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Laboratorio de Investigación de Enfermedades Gastrointestinales

Av. El Polo 740, Of. C-414 C. C. El Polo, Surco, Lima, PERU Telef. 51 (1) 250-1884 http://www.gastrolabperu.com

UUTTIILLIIDDAADD CCLLIINNIICCAA

Es una prueba rápida que puede ser útil en la evaluación de pacientes con diarrea para deter-minar si hay o no reacción inflamatoria. Su valor predictivo para identificar muestras que requie-ren cultivo es superior que el examen de leucoci-

tos fecales por microscopía. Es útil también en el tamizado inicial de pacientes con diarrea crónica para detectar enfermedad inflamatoria intestinal así como para evaluar la actividad de la enferme-dad en pacientes ya diagnosticados.

DDEESSCCRRIIPPCCIIOONN

Este examen detecta lactoferrina en heces, una proteína muy estable que marca la presencia de leucocitos. Cuentas de látex recubiertas con anti-cuerpos anti-lactoferrina dan una reacción positi-va de aglutinación si hay lactoferrina en niveles

elevados. La reacción indica un número aumenta-do de leucocitos fecales, salvo que la lactoferrina provenga de otras fuentes, como leche materna. Cuentas de látex recubiertas con IgG sirven como control negativo. El examen es semi-cuantitativo.

IINNFFOORRMMAACCIIOONN CCLLIINNIICCAA

En contraste con las diarreas virales y las diarreas causadas por algunas bacterias como E. coli enterotoxigénica y V. cholerae o parásitos como Cyclospora y Cryptosporidium, las diarreas causa-das por Shigella, Campylobacter, Salmonella, Clostridium difficile y Yersinia, inducen una re-acción inflamatoria intensa en la pared intestinal que se traduce en la exudación hacia el lumen de grandes cantidades de leucocitos que subsecuen-temente aparecen en el moco fecal. Otras condi-ciones clínicas de origen no-infeccioso como coli-tis alérgica y enfermedad inflamatoria intestinal crónica causan un proceso inflamatorio similar. La detección de leucocitos en las heces es por eso una herramienta diagnóstica útil en la evalua-ción de pacientes con diarrea. La mayoría de la-

boratorios clínicos detecta leucocitos fecales me-diante microscopía; sin embargo, este método no es estándar porque depende de la experiencia del examinador y de las condiciones de la muestra. Los leucocitos son estructuras frágiles y su morfo-logía puede cambiar y su cantidad disminuir, ha-ciendo difícil su reconocimiento, si la muestra no es examinada inmediatamente tras su recolec-ción. De otro lado, algunas toxinas como las producidas por C. difficile pueden desintegrar los leucocitos. Por todo esto puede que no se observen leucocitos aun cuando hay una severa inflamación. La detección de lactoferrina fecal, una proteína liberada de los leucocitos, es un método alternativo para evaluar la inflamación intestinal sin las limitaciones de la microscopía.

MMUUEESSTTRRAA

Heces frescas, refrigeradas o congeladas, en recipiente apropiado (frasco limpio, seco, de boca ancha y tapa hermética). Mínimo 5 mL (5 g) – Mayor cantidad si conjuntamente se solicitan otros exámenes.

IINNSSTTRRUUCCCCIIOONNEESS PPAARRAA OOBBTTEENNCCIIOONN YY TTRRAANNSSPPOORRTTEE DDEE LLAA MMUUEESSTTRRAA

Obtener la muestra en frasco limpio de boca ancha y tapa hermética. No mezclar la muestra con orina, cremas o talco. Colectar la mayor cantidad posible. En niños pequeños colocar el pañal al revés (por la parte no absorbente), cu-brir la salida de la uretra con un trozo de algodón (para no contaminar la muestra con orina) y trasvasar la muestra al frasco. Muestras en pañal no son aceptables. Enviar la muestra al labora-torio inmediatamente después de su obtención en

caja térmica con refrigerantes. Muestras de luga-res fuera de Lima o que no pueden ser enviadas al laboratorio antes de 3 horas desde su obtén-ción deben ser congeladas a -20°C hasta su envío. Muestras en un medio de preservación como Cary-Blair son aceptables para esta prueba. No colectar la muestra en recipientes que contengan formol o compuestos similares, sueros animales, iones metálicos, agentes oxidantes o detergentes debido a posibles interferencias con la prueba.

