SEMESTRE I

PROTEINAS

Facultad medicina humana

Escuela académica profesional – tecnología médica

CURSO: BIOLOGÍA

DOCENTE: GIANCARLO TORRES GAMARRA

ESTUDIANTE: ARIAS AYALA JOSE

GALVAN CRISOSTOMO GIANCARLO

HORMAZA CACERES KEVIN BRIAN

MONGE CASTAÑEDA LUIS ALBERTO

HUAMANTICA PALOMINO JULIO

VILLANUEVA HINOJOSA JESSICA YANINA

HUANCAYO – PILCOMAYO

2013 - II

I. OBJETIVO

Identificar y reconocer proteínas a través de la prueba de Biuret y desnaturalización.

II. FUNDAMENTO CIENTÍFICO

Las proteínas son componentes orgánicos, básicamente cuaternarios: C, H, O y N aunque a veces contienen átomos de P, S, Fe y Ca. Estos principios inmediatos orgánicos son el producto de la organización de varias estructuras básicas, denominadas aminoácidos, las cuales se unen a través de enlaces peptídicos. Todo aminoácido químicamente es un amino carboxilo. Las proteínas adoptan diferentes grados de configuración, es decir de estructura, puede ser: primaria, secundaria, terciaria y cuaternaria. Todas estas son solubles en agua, a excepción de la primaria. Asimismo cuando estas interaccionan con el calor o algún agente orgánico pierden su configuración inicial y en consecuencia sus propiedades inherentes.

Las funciones que desempeñan las proteínas en un organismo son variados, entre ellos tenemos: estructural (queratina), de transporte (hemoglobina), de contracción (actina y miosina), de protección (interferon), hormonal (insulina), entre otros.

Aportes:

Por sus propiedades físico-químicas, las proteínas se pueden clasificar en proteínas simples (holoproteidos), que por hidrólisis dan solo aminoácidos o sus derivados; proteínas conjugadas (heteroproteidos), que por hidrólisis dan aminoácidos acompañados de sustancias diversas, y proteínas derivadas, sustancias formadas por desnaturalización y desdoblamiento de las anteriores. Las proteínas son indispensables para la vida, sobre todo por su función plástica (constituyen el 80% del protoplasma deshidratado de toda célula), pero también por sus funciones biorreguladoras (forman parte de las enzimas) y de defensa (los anticuerpos son proteínas).

Las proteínas desempeñan un papel fundamental para la vida y son las biomoléculas más versátiles y diversas. Son imprescindibles para el crecimiento del organismo y realizan una enorme cantidad de funciones diferentes, entre las que destacan:

Estructural. Esta es la función más importante de una proteína (Ej.: colágeno), Inmunológica (anticuerpos), Enzimática (Ej.: sacarosa y pepsina), Contráctil (actina y miosina). Homeostática: colaboran en el mantenimiento del pH (ya que actúan como un

tampón químico), Transducción de señales (Ej.: rodopsina) Protectora o defensiva (Ej.: trombina y fibrinógeno)

Se entiende como conformación, la orientación tridimensional que adquieren los grupos característicos de una molécula en el espacio, en virtud de la libertad de giro de éstos

sobre los ejes de sus enlaces. Existen dos clases de proteínas que difieren en sus conformaciones características: "proteínas fibrosas" y "proteínas globulares".

III. MATERIALES

Tubos de ensayo, gradillas

y gotero

Mechero de alcohol

Pinza, varilla y pipeta

Soya, leche y claras de

huevo

Suero sanguíneo

Hidróxido de sodio (NaOH

al 10%)

Agua destilada

Sulfato cúprico (CuSO4 al

5%)

Alcohol etílico

IV. PROCEDIMIENTOS

PRACTICA I:

Se distribuyen las muestras de acuerdo como nos indica la tabla

Se agrega el hidróxido de sodio a cada una de las muestras

Se agrega el sulfato de cobre a todas las muestras y luego se agita

CUADRO DE RESULTADOS

Tubo

N°

muestra añadir agregar Lo que se

indica

resultados

1 Albumina de

huevo 1 ml

NaOH 10 %

(0.5 ml)

cuSO4 1%

(1 ml)agitar

Color violeta intenso confirma

presencia de proteínas (II)

2 Albumina de

soya 1 ml

Violeta opaco; proteínas en poca

cantidad (III)

3 Suero

sanguíneo 1 ml

Color violeta intenso, presencia de

proteínas en mayor número (I)

4 Leche 1 ml Violeta bajo poca presencia de

proteínas (IV)

Nota: los números romanos I; II; III; IV representan en orden de concentración de proteínas por muestra

