Para determinar las características concretas de Para determinar las características concretas de especies de microorganismos, es especies de microorganismos, es indispensableindispensable aislarlos como un cultivo puro. aislarlos como un cultivo puro.

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MORFOLOGIA COLONIALMORFOLOGIA COLONIAL

MICOLOGÍAMICOLOGÍA((HONGOS)HONGOS)

Dimórficos: Dimórficos:

Se presentan como moho a 25Se presentan como moho a 2500C y C y como levadura a 37como levadura a 3700C (patógeno)C (patógeno)

Formas o métodos de identificación en hongosFormas o métodos de identificación en hongos

MICROCULTIVO Y COLOREAR CON AZUL DE LACTOFENOLMICROCULTIVO Y COLOREAR CON AZUL DE LACTOFENOL

1.- 1.- Aspecto macroscópico de la colonia en agar sabouaudAspecto macroscópico de la colonia en agar sabouaud o papa o papa dextrosa. dextrosa.

2.- Tipo de hifa. 2.- Tipo de hifa. 3.- Colocación del o los esporóforos. 3.- Colocación del o los esporóforos. 4.- Presencia de esterigmatas (esporangióforo o conidióforo)y el orden 4.- Presencia de esterigmatas (esporangióforo o conidióforo)y el orden

que presentan. que presentan. 5.- Forma tamaño y distribución de las esporas. 5.- Forma tamaño y distribución de las esporas. 6.- Presencia o no de rhizoides. Solo se presentan en hongos de hifa 6.- Presencia o no de rhizoides. Solo se presentan en hongos de hifa

no septada. no septada. Por ejemplo: Por ejemplo: Rihizopus, Rhizomucor, AbsidiaRihizopus, Rhizomucor, Absidia7.- Practicar pruebas de identificación bioquímica. 7.- Practicar pruebas de identificación bioquímica.

AspergillusAspergillus

PenicilliumPenicillium

FusariumFusarium

CurvulariaCurvularia

• Microcultivo en portaobjeto mostrando la inoculación del Microcultivo en portaobjeto mostrando la inoculación del tapón de agar (flecha)tapón de agar (flecha)

(I) (II)(III) (IV)

unicelulares

pluricelulares

PARASITOLOGÍAPARASITOLOGÍA

Naegleria

Giardia

Balantidium Toxoplasma Trypanosoma

ParameciumEndolimax

T. soliumFasciola hepatica

Ascaris

• Método de Flotación (Faust):Método de Flotación (Faust):• Procedimiento:Procedimiento:• Se toma el otro tubo del paso III inciso 2, centrifugado anteriormenteSe toma el otro tubo del paso III inciso 2, centrifugado anteriormente• Se agregan 1.0ml. de solución de sulfato de zinc al sedimento y mezclar agitando Se agregan 1.0ml. de solución de sulfato de zinc al sedimento y mezclar agitando

el tubo o bien con un aplicador.el tubo o bien con un aplicador.• Se llena el tubo con más solución de sulfato de zinc hasta de 2 cm. del borde.Se llena el tubo con más solución de sulfato de zinc hasta de 2 cm. del borde.• Se pasa la suspensión por la gasa que se ha puesto sobre el vaso de papel, se Se pasa la suspensión por la gasa que se ha puesto sobre el vaso de papel, se

desecha la gasa.desecha la gasa.• Se regresa la suspensión al tubo y se agregar suficiente sulfato de zinc para llenar Se regresa la suspensión al tubo y se agregar suficiente sulfato de zinc para llenar

el tubo hasta 2 cm. del borde.el tubo hasta 2 cm. del borde.• Nota: Si la suspensión está clara, se puede omitir el paso anterior.Nota: Si la suspensión está clara, se puede omitir el paso anterior.• Centrifugar un minuto a 2000 rpm. Dejando que la centrífuga pare Centrifugar un minuto a 2000 rpm. Dejando que la centrífuga pare

espontáneamente. espontáneamente. • Se prepara un portaobjeto poniendo una gota de lugol.Se prepara un portaobjeto poniendo una gota de lugol.• Sin quitar el tubo de la centrifuga, y usando el asa estéril, tomar varias cargas de Sin quitar el tubo de la centrifuga, y usando el asa estéril, tomar varias cargas de

la película sobrenadante, emulsionándola con el lugol.la película sobrenadante, emulsionándola con el lugol.• Cubrir con el cubreobjetos y observar al microscopio.Cubrir con el cubreobjetos y observar al microscopio.

