MICOLOGIA I

Introducción

• MICOLOGÍA: Hongos

Distribución universal naturaleza

Microorganismos de gran utilidad

Se conocen > 250.000 especies

( < 500 infecciones hombre)

Incremento interés últimos años

( aumento inmunodeprimidos)

Introducción

• No todos Hongos perjudiciales

• Hongos beneficiosos para el hombre

Los hongos como productores de metabolitos secundarios

Penicillium notatum

Staphylococcus aureus

PENICILINA

Los hongos como productores de metabolitos secundarios

Otros antibióticos:

- Cefalosporina- Ácido fusídico- Ácido helvolico- Ramicina- Griseofulvina- Oosporeina- Pecilocina- Fumagilina- Sicanina

Los hongos como productores de metabolitos secundarios

Inmunoreguladores: Ciclosporina

Tolypocladium inflatum

Los hongos en biotecnología ambiental

Tratamiento efluentes industriales

Decoloración de residuos

Tratamiento de efluentes con elevado contenido en ácidos grasos

Tratamiento de los residuos de las destilerias de Whisky en Irlanda

Los hongos en la industria alimentaria

Producción de quesos:

- Modificación de sabores (Quesos azules) Crecimiento interno del hongo

- Modificación de textura (Quesos Camenbert, Brie) Crecimiento externo. Acción de proteasas

Penicillium roqueforti

Penicillium camemberti

Los hongos en la industria alimentaria

Comidas orientales fermentadas:

-Tempeh kederle, indonesio Rhizopus olygosporus

- Idli, sur de la IndiaTrichosporium pullulans

- Ang-kak, China y FilipinasMonascus purpureus

Los hongos en la industria alimentaria

Elaboración de bebidas alcohólicas

- Cervezas

- Vinos

Características Generales• Reino FUNGI:

5º reino naturaleza

Características Generales

- Células eucariotas.

- Nutrición heterótrofa.( no clorofila)

- Reproducción :

esporas sexuales (meiosis)

esporas asexuales (mitosis)

- Sin diferenciación tisular.

EstructuraPared celular:

- Quitina.- Mananos- Glucanos.- Glicoproteinas

Membrana celular: ErgosterolNúcleo verdadero con membrana nuclear

Metabolismo

• Heterótrofo.• Aerobios o anaerobios facultativos.

• Tª óptima crecimiento 25-30ºC.• Crecimiento lento (hasta 2 meses).

UNICELULAR

LEVADURAS

blastoconidias

UNICELULAR

LEVADURAS

blastoconidias

MORFOLOGÍA MORFOLOGÍA

PLURICELULAR

HONGOS FILAMENTOSOS

(mohos)

PLURICELULAR

HONGOS FILAMENTOSOS

(mohos)

Hifa

Micelio

COLONIA

HONGOS DIMÓRFICOS

37ºC: LEVADURAS

HONGOS DIMÓRFICOS

37ºC: LEVADURAS

MORFOLOGÍA MORFOLOGÍA

Tra ambiente:H.FILAMENTOSOS Tra ambiente:H.FILAMENTOSOS

Hifa

Micelio

COLONIA

Levaduras

Hongos filamentosos (Mohos)

Hongos DimorficosTra ambiente Tra 37ºC

Blastomyces dermatitidis

Reproducción

• Asexual:

- Fragmentos de hifas.

- Conidias o esporas

• Sexual:

- Esporas sexuales.

Patogenia Micosis• Factores Hongo

Inóculo

Factores virulencia (poco conocidos)

Enzimas

• Factores Huesped

Inespecíficos

Específicos: inmunidda celular

inmunidda humoral

Patogenia Micosis

• Patógenos Oportunistas CandidiasisCriptococosisAspergilosisZigomicosis

Diagnóstico micológico.I Directo

1. Toma de muestra y transporte adecuado

2. Exámen directo al M.O.:- Fresco: +/- KOH o NaOH.- Tinciones: Calcofluor, azul de

lactofenol, Gram, tinta china, histopatológicas..

- IFD.3. Cultivo:

- Medio de Sabouraud glucosado +/- antibióticos.

- Dimorfismo: 25ºC (Sabouraud) y 37ºC (BHI).

Diagnóstico micológico IDirecto

4. Identificación: • Filamentosos: características macro/micro.• Levaduriformes: Pruebas bioquímicas; test

de filamentación.

ColorColor

TopografíaTopografía

TexturaTextura

Tasa crecimientoTasa crecimiento

Macroscópicas

Características morfológicas

Hifas

Conidóforo

Vesícula

Fiálides

Conidios

Esclerocios

Células de Hülle

Cleistotecios

Ascos

Ascosporas

Microscópicas

Características morfológicas

Diagnóstico micológico IDirecto

4. Detección de antígenos: • Ag. capsular de Cryptococcus neoformans • Galactomanano de Aspergillus spp.

5. Detección otros componentes: Beta-1-3-D Glucano y Acidos Nucleicos

(PCR).

