000 X .

mentos citoplásmicos tlc mcgacarioci- plaqucta aislada o separada de la cé- tos, pero an'ucleados al menos al nivel lula madre. del corte respectivo. Si: clasifican esas Lo mismo que Iris otras caracterís- formas como fragmentos mcgacariocí- ticas dc inmadurez que sc han men- ticos por la prcscncia de membranas cionado, cs raro observar cn condicio- de demarcación que son una caractc- ncs usualcs elementos del Aparato dc rística del megacariocito y no dc la Golgi en las plaquctns normales circu-

1

Octiihre-Diciembre 1973 ANALES DE MEDICINA Y CIRUGIA 379

Figiira 13. - Plaqiieta con remanente nuclear (N). Nótese que el citoplasma tiene organelas plaqiietarias típicas tales como el sistema canalicular abierto (sca). Aumento 25.000 X .

lantcs. E n cl material estudiado no fue raro encontrar elementos tubulares, vc- sicularcs y vacuolares típicos dc Golgi (fig. 14). Así como uno o varios cen- triolos (fig. 15). Los túbulos dcl Apa- rato dc Golgi no mostraron positividad pcroxidásica (fig. 16).

La presencia d e formas mitóticas cn cClulas identificadas como perteneeien- tes a la línea megacariocítica plaqueta-

ria constituyó un hallazgo sorprendcn- tc (fig. 17).

Megacariocitos: El espectro que hemos mencionado se llegó a comple- tar con el hallazgo predominantemente en la capa lcucocitaria d e células apa- rcntemcntc mononucleadas de un diá- metro de 20 a 30 ó con núcleo inma- duro bien central y redondo o bien ovoide y periférico y con citoplasma

380 ANALES 1)E MEDICINA Y CIRUGIA Vol. LIII - N." 234

Figura 14. -Este corte revela varios conglomerados canaliculares con la apariencia del Aparato de Golgi (G). Aumento 20.000 X.

en cantidad variable, pero en el cual se podían identificar elementos asocia- dos con el citoplasma cle los megaca- riocitos (figs. 18 y 19). Esos elementos incluyen: membranas de demarcación, granulaciones densas, retículo endo- plásmico granular, Aparato de Golgi y microtúbulos. El grado de diferen- ciación fue variable desde células muy cercanas al blasto primitivo hasta célu-

las del tipo de "plaqueta nucleada" a que ya hicimos relación.

En las células más inmaduras la reacción de la peroxidasa fue con fre- cuencia negativa, aunque ocasional- mente se demostró reactividad en el espacio perinuclear que hace parte del retículo grenular (fig. 20). En los me- gacariocitos como en las plaquetas a pH 6,O y 7,6 particularmente se ob-

PULM8-HGBBER BALSAMICO, Supositarioc Cajas con 12 supositorios, conteniendo cada uno respectivamente:

Succinato doble de 2-cloro-alfa-(2-dimetilamino- etil) benzhidrol y 1-alfa-2.mef.il-8-metoxi-6, 7-me- tilendioxi-1-(6,7 dimetoxi-3-ftalidil)-1, 2, 3, 4-te- trahidroisoquinolina . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Guayacol Glicerileter N-acetil-p-aminofenol . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Clorhidrato de Metapirileiie . . . . . . . . . . . . . . . . . . Benzoato de Sodio . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1, 3, 7-Trimetilxantina . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Excipientes.. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

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Octiibre-Diciembre 1973 ANALES DE MEDICINA Y CIRUGZA 381

Figura 15. - Plaqueta displástica con relativa abundancia de mitocondrias (M), de túbulos y de microtúbulos (+). Hay pobreza de gránulos. Obsérvese la presencia de dos cen-

tríolos (C, y C2) en cortes transversal y oblicuo. Aumento 60.000 X.

3 82 ANALES DE MEDIC'IIVA Y C'IRUGIA Vol. LIII - N." 234

Figura 16. -Reacción de la peroxidasa p H 9,O. Nótese reacción positiva (osmio negro) en el sistema tubular denso y un sistema tubular no reactivo con la ap~iriencia morfológi- ca del Aparato de Golgi (G). Preparación contrastada con doble coloración. Aumento

28.000 X .

scrvó rcacción en las mitocondrias. Ese tipo de reacción niitocondrial sc ha considerado relacionado a la prc- scncia dc catalasa y no dc pcroxidasa (figura 20).

DISCUSION

Aunquc por n~uchos años se ha sa- bido quc las plaquctas sanguíneas cn los trastornos i~iicloproliferativos cró- nicos son con frecucncia morfológica y funcionalincntc anormales sorprcnde quc no haya habido un estudio sistc-

mático de la ultracstructura dc cstos clcmcntos utilizando nicdios modcrn«s de inicroscopia electrónica.

