Mini Manual de Bio (1)

21

23

5.- Metabolismo Energético celular:

Se ponen en un tubo de ensayo los pigmentos fotosintéticos extraídos de la hoja de cardenal. Cabe destacar que los pigmentos fotosintéticos fueron hervidos con alcohol, por lo tanto en la mezcla están presente tanto los pigmentos como el alcohol de 95º.

Al tubo de ensayo se le agrega un volumen, inferior al del extracto de pigmentos, de Bencina blanca.

Como sabemos, la Bencina blanca es un compuesto de tipo apolar o Hidrofóbico y por lo tanto se unirán a él, moléculas de tipo apolar. En cambio, el alcohol etílico es de tipo polar, es decir, hidrofílico y por ende se unirán a él todos los componentes polares.

BENCINA BLANCA

PIGMENTOS FOTOSINTETICOS

ANTES DE BATIR..1*Experimento Presencia de

pigmentos Fotosintéticos

Cloroplastos

Propósito: Observar los cloroplastos

Tinción: S/T

Descripción: Se ven los cloroplastos pegados o muy cerca a la pared celular esto porque esta la gran vacuola que tira a los cloroplastos a los extremos, llama la atención que son una gran cantidad de cloroplatos.

VACUOLA

PARED CELULAR

CLOROPLASTOS

¡¡¡Mini Manual de Biología!!! ¡¡¡Mini Manual de Biología!!!

41

Apoptosis NecrosisMecanismo

Restos Celulares

Fragmentación celular

Fragmentación del DNA

Orgánulos

Membrana

Tamaño celular

Programada Genéticamente Accidental

Son reconocidos y fagocitados Inducen inflamación local

En cuerpos apoptóticos por membrana

Los contenidos de los orgánulos se liberan

Temprana, Fragmentos oligonuclesomales

Tardía, Fragmentos grandes

Se preservan Se desintegran

Se mantiene Se rompe

Disminuye Aumenta

Tabla Comparativa entre Apoptosis y Necrosis

1.- Microscopia……………………………………………………………………………..1

2.-Morfología de los seres vivos…………………………………………………...3

3.-Métodos de estudio de biología celular……………………………………10

4.- Organización celular Eucarionte…………………………………………….14

5.- Metabolismo energético celular…………………………………………….21

6.- Ciclo celular y Apoptosis……………………………………………………….28

7.- Meiosis …………………………………………………………………………………34

8.- Gametogénesis……………………………………………………………………..36

Índice:

31

29

• Nombre preparación : Aplastado de Meristemo de Cebolla

• Propósito : Observación de nucleolos

• Tinción: Argéntica (Sales de plata)

• Aumento Total: 400X

• Descripción : Se observan células de color café claro, con hasta cuatro nucléolos y un núcleo café oscuro. Las células alargadas son producto del mismo aplastado. Las células se ven cuadradas y bien definidas gracias a su pared celular.

CITOPLASMA

NÚCLEO

NÚCLEOLO

La Mayoría de las células están en interfase, esto se sabe por la presencia de nucléolos.

Las células pueden tener uno o varios nucléolos en su núcleo, esto por la necesidad de síntesis de proteínas. Depende del momento de interfase en el que se encuentre.

• Nombre preparación : Aplastado de Meristema de Cebolla

• Propósito : Observación de estadíos Mitóticos

• Tinción: Orceína Acética 2%


• Descripción: Se ve interfase, profase, metafase, anafase, telofase e incluso una citocinesis. Los cromosomas se distinguen de un color violeta, mientras que el contenido citoplasmático es calipso.

