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Módulo Fisiología FBA III 1 ¿Qué es el BIENESTAR ANIMAL? Es todo lo relativo al confort animal, y que está más allá de la mera falta de enfermedad, abarcando el completo estado de bienestar físico. Es la realidad que considera al animal en un estado de armonía en su ambiente y la forma por la cual reacciona frente a los problemas del medio, tomando en cuenta su confort, su alojamiento, trato, cuidado, nutrición, prevención de enfermedades, cuidado responsable, manejo y eutanasia humanitaria cuando corresponda. Para que las necesidades de los animales queden cubiertas, se han de cumplir unos estándares mínimos de bienestar, conocidos como “las cinco necesidades”, promulgadas por el Farm Animal Welfare Council del Reino Unido, que son: -Que estén libres de sed, hambre y mal nutrición: la dieta debe ser satisfactoria, apropiada y segura. La intimidación y la competencia durante la alimentación son minimizadas por la asignación de espacios con especificaciones generosas para comer y beber. Los animales deben tener continuo acceso a agua dulce y limpia. -Que estén libres de incomodidad : lugares adecuados para descansar confortablemente, acicalarse ellos mismos y levantarse y echarse fácilmente. -Que estén libre de dolor, lesiones y enfermedad : los animales deben ser protegidos de daños y de elementos que les puedan causar dolor o que atenten contra la salud. Su medio ambiente debe ser bien manejado para promover la buena salud y deben recibir atención veterinaria rápida cuando sea necesario. -Que sean libres para expresar su comportamiento normal : mediante el suministro de suficiente espacio, instalaciones apropiadas y compañía de animales de su propia clase. -Que no sufran miedo ni angustia : evitarles el estrés, particularmente cuando están siendo trasladados, cargados o descargados. La mezcla de diferentes grupos sociales, edades y sexos de animales puede ser también muy estresante y más aún tener como consecuencia daños. 1.-EVALUACIÓN DEL DOLOR Y MECANISMOS DE REDUCCIÓN Dolor: se define como el malestar sentido y la experiencia emocional asociados y descritos en términos de perjuicio o daño. Desde un punto de vista médico, se define como una sensación subjetiva de malestar o sufrimiento que se origina como resultado de estimulaciones nocivas que indican daño tisular o enfermedad de cualquier tipo. La evaluación y el control del dolor y del sufrimiento son desafíos que se deben enfrentar, si se quiere tratar a los animales de manera ética y humanitaria. Además de consideraciones éticas, una salud deficiente, el dolor o la angustia en los animales agrega variables indeseables en la investigación, que puede causar muchos problemas con la interpretación de los estudios. La investigación sobre el dolor requiere frecuentemente producir en los animales estas mismas sensaciones y comportamientos que, según la ética, se deben eliminar. Desde hace tiempo, se intentó definir lo que constituye el estrés, pero sin llegar a un acuerdo. Sin embargo, ILAR (1992) definió recientemente el estrés como "el efecto producido por eventos externos (es decir, físicos o ambientales) o factores internos (es decir, fisiológicos o psicológicos), reconocidos como agentes estresantes que inducen un cambio en el equilibrio biológico de un animal." La presencia o la ausencia de estrés parece ser el único indicador aceptable del bienestar animal. Cuando se requiere una respuesta al estrés a corto plazo intervienen el sistema nervioso simpático y la médula adrenal, mientras que a largo plazo intervienen la hipófisis y la corteza adrenal. Los receptores que responden específicamente a estímulos adversos se llaman "nociceptores" Sin embargo, Wall (1992) menciona que hay evidencia que el sistema

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¿Qué es el BIENESTAR ANIMAL?

Es todo lo relativo al confort animal, y que está más allá de la mera falta de enfermedad, abarcando el completo estado de bienestar físico. Es la realidad que considera al animal en un estado de armonía en su ambiente y la forma por la cual reacciona frente a los problemas del medio, tomando en cuenta su confort,

su alojamiento, trato, cuidado, nutrición, prevención de enfermedades, cuidado responsable, manejo y eutanasia humanitaria cuando corresponda. Para que las necesidades de los animales queden cubiertas, se han de cumplir unos estándares mínimos de bienestar, conocidos como “las cinco necesidades”, promulgadas por el Farm Animal Welfare Council del Reino Unido, que son: -Que estén libres de sed, hambre y mal nutrición: la dieta debe ser satisfactoria, apropiada y segura. La intimidación y la competencia durante la alimentación son minimizadas por la asignación de espacios con especificaciones generosas para comer y beber. Los animales deben tener continuo acceso a agua dulce y limpia. -Que estén libres de incomodidad: lugares adecuados para descansar confortablemente, acicalarse ellos mismos y levantarse y echarse fácilmente. -Que estén libre de dolor, lesiones y enfermedad: los animales deben ser protegidos de daños y de elementos que les puedan causar dolor o que atenten contra la salud. Su medio ambiente debe ser bien manejado para promover la buena salud y deben recibir atención veterinaria rápida cuando sea necesario. -Que sean libres para expresar su comportamiento normal: mediante el suministro de suficiente espacio, instalaciones apropiadas y compañía de animales de su propia clase. -Que no sufran miedo ni angustia: evitarles el estrés, particularmente cuando están siendo trasladados, cargados o descargados. La mezcla de diferentes grupos sociales, edades y sexos de animales puede ser también muy estresante y más aún tener como consecuencia daños. 1.-EVALUACIÓN DEL DOLOR Y MECANISMOS DE REDUCCIÓN Dolor: se define como el malestar sentido y la experiencia emocional asociados y descritos en términos de perjuicio o daño. Desde un punto de vista médico, se define como una sensación subjetiva de malestar o sufrimiento que se origina como resultado de estimulaciones nocivas que indican daño tisular o enfermedad de cualquier tipo.

