Manual de Practicas de Laboratorio

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Equipo 5 MANUEL DE PRACTICAS DE LABORATORIO AFBL PROFESORA: QBP. VIRGINIA GOMEZ RUIZ Centro de Bachillerato Técnico Industrial Y de Servicios No. 134 2 “B” Laboratorista Clínico

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Page 1: Manual de Practicas de Laboratorio

Equipo 5

MANUEL DE PRACTICAS DE LABORATORIO

AFBL

PROFESORA: QBP. VIRGINIA GOMEZ RUIZ

Centro de Bachillerato Técnico Industrial Y de Servicios No. 134

2 “B” Laboratorista Clínico

Page 2: Manual de Practicas de Laboratorio

Introducción

En este manual se darán a conocer las distintas prácticas que se llevaron a cabo en este semestre. El objetivo que persigue es conocer los distintos métodos por los cuales se llevaron a cabo, aplicando las diferentes normas, y aplicando la normatividad que se establece en cada una de ellas así como el procedimiento adecuado y el trato justo y digno al paciente.

De igual forma nos ayudara al correcto manejo del material y la realización de distintas prácticas observando el resultado de cada una de ellas asi como errores que se pueden producir al realizarla.

Durante el semestre todas estas prácticas fueron complementadas por información y datos externos obtenidos de libros y páginas de internet con el fin de proporcionar un amplio entendimiento del proceso de todas estas prácticas de laboratorios.

Nuestro objetivos como alumnos fue el de haber aprovechado cada material y cada proceso practico para así adquirir la habilidad de poder realizarlo en la vida real o vida cotidiana principalmente en nuestro futuro y así dar a toda la sociedad una gran eficiencia como Laboratorista Clínico.

Otro fin muy importante de este manual fue el de que alumnos en un futro puedan usar este manual con el fin de ampliar sus conclusiones o saber la secuencia de cada una de las practicas

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INDICE

Objetivos

- General

- Específicos

Introducción General

Practica 1: Extracción Sanguínea con Vacutainer………….........3-14

Practica 2: grupos sanguíneos……………………………………15-23

Practica:3 separación y envasado de los RPBI…………….…..24-33

Practica 4: Clasificación y Manejo de reactivos…………………34-46

Practica 5: Preparar reactivos y almacenar……........................47-54

Practica 6: frotis sanguineo……………………………………..…55-64

Practica 7: Frotis de Exudado Faríngeo…………………………65-73

Practica 8: examen general de orina……………………...…......74-87

Practica 9: examen coproparasitoscopico……………………….88-94

Practica 10: cuantificación de emoglobina……………………95-100

Conclusión General

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PRACTICA 1

“EXTRACCION SANGUINEA CON VACUTAINER”

OBJETIVO GENERAL

-Aplicar la técnica correcta en la toma de muestra con tubo vacio

nos dará mayor confianza en el resultado y nos ayudara a realizar

varios exámenes en una sola venopunción.

OBJETIVOS ESPECIFICOS

-Conocer el material a utilizar en la toma de muestra con

Vacutainer.

-Aplicar la técnica correcta para la venopunción con el tubo vacio.

-Tener habilidad para utilizar el material que se necesita.

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INTRODUCCIÓN

Los diferentes análisis de laboratorio nos dan información muy valiosa acerca de las personas enfermas ayudándonos en el diagnostico y en la administración.

En la sangre venosa se pueden hacer distintos estudios analíticos, ya sea desde el punto de vista bioquímico, hematológico o microbiológico.

La persona tiene en promedio unos 5 litros de sangre que se pueden separar en 3 litros de plasma y 2 de células.

El sitio de punción varía dependiendo de la edad del paciente y accesibilidad de la vena. En niños mayores puede utilizarse de forma similar a la de un adulto, pero no así en niños pequeños.

El Vacutainer es un Sistema utilizado para la extracción de sangre intravenosa al vacio, específicamente a la región del brazo. La ventaja del Vacutainer es que la persona que toma la muestra no entra en contacto con la aguja, evitando así algún riesgo de contagio.

Existen cuatro tipos diferentes de tubos al vacio para la extracción de sangre que se identifican con colores; tapón lila, azul, verde, naranja, rojo, amarillo.

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El Tubo de EDTA o de tapa lila, está disponible para varios análisis de glóbulo. Es utilizado para determinaciones de Hematología. De capacidades 3 a 10 ml. Es el anticoagulante que mejor conserva las células y de mayor uso en todos los casos que se requieren exámenes HEMÁTICOS y de HEMOPARÁSITOS.

El Tubo de PT o de tapa azul, es llenado de la solución de Citrato de Tri-Sodio de buffered. Tiene las ventajas de la certeza alta a mezclar proporción de sangre y anticoagulante. Es utilizado para probar rutinario de coagulación.

El Tubo de la heparina es utilizado extensamente en la colección de sangre y anticoagulación y para la bioquímica clínica, la bioquímica de la emergencia

prueba y también para alguna hemorragia. Es rápido para la operación y puede ser utilizado en una gran variedad de la

temperatura. No llevará a la fuera-separación secundaria de la proteína de fibra. Es también compatible con el parámetro del suero. Es utilizado para determinaciones de plasma en la química.

El Tubo de la profesional-coagulación es aplicable en la colección de sangre para bioquímico y las pruebas de la inmunidad. El mérito es que es conveniente para una gran variedad de operaciones, rápido en la coagulación y libre de la separación secundaria de la proteína de fibra. Es utilizado para determinaciones de suero en la química, la serología e inmunología.

Este tubo contiene un polyer de la barrera - gel que asiste al fondo, que forma una barrera que separa el suero de la fibrina y células durante la centrifugación. Puede prevenir el cambio de sustancia entre la célula y el suero. El suero puede ser aspirado directamente del tubo de colección, eliminando la necesidad

para la transferencia a otro contenedor. Es utilizado para determinaciones de suero en la química.

Para la obtención de sangre el paciente debe de estar en una posición cómoda.

Al seleccionar el sitio de de punción debemos tener presente que existe varias venas en el brazo que pueden utilizarse; sin embargo, la mediana cubital y la media cefálica son las que se usan con mayor frecuencia.

El sitio de punción debe escogerse cuidadosamente evitando hematomas.

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Page 7: Manual de Practicas de Laboratorio

Una muestra tomada del costado que se haya realizado una mastectomía recientemente.

Las venas se distinguen al bajar el brazo y frotar el antebrazo suavemente en dirección hacia el hombro esto hará que las venas sean visibles. También se hacen más provenientes si se abre o cierra el puño.

Se debe evitar el ejercicio vigoroso ya que modifica el nivel de algunos componentes sanguíneos. Al aplicar el torniquete debe aflojarse por 2 min. Y solo dejar por espacio de 1 y retirar inmediatamente cuando la sangre comience a fluir.

La toma de la sangre puede lograrse por medio del método convencional de agua y de jeringa seguida de la transferencia de sangre a un tubo o con sistema de tubo al vacio.

Los tubos al vacio se fabrican para extraer volúmenes predeterminados de sangre en un sistema cerrado.

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Page 8: Manual de Practicas de Laboratorio

MATERIAL Y REACTIVOS:

Material:

Bata Blanca.

Tubo para Vacutainer de 4ml con anticoagulante EDIA.

Holder.

Aguja de colecta múltiple.

Torniquete.

Torundas de Algodón.

Alcohol.

Reactivos.

Alcohol. Anticoagulante ADTA Sangre

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Page 9: Manual de Practicas de Laboratorio

Procedimiento

Se le da confianza al paciente para que este tranquilo.

Colocar la aguja en el soporte para Vacutainer.

Se etiqueta el tubo EDTA con los datos del paciente.

Localizar la vena que se desea puncionar.

Se coloca el torniquete y se le indica al paciente que abra y cierre el puño.

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Page 10: Manual de Practicas de Laboratorio

Se desinfecta el área donde se va a tomar la muestra.

Se mete la aguja con el soporte en la vena.

Se introduce el tubo al soporte de Vacutainer y el tubo se llena solo.

Ya que se obtuvo la muestra, se saca el tubo. Luego se le retira el torniquete para poder sacar el soporte con la aguja.

El tubo se homogeniza invirtiéndolo varias veces y se coloca en una gradilla

El soporte con la aguja se retira por debajo de un algodón. La aguja se tapa inmediatamente después de utilizarla para no picar a alguien que se encuentre cerca.

En el lugar donde se extrajo sangre se coloca un parche redondo.

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OBSERVACIONES

-se limpia la mesa de trabajo

-se emprime una torunda con alcohol

-se prepara el vacutainer

-se pulsa la zona donde se encuentra la vena y se limpia con la torunda

-se coloca el torniquete

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-se destapa la aguja y la colocamos a uso 45°

-se inserta la aguja en la vena, se le coloca el tubo EDTA en la base del vacutainer

-al quitar la guja se le coloca una torunda exprimida con alcohol

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Page 13: Manual de Practicas de Laboratorio

Resultados

Muestra de sangre, de cada uno de los integrantes del equipo, mediante el método del sistema vacutainer.