CELULAS EN

MITOSIS

30

32

• Nombre preparación : C.T. de lombriz de tierra

• Propósito : Fase “S” (inicial o terminal)

• Tinción: H/E con técnicas de radioautrografia y sales de plata


• Descripción : Se ven regiones de color negro que corresponden a la presencia de la fase S. Se reconoce gracias a la Timidina Tritiada, pues reconoce a su base complementaria en el ADN y actúa como un marcador. Como sabemos, la fase S es aquella en la que se sintetiza material genético

FASE S iniciand

o

FASE S terminan

do

A la lombriz se le inyecto Timidina

Triteada en exceso (Timina marcada con

tritio H3)

G1

S

G2

M

2C

2C

4C

4C

ANAFASE

INICIAL

TELOFASE

FINAL

METAFASE

TELOFASE

INICIAL

PROFASE

INICIAL

PROFASE FINAL

INTERFASE

35

33

• Nombre preparación : C.T. de Prostata de rata

• Propósito : Observar células Apoptóticas

• Tinción: Hematoxilina Férrica


• Descripción : Se indujo apoptosis de la célula, en donde se observa el contenido celular deteriorado y cuerpos apoptóticos, los cuales son fagocitados por células vecinas y degradados por los lisosomas de éstas. Las células se observan de color negro, ya que la hematoxilina férrica reconoce la cromatina.

CELULAAPOPTÓT

ICA

La Célula en apoptosis se encuentra rodeada de una

porción blanca y tiene puntitos más oscuros(el núcleo)

Prometafase

Quiasma de Diploteno

Paquiteno

Cigoteno (bouquet)

34

36

7.- Meiosis:• Nombre preparación : C.T. del Lilium

• Propósito : Observación de las etapas de Profase I (Leptonema, Paquinema y Diplotema) y Metafase I

• Tinción: Hematoxilina Safranina


• Descripción : Hay células de la periferia que se tiñen de color calipso, en las cuales se observan núcleos de color morado, mientras que hacia el lumen, están las células violeta, en las cuales fijaremos nuestra atención. Estas células miden cerca de 15 micrones y en su interior podemos ver las distintas etapas de la profase: Leptoteno, paquiteno, diploteno.

PAQUINEMA

LEPTONEMA

DIPLONEMA

8.- Gametogénesis:

• Nombre preparación : C.T. de Testiculo de rata

• Propósito : Observación Gametogénesis Masculina

• Tinción: Hematoxilina


• Descripción : Observar distintos tipos celulares, y observar los tres tipos de compartimentos en las gónadas masculinas.

• Descripción: Se ven tres grandes compartimentos tubulares. El borde externo del túbulo se llama compartimiento peritubular y el contenido se llama compartimiento intratubular. Entre cada túbulo existe un compartimento llamado Intersticial. Dentro de las capas de un túbulo podemos distinguir en orden las siguientes células: Espermatogonias, Espermatocitos I, Espermátidas (redondas y alargadas) y espermios. En el compartimento intersticial se ven células de Leydig y en el compartimento intratubular, luego de las células Mioides, se ubican en forma triangular, las células de Sértoli.

TÚBULO

38

40

• Nombre preparación : C.T. de Ovario de rata

• Propósito : Observación Gametogénesis Femenina

• Tinción: Hematoxilina - Eosina


• Descripción : Observar distintos tipos celulares, y observar los tres tipos de compartimentos en las gónadas masculinas.

• Descripción: Se ven folículos primordiales, Primarios (28 micrones) aún sin antro, secundarios (30 micrones) o en formación y Terciarios (35-36 micrones) con un antro ya formado.

FOLÍCULO

PRIMARIOFOLÍCUL

O SECUND

ARIO

FOLÍCULO

TERCIARIO

ANTRO

Mitosis MeiosisConservativa 2n 2n

(2n=Diploide; n=Haploide)Reducida 2n n (2n=Diploide;

n=Haploide)

1 División Producto: 2 Células Hijas

2 Divisiones Producto: 4 Células Hijas

No hay Apareamiento de cromosomas Homólogos

Hay Apareamiento de cromosomas Homólogos

Células NO Gaméticas Células Gaméticas

No hay Variabilidad Genética Hay Variabilidad Genética

Tabla Comparativa entre Mitosis y Meiosis

37

39

CÉLULAS MIOIDES

CÉLULAS DE SERTOLI

ESPERMATOZOIDES

ESPERMÁTIDAS REDONDAS

ESPERMATOCITO I

ESPERMATOGONIAS

CÉLULAS DE LEYDIG

Folículo de Graff

Folículo Terciario

Antro Folicular

24

22

2

Es importante destacar los colores característicos de cada Pigmento:

Clorofila a---Verde azulado

Clorofila b---Verde amarillento

Carotenos---Naranjo

Xantofilas----Amarillo

1

DESPUES DE BATIR..