La evaluación y el control del dolor y del sufrimiento son desafíos que se deben enfrentar, si se quiere tratar a los animales de manera ética y humanitaria. Además de consideraciones éticas, una salud deficiente, el dolor o la angustia en los animales agrega variables indeseables en la investigación, que puede causar muchos problemas con la interpretación de los estudios. La investigación sobre el dolor requiere frecuentemente producir en los animales estas mismas sensaciones y comportamientos que, según la ética, se deben eliminar.

Desde hace tiempo, se intentó definir lo que constituye el estrés, pero sin llegar a un acuerdo. Sin embargo, ILAR (1992) definió recientemente el estrés como "el efecto producido por eventos externos (es decir, físicos o ambientales) o factores internos (es decir, fisiológicos o psicológicos), reconocidos como agentes estresantes que inducen un cambio en el equilibrio biológico de un animal."

La presencia o la ausencia de estrés parece ser el único indicador aceptable del bienestar animal.

Cuando se requiere una respuesta al estrés a corto plazo intervienen el sistema nervioso simpático y la médula adrenal, mientras que a largo plazo intervienen la hipófisis y la corteza adrenal.

Los receptores que responden específicamente a estímulos adversos se llaman "nociceptores" Sin embargo, Wall (1992) menciona que hay evidencia que el sistema

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nervioso central puede extraer informaciones pertinentes al dolor a partir de otros aferentes que no son los nociceptores específicos.

En los proyectos de investigación sobre el dolor, la gran mayoría de los animales

utilizados son roedores, especialmente ratas; sin embargo, la detección del dolor en roedores no es fácil. Cambios leves en los comportamientos, vocalizaciones, el uso anormal de ciertas partes del cuerpo, pueden señalar dolor, pero no podemos evaluar su magnitud. En roedores, los indicadores importantes del dolor son el hecho de quedarse acostado, cambios en los pelos y en el brillo de los ojos.

Una de las características de dolor o de angustia en los animales es un cambio en el comportamiento y en la manifestación de reflejos. El personal de apoyo y los investigadores deben conocer las características del comportamiento del animal experimental, porque el éxito o el fracaso del estudio puede depender de la habilidad del técnico que les observa en minimizar las actitudes del dolor y de la angustia de los animales. Además, el hecho de conocer el personal, el ambiente y los procedimientos, pueden reducir la ansiedad en los animales, al igual que un refuerzo positivo.

Existen muchas respuestas estereotípicas al estrés y al dolor en los animales, particularmente en los mamíferos. No obstante, existen diferencias por especies. El reconocimiento de cambios en el comportamiento y el aspecto físico en una especie animal estudiada, permitirá la identificación rápida de un animal que experimenta dolor o angustia. Observaciones específicas de muestras de dolor o estrés en algunas especies Primates no humanos Señales claves: posición encorvada, ausencia de limpieza, rechazo de alimentos o de agua, aspecto desanimado. Perros Señales claves: inapetencia, mordeduras de las áreas dolorosas, anormalmente aprensivo. Gatos Señales claves: postura tiesa, comportamiento demencial, falta de aseo, cabeza y cuello encorvados, inapetencia. Ratones Señales claves: aislamiento, mordeduras, piloerección, lomo arqueado, ojos y abdomen hundidos, deshidratación, pérdida de peso. Ratas Señales claves: vocalizaciones, peleas, lamido/vivacidad, pérdida de peso, piloerección, posición arqueada, hipotermia. Cobayos Señales claves: alejamiento, vocalización, ausencia de resistencia a la inmovilización, pelaje hirsuto, ausencia de repuesta. Conejos Señales claves: disminución de la toma de agua y de alimentos, cabeza girada hacia atrás de la jaula, movimientos limitados, fotosensibilidad aparente.

Los indicadores de problemas de bienestar a corto plazo incluyen el ritmo cardíaco, el ritmo respiratorio, la alteración de la función adrenal, y la de la química cerebral. El estrés aumenta los niveles de colesterol, y produce heterofilia y linfopenia. Otro indicador fisiológico es la calidad de la carne después del sacrificio (pálida-suave-exudativa debida a glicólisis, ácido láctico y descenso de pH), y la calidad externa (cáscara rosa) o interna (manchas de sangre) del huevo. La asimetría fluctuante de caracteres morfológicos bilaterales también está relacionada con el estrés. Dos indicadores relacionados con el comportamiento son el pasotismo ante el mundo que rodea al animal, y los estereotipos (secuencia de movimientos repetidos sin ningún objetivo).

Cuando hay estrés a largo plazo, ocurren inicialmente las mismas respuestas que en el estrés a corto plazo, aunque algunas cesan posteriormente y pueden ser reemplazadas por otras. La respuesta de la médula adrenal es muy breve mientras que la de la corteza adrenal, aunque más prolongada, disminuye al cabo de poco tiempo. Finalmente, los

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animales pueden escapar del estrés prolongado por autonarcotización con opiáceos naturales (endorfinas).

Al realizar un experimento con animales que vaya a sufrir algún tipo de dolor, es esencial considerar una revisión minuciosa por parte de los responsables de los proyectos y los legisladores, además de ponderar el beneficio que se obtendrá con el trabajo, así como también se deben considerar lo siguiente:

1. Si es posible, el investigador deberá probar el estímulo doloroso en él mismo, este principio aplica para la mayoría de los estímulos no invasivos que causen dolor agudo.

2. Al hacer posible la evaluación de los niveles bajos del dolor el investigador deberá dar una cuidadosa medición de la desviación de la conducta normal del animal. En este punto se tendrá que considerar los parámetros fisiológicos y de conducta. Esta información deberá ser incluida en el manuscrito.

