UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN CRISTBAL DE HUAMANGA

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA DE FARMACIA Y BIOQUIMICA

PROYECTO DE INVESTIGACION

Estudio comparativo de la actividad hipoglucemiante del extracto de Petroselinum crispum perejil y extracto acuoso de Cinnamomum zeylanicum canela, en ratas. Ayacucho 2015

ALUMNO: Huamn Mendoza, Franklin

AYACUCHO PER2015

I. GENERALIDADES.1. Ttulo. Estudio comparativo de la actividad hipoglucemiante del extracto Petroselinum crispum perejil y extracto acuoso de Cinnamomum zeylanicum canela, en ratas. Ayacucho 20152. personal investigador.2.1. Autor : Huamn Mendoza, Franklin 2.2. Asesor :2.3. Colaborador :3. Tipo de Investigacin.Bsico Experimental. 4. Rgimen de Investigacin.Libre5. Lugar de Ejecucin del Proyecto. El presente trabajo de investigacin se desarrollar durante los meses de enero a diciembre del 2015 en los Laboratorios de Farmacognosia y Farmacologa de la Facultad de Ciencias Biolgicas de la Universidad Nacional de San Cristbal de Huamanga, ubicado en la Ciudad Universitaria a 2761 msnm. 6. Cronograma de Trabajo.Fecha de inicio :Fecha de trmino : ACTIVIDADESAO 2015

IIIIIIV

EFMAMJJASOND

Revisin bibliogrficaXxxxxxxxxxx

Recoleccin de la muestra xx

Preparacin de Reactivos y Materialesxx

Preparacin de los extractos y determinacin de su composicin qumicaxxx

Determinacin de la actividad hipoglucemiante. xx

Anlisis de resultados y elaboracin del informe final.xx

7. Recursos Disponibles.7.1. Recursos humanos.01 Estudiante01 Qumico Farmacutico 7.2. Recursos materiales.Materiales y Equipos.BalanzaEstufaBao MaraMateriales bsicos de vidrio.Jeringas Test de glucosa (HUMAN)Cmara fotogrfica.Reactivos y solventes qumicos.EtanolReactivos para Tamizaje FitoqumicoAgua destilada Material Biolgico 5 Ratas Wistar Macho de 250 300 g de peso8. Presupuesto.02.0 Bienes:Material biolgico S/. 1,000.00Materiales de laboratorio y equipos S/. 5,000.00Reactivos S/. 2,000.00Material de escritorio/impresin S/. 1,000.00 Sub Total S/. 9,000.0003.0 Servicios:Movilidad y alimentacin S/. 200.00 Impresiones S/. 300.00Encuadernacin S/. 350.00Otros S/. 200.00Sub Total S/. 1 050.00 Total S/. 10050.00