MICOSIS OPORTUNISTAS

CANDIDEMIAS

Infecciones profundas por levaduras del género Candida, las cuales en la mayoría de los casos son endógenas

FACTORES DE VIRULENCIA• Formación de seudofilamentos y filamentos verdaderos• Proteasas extracelulares,

aspartilproteasas• Acidificación del medio• Adherencia• Producción de biofilm• Variación antigénica

FACTORES DE VIRULENCIA• Fase analítica(en una muestra

representativa):• Presencia de levaduras con o sin seudo

filamentos en sitios anatómicamente estériles.

• Cantidad de levaduras en la muestra.• Observación de levaduras y/o seudo

filamentos en los tejidos (biopsia).

TIPOS DE CANDIDIASIS

• Candidiasis profunda localizada: esofágica, pulmonar, renal, otras.

• Candidiasis profunda sistémica: Puerta de entrada variable con diseminación linfo-hemática y compromiso de uno o varios parénquimas

ESTUDIO MICOLÓGICO:

• Fase preanalítica: obtención, transporte y conservación de la muestra.

Tubo germinativo Micromorfología

ESTUDIO MACRO Y MICROMORFOLÓGICO DE LA COLONIA AISLADA

CRIPTOCOCOSIS

• Micosis sistémica, de curso subagudo,• Causada por un hongo oportunista• Cryptococcus neoformans

• Genero Cryptococcus.• Cryptococcus neoformans var. Neoformans var. grubii• Cryptococcus gatti

• Agente: Cryptococcus neoformans

• Levadura capsulada de 6-8 de diámetro, cápsula mucopolisacárida, de espesor variable

• Amplia distribución mundial

• Reservorio en el suelo vinculado a excretas de aves (palomas)

• Gran aumento del nº de casos luego de la pandemia de SIDA

FACTORES DE VIRULENCIA

• Cápsula (Glucuronoxilomananos)• Producción de manitol• Síntesis de melanina• Proteasas• Fosfolipasas

MECANISMO DE INFECCIÓN

•Puerta de entrada inhalatoria•Neumonitis con invasión tisular•Diseminación linfohemática•Infección SNC (entre otros sitios)•C. neoformans: Neurotropismo

..........•Meningoencefalitis sub-aguda•Sindrome tóxico infeccioso•LCR: claro (cristal de roca), con hipogulucorraquia e hiperproteinirraquia Hidrocefalia, obstructiva.

TIPOS DE CRIPTOCOCOSIS

• Criptococosis pulmonar: En los pacientes sintomáticos; tos, expectoración mucosa, repercusión general.• Criptococosis cutánea: vesículo pápulosas umbilicadas, ulceraciones únicas o múltiples.• Expresión de formas diseminadas.• Otras Localizaciones: hígado, riñón, bazo, ganglios linfáticos, suprarrenales, entre otros.

EXÁMEN DIRECTO: LCR

• Examen en fresco c/tinta china y coloraciones (Gram, Giemsa, Gomori, PAS, Mucicarmín).• Sensibilidad del ex. directo con tinta china en meningitis criptococóccica: 70-80%.• Sensibilidad del ex.directo en criptococosis cutánea: 95-100%.

DIAGNOSTICO MICROBIOLOGICO

FRESCO CON TINTA CHINA

DIAGNOSTICO MICROBIOLOGICO

• Cultivos:• Sabouraud (sin

cicloheximida).• Sensibilidad en

meningitis criptococóccica:

80-90%.

Detección de antígenos circulantes:

• Técnica: aglutinación de partículas de látex (latex sensibilizadas con Ac. específicos anti C. neoformans).

• Sensibilidad en criptococosis meníngea en LCR:>90%, en suero: 40-50%.

TRATAMIENTO

• Anfotericina B• 5-fluocitocyna• Fluconazol• Terapia antirretroviral en el paciente con SIDA• Tratamiento de la hidrocefalia

PREVENCIÓN

• Primaria: evitar la exposición en pacientes susceptibles.

• Secundaria: fluconazol

HONGO FILAMENTOSO OPORTUNISTA

Aspergillus

• Micelios• Hifas verdaderas• Exogenas, Inhaladas

– Tierra– Estanques de agua,– Comida– Vegetales en descomposición

Aspergillus

– Materiales de protección para incendios– Almohadas– Ventilación y sistemas de enfriamento– Ventiladores de computadoras

•Entra por las fosas nasales y llega al aparato respiratorio

Aspergillus

Tipos de Aspergillus–Aspergillus flavus–Aspergillus fumigatus–Aspergillus niger–Aspergillus terreus–Aspergillus oryzae–Aspergillus parasiticus–Aspergillus tamarii

GRACIAS, HASTA PRONTO….