3. En estudios de dolor agudo o crónico en animales, la medición deberá ser tomada para prevenir un compromiso razonable de que estos son expuestos al dolor mínimo necesario.

4. A las experiencias de dolor crónico se les debe dar solución o se les debe administrar medicamentos o procedimientos analgésicos que no intervengan con la investigación.

5. Los estudios de dolor paralizante en los animales deben ser con agentes bloqueadores neuromusculares y no se deben aplicar sin anestesia general y se debe dar un manejo quirúrgico apropiado en el que se elimine la sensibilidad.

6. La duración del experimento debe de ser lo más corto posible y el número de animales se debe reducir al mínimo.

PRINCIPIOS ÉTICOS DE LA INVESTIGACIÓN CON ANIMALES

1. Si se deben utilizar animales, ellos deberían ser mantenidos en condiciones que aseguren su bienestar físico y psicológico, según la política del CCPA sobre Las necesidades sociales y comportamentales de los animales de experimentación.

2. Los animales no se deben someter a angustia o dolor innecesarios. La técnica experimental debe asegurarles toda la protección posible, ya sea para investigación, enseñanza o para pruebas; el costo y la conveniencia no deben tener precedencia sobre el bienestar físico y mental del animal.

3. Se debe buscar la opinión de expertos sobre el valor potencial de estudios con animales. Los procedimientos siguientes, que no son todos sino solo un ejemplo, requieren una evaluación externa e independiente que justifique su uso:

* investigaciones sobre quemaduras, congelamiento, fracturas, y otros tipos de lesiones en animales anestesiados, se deberán realizar con prácticas veterinarias aceptables para lograr el alivio del dolor, incluyendo la analgesia adecuada durante el período de recuperación.

* peleas organizadas entre predadores y presas o entre animales de una misma especie, cuando son probables las heridas.

4. Si el dolor o la angustia son necesariamente parte del estudio, se deben minimizar tanto en intensidad como en su duración. Los investigadores, los Comités de protección de los animales, los comités de revisión de subsidios y los jueces deben ser especialmente cuidadosos en su evaluación de los proyectos de uso animal en los siguientes procedimientos:

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a) experimentos que involucren la privación de medicamentos que alivian el dolor pre o postoperatorio. b) experimentos donde el animal está paralizado o inmovilizado sin reducción en la sensación de dolor. c) impulsos eléctricos utilizados como refuerzo negativo. d) condiciones ambientales extremas tales como temperaturas bajas o altas, humedad alta, atmósfera modificada, etc., o cambios bruscos de estas condiciones. e) experimentos sobre la angustia y el dolor. f) experimentos que requieran la privación de alimentos y agua por períodos incompatibles con las necesidades fisiológicas específicas de las especies; tales experimentos no deberían ser perjudiciales para la salud de los animales. g) inyección del adyuvante completo de Freund (ACF). Esto debe efectuarse en conformidad con las Directrices sobre los procedimientos inmunológicos aceptables por el CCPA.

5. Un animal en estado de dolor severo que no puede ser aliviado debería ser inmediatamente destruido, usando un método que produzca una inconsciencia rápida.

6. Mientras que los procedimientos sin recuperación que involucren animales anestesiados, y los estudios que no causan dolor o angustia se consideran aceptables, los procedimientos experimentales siguientes infligen un dolor excesivo y por lo tanto son inaceptables:

a) utilización de relajantes musculares o de paralizantes (curare y similares) solos, sin anestesia, durante los procedimientos quirúrgicos; b) procedimientos traumatizantes que involucren aplastar, quemar, herir o golpear animales no anestesiados.

7. En el pasado, se realizaron estudios tales como pruebas toxicológicas y biológicas, investigaciones sobre el cáncer y sobre enfermedades infecciosas requiriendo la continuación de la experiencia hasta la muerte del animal. Sin embargo, cuando hay señales evidentes que dichos procesos ocasionan angustia o dolor irreversibles, se deberían buscar métodos alternativos que satisfagan tanto los requerimientos del estudio como las necesidades del animal.

8. La restricción física debería ser utilizada solamente después de que se hayan examinado cuidadosamente los procedimientos alternativos y que se hayan considerado inadecuados. Los animales así sujetos deben recibir una atención y cuidado excepcional, en conformidad con los requerimientos específicos y generales de las diferentes especies, tal como está indicado en el Manual.

9. Los experimentos dolorosos o la repetición de operaciones traumatizantes sobre un animal, realizadas únicamente con fines de enseñanza o para la demostración de conocimientos científicos establecidos, no puede justificarse. Los medios audiovisuales u otras técnicas alternativas deberían ser empleados para transmitir este tipo de información.

2.- APLICACIÓN DE MÉTODOS DE ENRIQUECIMIENTO AMBIENTAL

-Principios y objetivos del enriquecimiento

El enriquecimiento ambiental es la modificación de las instalaciones de los animales para mejorar sus condiciones, estimular su comportamiento exploratorio y su vida social. También proporcionando objetos para manipular y presentando alimentos de manera inusual para que los animales pasen mucho tiempo desarrollando comportamientos típicos de su especie.

En la naturaleza los animales pasan la mayor parte del tiempo buscando comida, agua, refugio, protegiendo y criando su progenie. Además gastan mucha energía en competiciones para la dominancia y/o emparejarse, en escapar de los depredadores o en

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cazar. Los animales gastan su energía y ocupan su tiempo en actividades de tipo constructivo.

