Labo 1 Prueba de Aglutininas Frias

UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS Facultad de Farmacia y Bioquímica

Profesor Responsable: Q.F. Dr. Juan Manuel Parreño Tipián.

Alumna: Fiorella Yahaira Pérez Guerrero

Código:08040106

Año de Estudio: Quinto

Semestre Académico: 2013-II

Laboratorio:Viernes 10:00- 14:00

Facultad de Farmacia y Bioquímica UNMSM

I. INTRODUCCIÓN

Como sabemos las aglutininas son globulinas producidas por las mismas células que producen los anticuerpos frente a antígenos extraños y que hacen que los glóbulos rojos se agrupen; su importancia clínica implica realizar una prueba de sangre con el objetivo de diagnosticar la presencia de enfermedades infecciosas, ciertos tipos de cáncer, lupus eritematoso sistémico, signos de anemia hemolítica y alteración que se caracteriza por la insuficiencia de glóbulos rojos en la sangre debido a su destrucción prematura.Si bien esta prueba no es muy específica en la determinación de ciertas enfermedades, suele ser trascendental, ya que dichas células sanguíneas son responsables de dotar de oxígeno a los tejidos corporales; por ello en el presente informe estudiaremos la importancia de dicha prueba, así como los métodos empleados para determinarla y su significancia clínica frente a un resultado dado.

Análisis Clínico II 2


II. OBJETIVOS

Identificar la presencia o ausencia de Crioaglutininas en suero.

Diagnosticar y determinar las causas de enfermedades idiopáticas por crioaglutininas como Infecciones, Anemias hemolíticas, Linfoma, Lupus eritematoso o Cáncer.



III. MARCO TEÓRICOA. Crioaglutininas

El análisis de crioaglutininas se realiza con el objetivo de evaluar las condiciones que hacen que el cuerpo produzca ciertos tipos de anticuerpos (aglutininas) a nivel del sistema inmunitari o en respuesta a una infección.

Estas crioaglutininas fue descrito por primera vez hace más de un siglo, y no son más que inmunoglobulinas o anticuerpos monoclonales de clase IgM, que a temperaturas comprendidas entre 0 y 5 ºC, producen la aglutinación de los hematíes o son capaces de producir hemólisis; el antígeno blanco en el eritrocito es un oligosacárido del sistema I/i que es un precursor de los antígenos de los grupos sanguíneos ABH y Lewis. Esto ocasiona también una lesión celular por lisis directa que será mediada por la activación del complemento. Dado que las IgM pueden fijar el complemento con facilidad, los glóbulos rojos del paciente se recubren con el complemento. Habitualmente, la progresión de la cascada del complemento se detiene en la formación de C3b, por la presencia de proteínas protectoras en la superficie de los glóbulos rojos.

B. Significancia clínica

Las crioaglutininas se encuentran por lo general a niveles bajos en muchas personas normales o sanas; sin embargo cobran significado clínico cuando interfieren en las tipificaciones dando reacciones cruzadas a temperaturas por debajo de los 4ºC, causando así dolores en las extremidades, trombosis, aglutinación y hemólisis.


Enfermedad crónica de Aglutinación fría

https://healthy.kaiserpermanente.org/static/health-encyclopedia/es-us/kb/sti1/5086/7/sti150867.shtml#sti150867-sec


Su presencia puede seguir a una serie de infecciones o enfermedades crónicas como un linfoma, anemia hemolítica, Lupus eritematoso sistémico y cáncer.

C. Enfermedades idiopáticas por crioaglutininas elevadas

El síndrome de crioaglutininas se presenta con una frecuencia de 30-40% y afecta generalmente a personas mayores de 40 años.

El estudio de crioaglutininas también hace posible la detección de algunos tipos de cáncer, como linfoma y mieloma múltiple.

D. Signos y síntomas


Aglutininas frías o crioaglutininas

VALORES NORMALES: sin aglutinación en títulos o por debajo de 1/40

VALORES ELEVADOS: Aglutinación en título mayores de 1/40

ENFERMEDAD CARACTERÍSTICASAnemia hemolítica

autoinmuneDe mayor frecuencia.