MMEETTOODDOO DDEE AANNAALLIISSIISS

Se prepara una suspensión de la muestra con una solución tamponada y se mezcla en Vórtex. Se coloca una gota de Látex Sensibilizado en cada uno de dos círculos de la tarjeta de aglutinación (círculos 1 y 2) y una gota de Látex Control Negativo en otro círculo (círculo 3). Una gota de la muestra-suspensión se añade a los círculos 2 y

3 y una gota de Reactivo de Control Positivo al círculo 1 de la tarjeta. Se incuba y agita la tarjeta durante 3 minutos, se lee y se registran los resultados. Para ser válida la prueba, el control positivo debe dar una reacción de aglutinación claramente visible como un anillo blanco en el perímetro y el control negativo no.

LACTOFERRINA FECAL (LEUKO-TEST) (CF008)

Lactoferrina es una proteína de los leucocitos y un marcador muy estable de reacción inflamatoria

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RRAANNGGOO DDEE RREESSUULLTTAADDOOSS

Negativo, sin aglutinación visible Positivo 1+, reacción inflamatoria leve Positivo 2+, reacción inflamatoria moderada,

Positivo 3+, reacción inflamatoria severa Positivo 4+, reacción inflamatoria muy severa

RRAANNGGOO NNOORRMMAALL

Negativo, no hay lactoferrina en cantidad elevada

TTIIEEMMPPOO DDEE EENNTTRREEGGAA DDEE RREESSUULLTTAADDOOSS

3 horas o antes, desde recibida la muestra

IINNTTEERRPPRREETTAACCIIOONN DDEE RREESSUULLTTAADDOOSS

Si el resultado se informa como POSITIVO indica la presencia de niveles elevados de lactoferrina liberada de leucocitos, salvo que la lactoferrina provenga de otras fuentes como leche materna. Normalmente no hay o hay solo una escaza canti-dad de leucocitos (y por ende lactoferrina) en una muestra fecal. Para esta prueba, la muestra se diluye a un nivel suficiente para detectar únicamente cantidades elevadas de lactoferrina por lo que esta prueba se puede considerar bas-tante específica de reacción inflamatoria clínica-mente relevante. En muestras fecales diarreicas, niveles aumentados de lactoferrina indican que una bacteria invasiva podría ser la causa y que un cultivo puede ser necesario. Niveles elevados de lactoferrina fecal pueden presentarse también en

procesos inflamatorios intestinales de origen no-infeccioso como colitis alérgica o enfermedad inflamatoria intestinal crónica. Aunque la prueba es semi-cuantitativa, el número de cruces en una reacción POSITIVA indica la intensidad de la reac-ción inflamatoria. Si el resultado se informa como NEGATIVO es muy poco probable que haya real-mente una condición inflamatoria intestinal sea infecciosa o no-infecciosa. Esta prueba sólo de-tecta lactoferrina en las heces y no indica nece-sariamente que hay una infección ni cuál podría ser el agente infeccioso de estar presente. Esta información es sólo para ser tomada en cuenta. El médico es el más indicado para decidir lo que se deba hacer en base a los síntomas, el cuadro clínico y el resultado de esta prueba.

LLIIMMIITTAACCIIOONNEESS YY RREECCOOMMEENNDDAACCIIOONNEESS

1. Mantener la muestra refrigerada desde su obtención hasta la llegada al laboratorio; la lactoferrina es una proteína estable pero puede deteriorarse en muestras expuestas a temperaturas elevadas durante el trans-porte al laboratorio;

2. En niños que reciben leche materna, el resultado de esta prueba puede ser POSITIVO debido a la lactoferrina que está presente en la leche materna en forma natural;

3. Si el resultado de la prueba es NEGATIVO y la sospecha de enfermedad inflamatoria es

muy fuerte puede ser conveniente repetir la prueba en una nueva muestra;

4. Esta prueba detecta niveles elevados de lactoferrina liberada de leucocitos fecales; la prueba puede no ser adecuada para personas inmunosuprimidas;

5. Esta prueba no ha sido evaluada clínica-mente para ser utilizada en la detección de leucocitos en otro tipo de muestras clínicas; sólo puede ser utilizado en el examen de especímenes fecales.

PPOORRQQUUEE DDEEBBOO HHAACCEERR EESSTTAA PPRRUUEEBBAA EENN GGAASSTTRROOLLAABB??

1. Hasta donde sabemos, somos el único laboratorio en el país que hace este examen…así de simple;

2. Hemos adquirido una enorme experiencia para hacer este examen, como lo hacen los mejores laboratorios del mundo: más de 300 exámenes hasta la fecha;

3. Ofrecemos abundante información para ayudar a elegir el mejor examen, para obtener una muestra adecuada y para interpretar los resultados.

HHOORRAARRIIOO DDEE RREECCEEPPCCIIOONN DDEE MMUUEESSTTRRAASS

Lunes a Viernes de 7:30 AM a 8:30 PM Sábados de 7:30 AM a 6:30 PM Atención fuera de horario, llamar al 990-371-374

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