Nosotros considcramos quc las anor- malidadcs ultracstructurales que repor- tamos aquí de manera preliminar ofrc- ccn una buena guía inicial para cstu- dios más elaborados dc tipo funcional y bioquímicos que ya hemos iniciado en nuestro laboratorio.

La existencia del mismo tipo de al- teraciones cn pacientes catcgorizados clínicainentc como LGC, MMMA y leucemia megacariocítica ofrecen un nuevo soporte al conccpto unificante

Octiihre-Diciembre 1973 ANALES DE MEDICINA Y CIRUGlA 383

Figura 17. -Célula en mitosis. Aiinqiie no es posible establecer con certeza se considera esta forma como de origen megacariocítico - plaquetario. Aumento 25.000 X.

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Figura 18. - Megacariocito circulante: núcleo (N), sistema canalicular abierto (sca), membranas de demarcación (+), gránulos y mitocondrias. Aumento 15.000 X.

de "enfermedades mieloproliferativas" como lo propuso DAMESHEK (1951).

Las "plaquetas azules" que consti- tuyeron la nota sobresaliente de la ob- servación con los métodos microscópi- cos y de coloración tradicionales se- mejan en su ultraestructura las plaque- tas del "síndrome de plaquetas grises" de Raccuglia descrito recientemente

(RACCUGLIA, 1971) y estudiado por WHITE con c1 microscopio electrónico (WHITE, 1972). El hallazgo más nota- ble por supuesto lo constituye la au- sencia o marcada disminución de los gránulos plaquetarios. Si se logran se- parar y fraccionar esos elementos gra- nulopénicos se tendría un cxperimen- to de la naturaleza que quizá fuese de

Figiira 19. - Segiilento dc tina cblula identificada como megacariocito primitivo. N: nú- cleo. En el citopl:i\rn;~ se ohservan organelas con características de línea megacariocítica - plaquetaria. Microtúhiilos (-+) y gránulos (G) se observan en el citoplasma. Aumento

51.000 X .

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Figura 20. - Reacción de la peroxidaia pH 7,6. Céliila biniicIe:idn con reacción positiva débil en el espacio perinuclear (+) y más fuerte en las mitocondrias. Aiimento 18.000 X .

utilidad en la mejor tiefinieión dc la función de los gránulos y membranas plaquetarias. Aún !no hay un acuerdo entre los investigadores cerca dc la localización, por cjcmplo de los nu- cleóticos de la adenina.

Nuestros estudios han brindado co- rroboración a la hipótesis de que el sistema tubular denso se deriva dcl retículo endoplásmico granular. La po-

sitividad de ainbos sistemas con la reacción de la pcroxidasa, pcro parti- cularnlcnte con la continuidad de nicm- branas con y sin ribosomas constituye amplia evidencia de csa dcrivación a nuestro parecer. BEHNKE (1967) y más rccicntcmelnte BRETON - GORIUS y GUI- CHARD (1972) y WHITE (1972) han sugerido la intcrrclación de aqiiellos sistemas en los cuales se crcc se hace

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la síntcsis dc los microfilamentos a su vcz los clementos constitutivos de los microtúbulos.

La desorganización de la banda de microtúbulos en la población plaquc- taria, que hcmos estudiado también, podría ofreccr un modelo para rceva- luar la función contráctil que se ha atribiiido a esos microtúbulos. Tam- bién cn cste campo tencmos cstudios cn progreso utilizando métodos de agregación plaquetaria in vitro.

La ocurroncia dc formas mitóticas c's dc iniportancia especial si sc acepta quc solamente las células más primi- tivas dc la línea megacariocítica - pla- quctaria tienen la capacidad dc divi- dirse, produciendo clcmentos diploi- dcs. Aunque carecemos de evidencia directa (tal por ejcmplo la determina- ción cuantitativa del ácido dcsoxiri- bonuclcico ADN) creemos que si no todas al menos un buen número de las células identificadas como megacario- citos son diploides. Hcmos concluido esto con base cn que tanto por micros- copia dc luz como por microscopia clcctrcínica, esas células aparecían m e nonucleadas y en cl hccho de no habcr podido demostrar una línea diploide cn cl cxamcn cromosómico. Natural- mente, aún es posible que esas células

sean poliploides. En todo caso de con- firmarse nuestra tesis de que existen células megacariocíticas tipo 2 N o di- ploidcs se habría dado un paso adc- lantc en la identificación de los estadios iniciales de la línea megacariocítica. Dcbe anotarse, sin cmbargo, que una disociación o asincronismo nucleocito- plásniico puedc explicar en un estado patológico la prcsencia de un núcleo diploidc y un citoplasma más maduro del que correspondería. Solamente cs- tudios adicionales podrán arrojar luz sobre este problema.