DISCUSION

En la práctica llegue a los resultados ya que seguí la técnica de extracción sanguínea correctamente manteniendo las medidas para evitar contaminación al paciente, una infección, siguiendo las normas que conozco y el procedimiento de extracción sanguínea llegue satisfactoria mente al final de la practica

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Page 14: Manual de Practicas de Laboratorio

Conclusión

Para concluir este sistema es muy fácil de utilizar, y tomando las medidas necesarias puede llegar hacer muy seguro y exacto, ya que al paciente se le da la confianza porque no puede regresar aire, se pueden llenar varios tubos con tan solo irlos cambiando, porque el tubo al estar al vacio succiona la sangre y de esta manera es muy fácil utilizar el método de vacutainer.

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Page 15: Manual de Practicas de Laboratorio

CUESTIONARIO

1.-¿QUÉ ES LA LANCETA?

R= es un material para poder obtener una pequeña muestra de sangre.

2.- ¿PARA QUE SE UTILIZA EL PORTA OBJETO?

R= para poder observar las muestras.

3.- ¿SE PUEDE REUTILIZAR UNA LANCETA?

R= no porque puede llegar a tener bacterias que pueden ser contagiosas.

4.- ¿SE TIENE QUE LIMPIAR EL ÁREA DE TRABAJO? R= si, para no tener infecciones

5.- ¿CUANTOS REACTIVOS SE UTILIZARON?

R= 3

6.- ¿cuáles son las que se utilizaron?

R= reactivo Anti-A, Anti-B, y Anti-D

7.- ¿QUE TIPO DE SANGRE ES MAS COMUN?

R= O+

8.- ¿QUE TIPO DE SANGRE ES LA MENOS COMUN?

R= A-

9.- ¿QUE ENFERMEDADES PUEDE CONTAJIARSE?

R= sida, cáncer, etc.

10.- ¿se utilizo la norma 087 en esta práctica?

R= si en los residuos y el cuidado de la limpieza.

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Page 16: Manual de Practicas de Laboratorio

PRACTICA 2

“Grupos sanguíneos”

OBJETIVO GENERAL

-conocer nuestro tipo de grupo sanguíneo por nosotros mismos

OBJETIVOS PARTICULARES

-conocer el material de laboratorio

-conocer los diferentes tipos de grupos sanguíneos

-aprender a extraer una muestra sanguínea, con lanceta

-determinar el tipo de grupo sanguíneo más destacado

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Page 17: Manual de Practicas de Laboratorio

INTRODUCCION

Es un método para decirle cuál es el tipo específico de sangre que usted tiene. El tipo de sangre que usted tenga depende de si hay o no ciertas proteínas, llamadas antígenos, en sus glóbulos rojos.

La determinación de grupos sanguíneos del sistema ABO se efectúa enfrentando los hematíes problema con antisueros de especificidad conocida: anti-A, anti-B y anti-AB (grupo 0).

La presencia del antígeno D se determina enfrentando los hematíes problema, en un medio proteico alto, con suero anti-D (RHo). La aglutinación o no aglutinación de los hematíes ensayados, son indicativos de la presencia o ausencia del correspondiente antígeno en los mismos.

La variante Du, forma débil del antígeno D, puede detectarse mejor incubando la suspensión de hematíes con suero anti-D, efectuando la prueba de la antiglobulina.

un grupo sanguíneo es una clasificación de la sangre de acuerdo con las características presentes o no en la superficie de los glóbulos rojos y en el suero de la sangre las dos clasificaciones mas importantes para describir grupos sanguíneos en los humanos son los antígenos y el factor RH.

Cada individuo posee un conjunto diferente de antígenos eritrocitados y por su número existen de 27 sistemas antígenos conocidos.

En esta práctica aprenderemos a identificar en los otros compañeros diversos tipos de grupos sanguíneos atreves de una muestra sanguínea obtenida con una lanceta.

La mayor parte población cuenta o tiene, es el grupo sanguíneos más común. Mientras que el más escaso.

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Page 18: Manual de Practicas de Laboratorio

Conocer tu grupo sanguíneo es de suma importancia para recibir donaciones ya que para realizar estos procedimientos se necesita que los dos o mas pacientes sean compatibles en los grupos sanguíneos.

Los sistemas antigénicos considerados más importantes son el sistema ABO y el Sistema Rh. Estos son los sistemas comúnmente relacionados a las temidas reacciones de transfusiones hemolíticas.

Reacciones contra antígenos eritrocitarios también pueden causar la dolencia Hemolítica del recién nacido, causada por el factor Rh+ del padre y del bebé y el Rh - de la madre] - (DHRN o Eritroblastosis Fetal), cuya causa generalmente (no siempre) se asocia a diferencias antigénicas relacionadas al Sistema Rh.

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Page 19: Manual de Practicas de Laboratorio

MATERIAL Y REACTIVOS

Material:

Lanceta.

Aplicadores de Madera.

Gasas Esterilizadas.

Portaobjetos.

Guantes.

Masking.

Cubreobjetos.

Torundas con alcohol.

Maquitel.

Agua y cloro.

Reactivos:

Anti A+B

Anti – A

Anti –B

Anti – D

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Page 20: Manual de Practicas de Laboratorio

Procedimiento

Se selecciona el dedo que se va

a punzar y se desinfecta con una

torunda.

Con la lanceta se pica con un

movimiento rápido en la yema

del dedo.

La primera gota se limpia con

una gasa.

Se colocan 4 muestras para

ponerle los 4 antígenos.

Colocar los antígenos según

tengan la etiqueta.

Se aglutina o mezcla la

sangre con el antígeno con

ayuda del aplicador.

Cuando se esta en

movimiento se observa su

aglutinación y ese es el tipo

de sangre.

RESULTADOS

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Page 21: Manual de Practicas de Laboratorio

Nombre: Jorge Chávez Domínguez

Edad: 15 años

Sexo: masculino

Fecha: 14 de marzo del 2011

Tipificación sanguínea y factor RH:

Grupo sanguíneo:”O”

Factor RH: positivo

OBSERVACIONES

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Page 22: Manual de Practicas de Laboratorio

-se limpia el área de trabajo

-tener en orden todo el material y esterilizado

-se pincha el dedo con la lanceta

-se clasifican los grupos sanguíneos

-tirar el material desechable o poner el material inservible en bolsa negra o roja

DISCUSIÓN

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Page 23: Manual de Practicas de Laboratorio

En esta práctica se llevo a cabo el reconocimiento de los diferentes grupos sanguíneos y sus distintas funciones, como también son las distintas características de cada uno de ellos. Y cuál es el problema que puede causar si esto se toma a la ligera. Sin pensar que pueda causar daño a futuro, pero con esto nos dimos cuenta de cómo se clasifican y sus características.

CONCLUSIÓN

Llevamos a cabo nuestros objetivos, mediante el procedimiento. Obtuvimos 3 muestras sanguíneas con ayuda de una lanceta, después diagnosticamos la muestra tipificación sanguínea y nuestro factor R+1. Desechamos los residuos con base a la norma nom-087-eco-ssa-2002. Finalmente determinamos el grupo sanguíneo más destacado en el grupo.

Cuestionario

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Page 24: Manual de Practicas de Laboratorio

1-¿Qué es un grupo sanguíneo?

R= es una clasificación de la sangre de acuerdo a las características en la superficie de glóbulos rojos y el suero de la sangre

2-¿Qué son los antígenos y el factor RH?

R=son dos clasificaciones importantes para cubrir los grupos sanguíneos

3-¿Qué posee cada fluido?

R=un conjunto diferente de antígenos eritrocitos

4¿Cuántos sistemas antígenos existen?

R=existen cerca de 27 sistemas antígenos conocidos

5-¿Cuál es el grupo sanguíneo más común en la población?

R=el grupo sanguíneo O+

6-¿Qué contienen los tubos de color lila o morado?

R=EDTA o anticoagulante

7-¿es importante saber a qué tipo de grupo sanguíneo eres?

R=si es fácil con tan solo unos análisis

8-¿puedes llegarlo a saber en tan solo una práctica escolar?

R= si llevando el procedimiento adecuado

9-¿con que reactivos sabes a qué grupo sanguíneo perteneces?

R=Anti-A, Anti-B y Anti-D

10-¿Cuánta sangre necesitas para llevar a cabo estos análisis?

R=con tan solo una gota de sangre

PRACTICA 3

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Page 25: Manual de Practicas de Laboratorio

“SEPARACION Y ENVASADO DE RPBI”

OBJETIVO GENERAL

-Que el alumno aprenda cómo se clasifican los desechos que produce

un lugar que da servicio médico a las personas y en un futuro tener

una idea sobre esto

OBJETIVOS PARTICULARES

-aprender que son los RPBI

-poner que el mismo alumno tire los materiales que se utilizan en la

practica

-tener información sobre esto en un futuro

INTRODUCCION

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Page 26: Manual de Practicas de Laboratorio

Los efectos adversos que pueden llegar a derivarse del manejo de las

sustancias químicas peligrosas comprenden, entre otros:

- Contaminación y deterioro de la calidad de agua, aire, suelo y

alimentos.

- Intoxicaciones y enfermedades que ocurren tanto en humanos

como en animales.

- Accidentes que envolverán explosiones, incendios, fugas o

derrames.

El llenado de los recipientes que contengan sustancias químicas

peligros en su estado líquido a presión atmosférica, debe hacerse

máximo hasta el 90% de su capacidad, para la cual se debe contar

con un dispositivo de lectura del nivel de llenado.