Exudado faríngeo:Exudado faríngeo:• se toma un hisopo estéril.se toma un hisopo estéril.• Se procede a tomar la muestra del fondo de la garganta.Se procede a tomar la muestra del fondo de la garganta.• Se inclina la cabeza del paciente hacia atrás y se ilumina bien la cavidad orofaríngea. Figura: Se inclina la cabeza del paciente hacia atrás y se ilumina bien la cavidad orofaríngea. Figura:

11.11.• Se solicita al paciente que abra bien la boca y emita un “AH”.Se solicita al paciente que abra bien la boca y emita un “AH”.• La lengua se baja suavemente con una espátula desechable.La lengua se baja suavemente con una espátula desechable.• Se introduce el hisopo hasta donde se encuentran las amígdalas y se frota contra la parte Se introduce el hisopo hasta donde se encuentran las amígdalas y se frota contra la parte

posterior de la mucosa faringea de un lado al otro hasta la otra amígdala o cualquier mancha posterior de la mucosa faringea de un lado al otro hasta la otra amígdala o cualquier mancha blanca o ulceración que se encuentre en esa zona. Evite tocar la lengua, la zona periodontal blanca o ulceración que se encuentre en esa zona. Evite tocar la lengua, la zona periodontal y la mucosa de los carrillos. Figuray la mucosa de los carrillos. Figura

• Proceda a realizar la siembra en los medios de cultivo a utilizar descargando el hisopo en Proceda a realizar la siembra en los medios de cultivo a utilizar descargando el hisopo en una esquina de la placa y desecharlo en un recipiente con desinfectante y proseguir una esquina de la placa y desecharlo en un recipiente con desinfectante y proseguir sembrando por estría cruzada con el asa para lograr el aislamiento del cultivo puro.sembrando por estría cruzada con el asa para lograr el aislamiento del cultivo puro.

• Incubar de 35-37 grados centígrados y de 18-24 horas, en aerobiosis o anaerobiosis según Incubar de 35-37 grados centígrados y de 18-24 horas, en aerobiosis o anaerobiosis según sea necesario.sea necesario.

• Después de este tiempo realice las observaciones macroscópicas y microscópicas.Después de este tiempo realice las observaciones macroscópicas y microscópicas.• Proceda a realizar las pruebas bioquímicas correspondientes, descritas posteriormente para Proceda a realizar las pruebas bioquímicas correspondientes, descritas posteriormente para

cada tipo de microorganismo.cada tipo de microorganismo.

Diferenciación de especiesDiferenciación de especiesLa diferenciación de especies de este género La diferenciación de especies de este género es complicada debido que se utilizan los tres es complicada debido que se utilizan los tres sistemas diferentes mencionados a sistemas diferentes mencionados a continuación:continuación:

1.1. Propiedades serológicas: Grupos de Propiedades serológicas: Grupos de Lancefield. Lancefield. serogrupos A hasta H y K hasta V.serogrupos A hasta H y K hasta V.

2.2. Patrones hemolíticos: alfa, beta y gama Patrones hemolíticos: alfa, beta y gama hemólisis.hemólisis.

3.3. Propiedades bioquímicas (fisiológicas).Propiedades bioquímicas (fisiológicas).

REBECA LANCEFIELD desarrollo en 1933 el sistema de clasificación serológica para diferenciar las cepas Betahemolíticas .

Los antígenos detectados son Los antígenos detectados son polisacaridos de pared celular polisacaridos de pared celular como en los estreptococos: como en los estreptococos: grupos A, B, C, F y G.grupos A, B, C, F y G.

Estos antígenos se pueden detectar fácilmente con pruebas inmunológicas, y han sido útiles para la identificación rápida de algunos patógenos.

Por ejemplo: Por ejemplo: Streptococcus pyogenesStreptococcus pyogenes ( (clasificado como clasificado como streptococcusstreptococcus del del grupo Agrupo A))

El antígeno de grupo se puede detectar por El antígeno de grupo se puede detectar por inmunoanálisis rápido.inmunoanálisis rápido.

Streptococcus Streptococcus de importancia Médicade importancia Médica

• Las cepas más virulentas poseen cápsula de ácido hialurónico (ácido glucurónico y N-acetilglucosamida). De aspecto mucoide en medios recién preparados y rugosa (mate) en medios secos.

• Las cepas no capsuladas, son pequeñas y brillantes.

• Normalmente de color gris-blanquecino. Brillantes.

• > 0.5 mm.• < 0.5 (pinpoint)

Descripción colonial