9. Financiamiento.Universidad Nacional de San Cristbal de Huamanga S/. 9000.00Autofinanciamiento S/. 1050.00 Total: S/. 10050.00II. PLAN DE INVESTIGACION.1. Problema.Cul de los extractos aislados de Petroselinum crispum perejil y Cinnamomum zeylanicum canela, tendr mayor actividad hipoglucemiante?2. Objetivos.Objetivo general Determinar la mayor actividad hipoglucemiante de los extractos aislados de Petroselinum crispum perejil y extracto acuoso de Cinnamomum zeylanicum canela en ratas. Objetivos especficos. Comparar la actividad hipoglucemiante del extracto Petroselinum crispum perejil y extracto acuso de Cinnamomum zeylanicum canela con un patrn de referencia. Comparar la actividad hipoglucemiante ptima de los extractos aislados de Petroselinum crispum perejil y extracto acuso de Cinnamomum zeylanicum canela, en ratas. 3. Construccin del marco terico.3.1. AntecedentesDurante una investigacin con alimentos del cientfico Richard Anderson del "Human Nutrition Research Centerde Maryland (USA), se investigaba entre otros alimentos una tarta de manzana con canela. Se esperaba un aumento del nivel de azcar en la sangre, pero para sorpresa de los cientficos pas lo contrario. Estudios posteriores revelaban que un poli fenol MHCP (Methylhydroxy-Chalzone-Polymer), que se encuentra de modo natural en la canela, fue la causa de la reduccin de los niveles de azcar en la sangre. El MHCP activa los receptores de la insulina y acta en las clulas de forma sinrgica con la insulina.(Tunaliet al.,1999; Ozlemet al., 2006) en sus estudios informan el uso de semillas de perejil en la preparacin de laxantes y ts adelgazantes; tambin es usado como un remedio popular para disminuir la glucosa en la sangre y se ha demostrado su efectividad en el tratamiento de los trastornos gastrointestinales mediante estudios con ratas.El perejil ha sido utilizado tradicionalmente en algunas zonas por pacientes diabticos para reducir los niveles de glucosa en sangre. Siguiendo las recomendaciones del Comit de Expertos en diabetes mellitus de la OMS, sobre el inters de estudiar especies vegetales hipoglucemiantes, se ha investigado su eficacia antidiabtica en animales de experimentacin. 3.2. Identificacin de los elementos necesarios para fundamentar el problema. Estudio botnico de la especie Petroselinum crispum perejil y Cinnamomum zeylanicum canela. Comparacin de la actividad hipoglucemiante de los extractos en ratas. Mtodos de Extraccin y definiciones.3.3. Redaccin del marco terico.Cinnamomum zeylanicum canela Clasificacin taxonmica Reino: PlantaeDivisin : MagnoliophytaClase: MagnoliopsidaOrden : LauralesFamilia : LauraceaeGnero : CinnamomumEspecie : C. zeylanicumNombre binomial : Cinnamomum zeylanicumNOMBRES VULGARES: Castellano : Canela, canela de Ceiln. Cataln : Canyella Portugus : Canela Francs : Cannelle Alemn : Ceylomzint Italiano : Cannella Ingls : Cinnamon

Descripcin botnicaSe trata de un rbol de hasta unos 10 metros de altura, que adopta forma de arbusto siempre verde.Su tallo: es de consistencia leoso. Su corteza, la parte ms importante, es marrn grisceo y tiene un ciclo perenne.Las hojas: son de unos 7-25 x 3-8 cm, tienen forma ovalada y puntiaguda, de color verde y brillante por la cara superior con 5 nervios rojizos, uno medial y dos por lado arqueadas que convergen en la base y el pice, y otro conjunto de nervios que forman un ngulo recto con ste. El peciolo es de unos 10 - 20 mm robusto con una sinuosa forma cncava.Las flores: de unos 0.5 cm, se agrupan en panculas que nacen en la axila de la hoja o tambin en la parte terminal y llegan a tener una longitud similar a la de las hojas. Las flores son hermafroditas (contiene el androceo y gineceo en la misma flor) son de color blanco o amarillo verdoso y recubiertas de pelos, bracteadas y actinomorfas. El perianto es indiferenciado formado por 6 tpalos libres. El gineceo es bicarpelar y su androceo est formado por 9 + 3 estambres distribuidos en 3 4 verticilos, que cuando se produce la dehiscencia de las anteras lo hace por el viento.El fruto: es una baya larga elipsoidal de unos 1.25 cm de color muy oscuro azulado-negro, con una nica semilla en su interior.Composicin qumica cidos : ascrbico, palmtico p-cumrico ( corteza) Terpenos: alfa-pineno, alfa-terpineno, alfa-ylangeno, beta-pineno camfeno, cariofileno, limoneno, linalol ( corteza) Diterpenos: cinnzelanol, cinnzeylanina Cumarinas ( Corteza) Aceite esencial, rico en benzalhehido ( Planta) eugenol, farnesol, gammaterpineol, geraniol, isoeugeneol, cariofileno (corteza) Alcanfor ( corteza) Fibra ( corteza) Taninos ( planta) Muclagos ( corteza) Sacarosa Vainilla Minerales: boro, calcio, cinc , cloro, cobre, cobalto, cromo, estroncio, fsforo, hierro, manganeso, nquel, plomo, potasio, sodio, yodo (corteza) Vitaminas: Vitamina C, niacina, tiamina.