En cautiverio, los animales tienen mucho tiempo y pueden desarrollar

comportamientos estereotipados o anormales, si no pueden invertir su energía en actividades que estimulan su comportamiento natural y su inteligencia. En cautiverio, agua y comida son proporcionadas por los cuidadores. Los animales viven en un grupo estable, donde no tienen que luchar para la dominación o para criar y no tienen depredadores que los amenazan. Es en este momento el enriquecimiento ambiental juega un papel importante para el bienestar físico, psíquico y de comportamiento de los animales. El enriquecimiento ambiental concierne: - Ambiente físico: Alguna de las consideraciones que debemos tener presente son las siguientes: 1) Tamaño y forma

2) Barreras 3) Substrato 4) Zona de descanso 5) Elementos temporales (como cuerdas, plataformas fáciles de mover)

- Alimento: La hora de la comida es un momento muy agradable para los animales, pero resulta muy corto. Las estrategias que permitan a los animales desarrollar su comportamiento natural son ideales. Hay diferentes modos de ofrecer la comida:

1) Tipo 2) Forma de ofrecerlo 3) Intervalo de comida 4) Cantidad 5) Calidad 6) Fresco, congelado, vivo

- Juguetes para que los animales se entretengan:

Los objetos nuevos pueden mantener entretenidos los animales durante muchas horas. Estos pueden ser naturales o hechos por el hombre. Los juguetes nuevos hay que quitarlos y cambiarlos con mucha frecuencia, para evitar que se acostumbren o se aburran con ellos. Se pueden clasificar los objetos nuevos en:

1) Naturales: troncos, raíces, hojas, flores, gusanos, rollos de platanera, paja,

hierba, frutos o verduras enteras (sandía, calabaza, coco) 2) Hecho por el hombre: bolas, ropa vieja, bidones, ruedas, revistas, tubos de PVC.

Naturalmente no existe un límite para la imaginación y se puede usar todo lo que pueda

influenciar de manera positiva en la vida de los animales en cautiverio. Lo importante es siempre comprobar que no sea tóxico ni peligroso.

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- Formación de grupos sociales: La formación adecuada de grupos sociales es una necesidad muy importante en la vida de los animales en cautividad, sobretodo en las especies gregarias (viven en grupos en la naturaleza).

Los grupos se pueden formar con animales de la misma especie o bien de distintas especies. A veces es necesario formar grupos de animales de la misma especie y del mismo sexo.

En otros casos, especies que son solitarias en la naturaleza, viven en parejas o en grupos en cautividad, esto requiere un trabajo de introducción adecuado. - Entretenimientos de tipo visual, olfativo o, auditorio y táctil: La imaginación juega un papel muy importante para estimular los sentidos de los animales.

1) Visual: proyectar películas variadas de animales de la misma especie en la

naturaleza o de otros grupos en cautividad. 2) Auditorio: poner cintas de diferentes tipos de música, de ruidos de otra especie, o

de la misma. También es muy importante hablarles. 3) Olfativo: utilizando esencias, heces de otros animales (siempre bajo control

veterinario), cualquier olor muy fuerte como ajo, cebollas, etc. 4) Táctil: introduciendo objetos nuevos y de varias texturas. El ambiente enriquecido es importante porque: - Mejora la condición física y psíquica de los animales - Evita y elimina el aburrimiento. - Ayuda a conservar las conductas biológicas específicas, incrementando la reproducción

(de gran importancia sobretodo en especies en peligro de extinción y que se quieren reintroducir en la naturaleza). Los animales desarrollan un comportamiento conservador y la vida es mas larga.

- Permite a los animales estar más activos.

En general, prevalece la idea de que, en ambientes enriquecidos con grupos sociales, puede existir un incremento apreciable de la respuesta interindividual como consecuencia de la jerarquía y el dominio social. Este hecho puede ir en detrimento de la uniformidad de la respuesta esperada en el modelo experimental, y exigir un incremento en los tamaños de la muestra, lo que iría en contra de los criterios de bienestar, y obliga a implantar el enriquecimiento con mucho cuidado para evitar o minimizar los efectos sobre los resultados experimentales.

3.- APLICACIÓN DE TÉCNICAS DE ANALGESIA, ANESTESIA Y EUTANASIA

EUTANASIA: Es un método humanitario de sacrificio, que debe producir el menor sufrimiento posible (dolor, angustia y miedo). Se emplea en animales de laboratorio cuando finaliza el experimento.

Toda técnica eutanásica ha de garantizar la ausencia de dolor o angustia; el método debe ser indoloro y libre de estrés facilitando la inconsciencia y muerte rápidas. Por ello el método ha de ser adecuado para la edad, la especie y el estado de salud del animal. Los signos típicos de dolor y angustia en la mayoría de especies animales son: vocalizaciones de angustia (no siempre en el rango audible para humanos), lucha, intentos de huída, agresiones defensivas o redirigidas, respuesta de paralización/inmovilización, jadeo, salivación, micción, defecación y evacuación de los sacos anales, dilatación de pupilas, taquicardia ,sudoración, contracciones reflejas de la musculatura esquelética, que originan temblor, temor y otros espasmos musculares.

Todos estos signos deben evitarse si el procedimiento eutanásico es correcto.

Igualmente está contraindicado el sacrificio de un animal en presencia de otros animales, ya que les produce miedo y angustia.

