FACULTAD: ESCUELA PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUMICAASIGNATURA: ANLISIS CLNICOTEMA: PERFIL LIPDICODOCENTE: TM. Jaime LuyoALUMNA: Alva Trinidad NancyCICLO : VIII 2015AO 2015

PERFIL LIPDICO

INTRODUCCIN

Los triacilgliceroles, el colesterol y las lipoprotenas plasmticasLos triacilgliceroles (TAG) constituyen la primera reserva energtica del organismo; se almacenan en grandes vacuolas en los adipocitos del tejido adiposo. La degradacin metablica de 1 g de TAG produce 9 kcal, mientras que 1 g de Glc slo suministra 4 kcal; adems el depsito de TAG no est hidratado (a diferencia del glucgeno) y no ejerce presin osmtica. Esta reserva energtica se puede emplear para generar energa qumica en forma de ATP, o bien para generar calor, como es el caso del tejido adiposo pardo. Por otra parte, el tejido adiposo tambin tiene una funcin de aislante trmico y de proteccin mecnica, como sucede en los riones. A su vez, el colesterol desempaa muchas funciones biolgicas, como dar fluidez a las membranas biolgicas y ser el precursor de cidos biliares, hormonas esteroideas y de la vitamina D. El metabolismo del colesterol est relacionado con enfermedades cardiovasculares (CHD Coronal Heart Disease) y con la aparicin de clculos biliares.En esta prctica se van a realizar las determinaciones de colesterol (CHO) y de triacilgliceroles (TAG) mediante mtodos colorimtricos y la comparacin con un patrn de concentracin conocida. La formacin de un sustrato coloreado permite medir su absorbancia, que es directamente proporcional a la concentracin de reactivo. Finalmente se discutir la importancia de dichas determinaciones en la Bioqumica Clnica y su relacin con el metabolismo glucdico, ya que muchas enfermedades metablicas como el hipercolesterolemia y la diabetes cursan con alternaciones en los niveles plasmticos de TAG y/o CHO.

GENERALIDADES:Debido al carcter hidrofbico de estos compuestos, no se encuentran libres en plasma sanguneo, sino que son transportados por las protenas. Existen diversas clases de lipoprotenas, en base a su densidad, el lpido que transportan y las apoprotenas que conforman su estructura. En funcin de su densidad las lipoprotenas se clasifican en:

El perfil lipdico El estudio clnico del perfil lipdico es un procedimiento analtico bsico en el diagnstico, pronstico y seguimiento de enfermedades metablicas. Generalmente se solicita el anlisis de los niveles de TAG, CHO total y CHO-HDL. Los niveles de CHO-LDL se calculan mediante la Frmula de Friedewald. Los valores de referencia son los siguientes:

Los niveles de CHO total < 100 mg/dL (2.6 mM) se relacionan con estados patolgicos, como la malnutricin, una enfermedad heptica cncer. Al determinar el CHO total y el CHO-HDL se puede hallar el valor de su cociente, que tambin se relaciona con el riesgo a de desarrollar una enfermedad cardiovascular: si CHOT / CHO-HDL 3.5 cociente ptimo si CHOT / CHO-HDL < 5 cociente deseable si CHOT / CHO-HDL > 5 alto riesgo de CHD Dentro de los niveles de CHO-LDL se pueden fijar unos valores deseables en base a la propensin a desarrollar CHD: < 100 mg/dL (1.14 mM) si se padece enfermedad cardiaca diabetes. < 130 mg/dL (1.5 mM) si existen 2 factores de riesgo < 160 mg/dL (1.8 mM) si existe 1 factor de riesgo Los factores de riesgo son los siguientes: Edad Hipertensin Bajos niveles de CHO-HDL Ser fumador Tener antecedentes de enfermedad cardiaca

Determinacin colorimtrica de TAG y CHO Se utilizan mtodos enzimticos especficos y sensibles, que se basan en la formacin de perxido de hidrgeno. Esta reaccin se acopla con una reaccin redox catalizada por una peroxidasa, de modo que se produce un sustrato coloreado. El sustrato coloreado presenta un mximo de absorbancia a = 500 nm. Aplicando la ley de Beer-Lambert, y teniendo en cuenta que la concentracin de la cromobase es directamente proporcional a la concentracin de sustrato inicial, es posible determinar la concentracin inicial de TAG o de CHO en la muestra. Para ello es necesario determinar la absorbancia de una solucin patrn ( estandar), o bien realizar una recta patrn con diferentes concentraciones.

Determinacin de HDL-CHO Se utiliza el cido fosfotngstico y MgCl2 para precipitar las LDL y las VLDL, de manera que las HDL son las nicas lipoprotenas que permanecen en solucin. Posteriomente, se determinan los niveles de CHO en el sobrenadante tal y como se ha indicado anteriormente. Determinacin de LDL-CHO: Se utiliza la Frmula de Friedewald:

Esta frmula slo es vlida si [TAG] < 400 mg/dL (4.66 mM)El perfil lipdico comprende en:

Lpidos totales Triglicridos Colesterol Fosfolipidos Electroforesis de protenas.