Finalmente, la mezcla de alcohol, pigmentos y bencina blanca se bate, para que sus componentes se separen en dos capas:

La capa Superior corresponde a la Bencina blanca de tipo apolar, a la cual se han unido los pigmentos de Clorofila.

En la fase inferior a ésta se observa una gran cantidad de alcohol etílico, al cual se han unido los carotenos, es decir, pigmentos fotosintéticos de otra naturaleza. Éstos son los pigmentos que a la luz se ven de color rojo.

Sin embargo han quedado algunos pigmentos verdes de clorofila en la fase inferior. Esto ocurre debido a que la cantidad de bencina blanca fue mínima en relación con la gran cantidad de clorofila que había en el tubo de ensayo, por lo tanto, la bencina blanca se saturó y no pudo aceptar más clorofila.

Bencina+ clorofila HidrofóbicoAlcohol+ carotenos + antófilas Hidrofílico

Pigmentos fotosintéticos: carotenoides, antófilas, clorofila.

Bencina: naturaleza apolar / Clorofila: naturaleza Antipática

CO2+ Ba(OH)2 BaCO3+H2O

MATRAZ CON LEVADURA, AGUA Y

GLUCOSA

TUBO DE ENSAYO CON EL

Ba(OH)2 QUE

FORMA EL PRECIPITA

DO DE BaCO3

2*Experimento Fermentación

Alcohólica

Este experimento consiste en un matraz conectado a un tubo de ensayo que contiene Agua de Barita Ba(OH)2. En el matraz se ha puesto cierta concentración de glucosa, agua y levadura. Como el matraz se encuentra sellado herméticamente, la levadura comienza a consumir el O2 y se desprende alcohol etílico y CO2 como consecuencia de la actividad metabólica de la levadura. El CO2 liberado llega mediante una conexión al tubo de ensayo que contiene agua de Barita y reacciona con ella, de manera que se forman un precipitado de color blanco, que corresponden a Carbonato de Bario BaCO3, el nuevo compuesto formado por la reacción.

18

20

• Nombre preparación : C.T. de Páncreas

• Propósito : Observar RER

• Tinción: Galocianina


• Descripción : Se identifican acinos (colonias celulares pancreáticas), con lumen, núcleo y RER, dispuesto hacia el lumen para la síntesis proteica.

LUMEN

ZONA DEL RER

ERGASTOPLAMS

O Grupos de ergastoplasmos

forman el acino

El RER se ubica en el ergastoplasmo

Islotes Pancreáticos

• Nombre preparación : C.T. de Tráquea de rata

• Propósito : Observar cilios

• Tinción: Hematoxilina Férrica(Tiñe de negro el núcleo)


• Descripción : Se ven Condrocitos (células cartilaginosas que conforman la tráquea) de los cuales se suspenden prolongaciones largas llamadas Cilios. (cilios: estructura básica del axolema).

Tejido Cartilaginoso

Se observan cilios, células caliciformes, tejido cartilaginoso,etc…

*Glicosilación(es el proceso de adición de carbohidratos a una proteína) ocurre en el RER y posteriormente en el Golgi.

http://es.wikipedia.org/wiki/Prote%C3%ADna

http://es.wikipedia.org/wiki/Carbohidratos

25

27

HOJA DE CARDENAL

DECOLORADA

HOJA DE CARDENAL

TEÑIDA CON LUGOL (SE TIÑEN

LOS AMILOPLASTOS)

Para decolorar la hoja de cardenal se sumerge en alcohol etílico (95º) y agua, contenidos en un vaso precipitado, hirviendo a baño maría, así se extraen sus pigmentos fotosintéticos.

Una vez decolorada la hoja de cardenal se tiñe con Yodo Yodurado (lugol) para reconocer los depósitos de almidón (amiloplastos), que se observan de un color café más oscuro en relación con el tejido vegetal de la hoja.

3*Experimento Reconocer el almidón en la hoja

Esto quiere decir, que la hoja tenía una función fotosintética, pues por alguna razón, fue capaz de sintetizar carbohidratos.