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Un aspecto aparentemente sencillo, pero muy importante es la confirmación de la muerte. Los signos indicativos son varios y se presentan simultáneamente. Los más habituales: ausencia de ventilación pulmonar y latido cardíaco, asociadas a ausencia de reflejos, midriasis y cianosis de las mucosas por falta de oxigenación, además de una bajada de la temperatura corporal por debajo de 25°C. Si existiese alguna duda en la confirmación de la muerte, se debería utilizar un segundo método para sacrificar al animal. A continuación se muestra una tabla resumen con los métodos disponibles: -MÉTODOS DE EUTANASIA- -Métodos físicos: Persiguen la pérdida rápida de la consciencia mediante un trauma cerebral. >Disparo: en la cabeza, destruyendo el cerebro. Es el método más usado en mamíferos y reptiles de gran tamaño. Hay dos variantes, Bala libre bala cautiva. En esta última, un émbolo sale del arma a gran velocidad produciendo contusión e inconsciencia. Posteriormente el animal ha de ser exanguinado. >Contusión: aturdimiento mediante un golpe en la cabeza. Puede aplicarse a especies pequeñas como roedores, conejos y aves. Jamás se usará un hacha o martillo como método de aturdimiento. >Aturdimiento eléctrico: para especies de tamaño medio; se aplica una corriente eléctrica con un equipo especial que dispone de unas tenazas que se colocan a ambos lados de la cabeza. El paso de la corriente produce inconsciencia por el cerebro y parada sobre el corazón por fibrilación ventricular. >Dislocación cervical: la aplicación correcta del método produce una lesión irreversible del tronco encefálico e inconsciencia inmediata. >Decapitación: implica separación total del cuello y la cabeza. Se requiere una guillotina o instrumento cortante que realice la operación rápidamente y en un solo intento >Irradiación con microondas: para animales de peso inferior a 300g, se aplica una radiación de microondas sobre el cerebro. Requiere equipamiento específico. -Métodos farmacológicos: se basan en la administración de agentes anestésicos que producen inconsciencia, fallo cardiovascular y respiratorio y muerte. *Agentes inhalatorios: agentes que se suministran en forma gaseosa. >Dióxido de carbono: es el más usado en animales pequeños. A concentraciones superiores al 60% el dióxido de carbono actúa como un agente anestésico y produce rápidamente la perdida de consciencia. >Monóxido de carbono: Produce una muerte rápida, ya que se mezcla con los eritrocitos en competencia por el oxigeno, produciendo de este modo hipoxia. >Anestésicos inhalatorios: producen inicialmente anestesia, y después muerte por sobredosis. Los más adecuados son el halotano o el isoflurano (especialmente indicado cuando se quiere mantener inalterado el metabolismo hepático). >Agentes para animales acuáticos: se diluyen en agua, e incluyen la benzocaína, tricaína metano sulfonato, el etomidato o el metomidato, y la quinaldina. Producen depresión del sistema nervioso central y la muerte. >Barbitúricos: producen muerte sin sufrimiento. Son muy baratos. El fármaco más difundido es el pentobarbital. >T-61: es la presentación comercial de un barbitúrico asociado a un paralizante de tipo despolarizante. Incluye un anestésico local (tetracaína).

-Métodos aceptables en animales inconscientes: Inserción de aguja, congelación rápida, exanguinación, nitrógeno/argón, etanol e hidrato de cloral, cloruro potásico, embolia gaseosa.

-Métodos inaceptables en eutanasia: Descompresión/vacío, hipotermia e hipertermia, ahogamiento/extracción del agua, rotura de cuello, estrangulación…

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ANALGESIA: Es un procedimiento que puede realizarse por varios métodos. Los más conocidos son los que emplean fármacos analgésicos o anestésicos. Trabajos recientes indican que la administración de analgésicos reduce considerablemente las consecuencias de la cirugía, retornándose mucho antes de la situación prequirúrgica. La anestesia y

analgesia actúan como mecanismos protectores frente a la agresión quirúrgica o a la manipulación intensa.

Existen dos grupos principales de fármacos: los derivados del opio o la morfina, denominados opiáceos y los antiinflamatorios no esteroideos (AINE). Otros analgésicos incluyen los agonistas de los receptores adrenérgicos α 2, anestésicos como la ketamina, y anestésicos locales como bupivacaína, mepivacaína o lidocaína. Los analgésicos se emplean antes de que el animal perciba el dolor, es la denominada analgesia preventiva. En la práctica, el analgésico se administra 15-30 minutos antes de que el animal se recupere de la anestesia, o bien antes de la anestesia como parte de la premedicación anestésica.

Los morfínicos actúan sobre los receptores opiáceos e incluyen los analgésicos más potentes que existen en la actualidad. Los opiáceos de acción analgésica moderada actúan sólo sobre algunos de los receptores opiáceos o lo hacen débilmente (buprenorfina, butorfanol, pentozocina), mientras que los de acción analgésica más potent actúan sobre todos los receptores opiáceos (agonistas puros), e incluyen a la morfina, la petidina o el fentanilo y sus derivados. Los opiáceos de potencia analgésica moderada son adecuados para el postoperatorio, pero también se emplean en la premedicación anestésica. La buprenorfina es el más usado en roedores y en todos los animales de laboratorio en general.

Los AINE son analgésicos de potencia moderada y suelen emplearse en el postoperatorio, en dolores crónicos moderados o en procesos inflamatorios que causan dolor o malestar. Inducen toxicidad gastrointestinal, renal y hemática. Recientemente han aparecido AINE cono menos toxicidad y mayor potencia analgésica (meloxicam y carprofeno).

ANESTESIA: La anestesia es un estado reversible producido por fármacos, que se caracteriza por la ausencia de cualquier tipo de percepción sensitiva, ya sea dolorosa o no. En investigación animal, la anestesia debe cumplir los siguientes objetivos:

-Facilitar la manipulación del animal o la realización de procedimientos quirúrgicos dolorosos.

-Proporcionar un trato humanitario a los animales, reduciendo al mínimo el sufrimiento asociado a dicha manipulación, y evitando situaciones dolorosas, de angustia o ansiedad.

-Reducir al mínimo las consecuencias negativas de la cirugía sobre la fisiología del animal.