SUMARIO

Sc dcscriben los cambios de micros- copia corriente y ultraestructurales ob- servados cn las plaquetas en la sangre circulante de 4 pacientes con diversos trastornos mieloproliferativos crónicos. El hal-icr podido establccer alteraciones bicn definidas en la línea megacariocí- tica - plaquetaria en estas enfermeda- des es de importancia clínica. Estos pa- cientcs tienen tendencia a sangrar y el defccto hemostático es con frecuen- cia rclacionado a trastornos dc fun- ción plaquetaria, cuyas bascs anatómi- cas son motivo de un análisis inicial cn cstc reporte.

En ausencia del profesor Ramón Sarró -quc solicitó de su autor al tiem- po de visitar Rochcstcr un trabajo para la Academia- prcsenta y rcsumc la incmoria cnviada al doctor Agustín Gómcz. Mcmoria que llegó a su poder transmitida -desde lucgo- por el doctor Sarró.

El Presidente (prof. Pedro Domingo) subraya el valor de la investigación realizada por Maldonado y cl honor que supone el haccrla constar aquí.

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B I B L I O C R A F I A

BEHNKE, O.: Electron Microscopic Observations o n the Membrane Systems o€ the Rat Blood Platelet. Anat. Rec., 158:121, 1967.

BRETON - GORIUS, J. y GUICHARD, J.: Ultrastr~ictural 1.ocalization of Peroxidaie Activity in Human Platelets and Megakaryocytes. Am. J . Path., 66:277, 1972.

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WHITE, J. G.: Interaction o€ Membrane Systems in Rlood Platelts. Am. J . Path., 66: 295, 1972.

Gama de Penicilinas Millonarias asociadas a Estreptomicina

L I A D E M Y C I N

L I A D E M Y C I N Mledium

L I A D E M Y C I N ANTICHOC

Ll ADE LIBORPTORIOS

L I A D E M Y C I N l l R M I C l U T l C O S @ PILONTOTAILD

Sinergia antibacteriana ciernpre vigente en patología infecciosa inespecifica

RAPIDA Y COMPLETA ABSORCION CONCENTRACIONES SANGUINEAS Y TISULARES MAS ELEVADAS AMPLIO ESPECTRO ANTIBACTERIANO EFECTO BACTERlClDA MAYOR RESISTENCIA A LA ACClON DE LA PENICILINASA

= MAXIMA EXCRECION URINARIA AUSENCIA DE TOXICIDAD TOLERANCIA PERFECTA POR VIA ORAL INAClLlN es un antibiótico valioso para el tratamiento de las infecciones producidas por microorganismos gram-positivo6 y por una serie de bacterias gram-negativas, entre ellas E. COLI. H. INFLUENZAE, SALMONELLA y SHIGELLA. SUS altas concentraciones sericas permlten que extienda su actividad frente a cepas de PROTEUS y KLEBSIELLA

INDICACIONES INFECCIONES DEL APARATO RESPIRATORIO

INFECCIONES GINECOLOGICAS Y OBSTETRICAS aborto septlco - Infecciones uterinas - infecciones urlnarias postoperatorias-endometritis - mastitis INFECCIONES - GASTROINTESTINALES disenteria bacilar - enteritis - colecistitis. etc. MENINGITIS Y SEPTICEMIA ENDOCARTITIS BACTERIANA INFECCIONES DE LOS TEJIDOS BLANDOS INFECCiONES PiOGENAS EN GENERAL . - -- - - otitis - sinusitis - infecciones oculares - amiadalltis - - osteomielitis, etc.

PRESENTACION Envase con 12 cápsulas de 175 mg. de Clorhidrato de pivampicillna P.V.P. 312,20 Ptas Envase con 24 cápsulas de 175 mg. de Clorhidrato de pivampicillna P.V.P. 588,90 Ptas. Envase con 12 cápsulas de 350 mg. de Clorhidrato de pivampicllina P.V.P. .468,50 Ptas.

.neumonias - bronquitis agudas y crdnicas - traqueo bronquitis - gripe. etc. INFECCIONES DEL APARATO URINARIO aboratorios INIBsA Productos farmac6uticos c~stitis.- pielonefritis - prostatitis Loreto, 8 - BARCELONA-15