Petroselinum crispum perejilClasificacin taxonomicaReino : PlantaeDivisin : MagnoliophytaClase : MagnoliopsidaOrden : ApialesFamilia : ApiaceaeGnero : PetroselinumEspecie : Petroselinum sativumDescripcin BotnicaEl perejil es una dicotilednea, herbcea, bianual, glabra, erecta, con olor y sabor caractersticos. Puede presentar alturas entre 20 y 90 cm. La raz es pivotante, carnosa, profunda, bien desarrollada. El tallo del primer ao es compacto (braquiblasto), estriado, se desarrolla en el segundo ao del cultivo con alturas variables entre 50 a 90 cm, terminando en umbelas compuestas, tanto en el tallo principal como ramificaciones laterales. Las hojas son compuestas, largamente pecioladas, divididas en fololos dentados, lisos o rizados. Las flores son pequeas, de color blanco-verdoso o color verde-grisceo; la floracin se produce en invierno. La inflorescencia tiene de 8-12 radios primarios, las flores tienen alrededor de 2 milmetros de longitud. Los frutos son diaquenios que se emplean como semilla, de 3-4 milmetros de dimetro, ovoides, comprimidos y provistos de cinco costillas, aromticos; la germinacin es muy lenta, el poder germinativo de la semilla comienza a disminuir a partir de los 2 aos; el peso de 1000 semillas es de 1,4 gr.Composicin Qumica Los diversos componentes qumicos del perejil confieren a esta planta un alto potencial para su uso farmacolgico, como se ver a continuacin.Moazediet al.(2007) y Fonnegra y Jimnez (2007) reportaron que los componentes caractersticos del perejil son flavonoides (apina, luteolina, apigenina y algunos glucsidos), aceite esencial (apiol y miristicina), cumarinas (bergapteno, imperatorina, xantotoxina, trioxaleno y angelicina), as como vitaminas C y E, mencionando adems que es la fuente ms rica en vitamina A. Bursacet al.(2005) y Troncosoet al.(2007) afirmaron que el perejil adems de contener las vitaminas C y E contienen algunas vitaminas del complejo B, calcio, hierro, fsforo y azufre. Por otro lado, Mohammad (2010), report que el perejil tiene una alta concentracin de cido petroselnico (ismero del cido oleico), furanocumarinas, oleorresinas, protenas, carbohidratos y taninos. Otro compuesto presente en el perejil en cantidades moderadas es el cido oxlico en forma de oxalatos (Ortegaet al.,2006).4. Hiptesis.El extracto acuoso de Cinnamomum zeylanicum canela frente al extracto Petroselinum sativum perejil, presenta mayor actividad hipoglucemiante.5. Variables e indicadores de investigacin.5.1. Variable independiente.Extracto de perejil y extracto acuoso de canela.Indicadores: 5.2. Variable dependiente. Actividad hipoglucemiante. Indicadores: Operacionalizacin de las variables

VARIABLEVARIABLE INDEPENDIENTEExtracto VARIABLE DEPENDIENTEEFECTO HIPOGLUCEMIANTE

DEFINICION CONCEPTUALExtractos constituido por metabolitos secundarios obtenidos de partes vegetales obtenido mediante extracto acuoso de canela y perejil por coccin.Frmacos que posee la capacidad de disminuir los niveles de glucosa ensangre Los hipoglucemiantes como la insulina, las sulfamidas y las biguanidas se utilizan en el tratamiento de ladiabetes.

DEFINICION OPERACIONAL

Determinacin de las diferentes concentraciones o dosis de los extractos que producirn modificaciones de acuerdo al peso de la rata.

INDICADORESConcentracin de los extractos: 0.2 mL, 0.4mL, 0.6mL.