CO2+ Ba(OH)2 BaCO3+H2O

1

2

5*Experimento

En un tubo de ensayo hay Agua de Barita (1). Al insuflar aire en ella, se forma el mismo precipitado de carbonato de Bario que se formaba al experimentar con la levadura, pues cuando se insufla aire, también se recibe CO2. Por lo tanto, se ve la misma ecuación que en la reacción anterior.

26

28

CO2+ H2O+ Rojo fenol H2CO3+ Beige

1 2

4*Experimento

En un tubo de ensayo se contiene una solución de Ba(OH)2 al 5% que además, tiene como indicador Rojo Fenol (1). Es importante comprender, que la mezcla está en estado básico pues se encuentra en agua y que el rojo fenol reacciona en soluciones ácidas.

Al insuflar aire en el tubo de ensayo, el rojo fenol cambia su color a beige (2), pues al captar CO2 éste reacciona con la molécula de agua y finalmente el agua se disocia para formar un ácido llamado Ácido Carbónico H2CO3.

Medio Basico Hidroxido de sodio+rojo fenol +CO2

Se agrego CO2 y se hizo un medio más acido

6.- Ciclo Celular y Apoptosis:

• Nombre preparación : C.T. de Hígado

• Propósito : Observación de núcleos

• Tinción: H/E


• Descripción : Se ven Hepatocitos humanos, con núcleos teñidos de un color morado. El borde más oscuro del núcleo corresponde a sitios en donde se encuentra la Heterocromatina. En el centro del núcleo, se observan unos gránulos morados oscuros que también corresponden a Heterocromatina, mientras que las porciones transparentes del núcleo corresponden a Eucromatina.

NÚCLEOHEPAT

OCITO

Los Hepatocitos tienen núcleos principalmente intermedios

Núcleo Vesiculoso

Núcleo Intermedio

Núcleo Macizo

Eu < He

Eu = He

Eu > He

He: Heterocromatina

Eu:Eucromatina

17

19

• Nombre preparación : C.T. de intestino delgado

• Propósito : Observar diferenciación de membranas

• Tinción: H/E


• Descripción : Se identifican microvellosidades

MICROVELLOSIDADES

TEJIDO CONJUNTI

VO

CELULA CALICIFOR

ME

Apical

Basal

Microvellosidades

LumenChapa Estriada: Conjunto de microvellosidadesCélulas Caliciformes: Secretan mucus

• Nombre preparación : C.T. de Epidídimo

• Propósito : Observar Complejo de Golgi

• Tinción: Método de Elfman


• Descripción : : Es posible reconocer prolongaciones de color negro que corresponden al complejo de golgi, sitio de modificaciones proteicas

* El método de elfman aplica una solución de sales de plata (plata metálica) que tiñe el golgi de color negro. Esto porque posee azucares reductores.

Lumen

Lumen

Se pueden observar: núcleos, estereocilios, aparato de golgi, etc...

jos

14

16

4.- Organización Celular Eucarionte:• Nombre preparación : Epidermis de catafilo de cebolla

• Propósito: Observación de permeabilidad células vegetales

• Tinción: Sin tinción


Concentración Medio Comportamiento

0,2 hipotónico turgencia

0,4 isotónico ------------------

0,6 hipertónico plasmólisis incipiente

0,8 hipertónico plasmólisis total

Se acerca al medio isotónico

Comienza la plasmólisis

Plasmolisis avanzada

Osmosis

0,2M 0,4 M

0,6 M

Ingresa Agua.

0,8 M Sale Agua.

: Más soluto

: Menos Soluto

• Nombre preparación : Frotis sanguíneo a diferentes concentraciones

• Propósito: Observación de permeabilidad células vegetales



Hipertónico Sale agua Plasmólisis Hipotónico entra agua Turgencia

0,1% 0,5%

0,9% 1,1%

No hay zona

bicóncava

Zona Bicóncava

Hipotónico Hipotónico

Isotónico

Hipertónico

Crenación: Deshidratación de los Eritrocitos

En células vegetales En Glóbulos rojos

Plasmólisis

Lisis Celular

Crenación

Hemolisis

13

15

• Nombre preparación : Pellet 1,2 o 3

• Propósito: Pellets obtenidos por fraccionamiento celular

• Tinción: Azul de Metileno


• Descripción : Se observa:

En el Pellet 1: La célula en sí. (Células completas)

En el Pellet 2: Núcleos

En el Pellet 3: Componentes del citoplasma (Restos de membrana y nucléolos)

PELLET 1

PELLET 2

PELLET 3

Procedimiento: Moler en 1 mortero, se deja descansar y se traspasa el sobrenadante Pellet1 (se obtuvo dejándolo decantar). Se saca el sobrenadantePellet2 Centrifugar 10min 1200RPM Pellet 3 10min. 5000 RPM , descartar el portanadante.