PRACTICA II:

Se colocan los tubos de ensayo

con la distribución de acuerdo a la

guía de practica

Se procede a agregarle agua,

NaOH ( 3 gotas), alcohol etílico

(0.5 ml) y agua destilada (1 ml) de

acuerdo a la guía de practicas

El procedimiento indica que a

algunas muestras se les debe de

calentar o agitar

CUADRO DE RESULTADOS

Tubo N ° Muestra AgregarLo que se

indicaResultados

1Albumina de

huevo 1 mlAgua 1ml Agitar

Hay desnaturalización forman estructuras

filamentosas

2Albumina de

huevo 1 ml---

Calentar

suavemente

Coagulación, se desnaturaliza formando un

compuesto blanco solido

3Albumina de

huevo 1 ml

NaOH

concentrado

(3 gotas)

---Coagulación; se forma una especie de gel

transparente

4Albumina de

huevo 1 ml

Alcohol

Etílico

(0.5 ml)

AgitarCoagulación; se forma un compuesto

transparente

5

Albumina

desnaturalizad

a

Agua

Destilada

(1 ml)

AgitarEl agua se queda en la parte superior no se

une con la muestra.

V. RESULTADOS:

PROTEINAS RESULTADOS

PRACTICA I Prueba de Biuret

PRACTICA IIDesnaturalizació

n

VI. CUESTIONARIO:

1. ¿Cuál es el mecanismo de reacción química de la prueba de Biuret?

R. –La reacción debe su nombre al Biuret, una molécula formada a partir de dos de urea (H2N-CO-NH-CO-NH2), que es la más sencilla que da positiva esta reacción La presencia de proteínas en una mezcla se puede determinar mediante la reacción del Biuret. El reactivo de Biuret contiene CuSO4 en solución acuosa alcalina (de NaOH o KOH). La reacción se basa en la formación de un compuesto de color violeta, debido a la formación de un complejo de coordinación entre los iones Cu2+ y los pares de electrones no compartidos del nitrógeno que forma parte de los enlaces peptídicos presentando un máximo de absorción a 540 nm

Da positiva esta reacción en todos los compuestos que tengan dos o más enlaces peptídicos consecutivos

CUSO4+NaOH = cu(OH)2 + Na2SO4

Proteína + cu(OH)2 complejo (Biuret – cupro - sódico) reacción de color violeta

2. ¿Por qué se dice que algunos aminoácidos son levógiros y otros dextrógiros?

R. – como es bien conocido por Química, las formas Dextrógira y Levógira están presentes en la mayoría de compuestos de cadenas largas. Esto es debido a la presencia de un átomo de carbono asimétrico en su estructura, lo cual provoca que puedan existir en las dos formas antes mencionadas (D y L); Los aminoácidos poseen entonces estas dos formas D y L que son isómeros ópticos (desvían el plan de luz para lados opuestos) pero el cuerpo humano solo es capaz de absorber la forma levógira de los aminoácidos por ello la L antes de los compuestos L-alanina o L-histidina por ejemplo;

La forma dextrógira (presente en algunos aminoácidos veterinarios) no es necesariamente absorbida.

En estos compuestos también existe la forma racémica (mezcla de L y D = DL) que además de no ser absorbida dificulta la absorción de la forma L, por ello la tecnología de la industria nutricional combina con otros tipos de compuestos naturales que ayudan a potenciar algunas propiedades de la forma dextrógira y solo en algunas circunstancias.

Exactamente y solo complementando, las formas D y DL también pueden causar algunos imprevistos neuromusculares comprometiendo algunos nervios y músculos si las matrices en los suplementos no contienen una formulación científicamente testada; es por ello que siempre recomendamos adquirir los mejores suplementos del mundo y no cualquier basura que se ofrece en muchas partes.

Un ejemplo más común es la fenilalanina que es DULCE en la forma L y AMARGA en la forma D; la forma que es utilizada en la fabricación del aspartamo es la forma L.

3. Cierta proteína X, está formada por 600 aminoácidos ¿Qué pasará con esta proteína al reaccionar con agua, sabiendo que su estructura es terciaria y que pasaría con ella si fuera sometida a un campo magnético? Justifique sus respuestas.

R.- La desnaturalización de la estructura terciaria implica la interrupción de:

Enlaces covalentes entre las cadenas laterales de los aminoácidos (como los puentes disulfuros entre las cisteínas).

Enlaces no covalentes dipolo-dipolo entre cadenas laterales polares de aminoácidos. Enlaces dipolo inducidos por fuerzas de Van Der Waals entre cadenas laterales no polares

de aminoácidos.