UNIDAD DE MEDICIONmg/ Kg

6. Diseo metodolgico.6.1. Fecha y lujar de ejecucin El presente trabajo de investigacin se desarrollar durante los meses de enero a diciembre del 2015 en los Laboratorios de Farmacognosia y Farmacologa de la Facultad de Ciencias Biolgicas de la Universidad Nacional de San Cristbal de Huamanga, ubicado en la Ciudad Universitaria a 2761 msnm. 6.2. Definicin de la poblacin y muestra 6.2.1. PoblacinLa poblacin estar constituida por la especie Petroselinum crispum perejil, que crece en el valle de Muyurina, provincia de Huamanga, departamento de Ayacucho, a una altitud de 2500 2600 msnm. 6.2.2. MuestraLa muestra estar constituida por 1 kg de hojas colectados en buen estado y conservadas en bolsas de tela para su transporte al Laboratorio de Farmacognosia.Los frutos y las races se utilizan con fines teraputicos, las races se deben recolectar jvenes, antes de que se lignifiquen, se limpian cuidadosamente, se cortan longitudinalmente y se secan a una temperatura no mayor de 40C. El material fresco es ms eficaz que aquel que ha sido secado.6.2.3. Unidades experimentalesSe utilizarn 5 ratas Holtzman machos en buen estado de salud con un peso entre 250 a 300 g, adquiridos en el Instituto Nacional de Salud de la ciudad de Lima, con una semana de anticipacin para su adecuacin a las condiciones de laboratorio, con alimento estndar y agua a voluntad. 6.3. Procedimiento para la recoleccin de datos.6.4. Preparacin de los extractos.6.5. Diseo experimental.Los animales marcados, pesados y distribuidos al azar se identificarn en los siguientes grupos:Grupo 1: Grupo 2: Grupo 3: Grupo 4: Grupo 5: Se realizar la medicin en la cola del animal con dilatacin previa a una temperatura de 35C, se colocar el sensor que presenta el instrumento y se realizar 5 medidas y el promedio de estos datos ser el resultado de la medicin. Los datos de la glucosa sern expresados en mg/dL6.6. Diseo estadstico.Para analizar el efecto Hipoglucemiante de los dos extractos y el control positivo se realizara comparando las medias de cada uno de los grupos frente a control positivo utilizando la prueba t studens y para elaborar graficas se utilizara Microsoft office Excel 2010.Se determinar la media, la desviacin estndar de los valores individuales obtenidos para los animales de cada grupo. Se aplicar el anlisis de varianza (ANOVA) a los valores obtenidos tras los diversos tratamientos seguidos de una prueba de Duncan.Los resultados sern presentados de la siguiente manera:TABLA N 1. Actividad hipoglucemiante expresada como mg/dL de los extractos aisladas de Petroselinum crispum perejil y Cinnamomum zeylanicum canela Repeticiones(ratas)

ControlesExtractos

Suero fisiolgico Glibenclamida (5 mg/Kg)CanelaPerejil

Inicio

1 hora

2 hora

3 hora

4 hora

5 hora

Mg/dLPromedio

7. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS.

1. LEN., J., Efecto Hipoglucemiante del Extracto de las Hojas del frutipan (Artocarpusaltili) en ratas (Rattus novergicus) con Hiperglucemia Inducida.,Escuela Superior Politecnica de Chimborazo.Facultad de Ciencias, Escuela Bioquimica y Farmacia., Riobamba-Ecuador., TESIS., 2011.2. Lock de Ugaz O. (1994). Investigacin Fitoqumica: Mtodos en el estudio de Productos Naturales. Pontificia Universidad Catlica del Per. Fondo Editorial. 3. Rodrguez, J.; Castillo, R.; Cern A. et al. (1996). Estudio Fitoqumico Biodirigido de Extracto de Cuatro Plantas Medicinales del Municipio de Epazoyucan, Hgo. Resumen de Ponencias del Primer Congreso Nacional de Plantas Medicinales de Mxico, Tlaxcala, Tlax., 24-30 de junio de 1996, pp: 60-61. 4. HUMAN TEST. 2007. Manual de Tcnicas: Prueba enzimtica colorimtrica por glucosa, mtodo sin desproteinizacin. Ecuador. (hoja incluida en reactivos).5. HIERVAS MEDICINALEShttp://www.supernatural.cl/hiervas medicinales.asp2015/06/166. FORMAS DE PREPARACION DE LAS PLANTAShttp://www./informaciones/plantas%20que%20curan.htm2015/06/127. CANELAhttp://foroantiguo.infojardin.com/showthread.php?t=1282572015/06/10

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