-Permitir la realización de investigaciones que no podrían llevarse a cabo con el animal consciente.

La anestesia puede ser general, con el animal inconsciente, o local o regional, en la que sólo una región corporal no es capaz de percibir estímulo sensitivo alguno.

Los componentes de la anestesia general son cuatro:

*La hipnosis o sueño: implica que el animal esté ausente de su medio circundante.

*La analgesia: Ausencia de percepción dolorosa.

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*La relajación muscular: va desde un grado moderado, proporcionado por la mayoría de los anestésicos, hasta la parálisis que se consigue por medio de los bloqueantes neuromusculares.

*El bloqueo de la actividad refleja: impide respuestas del sistema nervioso autónomo, que incluyen alteraciones de la frecuencia y del ritmo cardíaco, de la producción de secreciones etc…

Toda técnica anestésica puede incluir 3 períodos, denominados preanestesia, anestesia propiamente dicha y postanestesia.

La presencia de alimento o agua en el estómago puede ser un riesgo durante la anestesia. En general, se recomienda que los animales ayunen durante las 12 horas anteriores a la intervención quirúrgica, que suelen coincidir con el período nocturno.

Durante el período de preanestesia se administran fármacos al animal para tranquilizarlo o sedarlo. Los principales tranquilizantes se incluyen en cuatro grandes grupos farmacológicos: Las fenotiacinas, cuyo principal inconveniente es que produce hipotensión, aunque son potentes tranquilizantes, adecuados en la mayoría de las especies. Los agonistas de los receptores adrenérgicos α 2, con acción analgésica moderada, pero con el inconveniente de que producen bradicardia elevada. Las benzodiacepinas, cuyo efecto es adecuado en animales viejos o debilitados, y a su ves potencia el efecto de otros tranquilizantes administrados en dosis bajas para reducir sus efectos adversos. Se usa más como fármaco adyuvante de la ketamina para inducir la anestesia de roedores, conejos, perros o gatos. Opiáceos, que pueden usarse como fármacos en la preanestesia. La atropina, también muy usado en la preanestesia. Su empleo no es habitual puesto que produce efectos vagolíticos, como taquicardia o reducción de las secreciones bronquiales y salivales.

*Resumen de los principales anestésicos usados en animales de laboratorio

-Tipos de anestésicos inyectables

*Fenciclidinas: la ketamina y la tiletamina son los mas usados dentro de éste grupo. Producen una anestesia llamada disociativa, puesto que inducen a un estado de catalepsia en el que el animal parece estar consciente, pero indiferente a su entorno. Las fenciclidinas producen un grado variable de rigidez muscular, que se puede contrarrestar si se combinan con tranquilizantes. Pueden aplicarse a casi todas las especies de laboratorio, incluyendo aves y reptiles.

*Barbitúricos: los más empleados son el tiopental sódico y el pentobarbital. Los cuales producen una anestesia de duración ultracorta (5-10 minutos) y media (60 minutos) respectivamente. El tiopental sódico se no se usa para roedores, pero si en animales de tamaño medio (gatos, perros, cerdos…).

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*Propofol: anestésico hipnótico de acción ultracorta (5-10 minutos), muy parecido en sus acciones al tiopental sódico, aunque químicamente distinto. Es un buen hipnótico, pero produce una analgesia deficiente, por lo que se asocia a analgésicos potentes (opiáceos) cuando la cirugía provoca un dolor muy intenso. A diferecia del tiopental sódico, la administración repetida del fármaco no produce un efecto acumulativo, ni tampoco provoca necrosis por extravasación, pero resulta más caro.

*Etomidato y metomidato: Su principal ventaja frente a los anteriores fármacos es que afectan mínimamente al sistema cardiovascular. El etomidato produce una mala recuperación y deprime la función adrenocortical de forma transitoria. Se utiliza en especies de tamaño medio, aunque también se emplea para roedores y otras especies menos corrientes.

*Opiáceos: son excelentes analgésicos pero malos hipnóticos y relajantes musculares, de modo que para producir una anestesia adecuada se asocian a otros fármacos. Las combinaciones más comunes que incluyen al fentanilo como opiáceo son la fluanisona, la medetomidina, o el droperidol.

*Otros anestésicos: uretano, alfa-cloralosa, hidrato de cloral, tribromoetanol …

-Administración de anestésicos inhalatorios

Los más comúnmente usados son, el halotano, el metoxifluorano, el isofluorano. Los mas recientemente descubiertos son el sevoflurano y desflurano, pero son demasiado caros como para ser una alternativa práctica.

Equipamiento necesario: Fuente de gases, reductor de presión, regulador de flujo y vaporizador.

Circuitos anestésicos: permiten distribuir al animal el gas proveniente de la máquina anestésica. La clasificación más conocida los divide en abiertos, semiabiertos, semicerrados y cerrados.

*Esquema de los circuitos anestésicos más comunes

-Otros equipamientos anestésicos:

-Mascarillas, tubos endotraqueales, laringoscopio, cámaras de inducción.

RECUPERACIÓN ANESTÉSICA

Es el paso del período de inconsciencia producido por la anestesia al de consciencia. Esta recuperación ha de ser gradual y libre de excitación. El periodo se sueño que sigue a la recuperación de la anestesia puede considerarse un efecto beneficioso, ya que el animal se encuentra al margen de la agresión que supone la anestesia y la cirugía. La hipotermia es la complicación más frecuente durante la anestesia y una de las causas más comunes de retraso en la recuperación de la anestesia y, probablemente, de mortalidad postoperatoria, La mejor forma de facilitar una recuperación sin incidentes es la aplicación de un analgésico postoperatorio.