Los recipientes portátiles sujetos a presión que contengan sustancias

químicas peligrosas, deben:

- Contar con válvulas y manómetros.

- Tener indicada la presión máxima del trabajo.

Para el manejo de las sustancias químicas peligrosas se prohíbe el uso de herramientas, ropa, zapatos y objetos personales que puedan generales una chispa, flama o temperaturas que puedan provocar ignición. Con base en el conocimiento científico se realizaron las modificaciones a los criterios para la clasificación de los RPBI, asentados en la NOM-087-ECOL-SSA1-2002.

Así, residuos que en el pasado fueron considerados peligrosos, ahora dejan de ser considerados como tales y pueden ser manejados como basura común. Esto trae consigo la disminución del gasto por el

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Page 27: Manual de Practicas de Laboratorio

manejo de RPBI. Por lo anterior consideramos necesario y conveniente que el personal involucrado con el manejo de los RPBI, conozca estos cambios a fin de que realice el manejo adecuado de los mismos y proteja su salud.

MATERIAL Y REACTIVOS

Reactivos:

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Page 28: Manual de Practicas de Laboratorio

Giemsa.

Hidróxido de sodio.

Difco Phenol Red Manitol Agar.

Medio de cultivo Bioxon.

Acido acético.

Buffer de fosfato.

Resina sintética.

Safranina.

Azul de Metileno.

Calcio Cloruro.

Fenol.

Etilendininitrilote.

Cloroformo.

Alcohol metálico.

Azul de cresil brillante.

Procedimiento

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Page 29: Manual de Practicas de Laboratorio

Colocar los reactivos en medio de la mesa. Para evitar se caigan.

Se separan los reactivos de acuerdo con su clasificación de peligrosidad.

Elaborar una tabla que contenga los datos del reactivo.

Ya que se utilizaron los reactivos, se guardan en su respectivo lugar de almacenamiento.

La mesa se desinfecta con agua y cloro por si se llego a derramar alguna sustancia.

RESULTADO

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Page 30: Manual de Practicas de Laboratorio

Las lancetas ya que son objetivos punzo cortantes los colocamos en el recipiente rígidos polipropileno color rojo. Los portaobjetos los reutilizamos limpiándolos con cloro, algodones y gasas en la bolsa negra.

OBSERVACIONES

-Primero se exprime las torundas

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Page 31: Manual de Practicas de Laboratorio

-se desinfecta el área la cual se va a picar con la lanceta

-se pica una parte del dedo con lanceta

-se limpia las primeras gotas de sangre

-se coloca una gota de sangre en los porta objetos

-se le coloca una gota de cada reactivo que son anti-A, anti-B y anti-C

-se reconoce con que reactivo reacciona la muestra de sangre

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Page 32: Manual de Practicas de Laboratorio

-se limpian y se lava los portaobjetos, se tiran en bolsas negras del material desechable y se limpian la masa de trabajo

DISCUSION

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Page 33: Manual de Practicas de Laboratorio

En la práctica se llego a la finalidad de lo deseado o cumplimos con los objetivos que se deseaban cumplir, llevando a cabo la clasificación de RPBI. Cada uno de nosotros cumplimos utilizar una lanceta y colocar los reactivos correctamente para tener el tipo de sangre que es cada uno. Para cualquier registro y emergencia que pueda surgir.

Conclusión

Como conclusión determinamos que los residuos peligrosos biológicos infecciosos. Mejor conocidos como RPBI son aquellos que se generan durante las actividades consistencia les a la salud de humanos o animales en los centros de enseñanza e investigación todo aquel material que se considere RPBI deberá estar de acuerdo a su tipo en una bolsa o recipiente de color especifico según la indique la norma para identificarlos fácil mente.

Cuestionario

1-¿Qué es la lanceta?

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Page 34: Manual de Practicas de Laboratorio

R=es un material para poder obtener una pequeña muestra de sangre

2-¿para que se utiliza el portaobjeto?

R=para poder observar las muestras

3-¿se puede reutilizar una lanceta?

R=no porque puede llegar a tener bacterias que pueden ser contagiosos

4-¿se tiene que limpiar el área de trabajo?

R=si, para no tener infecciones

5-¿Cuántos reactivos se utilizan?

R= tres

6-¿Cuáles son los que se utilizan?

R=reactivos anti-A, anti-B y anti-D

7-¿Qué tipo de sangre es mas común?

R=O+

8-¿Qué tipo de sangre es la menos común?

R= A-

9-¿Qué enfermedades pueden contagiarse?

R=sida, cáncer, etc.

10-¿se utilizo la norma 087 en esta práctica?

R=si en los residuos y el cuidado de la limpieza

PRACTICA 4

“CLASIFICACION DE REACTIVOS”

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Page 35: Manual de Practicas de Laboratorio

OBJETIVO GENERAL:

-Conocer y aprender a clasificar cada uno de los reactivos que se

encuentran en el laboratorio.

OBJETIVOS ESPECIFICOS:

Conocer los diversos reactivos que se encuentran en un laboratorio. Aprender a diferenciar los reactivos Conocer el grado de peligro que tiene cada uno de los reactivos. Identificar la relación de esta práctica con la NOM-005-STPS-1998.

INTRODUCCIÓN:

Los efectos adversos que pueden llegar a derivarse del manejo de las sustancias

químicas peligrosas comprenden, entre otros:

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Page 36: Manual de Practicas de Laboratorio

-Contaminación y deterioro de la calidad de agua, aire, suelo y alimentos.

-Intoxicaciones y enfermedades que ocurren tanto en humanos como en animales.

-Accidentes que envolverán explosiones, incendios, fugas o derrames.

El llenado de los recipientes que contengan sustancias químicas peligros en su

estado líquido a presión atmosférica, debe hacerse máximo hasta el 90% de su

capacidad, para la cual se debe contar con un dispositivo de lectura del nivel de

llenado.

Los recipientes portátiles sujetos a presión que contengan sustancias químicas

peligrosas, deben:

-Contar con válvulas y manómetros.

-Tener indicada la presión máxima del trabajo.

Para el manejo de las sustancias químicas peligrosas se prohíbe el uso de

herramientas, ropa, zapatos y objetos personales que puedan generales una

chispa, flama o temperaturas que puedan provocar ignición.

MATERIAL Y REACTIVOS

Material:

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Page 37: Manual de Practicas de Laboratorio

Bata

Guantes

Colores

Reactivos:

Giemsa.

Hidróxido de sodio.

Difco Phenol Red Manitol Agar.

Medio de cultivo Bioxon.

Acido acético.

Buffer de fosfato.

Resina sintética.

Safranina.

Azul de Metileno.

Calcio Cloruro.

Fenol.

Etilendininitrilote.

Cloroformo.

Alcohol metálico.

Azul de cresil brillante.

Procedimiento:

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Page 38: Manual de Practicas de Laboratorio

Colocar los reactivos en medio de la mesa. Para evitar se caigan.

Se separan los reactivos de acuerdo con su clasificación de peligrosidad.

Elaborar una tabla que contenga los datos del reactivo.

Ya que se utilizaron los reactivos, se guardan en su respectivo lugar de almacenamiento.

La mesa se desinfecta con agua y cloro por si se llego a derramar alguna sustancia.

RESULTADO:

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Page 39: Manual de Practicas de Laboratorio

CORROSIVAS

DAÑO MEDIDAS DE SEGURIDAD

PROTECCION PICTOGRAMA

FORMALDEIDO 37%

IRRITANTE PARA LA PIEL, ASI COMO PARA VIAS RESPIRATOIAS Y GASTROINTESTINALES

CONSERVESE ENTRE 15=30 C

BATA CUBREBOCA

S GUANTES GAFAS DE

SEGURIDAD

HIDROXIDO DE SODIO

PUEDE DETONAR CAMBIO QUIMICO VIOLENTO

GRICEROL VIAS RESPIRATORIAS DAÑINO EN LOS OJOSY PIEL

BOTAS, LENTES Y GUANTES

BATA LENTES GUANTES

ACIDO ACETICO

QUEMADURAS GRAVES

NO SE EXPONGA AL CALOR

GUANTES BATA GAFAS DE

DSEGURIDADACIDO SULFURICO

CAUSA GRAVES QUEMADURAS, PUEDE SE R MORTAL SI SE INGIERE

NO SE EXPONGA AL CALOR

GUANTES BATA Y

MANDIL

INFLAMABLES

DAÑO MEDIDAS DE

PROTECCION PICTOGRAMA

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Page 40: Manual de Practicas de Laboratorio