Infección por estafilococos

Afecta a recién nacidos, mujeres en período de lactancia y personas con enfermedades crónicas o sistema inmunológico debilitado.

Mycoplasma pneumoniae

Con frecuencia de 25-35%, está asociado a síntomas de infecciones respiratorias. Ocasiona dolor torácico, tos seca, sudoración excesiva, fiebre, escalofrío y dolor de cabeza y garganta. Formación de anticuerpos contra antígeno I.

Enfermedades linfoproliferativas

Linfomas, leucemia linfocítica crónica. Frecuencia del 15-20%. Origen generalmente monoclonal y caracterizado por la destrucción preferencial de células jóvenes.

Lupus eritematoso sistémico.

Inducido por drogas Con frecuencia de 1-5% como la penicilina y alfa metildopa.

Otros Frecuencia 5-1% en Hepatitis C, influenza, citomegaloviru, sarampión, endocarditis bacteriana, tularemia, cirrosis y tumores en el timo.


En ciertos casos, los niveles altos de crioaglutininas pueden causar que la sangre se aglutine en los vasos sanguíneos debajo de la piel cuando la piel está expuesta al frío. Esto provoca una piel pálida y el entumecimiento de las manos y los pies.

IV. PROCEDIMIENTO

Método: M. TrombergFundamento: En la aglutinación antígeno - anticuerpo

(oligosacárido del sistema I/i - IgM)Muestra: 3ml de sangre venosa.Reactivos: Citrato de sodio (anticoagulante) 3.8%

Cloruro de sodio (medio) 0.9% Suero salino fisiológico

Materiales y Equipos:

6 tubos de ensayo Centrifuga Micropipetas


Es posible que se presenten con ictericia, signos cutáneos fenómeno de Raynaud, cianosis en extremidades, nariz, orejas y fatiga crónica por la anemia, generalmente con títulos aglutininas mayores a 1/128.


A. Método Operatorio


Extraer 3 ml de sangre venosa y llevarlo a 0.75ml de citrato de sodio al 3.8%

(anticuagulante).

LLevar a Centrifugar a 2 000 RPM por 5 min, con el objetivo de separar el plasma, plaquetas

y globulos rojos.

Preparar una suspención de hematies al 0.5% ( 0.05ml de GR en 10 ml de SSF).

0.3

[C]


V. RESULTADO

El resultado se realiza de acuerdo con la intensidad de la aglutinación que se registra en base a la tabla de consideraciones.

NOTA: Consideración de lectura:

Consideración LecturaEl disco se puede agitar sin romper. +++++El disco al agitarlo se rompe en grandes fragmentos.

++++

El disco al agitarlo se rompe en pequeño fragmentos.

+++

El disco al agitarlo se rompe en pequeños fragmentos fácilmente y puede observarse al microscopio.

++

El disco al agitarlo se rompe en muy pequeños fragmentos solo observables al microscopio.

+


0.3 0.3 0.3 0.3 0.3

Dejar en reposo por 24h a 0-5ºC

SSF(ml) 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3

PLASMA (ml) 0.3

SUSP. GR AL 0.5%

(ml)0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3

Nº TUBO DE ENSAYO LECTURA1 ++2 ++3 +++4 +++5 +++6 +++


VI. DISCUCIÓN

Este examen se realiza con el objetivo de diagnosticar algunas infecciones y determinar la causa de una anemia hemolítica; sin embargo por ser una prueba in vitro existen algunos factores que no hacen que la prueba sea muy específica. Un factor importante en el diagnostico de esta prueba son las bajas temperaturas (0-5ºC) que se deben de manejar en todo el proceso y la agitación del disco al observar la aglutinación.Si bien los resultados obtenidos nos dan un índice de lectura entre (++) y (+++), esto indicaría que en el paciente se encuentra un nivel de crioaglutinina a titulo no mayor de 1/64.Otro punto importante a mencionar es el hecho de diferenciar entre crioaglutininas y aglutininas calientes que puede ayudar a entender por qué se está presentando la anemia hemolítica y poder dirigir la terapia.

VII. CONCLUSIÓN

Se encuentra un nivel de crioaglutinina en suero a titulo no mayor de 1/64.

No existe índice de presentar enfermedad idiopática por crioaglutinina.