0,2 M 0,4 M

0,6 M 0,8 M

• Nombre preparación : Mezcla de Diatomeas

• Propósito: Observación representante del reino Protista

• Tinción: Vital


• Descripción: Se observan dos tipos de diatomeas: unas que tienen forma de hoja llamadas “Pennales” y otras que tienen forma de esfera, llamadas “Centrales”.

5

Reino Protista

COLONIA DE

PINULARIAS

PINULARIA

FILAMENTOSANAVICU

LAR

Diatomeas

Penales

Filamentosas

Naviculares

Pinularias

Centrales

Frustula: Capa externa de la Diatomea compuesta de sílice.

Rafe: Función entrada y salida de agua

7

• Nombre preparación : Penicillium Sp.

• Propósito: Observación representante del reino Fungi

• Tinción: Vital


• Descripción : Se observa una madeja de hilos (Hifas) de las cuales las que están en el centro del cuerpo se llaman hifas vegetativas. Las hifas que llegan a la periferia corresponden a hifas que contienen en su extremo terminal un esporangio, estas son las hifas reproductivas.

Reino Fungi

HIFAS REPRODUCT

IVAS CON ESPORANGI

OHIFAS VEGETATIVAS

Micelio: Conjunto de Hifas (reproductivas + vegetativas)

Levadura (Saccharomyces cerevisiae) único Hongo unicelular que existe

• Nombre preparación: Hilos entrecruzados

• Propósito: Uso y manejo del microscopio, poder de penetración


• Nombre preparación : Oscillatoria Sp

• Propósito: Observación representante del reino monera

• Tinción: Vital(Tiñe cuando el organismo esta vivo)


• Descripción: Se observan compartimentos o celdas unidas entre sí, formando una especie de hilo bacteriano que tiende a enrollarse u oscilar. Esta especie es llamada “Oscillatoria sp.” La bacteria se tiñe de un color verde azulado.

El Poder de Penetración es inversamenteproporcional al poder del aumento

2

4Colonia

Oscillatoria

Septo (división)

6

• Nombre preparación : Amoeba Sp.

• Propósito: Observación reino Protista

• Tinción: Vital


• Descripción: Se ven Amebas de color violeta y rosado, las cuales poseen brazos llamados pseudópodos. También posee: una vacuola contráctil y una vacuola alimenticia.

NÚCLEO

PSEUDÓPODO

V. CONTRA

CTIL

V. ALIMEN

TICIA

Pseudópodos: Extensiones del citoplasma + el citoesqueleto

• Nombre preparación : Lichen tallus

• Propósito: Organismo simbionte entre un representante del reino protista o monera y un representante del reino fungi.

• Tinción: Vital


• Descripción : El hongo degrada minerales de la roca, para que estos sean utilizados por las algas (ya que normalmente la simbiosis es con una alga) y el alga fotosintetiza para alimentar al hongo.

El liquen aparenta ser un tejido, pero en realidad es un Pseudo-tejido.

Liquen (No pertenece a ningún reino)

Asociación de 2 organismos diferentes en el que ambos se ven beneficiados.

Parte del Hongo

LiquenCORTEZA

CAPA ALGALCAPA FUNGICA

(soporte firmeza y agua)RIZOIDE (adhesión al sustrato)

8

Capa Rizoide: Pertenece al hongo la función es adherirse al sustrato

Capa Fúngica: Hifas modificadas

9

11

• Nombre preparación : Corte Transversal de hoja

• Propósito : Observación representante del reino plantae

• Tinción: Vital


• Descripción : Se observa una capa celular superior, que corresponde a la epidermis superior. Luego, se observan líneas celulares que corresponden al clorénquima. Y para finalizar, una capa que almacena aire y en la cual se ubican las estomas llamada neumatenquima, la que inferiormente es sellada por una capa celular llamada epidermis inferior.