SEGURIDAD

XILOL INFLAMABLE NARCOTICO CAUSA IRRITACION

MANTENER ALEJADO DEL CALOR, CHISPAS O FLAMAS

GUANTES BATA ANTEOJOS DE

SEGURIDAD

GLICERINA DAÑO A LA SALUD, SOLO INFLAMABLE

MANTENER ALEJADO DEL CALOR, CHISPAS O FLAMAS

GUANTES BATA

ANTEOJOS DE SEGURIDAD

WRIGHT DAÑOS FATALES A CAUSAR CEGUERA

MANTENER ALEJADO DEL CALOR, CHISPAS O FLAMAS

GUANTES BATA

ANTEOJOS DE SEGURIDAD

ETER ETILICO

ALTAMENTE INFLAMABLE Y VOLTATIL

ALMACENAR EN ALGUN LUGAR FRESCO Y SECO ALEJADO DE CHISRAS, FLAMA, LUZ SOLAR, MATERIALES OXIDANTES Y ACIDOS FUERTES

ANTEOJOS DE SEGURIDAD

GUANTES BATA EXTRACTOR

ACETONA INFLAMABLE, INGESTION

MANTENER ALEJADO DEL CALOR, CHISPAS O FLAMA Y BIEN CERRADO

GUNTES BATA EXTRACTOR

VENENOSAS

DAÑO MEDIDAS DE

PROTECCION PICTOGRAMA

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Page 41: Manual de Practicas de Laboratorio

SEGURIDAD

ALCOHOL METILICO ABSOLUTO

CEGUERA O MUERTE

QUITAR ROPA CONTAMINADA, LAVAR CON ABUNDANTE AGUA

BATA GUANTES

FORMALDEIDO 37%

IRRITACION QUITAR ROPA CONTAMINADA, LAVAR CON ABUNDANTE AGUA

BATA GUANTES

LIQUIDO DE HAYEN

CEGUERA O MUERTE

LAVAR CON ABUNDANTE AGUA

BATA GUANTES

WRIGHT MUERTE O CEGUERA

LAVAR CON ABUNDANTE AGUA, QUITAR ROPA CONTAMINADA

BATA GUANTES

ACIDO CLORHIDRICO

IRRITACION LAVAR CON ABUNDANTE AGUA

BATA GUANTES

ACIDO ACETICO

IRRITACION TOMAR ABUNDANTE AGUA EN CESO DE INGERIRLO, DAR OXIGENO

BATA GUANTES

AZUL DE METILENO

INTOXICACION, IRRITACION

QIUTAR LA ROPA CONTAMINADA

BATA GUANTES

FENOL CRISTALES

IRRITACION QITAR LA ROPA CONTAMINADA, LAVAR CON ABUNDANTE AGUA

BATA GUANTES

XINOL IRRITACION LAVAR agua BATa

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Page 42: Manual de Practicas de Laboratorio

OBSERVACIONES:

DEFINICIONES IDENTIFICACIÓNExplosivos:

Las sustancias y preparados sólidos, líquidos, pastosos o gelatinosos que, incluso en ausencia de oxígeno del aire, puedan reaccionar de forma

exotérmica con rápida formación de gases y que, en determinadas

condiciones de ensayo, detonan, deflagran rápidamente o, bajo el efecto

del calor, en caso de confinamiento parcial, explotan.

E

ExplosivoComburentes:

Las sustancias y preparados que, en contacto con otras sustancias, en

especial con sustancias inflamables, produzcan una reacción fuertemente

exotérmica.

O

Comburentes

Extremadamente inflamables:Las sustancias y preparados líquidos

F+

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Page 43: Manual de Practicas de Laboratorio

que tengan un punto de ignición extremadamente bajo y un punto de

ebullición bajo, y las sustancias y preparados gaseosos que, a

temperatura y presión normales, sean inflamables con el aire.

Extremadamente inflamableFácilmente inflamable:

Las sustancias y preparados:• Que puedan calentarse e

inflamarse en el aire a temperatura ambiente sin aporte de energía. o• Los sólidos que puedan

inflamarse fácilmente tras un breve contacto con una fuente de inflamación

y que sigan quemándose o consumiéndose una vez retirada dicha

fuente, o• Los líquidos cuyo punto de

ignición sea muy bajo, o• Que, en contacto con agua o con

aire húmedo, desprendan gases extremadamente inflamables en

cantidades peligrosas

F

Fácilmente inflamables

Inflamables:Las sustancias y preparados líquidos

cuyo punto de ignición sea bajo

InflamablesMuy tóxicos:

Las sustancias y preparados que, por inhalación, ingestión o penetración cutánea en muy pequeña cantidad puedan provocar efectos agudos o

T+

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Page 44: Manual de Practicas de Laboratorio

crónicos e incluso la muerte

Muy tóxicosTóxicos:

Las sustancias y preparados que, por inhalación' ingestión o penetración cutánea en pequeñas cantidades

puedan provocar efectos agudos o crónicos e incluso la muerte

T

TóxicosNocivos:

Las sustancias y preparados que, por inhalación, ingestión o penetración cutánea puedan provocar efectos

agudos o crónicos e incluso la muerte

Xn

Nocivos

Corrosivos:Las sustancias y preparados que, en

contacto con tejidos vivos puedan ejercer una acción destructiva de los

C

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Page 45: Manual de Practicas de Laboratorio

mismos

CorrosivosIrritantes:

Las sustancias y preparados no corrosivos que. en contacto breve,

prolongado o repetido con la piel O las mucosas puedan provocar una reacción

inflamatoria

Xi

IrritanteSensibilizantes:

Las sustancias y preparados que, por inhalación o penetración cutánea, puedan ocasionar una reacción de hipersensibilidad, de forma que una

exposición posterior a esa sustancia o preparado dé lugar a efectos negativos

característicos

Por inhalación Xn

R42Por contacto

cutáneoXi

R43

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Page 46: Manual de Practicas de Laboratorio

DISCUSION:

Opinamos que es muy importante y fundamental mantener la pureza de los reactivos y almacenarlos por separado en sus frascos correspondientes para evitar que se mezclen con otros reactivos y tener exactitud en cualquier análisis, así mismo es importante leer antes los riesgos , primeros auxilios, métodos de seguridad, frases R y S que aparecen en la etiqueta antes de utilizar el reactivo y en caso de que ocurra un accidente, seguir las indicaciones, de primeros auxilios contenidas en la etiqueta del frasco. También es importante la clasificación de estos para determinar los riesgos y lo que no debemos hacer para así evitar accidentes.

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Page 47: Manual de Practicas de Laboratorio

Cuestionario

1. ¿Qué es un reactivo?

Un reactivo es, en química, toda sustancia que interactúa con otra en una reacción química que da lugar a otras sustancias de propiedades, características y conformación distinta, denominadas productos de reacción o simplemente productos.

2. ¿Cuáles son las variables por las que se pueden clasificar los reactivos?

Propiedades físico-químicas, reactividad en reacciones químicas, características del uso del reactivo.

3. ¿Que son los Reactivos para análisis (PA)?

Son aquellos cuyo contenido en impurezas no rebasa el número mínimo de sustancias determinables por el método que se utilice.

4. ¿Qué son los reactivos purísimos?

Son reactivos con un mayor grado de pureza que los reactivos “para análisis”.

5. ¿Qué son los reactivos especiales?

Son reactivos con calidades específicas para algunas técnicas analíticas, como cromatografía líquida (HPLC), espectrofotometría (UV)…

6. ¿Qué es un pictograma?

Un pictograma es un signo que representa esquemáticamente un símbolo, objeto real o figura.

7. ¿Qué son las sustancias químicas peligrosas?

Son aquellos elementos químicos y sus compuestos, tal y como se presentan en su estado natural o como se producen por la industria

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Page 48: Manual de Practicas de Laboratorio

que puedan dañar directa o indirectamente a personas, bienes y/ o medio ambiente.

8. ¿Qué son las sustancias corrosivas?

Se denominan en general, sustancias corrosivas, a aquellas que son capaces de causar graves lesiones en los tejidos vivos (humanos) y de atacar a otras sustancias (metales, maderas,...).

9. ¿Que son las sustancias inflamables?

Son aquellas capaces de formar una mezcla, con el aire, en concentraciones tales que las haga formar una flama espontáneamente.

10. ¿cuales son algunos ejemplos de sustancias irritantes?

Ácido benzoico, el ácido sórbico, el benzoato sódico y el aldehído cinámico13-15

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Page 49: Manual de Practicas de Laboratorio

PRACTICA 5

“PREPARACION DE REACTIVOS Y ALMACENAR”

OBJETIVO GENERAL

Familiarizarse con la preparación de soluciones de la concentración requerida

OBJETIVOS ESPECIFICOS

Obtener la preparación de solución llamada lugol Obtener una preparación de la solución llamada hipoclorito de sodio Obtener una solución llamada alcohol-acetona

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Page 50: Manual de Practicas de Laboratorio

INTRODUCCION

Un reactivo es, en química toda sustancia que interactúa con otra en una reacción química que da lugar a otras sustancias de propiedades, características y conformación distinta, denominadas productos de reacción o simplemente productos.

Por tratarse de compuestos quimicos, los reactivos se pueden clasificar según muchas variables: propiedades físico-químicas, reactividad en reacciones químicas, características del uso del reactivo.

Sin embargo, por tratarse del concepto de reactivo la clasificación más adecuada en este caso sería la de características de su uso, según la cual se clasifican en el uso al que están destinados los reactivos. Esta clasificación viene dada en el envase del reactivo y depende del tratamiento que se le haya dado, de su riqueza, de su pureza que determina el uso químico que se le va a poder dar, teniendo en cuenta la precisión, exactitud y error absoluto que se ha de tener en la operación química a realizar.

Así los reactivos se pueden clasificar en:

PB: Destinado a bioquímica. PA: Destinados a aplicaciones analíticas.