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4.-CONTROL DE LAS CONDICIONES DE MANTENIMIENTO

-Estabulación de los animales

Para el mantenimiento o estabulación de animales, se utilizan distintos sistemas, según las especies y requerimientos experimentales. El Anexo II de la Directiva 86/609/CEE distingue entre:

�Jaula: receptáculo fijo o móvil cerrado por paredes sólidas y, al menos por un lado con barrotes o tela metálica, o en su caso, redes, y donde se alojan o transportan uno o más animales. Las jaulas deben ser adecuadamente ventiladas, permitir un campo visual satisfactorio y un acceso fácil a los animales. Los sistemas de bebederos y de distribución de alimentos deben ser planificados y ubicados para permitir su acceso fácil, sin que se contaminen con excrementos. El diseño de las jaulas debe facilitar su limpieza y desinfección.

�Cercado: zona cerrada, con paredes, barrotes o tela metálica, donde se mantiene a uno o más animales. La libertad de movimientos de los animales queda menos limitada que en las jaulas.

�Corral: en éstos los animales alojados en jaulas o cercados pueden moverse libremente durante un determinado periodo, según sus necesidades fisiológicas o etológicas, como el ejercicio.

�Compartimento: pequeño recinto de tres lados, equipado con un comedero y separaciones laterales, donde pueden mantenerse atados a uno o más animales.

-Características técnicas de construcción

En cuanto a las superficies, los acabados de los suelos, paredes y techos tienen que proporcionar superficies lisas, continuas, impermeables y de fácil limpieza y desinfección. Los materiales utilizados en el recubrimiento serán resistentes tanto al desgaste producido por la circulación de materiales pesados, como a la aplicación de detergentes y desinfectantes químicos. Se usarán resinas epoxídicas, suelos plásticos sellados, desaconsejándose el gres, terrazo o material similar.

Todos los puntos de contacto entre paredes y marcos de las puertas, conductos, tubos y cables estarán sellados, evitándose así rincones o zonas de difícil control y desinfección, donde puedan anidar insectos u otros organismos.

Con respecto a los desagües, las salas donde esté previsto trabajar con agua dispondrán de suelos antideslizantes con pendientes adecuadas y desagües de seguridad del tamaño adecuado.

El tamaño de las diferentes habitaciones (para animales, almacenes, lavado…) se debe analizar y definir en función del uso que se va a hacer de las mismas. En general, se aconseja que los pasillos no tengas un ancho inferior a 150 cm y que las puertas midan al menos 100 cm de ancho por 210 cm de alto. Las puertas pueden dotarse de mirillas para inspeccionar el interior de las habitaciones sin necesidad de acceder a ellas.

En relación a la temperatura, los límites de temperatura que se consideran adecuados para su comodidad son: en torno a 15-21º para conejos, gatos, perros, aves de corral y palomas. Entre 20-24º para roedores cobayas y primates del Viejo Mundo no humanos y codornices, o 20-28º, en el caso de primates del Nuevo Mundo no humanos.

Como norma general, pero sobre todo en las zonas de experimentación, deben establecerse una serie de mecanismos que eviten oscilaciones importantes de la temperatura sobre los valores prefijados (± 2º C).

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Referente a la humedad relativa, para la mayoría de la especies se recomienda un valor del 55 %, con oscilaciones no superiores al 10 %. En algunas especies como primates, puede resultar necesario mantener una humedad relativa superior.

En cuanto a la iluminación, para favorecer un adecuado nivel de control sanitario, puede optarse por situar unos plafones translúcidos en el techo, o bien ubicar las lámparas fluorescentes dentro de las salas, protegidas por pantallas estancas. Las ventanas exteriores complican el control de la temperatura, debido a la radiación y a la conducción que pueden poner en peligro la salud de los animales y los resultados de las investigaciones. También interfieren con el control del fotoperiodo. Si las ventanas ya están instaladas, se deben diseñar o modificar para minimizar los efectos mencionados y para favorecer al máximo la limpieza.

-Sistemas de limpieza por aspiración

Sirve para deshacerse de todos los residuos generados en los animalarios. Es un sistema robotizado que consta de 3 pasos:

�Una vez llegadas las cubetas sucias al área de lavado, el robot vacía su contenido en un recipiente especial que aspira la cama sucia y la conduce a un contenedor donde se almacena hasta su recogida por los servicios de limpieza, aunque también puede pasar directamente a un incinerador.

�Las cubetas vacías son depositadas por el robot en la cinta del túnel de lavado, y a medida que van saliendo limpias, el robot se encarga de cogerlas y apilarlas en carretillas o bandas de transporte, que las conduce a la zona de llenado de virutas.

�El llenado de virutas se realiza automáticamente por medio de un dosificador, que aporta la cantidad de viruta que necesita cada tipo de cubeta y consta de un equipo de aspiración que transporta los lechos desde donde están almacenados hasta un dispensador que lleva a cabo su distribución. El sistema extrae el polvo de los lechos limpios.

Los animales muertos, sus tejidos y excrementos, la cama, los alimentos inutilizados, etc., deberían ser recogidos en recipientes estancos de metal o de plástico con tapas bien ajustadas y bolsas estancas desechables. Las bolsas son esenciales para tejidos de animales, cadáveres y residuos radioactivos o tóxicos. Los desechos infecciosos idealmente deberían ser incinerados en el sitio. Si los desechos deben salir de las instalaciones, deberían ser esterilizados por autoclave antes de la recogida.