VIII. CUESTIONARIO1. ¿Qué son aglutininas en caliente?

Los estudios de aglutininas en caliente o también conocida como la prueba de Widal se utilizan para determinar enfermedades infecciosas como: salmonelosis, richetsiosis, brucelosis. La reacción de Widal, esta basado en el principio de aglutinación antígeno-anticuerpo y fue desarrollada por Georges Fernand Isadore Widal, prestigioso médico francés, en Junio de 1896, para el diagnóstico serológico de la fiebre tifoidea.

La reacción de Widal demuestra la presencia de anticuerpos aglutinantes (aglutininas) contra los antígenos H (flagelar) u O (somático) de la Salmonella typhi u otras bacterias en el suero de los pacientes con fiebre tifoidea a una temperatura corporal de 37º C o mayor a ella.

En el laboratorio se realizan diluciones seriadas para identificar hasta que dilución se presenta la aglutinación.

Aglutininas Febriles: Sin aglutinación de eritrocitos a titulo menor o igual a 1/80 diluciones.

2. Fundamento de dicha prueba.



Se fundamenta en el principio de aglutinación antígeno-anticuerpo a una temperatura corporal de 37ºC o mayor a esta, en donde predomina la IgG que presentan una gran afinidad de unirse al antígeno capsular de ciertos organismos como la Salmonella.

3. Interpretación clínica de las aglutininas en caliente.

Los niveles aumentados de aglutininas febriles pueden ser un índice de la presencia de salmonelosis, fiebre tifoidea, tularemia, enfermedad por rikettsias o brucelosis.Un diagnóstico de estas infecciones puede considerarse positivo si los títulos iníciales se cuadruplican entre una y cuatro semana; sin embargo, el clínico no puede esperar este tiempo para establecer un tratamiento, por lo cual se debe considerar la posibilidad de entrar a un tratamiento.

4. Fundamento e interpretación clínica de las crioaglutininas.


FUNDAM ENTO

En la aglutinación antígeno - anticuerpo presente entre los hem aties (antígeno blanco en el eritrocito es un oligosacárido del sistem a I/i) y los anticuerpos producidos por nuetro cuerpo (anticuerpos m onoclonales de clase IgM ) a tem peraturas com prendidas entre 0 y 5 ºC.

INTERPRETACIÓN CLÍNICALas crioaglutininas se encuentran por lo general a niveles bajos en m uchas personas norm ales o sanas; sin em bargo cobran significado clínico cuando interfieren en las tipificaciones dando reacciones cruzadas a tem peraturas por debajo de los 4ºC.Su presencia puede seguir a una serie de infecciones o enferm edades crónicas com o un linfom a, anem ia hem olítica, Lupus eritem atoso sistém ico y cáncer.VALORES NORM ALES: sin aglutinación en títulos o por debajo de 1/40VALORES ELEVADOS: Aglutinación en título m ayores de 1/40


IX. BIBLIOGRAFÍA1. American Association of Blood Bank. Manual Técnico .13.ED. Buenos Aires:

Edigraf; 20012. Correa Jiménez, Luz María. Ayudas diagnósticas, análisis e interpretación.

Manizales, Universidad de Caldas, Centro Editorial 2002.3. Schwartz RS. Autoimmune and intravascular hemolytic anemias. In: Goldman

L, Schafer AI, eds. Cecil Medicine. 24th ed. Philadelphia, Pa:Saunders Elsevier; 2011:chap 163.

4. LotharT. Clinical Laboratory Diagnostics: Use and assessment of clinical laboratory results, English edition, 1998.

5. Centro Médico de la Universidad de Maryland. Aglutininas frías y febriles, Información general. University of Maryland Medical Center (UMMC)

6. Pagana KD, Pagana TJ. Guía de pruebas diagnósticas y de laboratorio. 8ª Edición. España: Editorial Elsevier / Mosby; 2009.



7. Abraham E. Katime Zúñiga. Artículo de revisión: Reacción de Widal - interpretación clínica. Rev. Panam Infectol 2006;8(2):40-44

8. Paul N. Lanken. Manual de cuidados intensivos. Editorial Médica Panamericana. Madrid. 2003.


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