QP: Químicamente puro, destinado a uso general en laboratorio.

DC: Destinados a las aplicaciones del análisis clínico.

Que produce reacción. Substancia que se emplea en química para reconocer la naturaleza de ciertos cuerpos por medio de la acción que produce sobre ellos (es casi lo mismo que sustancia reactante).

En materia de evaluaciones académicas es una instrucción de parte del creador de la prueba, que tiene que ver con la aplicación y resultados, se evalúa su reacción o consecuencia en razón a la veracidad de su resultado y en algunos casos también a la metodología de su ejecución, y con ello se obtiene un porcentaje acumulativo y la calificación de la evaluación.

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Page 51: Manual de Practicas de Laboratorio

MATERIAL Y REACTIVOS

MATERIAL:

-Probeta

-Tubo de ensaye

-Vaso de precipitado

-Frasco gotero

REACTIVOS:

-Cloro

-Buffer

-Wiemsa

-Agua

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Page 52: Manual de Practicas de Laboratorio

PROCEDIMIENTO

LUGOL

1-La disolución de lugol consiste en 5 g. de I2 y de 10 g. de Ki con 85 ml. De agua destilada obteniéndose una disolución marrón con una concentración total de yodo de 150mg/ml

2-El Ki y el potasio hacen yodo dratomico soluble en agua debido a la formación de iones trigodines I3

NOTA: No debe confundirse con la titura del yodo, que consiste en yodo dratomico I2 y sales debidos con agua y alcohol etílico (etanol)

La solución de lugol no contiene alcohol.

ALCOHOL ACETONA

El alcohol-acetona actúa en forma excedente que no haya fijado a las paredes celulares.

Si es para tinción de Gram 70% de etanol absoluto y 30% acetona, para 100 ml. Solamente mezclas 30 ml de acetona y 70 ml de etanol absoluto.

HIPOCLORITO DE SODIO

Conocido como cloró, blanqueador, agua de jabón. Cabe destacar que el hipoclorito de sodio es cloro común por lo tanto es mas conveniente que se compre.

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Page 53: Manual de Practicas de Laboratorio

RESULTADO

En esta práctica obtuvimos dos reactivos: hipoclorito de sodio y un colorante para tinción.

El primero lo ocupamos para limpiar la mesa con un atomizador y el segundo para la tinción de frotis en el cual dejamos secar con el diluido y el concentrado

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Page 54: Manual de Practicas de Laboratorio

DISCUSIÓN

En la práctica llegue al resultado deseado, ya que por medio del procedimiento obtuvimos dos reactivos:

El hipoclorito de sodio, el cual ocupamos para limpiar la mesa de trabajo. El lugol para agregar al frotis seco.

CONCLUSION

Como conclusión determinamos que el manejo de reactivos es un tarea de alto riesgo; a pesar de ello y de sus graves consecuencias que evidenciamos en los accidentes, se necesita seguir trabajando para comprender los beneficios y entender este lenguaje.

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Page 55: Manual de Practicas de Laboratorio

Cuestionario

¿Cuál es la finalidad de la práctica?

R= aprender a clasificar los distintos reactivos utilizados en el laboratorio, de acuerdo a su contenido

¿Qué es la preparación de soluciones?

R=es un proceso que requiere todos los cuidados básicos posibles, ya que en la preparación ese está expuesto a sus. Desconocidas.

¿Qué puede pasar si nos exponemos a esas sustancias?

R=nos puede ocasionar daños tanto ecológicos, como personales.

¿Qué se debe tomar en cuenta para evitar esto?

R=tener los cuidados básicos, y tomar en cuenta las normas de bioseguridad , y normas de laboratorio.

¿Cómo debe mantenerse el lugar donde se pesen las sustancias?

R=debe estar firme, nivelado, y totalmente limpio

¿En dónde deben almacenarse algunas soluciones?

R=para evitar procesos de oxidación por acción de la luz

Menciona algunas precauciones:

Evitar su exposición a la luz, mantenerlas a temperatura ambiente, tenerlas en un lugar firme, etc.

¿Cuáles son los materiales utilizados para la práctica?

R= cubre bocas, guantes, y materiales de seguridad

¿Cuáles son los diferentes tipos de sustancias que se manejan?

R=corrosivas, tóxicas, inflamables, cancerígenas, etc.

¿Cómo se llama la practica?

R= Preparar reactivos y almacenar.

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Page 56: Manual de Practicas de Laboratorio

PRACTICA 6

“FROTIS SANGUÍNEO”

OBJETIVO GENERAL

Aprender el procedimiento a llevar para el correcto Frotis sanguíneo

tomando en cuenta las medidas de seguridad estándares que se presentan

en dicha practica.

OBJETIVOS PARTICULARES

Aprender a utilizar y manipular la muestra y el material necesario para la

realización de la práctica.

Aprender a realizar una extensión sanguínea de manera adecuada.

Conocer las diferentes células que se pueden encontrar en la muestra

sanguínea.

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Page 57: Manual de Practicas de Laboratorio

INTRODUCCION

Una extensión o frotis sanguíneo consiste en recubrir parcialmente un porta con

una gota de sangre, de tal manera que las células de ésta se dispongan formando

una sola capa de ellas. Esto puede hacerse manual o automáticamente. Lo último

se realiza mediante un aparato (spinner) que centrifuga rápidamente el porta con

la sangre depositada en su centro. Con este aparato se obtienen unos frotis que

presentan una distribución celular muy homogénea.

PARTES DE UNA EXTENSIÓN.

CABEZA.

Es la zona inicial de la extensión.

Es la región más gruesa.

En ella se encuentra una mayor proporción de linfocitos, y los hematíes forman

aglomerados (pilas de monedas).

CUERPO.

Es la zona media del frotis.

Su espesor es el apropiado.

En ella existe una adecuada proporción entre los distintos tipos de leucocitos.

Contiene la "zona ideal" de observación, que corresponde a la porción que limita

con la cola.

COLA.

Es la zona final de la extensión.

Suele tener un aspecto redondeado.

Es la región más fina.

En ella se encuentra una mayor proporción de leucocitos grandes (granulocitos y

monocitos), y además. los hematíes están deformados y presentan una tonalidad

uniforme.

En su porción terminal suelen ser más abundantes las plaquetas, sobre todo si

son grandes.

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Page 58: Manual de Practicas de Laboratorio

BORDES.

Contienen una mayor proporción de leucocitos grandes.

Si están deshilachados, en ellos las células son difíciles de reconocer por estar

deformadas o destruidas

La tinción de Giemsa es un método habitual para el examen de frotis sanguíneos,

cortes histológicos y otro tipo de muestras biológicas. Este método tiene utilidad

sobre todo para poner de manifiesto las ricketsias localizadas dentro de la célula

huéspedes. La coloración de giemsa se emplea también para teñir frotis de sangre

en el examen para protozoos.

Estos organismos adquieren una coloración diferencial y se ven dentro del

citoplasma de la célula huésped. La técnica de Giemsa está formada por varios

colorantes: los tintes neutros utilizados combinan el azul de metileno como tinte

básico y la eosina como tinte ácido, lo que da una amplia gama de colores. El azul

de metileno es un colorante metacromático, de ahí que muchas estructuras se

tiñan de púrpura y no de azul. El pH de la solución de coloración es crítico y se

debe ajustar idealmente según diversos fijadores. La gama del pH debe estar

entre 6.4 y 6.9.

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Page 59: Manual de Practicas de Laboratorio

MATERIALES Y REACTIVOS

Materiales:

Portaobjetos.

Guantes.

Una jeringa o un tubo capilar.

Microscopio.

Reactivos:

Wright.

Sol. Buffer.

Aceite de inmersión.

Muestra biológica:

Sangre.

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Page 60: Manual de Practicas de Laboratorio

PROCEDIMIENTO

1. El lugar donde se hará el Frotis deberá ser en un lugar plano.

2. Colocar una gota de sangre en una orilla de un portaobjetos, este se le

llama base.

3. Colocar el portaobjetos extensor, en un ángulo de 45°.

4. Dejar que se extienda la sangre.

5. Con un movimiento rápido deslizar el portaobjetos extensor.

6. Se deja secar la extensión.

7. Etiquetar el portaobjetos base.

8. Una vez seca la extensión se agregara una gota del reactivo Wright. Se

dejara 5 minutos y se enjuaga.

9. Posteriormente, agregarle 2 gotas de solución Buffer. Se dejara 8

minutos y después se enjuaga.

10. Dejar secarse para agregarle el aceite de inmersión.

11. Observar en el microscopio si hay alguna célula sanguínea.

RESULTADOS

Al introducir mi

frotis sanguíneo al

microscopio, con una

gota de aceite de

inmersión y

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Page 61: Manual de Practicas de Laboratorio

ajustar los tornillos micrométrico y macrométrico; se puede observar

alguna células especificas que son llamadas células eusinofilos

neutrofilo y monocito.

Frotis con solución y colorante.

Frotis con un solo

colorante

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Page 62: Manual de Practicas de Laboratorio

OBSERVACION:

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Page 63: Manual de Practicas de Laboratorio

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Page 64: Manual de Practicas de Laboratorio

Errores que no se deben de cometer al hacer el barrido del frotis.