ENTONCES SI LE AGREGAMOS AGUA DESTILADA:

cambios en las propiedades hidrodinámicas de la proteína: aumenta la viscosidad y disminuye el coeficiente de difusión

una drástica disminución de su solubilidad, ya que los residuos hidrofóbicos del interior aparecen en la superficie

pérdida de las propiedades biológicas

EN TEORIA ESTA PROTEINA PODRIA VOLVER A RETOMAR SU ESTRUCTURA O MUTAR A OTRA

PROTEINA SIMILAR

Y SI LUEGO LA EXPONEMOS ANTE UN CAMPO MAGNETICO

EL MAGNETISMO PROVOCA LA DESESTABILIZACION DE LAS PROTEINAS ES DECIR; ROMPE SUS

ENLACES PEPTIDOS SE PRODUCE LA AGREGACIÓN Y PRECIPITACIÓN DE LA PROTEÍNA

DESNATURALIZADA

VII. CONCLUSIONES:

1. Nos ayuda a comprender y a reconocer las proteínas naturales; las cuales mediante inclusión de agentes físicos o solventes, se desnaturalizan demostrando que las teorías de experimentación y reconocimiento de algunas sustancia biológicas están en lo correcto, pues hay abundante presencia de proteínas en la albumina del huevo.

2. Cuando una proteína es desnaturalizada no puede volver a su estado anterior (como se pudo ver en el 5TO tubo de ensayo), pero hay algunos compuestos que no pierden sus propiedades biológicas y si pueden regresarlas a su estructura anterior. U obtener otra proteína a partir de ella.

3. los sueros al estar compuestos por proteínas solubles son sensibles al cambio de su Ph y por lo tanto reaccionan muy fácilmente ante agentes biológicos

4. Es más fácil identificar a una proteína en su estado natural, evitando exponerla a muchos procesos químicos.

5. El proceso de desnaturalización es una acción tan simple que lo podemos realizar en nuestras actividades diarias inclusive sin darnos cuenta de ello (como cocinar un huevo), es decir que una parte de la química en si está presente en nosotros mismos y la aplicamos a nuestra vida cotidiana.

VIII. BIBLIOGRAFIA:

PROTEINAS

1. http://es.wikipedia.org/wiki/Prote%C3%ADna 2. http://www.monografias.com/trabajos10/compo/compo.shtml 3. http://www.monografias.com/trabajos93/desnaturalizacion-proteina-temperaturas-y-

ph-extremos/desnaturalizacion-proteina-temperaturas-y-ph-extremos.shtml

AMINOACIDOS LEVOGIROS Y DEXTROGIROS

1. http://www.google.com.pe/url? sa=t&rct=j&q=&esrc=s&source=web&cd=2&sqi=2&ved=0CDQQFjAB&url=http%3A%2F%2Fwww.calier.com.ar%2Ftt%2Fdiferencias_entre_el_uso_de_aminoacidos_levogiros_y_dextrogiros_al_agua_de_bebida.doc&ei=ldpSUqOoPJKx4APq3YCICg&usg=AFQjCNFLfc0gHGskjrf4Wk0--IMP-XWOyQ&bvm=bv.53537100,d.dmg

2. http://www.masmusculo.com.es/research/compuestos-levogiros-l-vs-compuestos- dextrogiros-d/

REACCION DE BIURET

1. http://www.google.com.pe/url? sa=t&rct=j&q=&esrc=s&frm=1&source=web&cd=2&ved=0CC8QFjAB&url=http%3A%2F%2Fcatedras.quimica.unlp.edu.ar%2Fqo3%2FApuntes%2FBiuret.pdf&ei=G61RUs7aMJDo8wSon4DQAw&usg=AFQjCNE3IIIbA6il0sOxN20DY7T2XDXQfw

2. https://sites.google.com/a/ps.edu.pe/biologiaps/bioquimica/proteinas/ desnaturalizacion-de-una-proteina

DESNATURALIZACION DE PROTEINAS

1. http://www.ehu.es/biomoleculas/proteinas/desnaturalizacion.htm 2. http://books.google.com.pe/books?

id=X2YVG6Fzp1UC&pg=PA122&lpg=PA122&dq=PROTEINA++CAMPO+MAGNETICO&source=bl&ots=o3gQjtDpXt&sig=q3uVWdoOgzr_MVFVMJ2cIf9zlcU&hl=es-419&sa=X&ei=QvRWUryyFNTB4AOVxYH4Cw&ved=0CF4Q6AEwBw#v=onepage&q=PROTEINA%20%20CAMPO%20MAGNETICO&f=false