Las lipoprotenas plasmticas tienden a aumentar como resultado de:

Una sobreproduccinReducida utilizacin o hidrlisisDeficientes catabolismo de los mismos

Tambin pueden verse alteradas por:

Variacin fisiolgica: como la edad y peso.La edad tiende a elevar o disminuir los valores de fosfolipidos y colesterolEl peso tiende a elevar los valores de fosfolipidos y colesterol

Variaciones patolgicas: dislipoproteinemiaPrimaria:Tipo I: aumento de quilomicronesTipo: aumento de LDLTipo II b: aumento del LDL Y VLDLTipo III: Beta anchaTipo IV: aumento del VLDLTipo V: aumento del quilomicrones y VLDL

Secundaria:Hipotiroidismo: aumento del colesterolDiabetes sacarina: aumento de los triglicridosSndrome nefrtico: aumento de los lpidos totales

En cantidades normales, el colesterol no es nocivo para el organismo, es necesario para el correcto funcionamiento de nuestro cuerpo, ya que interviene en procesos tan importantes como la creacin de vitamina D, hormonas o sales biliares; pero en altas concentraciones, definido como hipercolesterolemia, s resulta perjudicial para la salud

Lostriglicridosson el principaltipo de grasatransportado por el organismo y provienen de losalimentosque consumimos. Es importante que estos no aumenten demasiado, puesto que lostriglicridos altosaumentan el riesgo de padecerenfermedades coronarias

OBJETIVOS:Los objetivos de la prctica son la determinacin en suero del colesterol y triglicridos, para lo que se utilizarn reactivos indicados para estas pruebas.

MATERIALES: Tubos de ensayo Guantes Tubo de ensayo tapn rojo Ligadura Torundas Micropipetas Puntas para pipeta Algodn GradillasEQUIPOS Centrifuga Espectrofotmetro Equipo de Bao mara

REACTIVOS TGL lquido Colesterol lquidoMUESTRA Sangre venosa

MATERIALES

EQUIPOS Y REACTIVOS

PROCEDIMIENTOS

Se realiz la extraccin sangunea con los procedimientos bsicos Se centrifuga la muestra durante 5 minutos a 3500 RPM Obtenemos el suero recin extrado y no hemolizado

Marcar 3 tubos: Tubo 1 para la muestra (Mx), Tubo 2 para el estndar de referencia (St) y Tubo 3 para blanco (B).

Para las determinaciones preparamos:

Muestra: 1ml de reactivo+ 10 L de muestra Estndar: 1ml de reactivo + 10 L de estndar Blanco reactivo: 1ml de reactivo

Preparando las soluciones

Tubos rotulados

Incubamos todos los tubos a 37 c por 5 minutos a bao Mara.

Despus de incubar mezclamos todos los tubos por inversin.

Procedimos a la lectura en el espectrofotmetro a 500 nm.

Calibramos el blanco y registramos los valores obtenidos

CLCULOS - RESULTADOS

Colesterol = O = 505 nm Tg = 505 nm Factores de conversin: Colesterol: 0,0258 = ..mmol/ Lt Triglicridos: 0,0113 = ..mmol/Lt

DETERMINACIN DE COLESTEROL Y TRIGLICRIDOS

ESPECTROFOTMETRO 505 nm

BlColesterol--------StColesterol0,331 mg/dLMxColesterol0,224mg/dL

BlTriglicrido--------StTriglicrido0,108MxTriglicrido0,061

Lectura: COLESTEROL * St = 200

F = St=200=604Abs. St0,331

Medicin:

F x Abs Mx = mg/dL

604x0,224=135 mg/dL135x0,0258=3,483 mmol/ Lt

Por lo tanto el valor del colesterol es: 135 mg/Dl Y el valor con el factor de conversin es: 3,483 mmol/Lt

Valores normales de COLESTEROL TOTALDeseable menos de 200 mg/dlLimitealto: 200-239mg/dlAlto: 240 o por encima mg/dl

Lectura: TRIGLICRIDOS * St = 200

F = St=200=1852

Abs. St0,108

1852x0,061=113 mg/dL

113x0,0113=1,277 mmol/ Lt

Por lo tanto el valor del triglicrido es: 113 mg/Dl Y el valor con el factor de conversin es: 1,277 mmol/Lt

Valores normales de TRIGLICRIDOSNormal: menos de 150 mg/dLLimtrofe alto: 150 a 199 mg/dLAlto: 200 a 499 mg/dLMuy alto: 500 mg/dL o superior

Los mtodos enzimticos especficos y sensibles se basan en la formacin de perxido de hidrgeno. Esta reaccin se acopla con una reaccin redox catalizada por una peroxidasa, de modo que se produce un sustrato coloreado

CONCLUSIONES

En nuestra prctica los valores obtenidos tanto del colesterol como de triglicridos estn dentro de los valores normales deseables.

La determinacin del perfil lipdico tiene gran importancia clnica ya que se puede emplear como un diagnostico primario de ciertas enfermedades, as como tambin en el seguimiento de algunas enfermedades como: diabetes mellitas, necrosis, obstruccin biliar y varias anormalidades metablicas que resultan de disturbios endocrinos.

El colesterol es un esteroide sintetizado a partir de la Acetil CoA, y sirve como intermediario metablico a otros esteroides, cidos biliares y vitamina D. La concentracin del colesterol total en suero, se ha asociado con enfermedades metablicas, infecciosas y coronarias cardiacas.

En el plasma, el colesterol es transportado por tres tipos de protenas: lipoprotenas de alta densidad (HDL-colesterol), lipoprotena de baja densidad (LDL-colesterol) y Lipoprotena de muy baja densidad (VLDL-colesterol).

La medida del HDL-colesterol es considerada mucho mejor que la del colesterol total como una prediccin del riesgo de enfermedades coronarias cardiacas.

Si el colesterol tiene un valor normal, un nivel elevado de triglicridos no parece ser un factor de riesgo de enfermedad cardiaca, pero s puede ser riesgoso al asociarse condiabetesypancreatitis

BIBLIOGRAFA

Inserto de Laboratorios Biogamma C.A.Qumica Sangunea.Caracas- Venezuela: Edif. Frangiu,La Trinidad, Calle Bolvar No. 27 1er piso, local 1-A. TLF:945. 80. 24. E-mail: Biogamma@ cantv. Net.

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Jimnez, E y otros. (1996) mejora contina de la calidad. Panamericana: Mxico, D.F.

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