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Page 65: Manual de Practicas de Laboratorio

DISCUSIÓN

En esta practica se llego al resultado deseado siguiendo un orden de

acuerdo al procedimiento, para asi poder realizar satisfactoriamente el

frotis saguineo, siguiendo cada una de las normas vistas hasta la fecha.

Para asi tener un eficiente trabajo.

CONCLUSION

El frotis sanguíneo o barrido sanguíneo es una manera muy simple para

hacer el estudio de la sangre. el frotis es una técnica esencial para el

análisis morfológico de las células hemáticas. tiene varias partes:

cabeza: En ella se encuentra una mayor proporción de linfocitos, y los

hematíes forman aglomerados

cuerpo: En ella existe una adecuada proporción entre los distintos tipos

de leucocitos.

cola: En ella se encuentra una mayor proporción de leucocitos grandes

(granulocitos y monocitos), y además. los hematíes están deformados y

presentan una tonalidad uniforme.

Bordes: Contienen una mayor proporción de leucocitos grandes.

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Page 66: Manual de Practicas de Laboratorio

CUESTIONARIO

En que consiste el frotis sanguíneo?

En recubrir parcialmente un portaobjetos con una gota de sangre, de tal manera

que la celula se disponga formando una sola capa de ella.

Cuales son las partes de una extencion?

Cabeza, cuerpo y borde.

Que es la cabeza?

Es la zona inicial de la extencion.

Que podemos encontrar en la cabeza?

Una mayor cantidad de linfocitos

A que se le llama cuerpo?

A la zona media del frotis

Que podemos encontrar en su porción terminal?

Plaquetas

Que contienen los bordes?

Mayor proporción de leucocitos grandes

Menciona 3 caracteristicas de una buena extencion

-El borde de la cola tiene que estar finamente deshilachado

-Los bordes laterales de la extencion deben estar separados de3 los bordes del

porta por un milímetro aproximadamente.

-Toda la extencion a de ser fina y homogénea.

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Page 67: Manual de Practicas de Laboratorio

PRACTICA 7

FROTIS DE EXUDADO FARINGEO

OBJETIVO GENERAL

Que el alumno obtenga el conocimiento y la habilidad de realizar un frotis de un

exudado faríngeo, obteniendo la muestra necesaria, igualmente podrá analizarla

en microscopio.

OBJETIVOS ESPECIFICOS

*Conocer las propiedades de la tinción utilizada en la práctica para la observación microscópica

*Poder identificar correctamente las células observadas bajo el microscopio con tinción de Gram.

*Que el alumno obtenga la capacidad de aplicar correctamente el método adecuado sobre la realización de un exudado faríngeo.

INTRODUCCION

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Page 68: Manual de Practicas de Laboratorio

El Frotis faríngeo es un importante test para diagnosticar y tratar con una gran precisión las

infecciones que causan los dolores de garganta, además puede prevenir la transmisión de estas

enfermedades de un niño a otro, como por ejemplo en las guarderías.

Generalmente el médico siempre pide la colaboración de los papás para realizar esta prueba, la

ayuda consiste en coger en brazos al niño para que se sienta más seguro y a la vez también para

sujetarle los brazos y la cabeza.

Hay una gran cantidad de virus y bacterias que nos acechan en todo momento y evitarlas resulta

bastante difícil, pero gracias a las medidas de prevención y protección podemos estar cada día un

poco más tranquilos con respecto al bienestar de nuestro pequeño.

.

La mayoría de los colorantes son compuestos orgánicos que tienen alguna afinidad específica por los materiales celulares. Muchos colorantes utilizados con frecuencia son moléculas cargadas positivamente (cationes) y se combinan con intensidad con los constituyentes celulares cargados negativamente, tales como los ácidos nucleídos y los polisacáridos ácidos. Ejemplos de colorantes catiónicos son el azul de metileno, el cristal violeta y la safranina. Otros colorantes son moléculas cargadas negativamente (aniones) y se combinan con los constituyentes celulares cargados positivamente, tales como muchas proteínas. Esos colorantes incluyen la eosina, la fucsina ácida y el rojo Congo. Otro grupo de colorantes son sustancias liposolubles; los colorantes de este grupo se combinan con los materiales lipídico de la célula, usándose a menudo para revelar la localización de las gotículas o depósitos de grasa. Un ejemplo de colorante liposoluble es el negro Sudán.

Algunos colorantes teñirán mejor sólo después de que la célula haya sido tratada con otra sustancia química, que no es un colorante por sí mismo. Esta sustancia se denomina mordiente; un mordiente habitual es el ácido tánico. El mordiente se combina con un constituyente celular y lo altera de tal modo que ahora sí podrá atacar el colorante.

Si se desea simplemente incrementar el contraste de las células para la microscopía, son suficientes los procedimientos simples de tinción. El azul de metileno es un buen colorante simple que actúa sobre todas las células bacterianas rápidamente y que no produce un color tan intenso que oscurezca los detalles celulares. Es especialmente útil para detectar la presencia de bacterias en muestras naturales, puesto que la mayor parte del material no celular no se tiñe.

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Page 69: Manual de Practicas de Laboratorio

Los métodos de tinción son de gran utilidad, pero deben usarse siempre con precaución, ya que pueden conducir a errores. Las moléculas de colorante forman en ocasiones precipitados o agregados que parecen estructuras celulares auténticas, pero que son formaciones completamente artificiales inducidas por el mismo colorante. Tales estructuras se denominan artefactos, y deben tomarse muchas precauciones para tener la seguridad de que no nos estamos equivocando al creer que un artefacto es una estructura realmente existente.

MATERIAL Y REACTIVOS

Material:

Portaobjetos. Masking.

Hisopos estériles.

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Page 70: Manual de Practicas de Laboratorio

Guantes.

Gasas esterilizadas.

Cubreboca.

Abatelenguas.

Microscopio.

Mechero de Bunsen

Reactivos:

Cristal Violeta. Yodo de Gram.

Etanol o Alcohol Acetona.

Safranina.

Aceite de Inmersión.

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Page 71: Manual de Practicas de Laboratorio

Procedimiento

Desinfectar el portaobjetos y etiquetar con el nombre del paciente.

Se extrae la secreción de las

amígdalas utilizando el Abatelenguas y los hisopos; la secreción se extrae con el hisopo y se coloca en el portaobjetos extendiéndola.

Con el mechero Bunsen se le pasa tres veces por el mechero tocando la otra mano con el portaobjetos del lado donde esta la muestra, para así fijarla.

Después se aplica la técnica de tinción de Gram.

Agregar una gota de cristal violeta. Esperar 1 minuto y luego enjuagar.

Agregar una gota de yodo de Gram. Esperar 1 minuto y luego enjuagar.

Agregar una gota de etanol o alcohol acetona. Dejar 1 minuto y luego enjuagar.

Agregar a la muestra una gota de safranina. Dejar 10 segundos y luego enjuagar.

Ya una vez seco, el portaobjetos se le agrega 1 gota de aceite de inmersión.

El portaobjetos se coloca en el microscopio para observar que tipo

de bact

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Page 72: Manual de Practicas de Laboratorio

Resultado

Nombre del paciente:

Edad: Tipo de estudio: Exudado faríngeo

Sexo:

Bacteria encontrada: Estafilococos: Bacterias causantes de que el paciente tenga dolor de garganta.

ESTAFILOCOCOS

Observacion

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Page 73: Manual de Practicas de Laboratorio

Desinfectar el portaobjetos y etiquetar con el nombre del paciente.

Se extrae la secreción de las amígdalas utilizando el Abatelenguas y los hisopos; la secreción se extrae con el hisopo y se coloca en el portaobjetos extendiéndola.

Con el mechero Bunsen se le pasa tres veces por el mechero tocando la otra mano con el portaobjetos del lado donde esta la muestra, para así fijarla.

Después se aplica la técnica de tinción de Gram. Agregar una gota de cristal violeta. Esperar 1 minuto y luego enjuagar.

Agregar una gota de yodo de Gram. Esperar 1 minuto y luego enjuagar.

Agregar una gota de etanol o alcohol acetona. Dejar 1 minuto y luego enjuagar.

Agregar a la muestra una gota de safranina. Dejar 10 segundos y luego enjuagar.

Ya una vez seco, el portaobjetos se le agrega 1 gota de aceite de inmersión.

El portaobjetos se coloca en el microscopio

para observar que tipo de bact

Discusión:

En esta práctica aprendimos como se realiza un exudado faríngeo y su tinción

Siguiendo el procedimiento adecuado tanto para la toma de muestra

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Page 74: Manual de Practicas de Laboratorio

Como para la realización de la tinción de Gram.

Así como los diferentes tipos de bacterias que se pueden encontrar en el paciente

Al realizar el exudado faríngeo además de saber que padecimientos que estas le

Pueden provocar al paciente.

Conclusión:

En esta práctica concluimos que los objetivos planteados anteriormente fueron cumplidos

Satisfactoriamente ya que el alumno aprendió como realizar un exudado faríngeo

Y la tinción de Gram con el respectivo procedimiento para poder observar la muestra

En el microscopio y posteriormente identificar las bacterias observadas en la muestra Para saber que padecimientos pueden ocasionar estas bacterias en el paciente.

Cuestionario:1.- ¿Qué es el exudado faríngeo?