-Filtración y tratamiento del agua

Es prioritario someterla a un tratamiento que garantice la ausencia de microorganismos, en especial Pseudomonas spp., coniformes y Clostridium. Su disponibilidad para los animales en todos los casos será ad libitum. El agua se somete a una serie de tratamientos como cloración, acidificación, filtración, esterilización con rayos ultravioleta, esterilización en autoclave, ozonización etc… Los sistemas de bebederos automáticos son económicos pero si no han sido adecuadamente diseñados, son difíciles de desinfectar bien, lo que puede conducir a una contaminación cruzada. El mal funcionamiento de los sistemas de bebederos automáticos puede resultar en el ahogamiento o en deshidratación; consiguientemente, se debe verificar los sistemas regularmente y completamente. Se debe enseñar a algunos animales a beber agua de los sistemas de bebederos automáticos. Estos sistemas no son recomendados para cobayos, a menos que ya estén acostumbrados.

-Sistemas de intercomunicación

Con el fin de evitar la circulación innecesaria del personal entre las distintas zonas, conviene definir y establecer un completo sistema de intercomunicación de las distintas zonas entre sí y con el exterior. Las señales sonoras de aviso de estos intercomunicadores

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serán de intensidad moderada y deberán trabajar a frecuencias no audibles o molestas para los animales

-Controles sanitarios de los animales

No sólo hay que controlar a los animales que están en mantenimiento o en experimentación, sino también a los que proceden de proveedores. A éstos hay que exigirles que cada expedición de animales venga acompañada de su correspondiente certificado sanitario. El control con respecto a virus, bacterias, hongos y parásitos ha de ser más o menos detallado.

-Vaciados sanitarios

Dado el elevado número de animales que suelen ocupar las habitaciones o celdas, resulta difícil, en presencia de éstos, realizar una limpieza enérgica (paredes, puerta, techos…) y menos posible todavía la desinfección.

Con respecto a éste último punto, a pesar de la existencia de productos en el mercado que recomiendan su uso en presencia de animales, hay que diferenciar entre animales de granja y animales de laboratorio. En general, el animal de laboratorio es más sensible y la utilización del producto desinfectante puede afectar al experimento. Se aconseja disponer de un espacio acondicionado donde almacenar las jaulas y equipos mientras dure la operación de limpieza y desinfección. Por regla general, los animales de laboratorio deberían ser traslados en jaulas recién limpiadas por lo menos una vez por semana.

La cama en las jaulas o en los cercados de los animales debería ser cambiada tan frecuentemente como sea necesario para mantener los animales limpios, secos, y relativamente sin mal olor, y para mantener el amoníaco en las jaulas en niveles aceptables.

-Renovación del ambiente

El nivel de ventilación debe ser el adecuado para satisfacer las exigencias de las especies alojadas, suministrando aire fresco y manteniendo bajos los niveles de olores, gases nocivos, polvo y agentes infecciosos de cualquier tipo. Para zonas de estabulación de animales, se requieren valores de 20 o más renovaciones por hora del ambiente, si la densidad de ocupación es elevada.

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Bibliografía: -Jesús M.Zuñiga, Joseph A. Tur Marí, Silvana N. Milocco, Ramón Piñeiro, “CIENCIA Y TECNOLOGÍA EN PROTECCIÓN Y EXPERIMENTACIÓN ANIMAL”. Ediciones Mac Graw Hill Interamericana Direcciones web consultadas: http://www.ccac.ca/en/CCAC_Programs/Guidelines_Policies/GUIDES/SPANISH/V1_93/CHAP/CHX.HTM http://www.ccac.ca/en/CCAC_Programs/Guidelines_Policies/GUIDES/SPANISH/V1_93/APPEN/APPXV.HTM http://www.ccac.ca/en/CCAC_Programs/Guidelines_Policies/GUIDES/SPANISH/V1_93/CHAP/CHV.HTM http://www.ccac.ca/en/CCAC_Programs/Guidelines_Policies/GUIDES/SPANISH/toc_v1.htm http://www.aamefe.org/bienestar.html http://www.virtualcentre.org/es/dec/toolbox/Indust/Standard.htm http://www.unavarra.es/rmga/JLCampo.pdf http://www.csic.edu.uy/chea/ordenanza.doc http://www.cucs.udg.mx/invsalud/abril2003/art1.html http://zcog.org/zcog%20frames/AVAFES%20Leon%202002%20Acrobat%20files/18ponencia%20Linda%20Timosi.pdf http://www.secal.es/word-pdf/eutanasia1.pdf http://ciberconta.unizar.es/cirugiaveterinaria/Mas_Informacion/Temas_anestesia/INHALATO.PDF

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Indice Páginas -¿Qué es en bienestar animal?.............................................................1 -Evaluación del dolor y mecanismos de reducción…………………1-5 �Definición de dolor. � Observaciones específicas de muestras de dolor o estrés en algunas especies. �Principios éticos en la investigación con animales. -Aplicación de métodos de enriquecimiento ambiental……………5-7 �Principios y objetivos del enriquecimiento. �Ambiente físico. �Alimento. �Juguetes de entretenimiento para los animales. �Formación de grupos sociales. � Entretenimientos de tipo visual, olfativo, auditorio y táctil. �Importancia del ambiente enriquecido. -Aplicación de técnicas de analgesia, anestesia y eutanasia………..7-12 �Eutanasia �Métodos físicos, farmacológicos, métodos aceptables en animales inconscientes y métodos inaceptables en eutanasia. �Analgesia �Anestesia �Objetivos. �Resumen de los principales anestésicos usados en animales de laboratorio. �Tipos de anestésicos inyectables. � Administración de anestésicos inhalatorios. � Otros equipamientos anestésicos. �Recuperación anestésica. -Control de las condiciones de mantenimiento……………………..13-15 �Estabulación de los animales. �Características técnicas de construcción. �Sistemas de limpieza por aspiración. �Filtración y tratamiento del agua. �Sistemas de intercomunicación. �Controles sanitarios de los animales. �Vaciados sanitarios. �Renovación del ambiente.