Reino Plantae

ESTOMA

NEUMATENQUIMA

CLORENQU

IMA

EPIDERMIS SUPERIOR

Estomas= Células oclusivas + poro + cámara subestomática.

Clorénquima: Posee gran cantidad de cloroplastos. Función: fotosíntesis

Neumatenquima: Almacenamiento de gases(ej: vapor de

agua,co2...)

Estomas: Permite el intercambio gaseoso

Método InmediatoMétodo Mediato

NO

Se puede observar el proceso de crenación (cambios fisiológicos)

Más Rápido, Menos Costoso

Duran Horas

Se observa apilamiento de Eritrocitos

In Vivo

Se pueden ver los leucocitos

NO

Proceso de crenación Los glóbulos rojos se están deshidratando. En la célula vegetal a este proceso se le llama plasmólisis.

Menos Rápido, Más Costoso

Duran Años

NO

In Vitro

Ventajas: se logra ver con mayor detalle, gracias a su tinción.

Dura + tiempo

Desventaja: No se observan procesos biológicos (como crenación)

Preparación más compleja

Mucho más costoso

Método Mediato

En el otro método es lo

mismo pero al revés.

12

3.-Metodos de estudio de biología celular• Nombre preparación : Frontis de sangre humana

• Propósito: Ventajas y desventajas del método Inmediato



• Descripción: Se presentan gran cantidad de glóbulos rojos y se aprecia su forma, se notan todas las células iguales. Entrega la información de la agrupación en pilas de monedas

• Nombre preparación : Aplastado de Hígado

• Propósito : ventajas y desventajas del método inmediato

• Tinción: sin tinción


• Descripción : Se observan hepatocitos y el espacio intersticio.

• Nombre preparación : Frontis de sangre humana

• Propósito: Ventajas y desventajas del método Mediato

• Tinción: May grundwold giemsa


• Descripción: Permite observar glóbulos blancos, rojos y plaquetas. El glóbulo blanco es polimorfo nuclear más grande que el glóbulo rojo y mide de 9 a 10 micrones.También es posible diferenciar un linfocito, ya que su núcleo es grande y la célula se tiñe prácticamente completa.

Al fijarse los glóbulos rojos no se superponen entre sí, están fijados. Esto sucede por la técnica histológica

Glóbulo rojo crenado --> deshidratado

10

NÚCLEO DE UN HEPATOCITO

• Nombre preparación : C.T. de Hígado de rata

• Propósito : ventajas y desventajas del método mediato

• Tinción: H/E


• Descripción : Se observan hepatocitos teñidos, los núcleos de estos y se logra diferenciar el espacio intersticio.

ESPACIO INTERSTICIO

HEPATOCITO

NÚCL

EO

H/E: Hematoxilinacolorante básico tiñe de azul o purpura los elementos ácidos ej:Núcleo. Eosina Tiñe de Rosado o Rojo los elementos básicos Ej: Citoplasma.

• Nombre preparación: N°6 en papel milimetrado

• Propósito: Uso y manejo del microscopio. Poder de las lentes


• Aumento Total: 40X, 100X, 400X

1.-Microscopia

• Nombre preparación : Frotis de Sangre Humana

• Propósito: Calculo del tamaño celular. Uso del aumento de inmersión

• Tinción: May Grundwald Giemsa(MGG)

• Aumento Total: 400X 1

3

2.- Morfología de los Seres Vivos

Reino Monera

• Nombre preparación : Frotis Bacteriano

• Propósito: Observación representante del reino Monera

• Tinción: Gram


• Descripción: Se observan células teñidas(Gram+) de color violeta. Revelando morfología en forma de bastón, llamadas “Bacillus” y en forma esférica llamadas “Coccus”

Gram(+) Violeta

Gram(-) Rosado

Espirilos

Cocaceas

Bacilos

Stafilo sp

Streptococcusp

Mini Manual de Bio (1)

Documents

Transcript of Mini Manual de Bio (1)