R= Es la toma de muestra que se realiza en el fondo de la garganta mediante el uso de un hisopo estéril.

2.- ¿Para qué sirve el exudado faríngeo?

R= Sirve de herramienta de diagnóstico de padecimientos de origen bacteriano.

3.- ¿Cómo se consigue la muestra?

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Page 75: Manual de Practicas de Laboratorio

R= Se introduce el hisopo y se dan vueltas sobre la muestra a fin de que todo este quede impregnado.

4.- ¿Qué se hace ya que la muestra se impregna en el hisopo?

R= Se prosigue a sembrar en medios de cultivo.

5.- ¿A cuántos grados se incuba el cultivo?

R= A 37° C y se observan los resultados en 48 hrs.

6.- ¿Qué se busca en el exudado faríngeo?

R= Especies bacterianas asociadas a enfermedades relacionadas con el tracto respiratorio.

7.- ¿Principalmente que bacterias se buscan en el exudado faríngeo?

R= Estrepto cocos beta hemolíticos, ya que son los de mayor importancia.

8.- ¿A que puede ayudar el exudado faríngeo?

R= A determinar las causas del dolor de garganta y otros padecimientos.

9.- Con frecuencia, ¿A qué se debe el dolor de garganta?

R= A un virus.

10.- ¿Qué nos permite determinar el cultivo?

R= Si se debe a una bacteria estreptocócica para que los médicos puedan brindar el tratamiento correcto.

PRACTICA 8

EXAMEN GENERAL DE ORINA

OBJETIVO GENERAL

Adquirir el conocimiento específico y la técnica necesaria para

aplicar un examen general de orina.

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Page 76: Manual de Practicas de Laboratorio

OBJETIVOS PARTICULARES

Proporcionar una información útil de la salud por medio del

estudio general de orina.

Aprender a realizar el examen sin mayor problema y obtener así

un buen resultado.

Aplicar correctamente la técnica y el procedimiento para este

examen.

INTRODUCCION

Los análisis de orina realizados en el laboratorio clínico, puede

proporcionar una información amplia, variada y útil del riñón de un

individuo y de las enfermedades sistémicas que pueden afectar este

órgano excretor. Por medio de este análisis, es posible elucidar tanto

desórdenes estructurales (anatómicos) como desórdenes funcionales

(fisiológicos) del riñón y del tracto urinario inferior, sus causas, y su

pronóstico. La realización cuidadosa del examen de orina, por parte

del laboratorio, ayuda al diagnóstico diferencial de numerosas

enfermedades del sistema urinario. Usualmente, los datos de

laboratorio obtenidos por medio de este análisis, se logran sin dolor,

daño o tensión para el paciente. Esta es la razón por la cual, la

realización e interpretación correcta del análisis de orina, por parte del

laboratorio permanecerá siempre como una herramienta esencial de la

práctica clínica.

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Page 77: Manual de Practicas de Laboratorio

En la actualidad, se practican tres tipos de exámenes de orina: análisis

de orina por tira húmeda, empleado generalmente por los médicos en

sus consultorios y por los pacientes en sus casas; tamizaje de análisis

húmedo de la orina, comúnmente llamado análisis básico o rutinario

de orina; y citodiagnóstico de la orina, que es una evaluación

Citológica especializada del sedimento urinario que correlaciona con

los análisis realizados por medio de la tira reactiva. El análisis de orina

realizado con la tira húmeda es un ensayo de primera etapa para la

detección y monitoreo de pacientes con anormalidades químicas. Los

pacientes diabéticos a menudo monitorean permanentemente su

propia enfermedad, buscando signos de glucosuria, proteinuria, e

infecciones del tracto urinario, mediante pruebas realizadas en casa.

MATERIAL Y REACTIVOS

Material:

Portaobjetos.

Cubreobjetos.

2 tubos de ensaye de 13x100mm.

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Page 78: Manual de Practicas de Laboratorio

Pipeta Pasteur.

Bulbo.

Masking.

Cubreboca.

Gasas.

Guantes.

Centrifuga.

Microscopio.

Gradilla.

Muestra biológica:

Orina.

Reactivos:

Combur test.

PROCEDIMIENTO

1.- Etiquetar el frasco con el nombre del paciente.

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Page 79: Manual de Practicas de Laboratorio

2.- Llenar los tubos de ensaye tres cuartas partes con orina

colocándola en las gradillas.

3.- Después introducir una tira reactiva a un tubo para leer el

resultado.

4.- Comparar el resultado de la tira con el bote de las tiras

reactivas para conocer el resultado.

5.- Introducir los tubos a una centrifuga por cinco minutos a dos

mil quinientas revoluciones por minuto.

6 .- Con la pipeta obtener lo que en el tubo.

7.- Colocar tres gotas en el portaobjetos

8.- Colocar los cubreobjetos de manera que no forme burbujas.

9.- Colocar los portaobjetos en el microscopio para observar los

mismas.

RESULTADOS

Paciente: Samuel Carlo Bautista

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Page 80: Manual de Practicas de Laboratorio

Sexo: Masculino

Edad: 16 años

Fecha: 2 de Junio de 2011

EXAMEN FISICO EXAMEN

QUIMICO

EXAMEN

MICROSCOPICO

Color: Amarillo

oscuro

Densidad 1.015 En el examen

microscópico se

encontró como

resultado los cilindro

granuloso .

Claridad-Oscuro Valor Ph 7

No tiene solidos Leucocitos-

Negativo

Olor- Vitamina A Nitrito -Negativo

Espuma- Si presenta Proteina Normal 1+

Glucosa Normal

No cuerpos ceticos

Urobilingeo Normal

Bilirubina-Normal

Hemonglobina-

Negativo

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Page 81: Manual de Practicas de Laboratorio

Cilíndrico Granuloso

Paciente: Samuel Carlo Bautista

Paciente: Jorge Chávez Domínguez

Sexo: Masculino

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Page 82: Manual de Practicas de Laboratorio

Edad: 15 años

Fecha: 2 de Junio de 2011

EXAMEN FISICO EXAMEN

QUIMICO

EXAMEN

MICROSCOPICO

Color: Amarillo Claro Densidad 1 En el examen

microscópico se

encontró como

resultado los

incoloras que

presentan una forma

muy importante ya

que es soluble en

acido clorhídrico.

Claridad- Claro Valor Ph 6

No tiene solidos Leucocitos-

Negativo

Olor- Vitamina A Nitrito -Negativo

Espuma- Si presenta Proteina Normal 1+

Glucosa Normal

No cuerpos ceticos

Urobilingeo Normal

Bilirubina-Normal

Hemonglobina-

Negativo

Oxalato de calcio

Paciente: Jorge Chávez Domínguez

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Page 83: Manual de Practicas de Laboratorio

OBSERVACIONES

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Page 84: Manual de Practicas de Laboratorio

1.- Etiquetar el frasco con el

nombre del paciente.

2.- Llenar los tubos de ensaye tres

cuartas partes con orina

colocándola en las gradillas.

3.- Después introducir una tira

reactiva a un tubo para leer el

resultado.

4.- Comparar el resultado de la tira

con el bote de las tiras reactivas

para conocer el resultado.

5.- Introducir los tubos a una

centrifuga por cinco minutos a dos

mil quinientas revoluciones por

minuto.

6 .- Con la pipeta obtener lo que

quedo en el tubo.

83

Page 85: Manual de Practicas de Laboratorio

7.- Colocar tres gotas en el

portaobjetos

8.- Colocar los cubreobjetos de

manera que no forme burbujas.

9.- Colocar los portaobjetos en el

microscopio para observar los

mismas.

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Page 86: Manual de Practicas de Laboratorio

DISCUSIÓN

En esta práctica la principal principio fue dar a conocer los resultados al paciente eficazmente, todo estos métodos realizados en la práctica se llevaron a cabo siguiendo las normas que nos dan a conocer para poder llegar a un buen resultado y eficiencia en los resultados.

CONCLUSION

Para finalizar esta práctica se tuvo que volver a hacer el aseo del laboratorio basando en las normas del laboratorio, como conclusión se llegó a que el examen de general de orina es un examen que nos da a conocer muchos resultados como ph, densidad, glucosa , etc.

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Page 87: Manual de Practicas de Laboratorio

CUESTIONARIO

¿Por qué hacer el análisis?Para detectar trastornos renales o metabólicos, y para la detección de infeccionesdel tracto rutinario.¿Cuándo hacer el análisis?En el curso de un examen rutinario o cuando se padecen síntomas de infeccióndel tracto urinario, como dolor abdominal, dolor lumbar, emisiones de orinafrecuentes o dolorosas, o cuando aparece sangre en la orina; también formandoparte de una revisión durante un embarazo, o de un ingreso hospitalario, o delestudio preoperatorio antes de una intervención quirúrgica.¿Qué muestra se requiere?Unos 20 mL de orina son suficientes; de preferencia, la primera micción (emisiónde orina) de la mañana.

¿Qué es lo que se analiza?Un urianálisis está constituido por un conjunto de pruebas que detectan y midende manera semicuantitativa distintos componentes eliminados por la orina,incluyendo productos intermediarios del metabolismo así como tambiéncélulas, bacterias, y fragmentos celulares. La orina es producida por los riñones,localizados a ambos lados de la columna vertebral por debajo de la cajatorácica. Los riñones filtran productos de desecho y productos metabólicosintermediarios eliminándolos de la sangre, a la vez que ayudan a regular lacantidad de agua del organismo; todo ello, conservando proteínas, electrolitos y

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Page 88: Manual de Practicas de Laboratorio

otros compuestos que el organismo puede reutilizar. Todo lo que no es necesariose elimina por la orina, siendo trasnportada la orina desde los riñones hasta lavejiga urinaria, y excretándose al exterior a través de la uretra. La orina suele seramarillenta y de color claro, pero cada vez que se orina, el color, la cantidad, laconcentración y el contenido de la orina pueden variar ligeramente debido a lavariedad de constituyentes que en ella se encuentran.Son muchos los trastornos de salud que pueden detectarse de manera precoz através del hallazgo de anomalías en la orina. Entre estos hallazgos se incluyen lapresencia de concentraciones elevadas de ciertos constituyentes que no seencuentran normalmente en orina en cantidades significativas como: glucosa,proteínas, bilirrubina, células sanguíneas (hematíes y leucocitos), cristales ybacterias. Es posible que estas sustancias se hallen en orina porque seencuentran a concentraciones elevadas en la sangre y el organismo intentadisminuir los niveles sanguíneos eliminándolos por la orina, o bien porque en laenfermedad renal la capacidad de filtración de los riñones sea menos efectiva, oporque existe una infección bacteriana.¿Cómo se obtiene la muestra para el análisis?La muestra de orina para un urianálisis puede recogerse en cualquier momentodel día. La mejor muestra es la primera de la mañana porque es la másconcentrada y es la que con más probabilidades detectará anomalías. Debido a laposibilidad de contaminar la orina con bacterias y células del tejidocutáneo circundante durante el proceso de recogida de la orina (particularmente

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en las mujeres), es importante limpiar previamente la zona genital. Las mujeresdeberían asearse de adelante hacia atrás, abriendo los labios vaginales; loshombres deberían limpiarse la punta del pene. Al empezar a orinar, debe dejarsecaer un poco de orina en el sanitario y entonces proceder a recoger la orina en elcontenedor que se le haya suministrado, eliminando el resto de la orinadirectamente al sanitario. Este tipo de recogida de orina se conoce como recogidalimpia de orina.

¿Cómo se utiliza?El urianálisis se utiliza como una herramienta de cribado y/o de diagnóstico puestoque ayuda a detectar en orina sustancias o material celular asociados a distintasenfermedades metabólicas y renales

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PRACTICA 10

“CUANTIFICACION DE HEMOGLOBINA”

OBJETIVO GANERAL

Aplicar los procedimientos adecuados para la realización de esta practica

OBJETIVOS ESPECIFICOS

Saber que es hemoglobina Aprender a utilizar el espectrofotómetro Aprender a pipetear

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INTRODUCCION

La hemoglobina es oxidada por la acción del ferrocianuro a metahemoglobina y mediante el cianuro se convierte en cionmetahemoglobina.

La hemoglobina es una proteína que contiene hierro, otorga el color rojo a la sangre. Se encuentra en los glóbulos rojos y es encargada del transporte de oxigeno por la sangre desde los pulmones hasta los tejidos.

Cuando el nivel de hemoglobina aparece por debajo de los niveles normales indica anemia que puede obedecer a diferentes causas: anemia primaria, cáncer, embarazo, enfermedades renales o hemorragias. Si el nivel de hemoglobina es alto puede deberse a cardiopatías, deshidratación o estancia en lugares de gran altitud.

El diagnostico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de laboratorio.

Cada laboratorio debe disponer con su propio control de calidad y establecer correcciones en el caso de que los controles no cumplan con las tolerancias.

Hombres 14-18 g/dL=8,7-11,2 mmol/L

Mujeres 12-16 g/dL=7,5-9,9 mmol/L

Estos valores son orientativos.

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MATERIAL Y REACTIVOS

MATERIAL:

-Bata

-Guantes

-Pipeta de shali

-Pipeta automática

-Tubos de ensaye con EDTA

-Sistema vacutainer o jeringa

-Torniquete

-Torundas

-Alcohol

-Cubetas

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REACTIVOS:

Hemoglobin ferrocianuro de potasio 0.60mmol/L

50x cianuro de potasio 77mmlo/L

di hidrogeno fosfato de potasio 2mmol/L

Hemoglobin CAL Patrón de hemoglobina 15g/dL

Origen animal

PROCEDIMIENTO

1-Condicines de ensayo:

Longitud de onda…………..54nm

Cubeta………………………1cm pasó de luz

Temperatura………………...15-25º C

2-Ajustar el espectrofotómetro a cero frente a agua destilada

3-Pipetear

A) METODO MACRO

BLANCO PATRON MUESTRART (ml) 5,0 5,0 5,0Calibrar (ml) ----- 2,0 -----Muestra ----- ----- 2,0

4- Mezclar e incubar 3 min. A temperatura ambiente

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5- Leer la absorbencia (A) del calibrador y la muestra, frente al blanco de reactivo

RESULTADO

Nombre: Jorge Chávez Domínguez

Edad: 15 años Sexo: Masculino

Fecha: 23 de mayo del 2011

Tipo de examen: cuantificación de hemoglobina

Pipeta de shali: 0.27

Pipeta automática: 0.29

A X15 (CONC. PATRON) g/dl absorbencia de patrón: 0.24

P

Pipeta 0.27 x 15(conc. Del patrón) g/dl=16.875 g/dl de

De shali 0.24 hemoglobina

Pipeta 0.29 x15 (conc. Del patrón)g/dl=18.125g/dl de

Automática 0.24 hemoglobina

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DISCUSION

Con esta practica se llego a los resultados deseados, ya que aprendimos a utiliza el espectrofotómetro, las distintas pipetas (pipeta de shali y pipeta automática) y a leer la absorbencia (A) del calibrador y de la muestra.

CONCLUSION

Como conclusión determinamos que la hemoglobina es una proteína que le da el color rojo ala sangre además de que contiene hierro. Por medio de esta se puede determinar algunas enfermedades como la anemia, cáncer, embarazo, por mencionar algunas, cuando los niveles de hemoglobina son bajos. Si el nivel es alto puede ser cardiopatías, deshidratación, etc.

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Cuestionario

¿Cómo se llama la practica?

R=cuantificación de hemoglobina

¿Cuál es su objetivo principal?

R=que el alumno comprenda los métodos de análisis de una prueba de cuantificación de hemoglobina, ya que se conocerán diferentes resultados

¿Qué es la hemoglobina?

R=es una proteína que contiene hierro, y otorga el color rojo a la sangre.

¿En donde se encuentra?

R=en los glóbulos rojos

¿De qué se encarga?

R=de transportar oxigeno por la sangre desde los pulmones hasta los tejidos

¿Cuándo se indica anemia?

R=cuando los niveles de glóbulos están por debajo del 20%

¿Cómo se le llama al exceso de glóbulos rojos?

R=Polisemia

¿Cuáles son los materiales usados en esta práctica?

R=pipeta de shalli, pipeta automática, tubo de látex con gomilla, tubo con anticoagulante, cubre bocas, guantes, etc.

¿Que equipo se utiliza?

R=microscopio, refactofotómetro.

¿Cuándo se indica polisemia?

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R=cuando los niveles de glóbulos rojos son mayores del 40%.

Conclusión

Para concluir en este manual de practica nos hemos dado cuenta las distintas formas de llevar a cabo las prácticas de laboratorio, con responsabilidad, ética y respeto. Nos fuimos guiando de las normas 087, 005, 003, 166, norma iso, el código de biótica y norma conocer. Con esto nos fuimos dando cuenta y formándonos como elaborar prácticas en un laboratorio.

Gracias a eso nos hemos dado cuenta la importancia de tener todo en orden, estéril, con limpieza y cuidado. También ya sabemos clasificar los diferentes reactivos, asi como también saber identificar las sustancias peligrosas que pueden causar daños irreversibles.

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GLOSARIO

EXTRACION: Accion y efecto de extraer

SANGRE: Liquido rojo, que contiene componentes sanguíneos como globulos rojos y blancos que corren por el torrente sanguíneo (venas)

COPRO: Muestra biológica de efeces fecales

MICCION: Accion y efecto de orinar

SEDIMENTACION: Parte que después de someter a centrifugación queda en la parte baja del tubo

ESPUTO: O gargajo, también conocidos vulgarmente como gallos, es la muestra biológica extraída de la boca atreves de una expulsión de los pulmones.

TINCION: De verbo teñir, para realizar una tinción existen diferentes métodos.

REACTIVO: Sustancia reactiva, con características escificas.

VACUTAINER: Sistema para realizar extracción sanguinea

EDTA: Anticoagulante

FROTIS: Accion de frotar

CENTRIFUGAR: Procesar muestras para delimitar el sedimentado

DECANTAR: Retirar el sobrante

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RPBI: Residuos peligrosos biológico infecciosos

ANALISIS: Analizar, observar, comparar.

BIOETICA: Proteger la vida y trabajar con etica

COMPETENCIA: Mejorar, competir positivamente

CALIDAD: Régimen de satisfacción.

ACREDITACION: Certificación mediante un proceso

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